精准医学模式下生理学课程整合与教学改革的思考

文章结合精准医学的特征,探索精准医学模式下对医生知识结构的客观要求,即除了传统的医学知识结构外,急需更新补充生物信息学、医学信息学与大数据技术等知识与技能。为应对挑战,生理学作为基础医学核心课程之一,需要构建生理学传统内容与精准医学相适应的整合型课程内容,采纳基于大数据的教学形式与方式,培养具有广阔医学视野、临床决策能力以及人文关怀的医者,实现实质上的精准医疗。

药理学和病理生理学联合开展PBL教学初探

分析在药理学和病理生理学教学中联合开展以问题为基础的学习(PBL)教学法的必要性和可行性,阐述联合开展PBL教学的设计及应用,探讨两个学科联合开展PBL教学的效果。

整合医学模式下临床医学专业学位研究生培养体系建构的思考与探索

整合医学是今后医学发展和医学教育改革的一个重要趋势,是实现当前教育综合改革的重要举措。临床医学专业学位研究生教育历经20余年的发展,仍存在诸多问题。为了更好地实现临床医学专业学位研究生培养的目标,培养未来需要的高层次整合型医学专门人才,本文思考并探索了在整合医学模式下构建临床医学专业学位研究生培养体系的意义、必要性以及可采取的策略、措施、方法等,以期为临床医学专业学位研究生教育改革提供一定的理论参考和现实指导意义。

案例教学法在全科医学专业教学中的实施与探索

全科医学是整合临床医学、预防医学、康复医学及人文社会学科相关内容于一体的综合性医学专业学科。为使全科医学生能更好地认识和掌握疾病发生、发展和转归规律及机制,针对全科医学教育教学特点,在病理生理学课程教学中实施案例教学法,将基础理论与临床知识进行优化整合,将抽象医学理论感性化,以提高学生的自主学习能力及分析和解决问题的能力。

机能实验学培养方案及课程考核办法的改革与思考

为加强医学生综合能力的培养,湖北医药学院基础医学院机能实验室将《机能实验学》教学培养方案做了相应修订,将学生综合能力的培养分为“线上资源”、“基本技能培养”、“综合性实验”和“自主设计性实验”四个部分,将课程考核方式修订为“过程性考核 操作考试”。经过在2018级临床医学中试运行,以调查问卷的方式对1689人次进行调查,结果显示81.4%的学生认为“线上资源”可提高实验成功率,并对实验教学有促进作用;认为“基本技能训练”有利于提高实验动手能力的占96.8%;“综合性实验”可以提高观察问题和分析问题能力,使知识更系统化、条理化,可全程观察机体“正常–异常–治疗”等实验各个环节的占94.79%;认为通过“过程性考核”,对操作技能、实验现象的观察和解决问题的能力培养有利的占98.87%;该教学模式“很合理”和“合理”的分别达49.73%和39.19%;“自主设计性实验”的开设提高大学生创新能力,省校级大学生创新创业项目数量也较往年明显增多。这一研究成果和经验为本校后期全面开展实验教学改革和线上线下课程建设及虚拟仿真实验室建设夯实了坚实基础。

