尖吻蝮(Agkistrodon acutus)蛇毒凝血酶样酶的分离、纯化及其生化药理研究

本文报道自尖吻蝮蛇中分离、纯化三个凝血酶样酶(Thrombin-like Enzymes,TLEs),TLE-A,TLE-Ⅵ及TLE-Ⅶ。双向免疫扩散分别出现单一沉淀线,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分别呈单一区带,并依此测定分子量分别为66、31及14KD。试管内TLES能使纤维蛋白原或血浆形成纤维强白微凝块。凝血酶样酶制剂(TLES)150μg/ml效价与牛凝血酶1.0U/ml接近。肝素不能对抗其凝血效应,以对甲苯磺酰精氨酸甲基酯(TAME)为底物,其精氨酸酯酰活力可达2000μmol/min·mg左右。动物在体实验中,犬(n=6)静脉注射100μg/kg后4h药效达高蜂,血浆纤维蛋白原含量明显降低(P<0.02),凝血酶时间明显延长,血浆副凝血试验强阳性,血小板聚集功能明显抑制,家兔(n=10)每日静脉注射300μg/kg连用7天,对血液凝固系统效应与犬相似。药后第8天处死家兔病理解剖无明显变化。小鼠一次静脉注射的LD_(50)及其95％可信限为14.5±2.2(12.3～16.6)mg/kg。

放线菌素23-21的抗癌药理研究

采用裸鼠人鼻咽癌细胞系(CNE-2Z)和人胃癌细胞系(MGC-803)移植模型观察放线菌素23-21(Act 23-21)的抗癌作用。50μ/kg对CNE-2Z移植瘤和MGHC-803移植瘤的抑瘤率分别为58％和68.7％。肿瘤生长曲线显示,治疗组肿瘤生长缓慢。电镜观察治疗组瘤细胞可见核仁分离和微球体形成。提示Act 23-21可能有抑制核仁rRNA合成的作用。在有效剂量下未见重要脏器病理改变。

木棉花乙醇提取物的抗炎作用

木棉花乙醇提取物中乙酸乙酯可溶部分(GA)0.25,0.5g/kg腹腔注射,对小鼠角叉菜性足跖肿胀、小鼠二甲苯耳壳肿胀等炎症模型有较强的抗炎作用,最大抑制率分别为49.1%,66.7%.GA0.2g/kg对大鼠蛋清及角叉菜足跖肿胀模型也有较强的抑制作用,最大抑制率分别达78.3%,56.3%,对大鼠棉球肉芽肿的抑制作用与氢化可的松0.025g/kg相当。

香菇多糖注射液长期毒性试验

香菇多糖注射液系香菇(Lenfinus edodes)子实体的提取物,具有刺激免疫功能和抗肿瘤的作用;对白血病、食管癌、胃癌等病人治疗,证明有不同程度提高机体免疫功能的作用;对慢性迁延性肝炎患者有明显降低转氨酶的作用。本文观察该药对犬和大鼠的长期毒性,以便了解连续用药而产生的毒性作用,为临床用药提供安全性评价的实验依据。

雷公藤内酯对 L_(1210)等癌细胞的体外杀伤作用

以台盼兰排染法及中性红活染比色法测定雷公藤内酯对 L_(1210),HeLa 等癌细胞的体外杀伤作用,以[~3H]TdR,[~3H]UR 参入、荧光染色等方法观察药物对这些细胞株核酸合成的影响,发现该药对癌细胞的杀伤作用与其抑制核酸合成有关。

蜂毒素对大鼠血小板内钙浓度的影响

应用Ｆｕｒａ－２作为荧光试剂，测定大鼠血小板细胞内Ｃａ^（２＋）浓度变化。蜂毒素１．５ｍｇ／Ｌ使血小板细胞内Ｃａ^（２＋）浓度增加；悬液中加入ＣａＣｌ＿２１ｍｍｏｌ／Ｌ，血小板细胞内Ｃａ^（２＋）继续增加。维拉帕米３．１２５ｍｇ／Ｌ作用５ｍｉｎ后，蜂毒素仍可使血小板内Ｃａ^（２＋）增加．但加入ＣａＣｌ２血小板Ｃａ^（２＋）的浓度不再增加。提示蜂毒素促进大鼠血小板细胞内Ｃａ^（２＋）的释放和细胞外Ｃａ^（２＋）进入细胞内。

麝珠明目散滴眼剂点眼降眼压作用的实验研究

观察麝珠明目散滴眼液对正常兔和水负荷高眼压兔眼压影响。结果表明，３％，６％麝珠明目散滴药后１，０．５ｈ能显著降低眼压（Ｐ＜０．０１），并持续５，５．５ｈ以上，眼压降低最大值分别为０．７０７±０．３８９和１．２５９±０．２８０ｋＰａ；６％麝珠明目散眼压降低最大值大于３％麝珠明目散（Ｐ＜０．０５）或２％匹罗卡品滴眼液（Ｐ＜０．０５）。３％和６％麝珠明目散也能显著降低水负荷高眼压兔眼压，作用随剂量增大而更加显著（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）．与２％匹罗卡品作用无显著差异（Ｐ＞０．０５）。

