同工酶技术及其在水产动物中的应用

同工酶作为一种重要的生物标志物,在诸多领域都有着重要作用。本文综述了同工酶的研究方法以及应用于水产动物上的研究,包括水产动物的种群遗传、亲缘关系分析、生物种质、病理诊断等研究方面,并且重点论述了同工酶在水产动物种质特性和在育种方面的应用,同时提出了同工酶技术的进一步应用前景。

胆汁酸在水产养殖中的研究进展

胆汁酸作为胆固醇代谢的最终产物之一,是胆汁的重要组成成分,可促进动物肠道中胆固醇、脂质和脂溶性维生素的吸收。文章总结了饲料中补充胆汁酸对水产动物生长性能、抗氧化、免疫、脂质代谢以及肝肠健康等方面的影响,以期为胆汁酸作为水产饲料添加剂在水产养殖中的研究和应用提供参考。

液态氧增氧技术在水产养殖中的应用

改革开放以来,中国水产养殖业发展取得了巨大成就,在世界粮食安全、社会经济发展、人民健康等领域作出了突出贡献。据2021年中国渔业年鉴统计,2020年全国水产养殖产量超过5,000万t,20多年来中国水产养殖产量一直占世界养殖产量的2/3左右,为中国消费者提供了1/3以上的动物蛋白来源。另一方面,随着水产养殖业集约化程度越来越高,高密度养殖越来越成为消费市场和众多养殖户的需求。

氨基酸微量元素螯合物对草鱼肝脏和肠道健康的影响

为研究饲料中氨基酸微量元素螯合物(铁、锰、铜、锌)对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝脏和肠道健康的影响。共设置6组等氮(30%)、等脂(4.7%)实验饲料,对照组(CON)为不添加铁、锰、铜、锌4种微量元素的基础饲料,在对照组配方基础上添加无机铁(50 mg/kg)、铜(2 mg/kg)、锰(10 mg/kg)、锌(40 mg/kg)制成IT100组,用氨基酸微量元素螯合物以25%(OT25组)、50%(OT50组)、75%(OT75组)和100%(OT100组)的比例替代IT100组中无机微量元素,投喂初始体质量(40.05±0.05) g的草鱼8周。研究显示,与对照组相比,饲料中添加无机微量元素和氨基酸微量元素螯合物显著提高了草鱼肝脏的谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、微量还原型谷胱甘肽(GSH)和总超氧化物歧化酶(SOD)活性,降低了丙二醛含量(P<0.05)。OT100组显著提高了过氧化氢酶(CAT)活性,且OT75组和OT100组GPx活性和GSH含量显著高于IT100组(P<0.05)。与对照组相比,各组草鱼的肝细胞形态和肝血窦丰度趋于正常。与对照组相比,除OT25组外,其余各组的肠道绒毛高度和杯状细胞数量显著提高,且OT75和OT100组显著高于IT100组。无机微量元素和氨基酸微量元素螯合物降低了草鱼肠道细胞因子白介素-6(il-6)和白介素-1β(il-1β)基因表达量,提高了肠道紧密连接蛋白闭锁小带蛋白-2(zo-2)和claudin12基因表达量。OT75组显著提高了zo-1和occludin基因表达量,且OT75组il-1β基因表达量显著低于IT100组。综上所述,无机微量元素和氨基酸微量元素螯合物均可显著改善草鱼肠道和肝脏健康,75%氨基酸微量元素螯合物的作用效果显著优于无机微量元素。

散鳞镜鲤皮肤囊肿病病原的分离与鉴定

吉陶单极虫隶属于后生动物亚界,粘体动物门,粘孢子纲,双壳目,单极虫科,单极虫属。目前,已报道单极虫属种类约100余种,主要寄生于淡水鱼类,少数种类可寄生于海水鱼类当中。绝大部分种类不会导致鱼类疾病,仅少数几种单极虫会导致鱼类的大量死亡,如寄生于异育银鲫皮肤的“肤孢子病”武汉单极虫、寄生于异育银鲫鳃上的“鳃孢子虫病”汪氏单极虫以及寄生于鲤或散鳞镜鲤肠道或皮肤的吉陶单极虫等。