水凝胶负载Erastin诱导子宫内膜癌细胞铁死亡的作用研究

目的:利用温敏性水凝胶泊洛沙姆407(P407)负载Erastin缓释系统诱导人子宫内膜癌细胞(Ishikawa)铁死亡。方法:构建并评估负载Erastin水凝胶复合物(P407^(Era))的物理表征、相变时间和缓释性能。实验分为对照(control,Ctrl)组、水凝胶(P407)组、Erastin处理(Erastin)组和水凝胶负载Erastin(P407^(Era))组。CCK-8检测细胞增殖情况,ROS试剂盒检测细胞内活性氧含量,TUNEL原位细胞凋亡试剂盒检测细胞凋亡,Mito-Tracker Red CMXRos检测细胞线粒体膜电位,Mito-FerroGreen检测线粒体内Fe2+含量,免疫荧光和RT-qPCR检测铁死亡相关分子的表达水平。结果:P407水凝胶的相变时间与浓度呈负相关,18%浓度的P407水凝胶复合物药物缓释性能较优。与对照组相比,P407组、Erastin组和P407^(Era)组的Ishikawa细胞增殖、迁移和侵袭均受明显抑制,且P407^(Era)组比Erastin组抑制增殖、迁移和侵袭作用更加明显;Erastin组及P407^(Era)组细胞活性氧水平、细胞凋亡相对数量显著升高;细胞线粒体膜电位和线粒体Fe^(2+)结果显示,Erastin组和P407^(Era)组细胞线粒体膜电位显著下降,且线粒体Fe2+含量显著升高;免疫荧光结果显示Erastin组及P407^(Era)组GPX4含量显著降低,NRF2含量无明显变化;Erastin组及P407^(Era)组TFR1、NCOA4和P53的mRNA表达水平显著升高。结论:温敏性水凝胶泊洛沙姆407负载Erastin缓释系统诱导人子宫内膜癌细胞发生铁死亡。

槲皮素通过抑制Caspase3/Bax/Bcl-2凋亡通路保护内毒素血症小鼠心肌损伤

目的:观察槲皮素对内毒素血症小鼠心肌损伤的保护作用,并探讨Caspase3/Bax/Bcl-2凋亡信号通路机制。方法:18只C57BL/6N小鼠随机分为对照组(Control组)、脂多糖诱导内毒素血症模型组(LPS组)、槲皮素治疗组(QR组)。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血清中cTnI、LDH、CK-MB、TNF-α、IL-1β和IL-6水平;心脏超声检测小鼠LVEDd、LVESd、EF、FS、CO等心脏结构及心功能指标;Western Blot法检测心脏组织中Caspase3、Bax、Bcl-2的表达。结果:与Control组比较,LPS组cTnI、LDH、CK-MB、TNF-α、IL-1β和IL-6表达均升高,EF、FS、CO等心功能指标均下降,Caspase3和Bax表达增强,Bcl-2表达减弱;与LPS组比较,QR组cTnI、LDH、CK-MB、TNF-α、IL-1β和IL-6表达均下降,EF、FS、CO等心功能指标均升高,Caspase3和Bax表达减弱,Bcl-2表达增强。结论:槲皮素对LPS诱导内毒素血症小鼠心肌损伤具有保护作用,其作用机制与降低炎性因子TNF-α、IL-1β和IL-6释放,抑制Caspase3/Bax/Bcl-2凋亡信号通路有关。