核酸花粉合剂对小鼠免疫功能的影响

观察服用核酸花粉合剂对小鼠免疫功能的影响。小鼠口服核酸花粉合剂１～４ｇ／ｋｇ·ｄ。可使胸腺、脾脏重量增加，促进血清溶血素形成，并能对抗环磷酰胺诱发的血清溶血素下降，而对单核吞噬细胞系统、细胞免疫功能及环磷酰胺诱发的白细胞下降则无明显的影响。用Ｓ１８０荷瘤小鼠观察结果类似。

滇乌碱及其类似物镇痛效应的构效关系

目的：研究滇乌碱（Ｔ_１）、滇西嘟拉碱甲（Ｔ_２）及３－乙酰滇乌碱（Ｔ_３）的镇痛效应的构效关系。方法：小鼠扭体反应法和大、小鼠甲醛致痛法及急性毒性试验测试三药的镇痛作用强度及毒性。结果：镇痛作用Ｔ_１＞Ｔ_３＞Ｔ_２，毒性Ｔ_１＞Ｔ_２，Ｔ_１＞Ｔ_３，镇痛治疗指数Ｔ_３＞Ｔ_２＞Ｔ_１。结论：滇乌碱类生物碱３位上取代基与其镇痛效应及毒性关系密切。

洋地黄毒甙体内抗肿瘤活性及其增效作用

目的探讨洋地黄毒甙（ＤＴ）体内抗肿瘤活性及时常用化疗药５－氟尿嘧啶（５－ＦＵ）和环磷酰胺（ＣＴＸ）的增效作用。方法 应用小鼠移植性肿瘤模型，观察药物对小鼠生命延长率或肿瘤抑制率的影响。在可耐受的剂量（０．１ｍｇ／ｋｇ·ｄ－１，ｉｐ）下治疗小鼠腹水瘤ＥＡＣ，Ｈ２２，Ｐ３８８及实体瘤Ｓ１８０，Ｕ１４。结果 对腹水瘤无对抗作用，对实体瘤有一定抑制作用，抑瘤率分别为３４．６％，３５．１％。ＤＴ与５－ＦＵ（２００ｍｇ／ｋｇ·ｄ－１×１，ｉｐ）合用能显著提高５－ＦＵ对腹水瘤小鼠的生命延长率，分别达到５９．３％，７７．４％和９３．２％；与轻度抑瘤作用剂量（２０ｍｇ／ｋｇ·ｄ－１×２，ｉｐ）的ＣＴＸ合用，对实体瘤的抑瘤活性高于单独给药组，抑瘤率分别为７８．８％，８０．８％。结论 ＤＴ和５－ＦＵ或ＣＴＸ合用具有增强疗效的作用，毒性无明显相加。

黄花夹竹桃甙对K562细胞的杀伤作用

选用黄花夹竹桃甙作为Ｎａ＾＋Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶的抑制剂，观察其对体外培养的Ｋ５６２细胞的杀伤作用，初步探讨其作用机制。方法：台盼蓝排染法测定ＴＳ对Ｋ５６２细胞的杀伤作用；＾８６Ｒｂ示踪法测定ＴＳ对Ｋ５６２细胞Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶活性的抑制作用。

洋地黄毒甙体外抗人癌细胞株的作用

目的：探讨洋地黄毒甙体外抗肿瘤作用。方法：以台盼蓝排染法、中性红活染法和克隆形成实验测定洋地黄毒甙（ＤＴ）对多种人癌细胞株的细胞毒作用。结果：０．０１～１．２５μｇ／ｍｌＤＴ在体外能显著杀伤ＨＬ－６０．Ｋ５６２．ＳＭＭＣ－７７２１，ＳＧＣ－７９０１细胞，并呈剂量依赖性，药物作用２４ｈ．ＩＣ５０分别是０．１３２．０．１８２．０．２６５．０．４８９μｇ／ｍｌ。对正常成纤维细胞株ＨＬＦ的ＩＣ（５０）为４．２８８μｇ／ｍｌ．明显高于癌细胞，对癌细胞具有选择毒性作用。克隆形成实验中，０．０１～１．２５μｇ／ｍｌＤＴ处理１２ｈ，对ＨＬ－６０和ＳＧＣ－７９０１细胞集落形成有明显的抑制作用，ＩＣ５０分别是０．０５６．０．ｌ１９μｇ／ｍｌ。结论：应用洋地黄毒甙及其他Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶抑制剂防治肿瘤是一个值得探讨新方向。

增乳保育膏促进泌乳的实验研究

以仔鼠体重增长、吮乳量为指标，观察增乳保育膏促泌乳作用，并观察对小鼠授乳鼠血清催乳素（ＰＲＬ）水平和乳腺组织结构的影响。结果表明，增乳保育膏可通过小鼠或大鼠母鼠显著增加小鼠仔鼠体重或大鼠仔鼠吮乳量，表明该药具有促进泌乳作用；放免测定表明该药可显著提高小鼠授乳鼠血清ＰＲＬ水平，提示促进ＰＲＬ分泌可能是其促泌乳作用机理或机理之一；光镜下观察到用药母鼠乳腺腺泡高柱状上皮细胞增多。