温度和17α-甲基睾酮、来曲唑对棘胸蛙雄性化研究

棘胸蛙雄性个体大于同龄雌性个体,全雄育种技术已成为棘胸蛙养殖业的迫切需要。以5400尾出膜7 d(开口摄食)的棘胸蛙蝌蚪为试验对象,在21℃(TNR)、24℃(TNR)、27℃(TNR)三个水温条件下,探讨来曲唑(LZ)、17α-甲基睾酮(MT)、17α-甲基睾酮与来曲唑组合(ML)对棘胸蛙雄性化的影响。以未添加激素为对照组(CK),实验组分别在饲料中添加100 mg/kg LZ、80 mg/kg MT、40 mg/kg MT与50 mg/kg LZ组合(ML),分别在三个温度下饲养,通过性腺形态学与组织学判定幼蛙性别。结果表明:水温21℃、24℃、27℃时,CK组雄性率分别为43.07%±0.06%、47.86%±0.04%、62.16%±0.02%,中间态性腺的出现率分别为0、0、10.00%;LZ组雄性率分别为48.52%±0.02%、56.41%±0.05%、77.77%±0.01%,中间态性腺的出现率分别为14.29%、20.00%、40.00%;MT组和ML组雄性率均为100%,中间态性腺的出现率分别为0、0、36.36%和33.33%、28.57%、37.04%;27℃下变态的幼蛙个体普遍小于21℃和24℃,但无显著差异。综上,水温21~24℃下,在棘胸蛙蝌蚪期饲料中全程添加80 mg/kg MT或40 mg/kg MT与50 mg/kg LZ(ML),更有利于棘胸蛙蝌蚪的生长发育和性腺向雄性分化。

低鱼粉高脂饲料添加大豆卵磷脂对黄鳝生长、血清生化指标及肠道菌群的影响

试验旨在研究低鱼粉高脂饲料中添加大豆卵磷脂对黄鳝(Monopterusalbus)生长、血清生化指标及肠道菌群的影响,为降低黄鳝鱼粉使用量提供依据。以初始体重(20.03±0.01)g黄鳝为研究对象,以含有42%鱼粉、22%豆粕、6%粗脂肪的饲料为正常鱼粉组,另以含有22%鱼粉、52%豆粕和9%粗脂肪的饲料为低鱼粉高脂组,分别在低鱼粉高脂组中添加1%和2%的大豆卵磷脂,进行为期56d的养殖试验,于室外池塘进行网箱养殖,日投喂1次,喂量为黄鳝体重3%—5%。结果表明:(1)与对照组相比,低鱼粉高脂组黄鳝增重率显著降低(P<0.05),饵料系数与肝体比均显著增加(P<0.05),但添加2%大豆卵磷脂后黄鳝增重率显著提高(P<0.05),而饵料系数与肝体比显著降低(P<0.05);(2)对比正常鱼粉组,低鱼粉高脂饲料组黄鳝血清甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、血氨、尿素氮、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、酸性磷酸酶与免疫球蛋白M含量显著增加(P<0.05),且碱性磷酸酶活性显著降低(P<0.05),而添加2%大豆卵磷脂使黄鳝血清的高密度脂蛋白含量与碱性磷酸酶活性显著增加(P<0.05),低密度脂蛋白、血氨、尿素氮、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、酸性磷酸酶与免疫球蛋白M水平显著下降(P<0.05);(3)与对照组相比,低鱼粉高脂组黄鳝后肠绒毛高度与杯状细胞显著降低(P<0.05),而添加2%大豆卵磷脂后黄鳝后肠绒毛高度与杯状细胞数目上升;(4)与对照组相比,低鱼粉高脂组不动杆菌属与考克氏菌属相对丰度上升,而与低鱼粉高脂组相比,添加2%大豆磷脂后黄鳝肠道群落的丰富度与多样性显著增加(P<0.05),且显著提高了肠道红杆菌属的相对丰度,并显著减少不动杆菌属与考克氏菌属的丰度(P<0.05)。由此得出,在试验条件下,2%大豆卵磷脂可促进脂肪代谢和提高机体免疫性能,并修复肠道组织结构与维持菌群稳态,进而缓解低鱼粉高脂饲料对黄鳝生长的负面影响。