补体应答基因32在小鼠部分肝切除后肝再生过程中的表达及意义

目的 探讨补体应答基因32(RGC32)在部分肝切除(PH)术后肝再生过程中的表达及作用。方法 42只10周龄雄性C57BL/6小鼠,随机分为对照组[切除小鼠完整的肝脏称重、拍照作为正常对照(sham组),进一步切除肝左叶和肝中叶后称重、拍照作为手术对照(0 d组),sham组和0 d组共用一组小鼠]、术后1天组(1 d)、术后2天组(2 d)、术后4天组(4 d)、术后6天组(6 d)、术后8天组(8 d)和术后10天组(10 d),每组6只;PH术建模成功后分别于术后1、2、4、6、8、10天处死小鼠,收集小鼠肝脏,检测肝脏大小变化。HE和油红O染色评估肝组织形态学变化,血清ALT、AST检测评价肝功能变化,免疫组化染色检测增殖细胞核抗原(PCNA)和Ki67表达并分析肝再生过程中细胞增殖变化,实时荧光定量PCR和免疫组化染色技术检测肝再生过程中RGC32的表达及其亚细胞分布。Ed U细胞增殖实验分析L02细胞过表达或者敲除RGC32对肝细胞增殖的影响。计量资料多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验;两组间比较采用成组t检验。相关性分析采用Pearson相关分析法。结果 PH术后肝脏逐渐增大,第0~6天为肝体比(肝脏质量/体质量)上升的高峰期,不同时间点比较差异均有统计学意义(P值均<0.05);第6~10天肝脏大小变化不明显。PH术后肝脏脂滴显著增多,随着肝再生,脂滴减少,且呈现门静脉区和中央静脉区差异化(P值均<0.05)。与sham组比较,PH术后1天,血清ALT、AST水平明显升高(P值均<0.05),随后分别于术后第6天和术后第2天恢复至sham组水平(P值均>0.05)。免疫组化染色结果显示,PH术后PCNA和Ki67阳性肝实质细胞数迅速增多,第2天数目最多,分别为86±5和89±5,随后逐渐减少;而PCNA和Ki67阳性非实质细胞数逐渐增多,第6天才达到高峰,分别为34±5和25±3,随后逐渐减少。PH术后总RGC32表达在第2天升到最高,随后逐渐降低,细胞质RGC32表达变化趋势与之一致;而细胞核RGC32的表达在PH术后第2天降到最低,随后逐渐升高。相关性分析显示,细胞核RGC32的表达与肝实质细胞的增殖呈负相关(R2=0.308 3,P=0.016 7),细胞质RGC32的表达与肝实质细胞的增殖呈正相关(R2=0.808 6,P<0.000 1)。细胞实验显示,与对照组相比,RGC32过表达EdU阳性率减少15.6%(P<0.01),敲低RGC32表达EdU阳性率增加19.2%(P<0.01)。结论 肝实质细胞和非实质细胞增殖不同步,共同参与了肝脏再生。肝切除术后肝再生过程中,RGC32表达存在核质分布差异,核RGC32对肝细胞增殖具有抑制作用。

血液肿瘤中NPM1突变基因的载体构建及表达分析

目的:NPM1基因突变导致多种类型的血液肿瘤,其中最常见的是NPM1突变导致急性髓系白血病(AML)及间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)。构建这两种最常见的NPM1突变基因真核表达载体并分析其表达情况,对于研究NPM1突变与血液肿瘤发生的关系具有重要意义。方法:设计NPM1突变基因引物,通过重叠PCR扩增基因片段,并插入到pEGFP-N1载体,构建GFP-NPMc+及GFP-NPM-ALK真核表达载体;转染GFP-NPM1突变载体到HEK293T细胞,荧光显微镜观察突变蛋白细胞定位情况;免疫印迹检测NPM1突变蛋白过表达对相关细胞信号通路的影响。结果:双酶切实验显示GFP-NPMc+和GFP-NPM-ALK真核表达载体构建成功;荧光显微镜观察显示NPMc+和NPM-ALK突变蛋白均主要定位于细胞质;免疫印迹结果显示NPM1突变能够激活PKC和ERK等信号通路。结论:成功构建了血液肿瘤中最常见的NPM1突变基因表达载体,并通过NPM1蛋白细胞定位的分析,我们认为NPM1突变蛋白共有的组成结构域NPM-N端可能在各种血液肿瘤发生中发挥重要作用。

基于机能实验的微视频辅助生理学理论教学的效果评价

目的探讨基于机能实验的微视频辅助生理学理论教学的实施效果。方法选取湖北医药学院基础医学院2017级临床医学本科生1、2班(共140人)和3、4班(共123人)为研究对象。1、2班为对照组,3、4班为实验组;对照组采用讲授法为主的传统教学,实验组在选定章节的教学中采用微视频辅助传统教学,微视频来源于机能实验的录制和编辑加工。课程结束后,通过问卷调查从课程设计、实施和效果3个层面及期末考试卷面成绩评估该方案。采用SPSS 17.0进行t检验。结果实验组学生期末卷面成绩[(81.02±9.64)分]显著高于对照组[(73.41±11.39)分],差异有统计学意义(t=-5.805,P<0.001)。其中涉及第二章内容得分[(8.07±0.94)vs.(6.14±1.05),t=-15.616,P<0.001],第四章内容得分[(16.16±1.79)vs.(10.9±2.23),t=-20.903,P<0.001]和第六章内容得分[(6.04±0.53)vs.(5.82±0.78),t=-2.638,P=0.009]差异均有统计学意义。实验组调查表回收率100%,90%以上学生对该教学方案更感兴趣,认为可加强对重难点知识的理解,有助于归纳和总结能力的培养。结论基于机能实验的微视频辅助教学有助于提高生理学的教学效果,值得推广。