CN80-2对鼠肝匀浆SOD,GSH-PX 的影响

本文给小鼠 CN80-2灌胃(3g/kg)14天,及鼠肝组织中加入 CN80-2(0.3g/ml)温育2h,均可提高鼠肝组织中超氧化物歧化酶含量(P<0.01,P<0.05),其抑制脂质过氧化物的作用与冬虫夏草相近(P<0.05),CN80-2还可提高谷胱甘肽过氧化物酶的含量。

体外培养肿瘤细胞Na^+,K^+-ATP酶活性的观察

采用细胞融破酶底物法测定小鼠淋巴细胞白血病(P_(388))细胞、人粒细胞白血病(K_(562))细胞和相应的正常组织细胞—小鼠脾脏单个核细胞(MSMN)和成人末梢静脉血多形核细胞(ABPN)的Na^+,K^+-ATP酶活性,结果表明P_(388)和K_(562)细胞的Na^+,K^+-ATP酶活性明显高于MSMN和ABPN。采用^(86)Rb示踪法测定4种体外培养的肿瘤细胞—人肝癌细胞(SMMC-7721)、人胃腺癌细胞(SGC-7901)、人宫颈癌细胞(HeLa cells)和K_(582)细胞的 Na^+,K^+-ATP酶活性,并同它们的生长速度进行比较,发现肿瘤细胞生长速度较快者(SMMC-7721),Na^+,K^+-ATP酶的活性也较高。本文结果表明,肿瘤细胞具有高Na^+,K^+-ATP酶的特征,且同生长速度有关。

白血病细胞钠,钾腺苷三磷酸酶活性的实验观察

应用“铷示踪法测定小鼠淋巴白血病细胞(P_3细胞)和人慢性粒细胞白血病细胞(K_(62)细胞)的钠钾转运活性,并同其各自相应正常组织细胞进行比较,发现此二种肿瘤细胞的钠,钾腺苷三磷酸酶(Na^+,K^+-ATP酶)转运活性(41.178±5.312和55.124±9.756nmol K^+/10~6 cells/h)远较正常细胞(5.615±2.879和15.911±3.913nmol K^+/10~6 cells/h)为高(P<0.001),而非Na^+,K^+-ATP酶转运活性(14.521±2.224和89.034±11.428nmol K^+/10~6 cells/h)与正常细胞(13.041±4.480和91.700±19.128nmol K^+/10~6 cells/h)无明显差异。证明此二种白血病细胞具有高Na^+,K^+-ATP酶活性的特征。

雷公藤内酯对L_(1210)细胞补救通路DNA合成的影响

用[~3 H]TdR参入法发现雷公藤内酯对L_(1210)细胞TdR转运有较强的抑制作用,而对TdR磷酸化的影响较弱。通过分析药物对DNA溶液粘滞性的影响、药物对DNA平衡透析及药物与DNA作用后的紫外光谱与荧光光谱变化等,均未发现药物与DNA之间存在相互作用。从药物对无细胞体系DNA合成无明显影响可进一步证实该药对DNA模板功能及DNA聚合酶α均无明显影响。因此对补救通路DNA合成的抑制,主要缘于该药对细胞核苷转运的抑制。

硫酸锌对依米丁诱发的大鼠心肌损害的保护作用

本文报道硫酸锌对依米丁(吐根碱)引起的大鼠心肌损害的保护作用。结果表明预先应用硫酸锌五天后再用依米丁的动物,其心电图、血清肌酸激酶(SCPK)、病理检查均比单用依米丁的动物有显著减轻病变效果。上述结果提示:硫酸锌对依来丁诱发的中毒性心肌损害,具有一定的保护作用。

中国拟青霉对小鼠脑和肝组织脂质过氧化物的影响

本文报道中国拟青霉(Paecilcmyces sinensis S P.nov;代号CN80-2)对小鼠脑和肝组织脂质过氧化物(lipid peroxide简称LPO)的影响。给予CN80-23g/kg每天一次灌胃14天的试验组,小鼠脑和肝组织LPO均降低,与对照组比较差异显著(P<0.01,P<0.05)、给予CN80-23g/kg每天一次灌胃14天后停药14天的试验组,其脑组织中LPO仍然保持低水平,与对照组比较P<0.05,提示该药具有降低脑组织中LPO的作用。

金利油的镇痛消炎和抗前列腺增生作用

金利油0.075～0.3ml/10g 灌胃对小白鼠热板法和扭体法以及电刺激法有明显的镇痛作用,0.255～0.3ml/10g 的疗效与0.6%颅通定(0.2ml/10g)相近。对致炎剂诱发的急性、亚急性、肉芽增生性以及免疫性炎症模型,金利油也有显著的抑制作用。金利油0.1和0.2ml/10g 连续灌胃30d,对反复皮下注射丙酸睾丸酮诱发的雄性小鼠前列腺增生的抑制率分别为27.92%和40.31%.限度实验表明,金利油灌胃对小鼠无明显的急性毒性.