饲料蛋白质和脂肪水平对丝尾鳠幼鱼生长、血清生化指标及肝脏抗氧化能力的影响

设计蛋白质水平(34%、38%、42%)和脂肪水平(5%、8%、11%)的3×3交互实验,共配制9种实验饲料,投喂初始体重为(29.96±0.08) g的丝尾鳠(Hemibagrus wyckioides)幼鱼8周,探究饲料中蛋白质和脂肪水平对丝尾鳠生长、血清生化指标及肝脏抗氧化能力的影响。实验结果表明:丝尾鳠平均增重率和蛋白质效率随饲料蛋白和脂肪水平的升高而升高。P42L11组增重率最高、饲料系数最低,但与P38L8、P38L11、P42L8组间并无显著性差异(P>0.05);P38L11组蛋白质效率最高,但与P34L11、P38L8、P42L8、P42L11组间并无显著性差异(P>0.05)。11%脂肪组丝尾鳠平均脏体比、体脂肪含量及血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇含量最高,显著高于5%脂肪组(P<0.05)。油红染色结果表明,11%脂肪组出现肝脏脂肪蓄积,且血清平均谷丙转氨酶活性和谷草转氨酶活性显著高于5%和8%脂肪组(P<0.05)。肠道平均消化酶活力、肝脏抗氧化酶活力及丙二醛含量随着饲料蛋白和脂肪水平的升高而升高。综上所述,适度提高饲料蛋白和脂肪水平能够增加丝尾鳠增重率,降低饲料系数。42%蛋白水平下虽然能够获得更高的增重率,但会导致蛋白质效率降低,高脂肪水平则会引起肝脏脂肪异常沉积和肝损伤。因此,在此实验条件下,丝尾鳠饲料的最佳蛋白水平在38%左右,不宜超过42%;最佳脂肪水平在8%左右,不宜超过11%。

发育不良和歪头病对变态末期棘胸蛙皮肤菌群的影响

实验基于高通量测序技术,以健康(CTL组)、发育不良(DD组)和患歪头病(TD组)的棘胸蛙(Quasipaa spinosa)为研究对象,系统地探索宿主健康状态与皮肤微生物菌群组成、多样性及功能之间的潜在关系。所有样本经测序、质控及聚类获得2997条扩增子序列变体(ASVs),注释32个门,76个纲,167个目,259个科和402个属,其中变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidota)为棘胸蛙皮肤主要优势菌门(>1%),但丰度受宿主健康状态的影响。在属水平上筛选获得50个菌群标志物,其中23个(如乳杆菌(Lactobacillus)、德沃斯氏(Devosia)、希瓦氏菌(Shewanella)和Luteolibacter)在CTL组中相对丰度较高,提示棘胸蛙的健康状态;19个(如短稳杆菌(Empedobacter)、芽孢杆菌(Bacillus)和短螺旋体(Brevinema))在DD组中相对丰度较高,提示棘胸蛙发育不良的病症;8个(如伊丽莎白菌(Elizabethkingia)、柠檬酸杆菌(Citrobacter)和不动杆菌(Acinetobacter))在TD组中相对丰度较高,提示棘胸蛙歪头病的病症。多样性分析表明,TD组的多样性和均一度与CTL组和DD组相比显著降低,微生物菌群组成也表现出明显分离。功能预测表明,CTL组和TD组皮肤微生物菌群之间功能差异主要富集在新陈代谢相关通路。总之,该项研究揭示不同健康状态下棘胸蛙皮肤微生物菌群的组成和变化,突出共生微生物菌群在两栖动物健康养殖和疾病预防中的潜在应用。