化滞柔肝颗粒对非酒精性脂肪性肝炎患者胰岛素抵抗的影响

目的观察化滞柔肝颗粒(茵陈、决明子、大黄,等)对非酒精性脂肪性肝炎湿热蕴结证患者胰岛素抵抗的影响。方法将入选120例患者随机均分为两组,对照组[多烯磷脂酰胆碱胶囊(易善复)]和治疗组(化滞柔肝颗粒),两组均在控制饮食、加强有氧运动的基础上给予药物治疗。患者分别于治疗前后行身体质量指数、肝功能、血脂、血糖、胰岛素、脂联素和瘦素水平监测,稳态模式胰岛素抵抗指数计算及肝脏超声检查。结果治疗后,治疗组患者的血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、谷氨酰转肽酶、总胆固醇、甘油三酯、空腹血糖、空腹胰岛素水平及胰岛素抵抗指数均明显下降(P<0.05),肝脂肪变程度有明显改善(P<0.05),而血清脂联素水平明显升高(P<0.05);与对照组比较,治疗组患者血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、谷氨酰转肽酶、总胆固醇、甘油三酯、空腹血糖、空腹胰岛素、脂联素水平、胰岛素抵抗指数与肝脂肪变程度的差异有统计学意义(P<0.05)。此外两组患者治疗后身体质量指数、血清瘦素水平均有显著改善(P<0.05);与对照组比较,治疗组患者身体质量指数、血清瘦素水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论化滞柔肝颗粒联合基础疗法通过降低胰岛素抵抗来有效改善湿热蕴结证的非酒精性脂肪性肝炎。

肝脏CT量化非酒精性脂肪性肝病兔肝组织硫化氢浓度

目的研究肝脏CT值量化非酒精性脂肪性肝病(Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)兔肝组织硫化氢(Hydrogen sulfide,H2S)浓度的可行性。方法 40只日本大耳白兔随机分为重度NAFLD组(重度组)、轻度～中度NAFLD组(轻度组)、空白对照组(对照组)。重度组给予高脂饲料160 g/d,轻度组给予高脂饲料80 g/d+普通饲料80 g/d,对照组给予普通饲料160 g/d。饲养至10 w开始每周对重度组肝脏CT检测了解NAFLD程度,至13 w重度组达到重度NAFLD,终止实验,确定饲养周期13周。饲养前耳中动脉采血5 ml于肝素管中,离心取血浆保存于-20℃的冰柜中待检。实验结束,10%水合氯醛耳缘静脉麻醉,兔固定于木制固定器上,进行肝脏CT检测。腹主动脉抽血5 ml于肝素管中,离心取血浆保存于-20℃的冰箱中待检。全部血浆按照设备、试剂操作常规检测实验前后甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)。肝组织匀浆检测肝组织H2S浓度。HE染色,光学显微镜观察肝脏组织形态学改变。结果 (1)TG、TC检测结果:饲养前重度组、轻度组、对照组TC、TG比较无统计学差异(P>0.05)。饲养后重度组TC、TG分别为(32.12±1.25)、(6.02±2.12)mmol/L,轻度组TC、TG分别为(18.34±2.10)、(4.39±1.93)mmol/L,与饲养前比较有统计学差异(P<0.01)。饲养后重度组TG、TC高于轻度组(P<0.01)。(2)肝组织H2S浓度:重度组、轻度组肝组织H2S明显下降,重度组、轻度组与对照组比较均有统计学差异(P<0.01);重度组与轻度组比较也有统计学差异(P<0.05)。(3)肝脏CT值:重度组肝脏CT值(31.3±2.4)、轻度组肝脏CT值(42.1±3.5)与对照组肝脏CT值(58.9±1.9)比较有显著差异(P<0.01);重度组肝脏CT值低于轻度组,有显著性差异(P<0.01)。(4)肝脏病理学:重度组呈重度NAFLD改变,轻度组呈轻度～中度NAFLD改变,对照组为正常肝脏形态。结论 NAFLD兔肝脏CT值和脂肪肝程度、肝组织H2S浓度下降有关,可以通过肝脏CT值无创性量化肝组织H2S浓度,评价NAFLD治疗效果。

