国际合作势在必行路径模式因人而异——生物技术药物跨国技术转移路径与模式探讨

百泰生物药业有限公司是一家与古巴合资的中外合资企业，属于典型的在国际科技合作基础上发展起来的生物医药企业。借助古巴在生物技术方面的优势，2000年起百泰与古巴合作共同进行抗体药物的开发和产业化，2008年第一个产品“泰欣生”正式上市，

牛肉风味强化肽(BMP)表达载体的构建

牛肉风味强化肽(Beefy Meaty Peptide,BMP)最初是从牛肉木瓜蛋白酶的水解物中分离得到的八肽,它与味精和盐具有较好的协同作用,可以呈现出牛肉风味.为了能够大量、廉价地得到这种风味小肽物质,本文根据毕赤酵母密码子偏爱性设计出4拷贝头尾相连的BMP表达基因,并将其进行体外串联,得到8拷贝、12拷贝和16拷贝的BMP表达基因,将其插入到表达载体pPIC9,从而得到4种不同的毕赤酵母的表达载体.

纸质包装材料中可迁移重金属镉的快速测定

研究了纸质包装材料中可迁移重金属镉冷原子化的检测体系。对原子化温度、载气流速、进样量、溶液酸度、硼氢化钠浓度(氢氧化钠)和增敏剂加入量的影响,以及基体和共存离子的干扰进行了研究。结果表明:该方法具有快速、准确、灵敏度高、经济实用等优点,用于纸质包装材料中可迁移金属痕量镉的测定,相对标准偏差小于3.4%,加标回收率在97.4%～104.4%之间。

灯盏花指纹图谱研究及一测多评法分析

目的:建立灯盏花样品HPLC指纹图谱并结合一测多评法(QAMS)对其中绿原酸、咖啡酸、洋荆素、灯盏花乙素、异绿原酸B、灯盏花甲素、异绿原酸A、异绿原酸C 8种成分进行含量测定。方法:色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.1%甲酸溶液(A)-乙腈(B)-四氢呋喃(C),梯度洗脱;流速为0.8 mL/min;进样量为10μL;柱温为30℃;检测波长为330 nm。并对数据进行主成分分析和聚类分析。分别用外标法和QAMS计算含量。结果:建立了不同产地灯盏花样品的HPLC指纹图谱,标定了22个共有峰,指认出8个成分。QAMS法与外标法实测值间无显著性差异。结论:所建立的方法可用于灯盏花药材的质量控制。

尼妥珠单抗联合化疗治疗晚期恶性肿瘤的临床观察

目的观察尼妥珠单抗联合化疗治疗晚期恶性肿瘤(非头颈部肿瘤)的有效性和安全性。方法选择25例经病理组织学或细胞学检查确诊的Ⅳ期恶性肿瘤患者,包括非小细胞肺癌9例,结肠癌3例,胃癌3例,食管癌2例,神经胶质瘤2例,膀胱癌2例,胆囊癌2例,胆管癌1例,肝癌1例。患者接受尼妥珠单抗联合化疗。尼妥珠单抗200mg静脉滴注,每周1次,共6周,同时联合一线化疗方案或既往未使用过的化疗药物。参照Karnofsky评分变化评价生活质量,按照实体瘤的疗效评价标准(REC IST)评价近期疗效和按照NC I-CTC 3.0标准评价其毒性反应。结果 25例患者中,有23例可以评价药物的客观疗效,25例可以评价药物的安全性。在23例可评价疗效的病例中,治疗2个周期后PR有6例,SD有10例,PD有7例,客观有效率(RR:CR+PR)为26.09%(6/23),疾病控制率(DCR:CR+PR+SD)为69.56%(16/23);在25例可评价药物安全性的病例中,生活质量改善者有12例(48%),稳定者有9例(36%),仅4例(16%)为生活质量下降。G3/4级毒性主要与化疗药物有关,包括白细胞下降,血小板下降和贫血。与尼妥珠单抗相关的皮疹发生率低,且与临床是否获益无关。结论尼妥珠单抗联合化疗药物是有效和安全的,它可以用于多种恶性肿瘤的治疗,改善患者的QoL,与化疗药物具有一定的协同作用,值得临床推广和进一步研究。