低鱼粉饲料中添加酶解鱼小肽对牛蛙蝌蚪生长、变态、肝脏代谢及抗氧化能力的影响

本试验旨在低鱼粉饲料中添加酶解鱼小肽,研究其对牛蛙蝌蚪生长、变态、肝脏代谢及抗氧化能力的影响。试验挑选4800尾初始体重为0.04 g左右的牛蛙蝌蚪,随机分成5组,每组3个重复,每个重复320尾牛蛙蝌蚪,分别饲喂5种不同的等氮等脂饲料,其中以15%鱼粉饲料(FM15组)为对照,另设置2个不同鱼粉水平饲料,鱼粉水平分别为10%、5%,并在每个鱼粉水平饲料中分别添加2.5%和5.0%酶解鱼小肽,分别记为F10E2.5、F10E5、F5E2.5、F5E5组,试验投喂持续65 d。结果显示:1)与FM15组相比,低鱼粉水平饲料中添加酶解鱼小肽均能提高蝌蚪的变态率和存活率,其中F10E5组牛蛙蝌蚪变态率显著提高(P<0.05)。2)与FM15组相比,除F5E2.5组外其余3组肠道脂肪酶活性均显著提高(P<0.05)。3)与FM15组相比,饲料中添加酶解鱼小肽均能显著提高肠道超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.05),此外F10E5组肠道谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性及谷胱甘肽(GSH)含量显著提高(P<0.05)。4)与FM15组比,饲料中添加酶解鱼小肽均能显著提升肠道磺基转移酶(SULT)基因相对表达量(P<0.05),此外F10E5组肠道CAT、SOD及谷胱甘肽S-转移酶(GST)基因相对表达量显著提升(P<0.05)。5)除F5E5组外,饲料中添加酶解鱼小肽均能改善肝细胞空泡化。6)与FM15组相比,饲料中添加酶解鱼小肽均能显著提高肝脏谷草转氨酶与酸性磷酸酶活性(P<0.05),此外添加5.0%酶解鱼小肽后肝脏谷丙转氨酶活性均显著提高(P<0.05)。综上所述,饲料中添加10%鱼粉和5.0%酶解鱼小肽(F10E5)能够在不影响生长的情况下,提高牛蛙蝌蚪变态率、存活率及抗氧化能力。

氨基酸微量元素螯合物对草鱼生长性能、血清生化指标及微量元素沉积的影响

为研究饲料中添加氨基酸微量元素螯合物对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)生长性能、微量元素沉积及血清生化指标的影响,本试验以初始体重为(40.05±0.05)g的草鱼为研究对象,共计720尾随机分为6组,对照组(CON组)饲喂不添加微量元素的基础饲料,无机微量元素添加组(IT100组)饲喂在基础饲料中添加草鱼微量元素需要量的100%无机微量元素铜、铁、锌、锰的试验饲料,氨基酸微量元素螯合物添加组(OT25组、OT50组、OT75组和OT100组)饲喂以25%、50%、75%和100%氨基酸微量元素螯合物等比例替代IT100组饲料中无机微量元素的试验饲料,每组3个重复,每个重复40尾鱼,养殖8周。结果表明:1)不同组之间草鱼的存活率、肥满度、肝体比和脏体比没有显著差异(P>0.05)。与CON组相比,IT100组、OT75组增重率显著升高(P<0.05),而饲料系数的变化趋势则与之相反,OT50组和OT75组显著降低(P<0.05)。2)与CON组相比,IT100组、OT50组、OT75组、OT100组肠道胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性均显著升高(P<0.05),OT25组肠道的淀粉酶活性显著升高(P<0.05)。3)根据草鱼脊椎骨微量元素沉积量的二次回归方程,氨基酸微量元素螯合物内元素分别在添加水平为铜67.53%、铁58.22%、锌58.68%、锰56.07%时到达100%无机微量元素效价。4)与CON组相比,IT100组的血清中总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、尿素氮含量及谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性显著降低(P<0.05),血清补体3、高密度脂蛋白胆固醇含量和碱性磷酸酶活显著降低(P<0.05)。与CON组比较,OT各组血清甘油三酯含量均显著降低(P<0.05),OT100组血清总胆固醇、尿素氮含量及谷丙转氨酶活性显著降低(P<0.05),OT75组和OT100组血清低密度脂蛋白胆固醇含量和谷草转氨酶活性显著降低(P<0.05),OT100组血清碱性磷酸酶活性显著上升(P<0.05)。综上所述,饲料中添加适宜比例的氨基酸微量元素螯合物能提高草鱼生长性能、营养消化吸收和脊椎骨内微量元素沉积,其中75%的氨基酸微量元素螯合物替代比例为最适替代比例。