硫化氢在非酒精性脂肪性肝病大鼠血浆中的浓度变化

目的观察非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠血浆硫化氢(H2S)浓度变化。方法 SPF级雄性SD大鼠按随机数字法分为重度NAFLD模型组(重度组)、轻度NAFLD模型组(轻度组)、空白对照组(对照组)。重度组给予高脂饲料约20 g/d;轻度组高脂饲料量为重度组的50%,总重量与重度组相同;对照组给予重度组相同重量的普通饲料。12 w后每周处死1只重度组大鼠,观察脂肪肝程度;至16 w时,重度组达到重度脂肪肝,终止实验。腹主动脉采集血液,离心取血浆,检测甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、H2S及肝组织匀浆TG浓度。结果 (1)TC、TG:实验结束时,重度组TC、TG分别为(8.45±1.19)、(2.43±0.38)mmol/L,轻度组分别为(5.89±1.24)、(1.82±0.41)mmol/L,对照组分别为(1.98±0.14)、(0.84±0.22)mmol/L,3组间均有非常显著差异(P<0.01)。(2)肝组织TG:重度组(0.82±0.13)mmol/L,轻度组(0.62±0.14)mmol/L,对照组(0.42±0.10)mmol/L,3组间也均有非常显著差异(P<0.01)。(3)血浆H2S浓度:与对照组比较,重度组和轻度组H2S明显下降(P<0.01),重度组比轻度组下降更显著(P<0.05)。结论 NAFLD大鼠血浆H2S浓度下降,与脂肪肝程度相关;H2S下降是由于消耗过多。

非酒精性脂肪性肝病兔血浆丙二醛、超氧化物歧化酶与硫化氢、一氧化氮的关系

目的观察非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)兔血浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、硫化氢(H2S)、一氧化氮(NO)关系。方法 40只日本大耳白兔随机分为重、轻度NAFLD组及对照组。重度组给予高脂饲料160 g/d,轻度组给予高脂饲料80 g/d+普通饲料80 g/d,对照组给予普通饲料160 g/d。饲养周期13 w,建立不同程度NAFLD模型。实验结束采集血浆标本,按设备、试剂操作常规检测SOD、MDA、H2S、NO。结果重、轻度组MDA较对照组明显增高(P<0.01,P<0.05),且重度组明显高于轻度组(P<0.05)。重、轻度组SOD活力较对照组明显减低,重度组明显低于轻度组(均P<0.01)。重度组、轻度组H2S水平较对照组明显降低(P<0.01),重、轻度组无显著差异(P>0.05)。重、轻度组NO较对照组明显升高(P<0.01)。重度组高于轻度组(P<0.01)。结论 NAFLD兔血浆MDA/SOD、H2S/NO平衡紊乱可能是NAFLD的发病机制。