微型氢化物发生-原子吸收光谱法测定皮革中痕量砷

采用双毛细管微型在线氢化发生技术和装置,建立了氢化物发生-电热石英原子吸收法测定皮革中痕量砷的分析方法。对载气流速、NaBH4质量分数、5%抗坏血酸-5%硫脲用量和盐酸体积分数的影响,以及基体和共存离子的干扰进行了研究,同时进行了回收率、精密度试验,确定了仪器的最佳工作条件。试验表明:该方法灵敏度高,检测限为0.015μg/L,回收率为96.2%～105.9%,相对标准偏差小于3.4%。该方法具有检出限低、快速、准确、灵敏度高、经济实用等优点,用于皮革中痕量砷的测定,结果令人满意。

基于聚类分析的金莲花化学指纹图谱的构建

目的:采用高效液相色谱和聚类分析建立金莲花药材的共有模式。方法:研究对象为不同产地的金莲花,采用HPLC法,色谱柱:Agilent ZORBAX SB-C_(18)(250 mm×4. 6 mm,5μm);流动相:0. 5%甲酸水-乙腈-四氢呋喃;梯度洗脱,流速:1. 0 ml·min^(-1),检测波长:272 nm,柱温:30℃,进样量:10μl。根据中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2004A)版进行分析。结果:对15批金莲花药材进行检测,运用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2004A版和SPSS 19. 0统计学软件对指纹图谱分别进行相似度计算和化学模式识别研究,建立金莲花的指纹图谱的共有模式。结论:根据聚类分析结果筛选出12批金莲花样品,建立指纹图谱的共有模式。该方法简便准确,灵敏度高,为金莲花药材的质量控制提供试验依据。

膜荚黄芪UCGT基因的克隆及表达分析

UDP-毛蕊异黄酮葡萄糖基转移酶(UDP-glucose:calycosin-7-O-glucosyltransferase,UCGT)是糖基化毛蕊异黄酮生物合成毛蕊异黄酮葡萄糖苷的一种酶。试验采用同源克隆法和RACE技术从膜荚黄芪中克隆得到AmUCGT基因,对其进行生物信息学分析,同时调查了AmUCGT在不同组织中的表达量与毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量之间的关系。结果表明:AmUCGT基因的全长cDNA序列长度为1862 bp,其中,开放阅读框(ORF)1455 bp,预测其编码484个氨基酸多肽,蛋白质分子量约为53.99 kDa,理论等电点pI为6.52,为可溶性蛋白。AmUCGT在根、茎和叶中的表达趋势与毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量变化一致,推测其在毛蕊异黄酮葡萄糖苷的生物合成中起着重要作用。

膜荚黄芪IOMT基因的克隆及表达分析

该研究采用RACE技术克隆到了膜荚黄芪毛蕊异黄酮葡萄糖苷生物合成途径基因AmIOMT,并进行了生物信息学分析;调查了AmIOMT在膜荚黄芪不同发育时期的根、茎、叶和花中的表达量与芒柄花素之间的关系。结果表明:AmIOMT序列全长为1213 bp,其中,开放阅读框(ORF)编码362个氨基酸多肽,蛋白质分子量约为40.64 kDa,理论等电点pI为4.95,为亲水性蛋白,定位于细胞质中。AmIOMT在根、茎和叶中的表达呈上升趋势,与芒柄花素的含量一致,推测其参与了芒柄花素的生物合成,这为利用生物技术增加芒柄花素的含量提供了理论依据。

副鸡禽杆菌发酵培养工艺研究

本试验从接种方式、培养时间、初始接种量等方面对副鸡禽杆菌C-Apg-8（A型）的发酵培养条件进行了工艺改进。结果显示,通过将现有副鸡禽杆菌生产的二步接种法（一级种子→二级种子（7 500mL）→300L）改为四步接种法（4mL→160mL→1 600mL→30 000mL→300L）,接种比例由之前的2.5%变为2.5%~10%,培养方式由大瓶培养变为发酵罐培养,同时在不改变单批次发酵总体积、不增加人员和原材料成本的情况下,最终可以使副鸡禽杆菌发酵单批产量增加约5倍。

中国稳步迈向更高阶段

不久前,中国的全国人民代表大会和中国人民政治协商会议(以下简称两会)胜利闭幕。通过对两会精神的学习,我能够继续了解中国的战略重心,以及中国特色社会主义制度的优越性。在我看来,两会的看点主要聚焦在以下三个方面:大会的开幕式、《政府工作报告》和2023年中国经济的预期增长目标。由于新冠疫情对生产服务活动的影响以及受到国际局势的影响。设定规划,并在战略中遵循以最终实现最初拟定的目标。2022年国内生产总值(GDP)增长率下滑,中国政府提出了全新的经济增长计划。