GCRV感染存活草鱼的血清蛋白表达特性

为挖掘草鱼关键抗性分子,研究利用4D label-free定量蛋白质组学技术系统分析了团队前期获得的GCRV感染存活草鱼(候选抗性草鱼)与对照草鱼的血清蛋白表达差异。共鉴定到858个草鱼血清蛋白,329个蛋白在两类草鱼中差异表达,其中163个蛋白在候选抗性草鱼血清中显著高表达,166个蛋白显著低表达。差异表达蛋白的功能主要注释为体液免疫反应调节相关蛋白,显著富集到补体凝血级联、细胞黏附和铁死亡等信号通路。对差异表达的免疫相关蛋白进行分析发现,候选抗性草鱼血清中体液免疫分子MASP2、C4a、C4b、C7b、C8b、C8g、C9、CFI、C3a.1、C3a.2、C3a.3和C3a.6等补体和抗原提呈相关免疫分子MHC1UBA和IGL4V8等蛋白表达水平显著高于对照草鱼,而T细胞免疫相关分子TRAV、IGHV1-1、IGHV2-1、IGHV6-1、IGHV3-2和IGHV11-2等蛋白表达水平显著低于对照草鱼。免疫印迹检测进一步证实,以C3和IgM为代表的体液免疫分子在候选抗性草鱼血清中显著高表达,可能与草鱼抗病能力关联。研究将为高抗性草鱼的选育提供可参考的分子资源。

酶解鱼溶浆粉替代部分鱼粉对黄鳝生长、血清生化及免疫指标的影响

试验旨在研究酶解鱼溶浆粉对黄鳝(Monopterus albus)生长、肠道消化酶、血清生化及免疫指标的影响。以初始体重为(25.00±0.20)g健康黄鳝为研究对象,设置3个处理组,每组3个重复,每箱50尾黄鳝。酶解鱼溶浆粉分别替代基础饲料(对照组鱼粉含量为40%)中0、2.5%和5%的鱼粉,分别记为FM组、SHM2.5组和SHM5.0组,养殖试验持续56 d。结果表明,与FM组相比,酶解鱼溶浆粉替代部分鱼粉(SHM2.5组和SHM5.0组)对黄鳝增重率无显著差异(P>0.05),但肠道胰蛋白酶活性显著升高(P<0.05);酶解鱼溶浆粉替代部分鱼粉对黄鳝血清总胆固醇、尿素氮、总胆汁酸、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、补体3、丙二醛、碱性磷酸酶和超氧化物歧化酶水平均无显著影响(P>0.05);酶解鱼溶浆粉替代部分鱼粉显著升高血清中免疫球蛋白M、补体4和溶菌酶水平(P<0.05),SHM5.0组血清中葡萄糖、三酰甘油和碱性磷酸酶水平显著升高(P<0.05)。综上所述,酶解鱼溶浆粉适当替代鱼粉对黄鳝的生长、饲料利用和肠道消化酶无不利影响,并且会增强黄鳝的免疫功能。