急性主动脉综合征的诊治

急性主动脉综合征包括一类严重的、危及生命的主动脉疾病,包括急性主动脉夹层(aor t ic dissection,AD)、壁内血肿(intramural haematoma,IMH)、主动脉穿透性溃疡(penetrating aor tic ulcer,PAU),其中最常见的是主动脉夹层,其次为IMH、主动脉穿透性溃疡。先天性血管缺陷、遗传综合征和非遗传变异性综合征均是急性主动脉综合征的易患因素,可用CT、超声心动图、MR I等影像学方式来确诊。急性主动脉综合征的首要处理是控制血压以减少主动脉壁压力,其诊治往往需要一个多学科专家小组来评估并决定患者的治疗决策。急性主动脉综合征的最佳治疗方案仍然是一项具有挑战性的临床难题,需要进一步的研究来评价每种治疗方案的适用范围,制定以患者为本的精准治疗方案。

血小板源生长因子BB可促进骨骼肌成肌细胞增殖、分化与迁移

背景:骨骼肌损伤后,骨骼肌成肌细胞分化融合形成多核肌管和肌纤维完成肌损伤修复,但该过程修复缓慢且不完全。血小板源生长因子BB可以刺激多种组织细胞增殖、分化及迁移,在各种损伤后组织修复过程中发挥了重要作用。目的:探讨不同浓度血小板源生长因子BB对骨骼肌成肌细胞增殖、分化及迁移的影响及作用机制。方法:培养小鼠骨骼肌成肌细胞(C2C12细胞),分别给予血小板源生长因子BB 0,5,10,20,40μg/L及血小板源生长因子受体抑制剂伊马替尼处理。采用免疫细胞化学法及Western-blot法检测C2C12细胞中血小板源生长因子受体表达情况;分别培养1,2,3,4,5 d后,采用CCK8法检测细胞增殖情况;给予诱导分化培养4 d,采用光学显微镜观察各组肌管的形成情况,通过免疫荧光化学法和Western-blot法观察各组肌管中肌球蛋白重链及MyoG基因的表达情况;培养48 h后,采用Transwell法检测细胞迁移情况。结果与结论:①免疫荧光化学及Western-blot均提示C2C12细胞中可检测到血小板源生长因子受体表达,半定量后统计学分析显示不同血小板源生长因子BB质量浓度组间血小板源生长因子受体表达量差异无显著性意义(P>0.05);②CCK8检测结果显示,与对照组(血小板源生长因子BB 0μg/L组)比较,不同质量浓度血小板源生长因子BB组C2C12细胞增殖无明显改变;③免疫荧光化学法检测结果显示,与对照组相比,血小板源生长因子BB处理组肌球蛋白重链阳性细胞数增多,计数平均每个显微镜视野下肌管形成数目提示血小板源生长因子BB质量浓度为40μg/L时成熟肌管形成数目最多,达(27.00±0.76)个/视野,且该组中MyoG表达数量增多最为明显,与对照组相比差异有显著性意义(P<0.05);④Transwell结果显示,与对照组相比较,不同质量浓度血小板源生长因子BB组C2C12细胞的迁移数量均增加,其中以40μg/L组迁移数目最高达144.00±13.03(P<0.05);⑤提示血小板源生长因子BB能够促进C2C12细胞迁移、分化及其肌管形成,且促分化机制与其增强与血小板源生长因子受体结合、从而提高分化相关基因MyoG的表达有关。

绞股蓝皂苷对2型糖尿病并NAFLD大鼠肝组织TNF-α mRNA表达和血硫化氢的影响

目的:观察绞股蓝皂苷(gypenoside,GPS)对2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)并非酒精性脂肪性肝病(nonalcohol fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝组织肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)mRNA和血硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)的影响。方法:65只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白对照组(N组),NAFLD模型组(NM组),T2DM并NAFLD模型组(模型组)。T2DM并NAFLD模型大鼠分别给予GPS低、高剂量(0.5、1.0 g·kg-1·d-1)干预(JL组、JH组),模型组以纯净水灌胃作为对照组(M组)。检测血糖(blood sugar,BS)、甘油三酯(triglycerides,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、H2S变化,定量PCR技术检测肝组织TNF-αmRNA。结果:⑴血浆H2S浓度变化:JH组、JL组显著高于M组,JH组显著高于JL组(P均<0.01);⑵血糖和TG水平:JH组、JL组显著低于M组(P均<0.01),JH组低于JL组(P<0.01,P<0.05);⑶肝组织TNF-αmRNA PCR检测:JH组、JL组显著高于M组(P<0.01),JH组高于JL组(P<0.05)。结论:GPS能降低T2DM并NAFLD大鼠的BS、TG、TC,机理与下调肝组织TNF-αmRNA表达,升高血浆H2S浓度有关。