机遇只青睐有准备的人

为了弘扬在"科技北京"建设背景下的创新创业文化,培育创业企业家精神,营造创新创业氛围,使北京成为鼓励创新、培育创业的沃土,本刊特开辟"创业故事会"专栏,欢迎在北京创业,并取得成功的人士,撰写个人或团队在创业历程中的种种酸甜苦辣,与读者共享。

免疫融合蛋白sFcεRIα/mIg(IgG2)的研制

哮喘、过敏性鼻炎、特应性皮炎及食物过敏等疾病为一类常见疾病,但存在治疗效果不佳,患者病程长等特点。IgE分子是导致过敏性疾病的关键分子。抑制IgE分子与效应细胞膜表面FcεRI受体的结合可抑制过敏反应的发生。通过克隆FcεRI受体α亚基的cDNA与IgG2的稳定区铰链区、CH2和CH3的cDNA连接,以二聚化融合蛋白sFcεRIα/mIg(IgG2)的形式在CHO细胞中表达,达到提高sFcεRIα生物半衰期的目的。表达载体构建和初步的功能性试验等一系列研究证实,所表达的融合蛋白的分子量为170kDa,并与人IgE和鼠IgE有较好的结合活性。这些研究为该融合蛋白最终实现产业化打下良好基础。

泰欣生有奖征文通知

泰欣生（尼妥珠单抗）2008年4月在中国正式上市，作为全球新一代EGFR单克隆抗体，泰欣生治疗鼻咽癌的临床研究取得突出效果，2009年3月载入《NCCN头颈部肿瘤治疗临床实践指南（中国版）》。国家食品药品监督管理局已批准泰欣生治疗食管癌、非小细胞肺癌、结直肠癌、神经胶质瘤四项注册性临床研究，全国范围的临床试验正在进行中。

泰欣生有奖征文通知

泰欣生（尼妥珠单抗）2008年4月在中国正式上市，作为全球新一代EGFR单克隆抗体，泰欣生治疗鼻咽癌的临床研究取得突出效果，2009年3月载人《NCCN头颈部肿瘤治疗临床实践指南（中国版）》。国家食品药品监督管理局已批准泰欣生治疗食管癌、非小细胞肺癌、结直肠癌、神经胶质瘤四项注册性临床研究，全国范围的临床试验正在进行中。

一种新型高糖基化免疫融合蛋白NESP-Fc的研制

新红细胞生成刺激蛋白(NESP),是重组人红细胞生长素(rh EPO)的一种高糖基化类似物,它含有5个N端糖链和比rhEPO高2倍的唾液酸残基,具有较好的代谢稳定性和3倍于rhEPO的半衰期。在新红细胞生成刺激蛋白(NESP)的基础上,通过NESP的cDNA与人IgG2的铰链区与CH2和CH3的cDNA连接,形成了融合蛋白NESP-Fc,来达到提高NESP半衰期的目的。表达载体的构建、融合蛋白的表达纯化和初步的功能性试验等一系列研究证实,所表达的融合蛋白主要以二聚体形式存在;NESP-Fc能明显促进UT-7细胞的生长和小鼠体内网织红细胞的增殖;在大鼠体内的研究发现其半衰期高达56h;小试规模重组蛋白的表达量在1.4g/L左右。这些研究为该融合蛋白最终实现临床应用和产业化打下了良好的基础。

攀登治疗恶性肿瘤的高峰

当今时代，谁在知识和科技创新方面占据了优势，谁就在发展上掌握了主动。但是，自主创新需要冒很大的风险，而且要付出巨大的代价，虽然创新的前景确实很诱人，但目前在我国，真正依靠自主创新成长起来的企业并不很多，而百泰生物药业有限公司就是走自主创新之路企业中的一个。

两种亲和层析介质的载量分析

本文对两种用于单抗捕获工艺的rPA亲和层析胶——Mabselect SuRe和Prosep ultra plus进行了10％穿透时动态载量（Qdyn10%）的分析。结果表明，两者的Qdyn10％有一定的差异，与供应商提供的数据基本相符，相比较而言Prosep ultra plus胶有较陡的穿透曲线，10％穿透时Qdyn 10％和1％穿透时Qdyn10％差别较小。介质的动态载量是亲和层析胶性能的一个方面，其综合性能需要对层析介质使用寿命、杂质去除、在线清洗（CIP）工艺的比较后才能评定。