大口黑鲈烂身病病原菌的分离鉴定及其药物敏感性

从湖南省醴陵市某大口黑鲈工厂化养殖场中患烂身病的大口黑鲈体表溃疡处分离得到1株病原菌MS315509,经形态学和分子生物学鉴定,确定该病原菌为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)。人工感染结果显示,MS315509对大口黑鲈鱼苗的半数致死剂量为5.47×10^(7)cfu/mL,为弱毒株;MS315509携带细胞兴奋性肠毒素基因(alt)、细胞毒性肠毒素基因(act)和黏附素基因(aha1)3种毒力基因;采用12种抗生素与12种中草药对菌株MS315509进行药物敏感性试验,结果表明MS315509对庆大霉素、头孢拉定、石榴皮、苏木、五倍子、诃子等高度敏感,对四环素、头孢唑啉、卡那霉素、苯唑西林、恩诺沙星、青霉素、强力霉素、链霉素、黄连、艾叶和熟地黄等表现出耐药性。

高比例的棉粕和菜粕饲料中添加齐墩果酸对草鱼生长、血清生化指标、抗氧化及免疫力的影响

试验旨在研究高比例的棉粕和菜粕饲料中添加齐墩果酸对草鱼生长、血清生化指标、抗氧化和免疫能力的影响。试验选取均重约为50 g的草鱼480尾,随机分为3组,每组4个重复,每个重复40尾。分别为对照组、高比例的棉粕和菜粕组、高比例的棉粕和菜粕组+500 mg/kg齐墩果酸组,分别记为CON、S1和SQ2。养殖周期为56d。结果显示:(1)与CON组相比, S1和SQ2组草鱼的末均重(FBW)、增重率(WGR)和特定生长率(SGR)均显著降低(P<0.05), S1组草鱼的饵料系数(FCR)显著升高(P<0.05)。与S1组相比, SQ2组草鱼的FBW、WGR和SGR均显著升高(P<0.05),而FCR显著降低(P<0.05)。(2)与CON组相比, S1和SQ2组草鱼的血清谷草转氨酶(GOT)、胆汁酸(TBA)、总胆固醇(T-CHO)和肝脏丙二醛(MDA)水平均显著升高(P<0.05)。而血清酸性磷酸酶(ACP)、免疫球蛋白M(IgM)、肠道淀粉酶和肝脏过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)的水平均显著降低(P<0.05);S1组草鱼的血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量显著升高(P<0.05),而血清C3、肠道脂肪酶和肝脏总抗氧化能力(T-AOC)的含量显著降低(P<0.05)。与S1组相比, SQ2组草鱼的血清GOT、T-CHO和肝脏MDA的水平均显著降低(P<0.05),而血清ACP、IgM、肠道脂肪酶、淀粉酶和肝脏的CAT、SOD、T-AOC的水平均显著升高(P<0.05)。(3)与CON组相比, S1组和SQ2组草鱼肝脏中gpx1、cat、tgf-β1和il-15的表达水平显著下调(P<0.05);S1组草鱼肝脏中Mnsod和nrf2的表达水平显著下调(P<0.05),而keap1、tnf-α、nf-κb和il-12β的表达水平显著上调(P<0.05)。与S1组相比, SQ2组草鱼肝脏中Mnsod、gpx1、cat、nrf2、tgf-β1和il-15的表达水平显著上调(P<0.05),而keap1、tnf-α、nf-κb和il-12β的表达水平显著下调(P<0.05)。综上所述,高比例棉菜粕饲料显著降低了草鱼的生长性能,抗氧化能力和免疫力,并引起草鱼肝脏组织结构的损伤。齐墩果酸的添加可以缓解草鱼肝脏的氧化损伤和炎症反应,并提高草鱼的生长性能,抗氧化能力和免疫力。