紫草素通过PI3K/Akt通路抑制氧糖剥夺诱导的大鼠原代皮层神经元凋亡

目的:探讨紫草素对氧糖剥夺(OGD)损伤模型中大鼠原代皮层神经元的作用及机制。方法:用不同浓度(0. 02、0. 2、2和20μmol/L)紫草素对大鼠原代皮层神经元经进行预处理,再经OGD损伤处理,用乳酸脱氢酶(LDH)释放法和荧光素二乙酸酯/碘化丙啶(FDA/PI)双染法分别检测神经元活性和凋亡情况,选择最适紫草素浓度。然后,在加入紫草素之前提前加入LY294002(PI3K/Akt信号通路抑制剂,1μmol/L),用Wesern blot法检测神经元p-Akt(Ser473)水平变化,用LDH法和FDA/PI双染法检测神经元活性和凋亡率变化。结果:0. 2、2及20μmol/L的紫草素可显著提高神经元存活率(P <0. 05),同时还可使神经元内p-Akt(Ser473)水平显著升高(P <0. 05); LY294002可显著阻断紫草素对神经元p-Akt(Ser473)水平和凋亡率的影响(P <0. 05)。结论:紫草素可通过激活PI3K/Akt通路来减少OGD诱导的大鼠原代皮层神经元凋亡。

人参皂苷Rb1对氧-糖剥夺诱导的大鼠原代皮层神经元损伤的保护作用

目的探讨人参皂苷Rb1对氧-糖剥夺诱导的大鼠原代皮层神经元损伤的保护作用。方法神经元置于三气培养箱(85%N2、10%H2、5%CO2混合气体)中用无糖细胞外液中培养1.5 h,构建氧糖剥夺,分为对照组、模型组、人参皂苷Rb1组(0.2、2、20μmol/L)及人参皂苷Rb1(20μmol/L)+LY294002(1μmol/L)组。采用LDH法和PI/FDA双染检测神经元活性和凋亡率,Western blot法检测神经元p-Akt表达。结果与模型组比较,人参皂苷Rb1(2、20μmol/L)可显著降低神经元凋亡率、LDH释放(P<0.05),人参皂苷Rb1(0.2、2、20μmol/L)可显著提高神经元p-Akt表达(P<0.05);与人参皂苷Rb1组(20μmol/L)比较,人参皂苷Rb1+LY294002组可显著逆转人参皂苷Rb1对神经元凋亡、LDH释放的抑制作用,以及对p-Akt表达促进作用(P<0.05)。结论人参皂苷Rb1可经激活PI3K/Akt来减少OGD诱导的大鼠原代皮层神经元凋亡。

α7烟碱样乙酰胆碱受体调节干细胞功能的研究进展

α7烟碱型乙酰胆碱受体(alpha 7 nicotinic acetylcholine receptor,α7n ACHR)作为一种神经递质受体,广泛存在于各种非神经组织,参与调节细胞增殖、分化及生存等功能。最新的研究发现:α7n ACHR不仅在成熟的组织和器官,而且也在未分化的干/祖细胞中表达。作为一种重要的受体,具有调节干/祖细胞自我更新和分化的作用。本文就α7n ACHR在干细胞中的表达及其作用特征,尤其与干细胞功能障碍相关疾病的关联机制进行了综述。期望以此了解α7n ACHR在干细胞中的作用,并为以α7n ACHR为靶点的新药研发及干细胞治疗提供可靠的依据。