发酵饲料对牛蛙生长性能、肌肉营养成分及肠道菌群的影响

为研究投喂不同比例发酵饲料对牛蛙的生长性能、肌肉营养成分及肠道菌群的影响,将960只初始体重为(46.98±0.05)g的牛蛙随机分为4组,每组3个重复,每个重复80只牛蛙。4组牛蛙使用4种饲料进行投喂,具体为100%基础饲料(F1组)、75%基础饲料+25%发酵饲料(F2组)、50%基础饲料+50%发酵饲料(F3组)和100%发酵饲料(F4组)。牛蛙在网箱微流水中养殖,每日投喂2次(08:00、16:00),每日定量投喂牛蛙体重的2%~3%,投喂饲料重以干物质计算,每周依据体重及摄食情况调整投饵量,试验持续8周。结果显示:1)与F1组相比,3个发酵饲料组(F2、F3、F4组)牛蛙终末重和增重率显著增加(P<0.05),饲料系数显著降低(P<0.05);高发酵饲料组(F3、F4组)牛蛙存活率显著提高(P<0.05)。2)相较于F1组,F3、F4组牛蛙肠道脂肪酶(LPS)、淀粉酶(AMS)活性显著上升(P<0.05)。3)与F1组相比,F4组牛蛙肌肉粗蛋白质含量及必需氨基酸、非必需氨基酸、风味氨基酸、氨基酸总量均显著增加(P<0.05)。4)随着发酵饲料添加量的增加,牛蛙血清中碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和总抗氧化能力(T-AOC)呈现先上升再下降的趋势,丙二醛(MDA)含量则先下降后上升,极值均出现在F3组,且上述指标F3组与F1组之间均存在显著差异(P<0.05)。5)发酵饲料对牛蛙肠道菌群的丰富度与多样性均有影响,其中,F3组变形菌门相对丰度显著低于其他组(P<0.05),而梭杆菌门相对丰度则显著高于其他组(P<0.05)。由此可得,在本试验条件下,50%基础饲料和50%发酵饲料为最适配比,能有效提高牛蛙的生长性能,改善其肌肉品质,增强机体免疫力和抗氧化能力,且对牛蛙肠道菌群结构及稳态平衡具有正向调控作用。

美国牛蛙蝌蚪约氏不动杆菌的分离、鉴定及耐药性分析

为探明2023年3月初引起中国重庆市渝北区某牛蛙养殖场暴发疾病的原因,本实验从患病美国牛蛙蝌蚪肝脏和肠道中分离优势菌,采用形态学观察、生理生化实验、16S rDNA和rpoB基因序列测定、系统发育学分析进行鉴定。为确定该菌株的致病机理,对该菌株进行了人工感染实验、组织病理学观察、毒力基因检测、生长特性研究及药物敏感性实验。结果显示,在患病濒死美国牛蛙蝌蚪的肝脏和肠道中分离得到的其中一株优势菌命名为LT202303,经鉴定为约氏不动杆菌。该菌株携带OmpA、Omp34和OmpTsx等3种毒力基因,具有较强的耐盐性和在广泛的pH范围内生存的能力,对美国牛蛙蝌蚪的半数致死浓度为6.8×10^(6)CFU/mL,发病临床症状为肝脏红肿并伴有大量白色结节,肠道透明发黄。组织病理学观察发现该菌株可引起美国牛蛙蝌蚪肝脏和肠道的明显炎症反应和病灶性坏死。药敏实验结果显示,分离菌LT202303是一种产β-内酰胺酶的多重耐药细菌。本研究表明,约氏不动杆菌对牛蛙蝌蚪具有高致病力,可引起肝脏和肠道等多器官组织的病理损伤最终引发机体的损伤甚至死亡。本研究首次报道约氏不动杆菌感染引起的美国牛蛙蝌蚪传染病的暴发,为该疾病的诊断和防控提供理论参考。

小龙虾多种病症优势菌分离鉴定及药物敏感性分析

克氏原螯虾(Procambarusclarkii)俗称小龙虾,属甲壳纲十足目螯虾科原螯虾属。其适应性广,繁殖力强,自然种群发展较快,已在我国淡水水体中形成野生种群。原产于北美洲,1929年传入我国,目前是我国主要经济虾类之一,在淡水甲壳动物养殖中位居第一。在小龙虾收获期正值春夏交替季节,小龙虾病害时有发生,一些病原菌感染引起小龙虾溃疡和肠炎等疾病。同时小龙虾外在表现为活力弱、肝发白、积水、肝胰腺弥散、空肠、肠道偏蓝头胸甲易剥离或者肠道不充盈、肠道充血导致内容物偏蓝等特征。对于不同病症的患病小龙虾进行病原菌抽样调查,检测分析病原菌,并针对分离鉴定出的病原菌开展体外药物筛选工作,以期为小龙虾养殖提供一些用药指导。

中华鳖IGF2和IGF2R基因克隆及其功能研究

【目的】探索胰岛素样生长因子2基因(IGF2)和胰岛素样生长因子2受体基因(IGF2R)在中华鳖生长过程中发挥的作用,为揭示IGFs系统在中华鳖异速生长及两性生长差异中的作用机制打下基础。【方法】采用RACE克隆中华鳖IGF2和IGF2R基因c DNA序列,利用BioEdit、ExPASy、TMHMM Server v2.0、SignalP及SMART等在线软件进行生物信息学分析,并通过实时荧光定量PCR分析IGF2和IGF2R基因在雌雄中华鳖不同组织、不同表型及不同性类固醇激素处理下的表达变化。【结果】中华鳖IGF2基因cDNA序列全长1180 bp,共编码222个氨基酸残基;IGF2蛋白相对分子量为24.84 kD,理论等电点(pI)为9.00,属于跨膜蛋白,含有1个IIGF结构域。中华鳖IGF2R基因cDNA序列全长8765bp,共编码2443个氨基酸残基;IGF2R蛋白相对分子量为271.92kD,pI为5.64,属于跨膜蛋白,含有14个重复的CIMR结构域和1个FN2结构域。基于IGF2和IGF2R氨基酸序列相似性构建的系统发育进化树均显示,中华鳖与龟鳖类的亲缘关系最近,与鱼类和两栖动物的亲缘关系相对较远。IGF2和IGF2R基因在中华鳖体内具有广泛的组织表达谱,IGF2基因在精巢中的相对表达量显著高于卵巢(P<0.05,下同),IGF2R基因则恰好相反。IGF2基因在成年中华鳖生长快个体肝脏中的相对表达量显著高于生长慢个体,IGF2R基因的表达模式则相反。在雌二醇(E2)处理下,除雌性中华鳖肝脏中的IGF2R基因相对表达量在注射6 h时显著升高外,IGF2和IGF2R基因在雌雄个体肝脏中的相对表达量整体上呈下降趋势;MT处理对雄性个体肝脏中IGF2基因的表达无显著影响(P>0.05),但在注射48 h后显著提高雌性个体肝脏中的IGF2基因相对表达量,且显著下调雌性中华鳖肝脏中的IGF2R基因相对表达量。【结论】IGF2和IGF2R基因参与调控中华鳖性腺的发育及成熟,且IGF2R可能通过内化降解IGF2而对中华鳖的生长起负调控作用。此外,IGF2和IGF2R基因会通过下调表达量来响应外源激素的刺激,进而实现对中华鳖生长的调控。

17β-雌二醇对棘胸蛙生长发育及性比的影响

1前言两栖动物生长普遍存在着两性差异现象,有的表现为雌性生长速度快,成年个体大于同龄雄性,如滇蛙、斑腿泛树蛙、北仑姬蛙;有的表现为雄性生长速度快,成年个体大于同龄雌性,例如大蹼铃蟾、沼蛙、棘胸蛙等。因此,控制两栖类性别和单性养殖对其产业发展具有重要意义。