中西医结合防治胃癌的研究进展

胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一,发病率和死亡率均位居恶性肿瘤的第3位[1]。研究发现,我国早期胃癌的占比仅约20%,大多数患者确诊时已为进展期,总体5 a生存率不足50%[2]。预计未来25 a,我国胃癌的病例数及死亡人数仍将不断增加,社会和经济负担也日益沉重[3]。

多维度协同培养中西医结合创新型科研人才体系探讨——以福建中医药大学中西医结合学科为例

新时代对中西医结合科研人才的知识结构、创新能力和成长环境提出了新的要求,为培养与国际接轨的新时代创新型中西医结合科研人才,形成一套多维度协同培养体系,本研究以福建中医药大学中西医结合学科研究生为调查对象,总结优秀人才培养经验,提出以“三个课堂”教学模式构建学术理论、实验研究、科研创新和科研转化等多维度协同培养中西医结合创新型科研人才方案。

乙氧基血根碱改善血管紧张素Ⅱ诱导的小鼠心肌纤维化的实验研究

目的 探讨乙氧基血根碱对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的小鼠心肌纤维化的影响及作用机制。方法 构建AngⅡ诱导的高血压小鼠心肌纤维化模型,根据小鼠的基线血压随机分为空白组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、阳性药组。除空白组之外的其余各组小鼠皮下以500 ng/(kg·min)的速率释放AngⅡ,空白组在泵内注入等量体积生理盐水,持续4周;低、中、高剂量组从术后第1天起分别给予0.1、1、10 mg/(kg·d)乙氧基血根碱灌胃,空白组和模型组给予等体积生理盐水,阳性药组给予10 mg/(kg·d)缬沙坦,连续灌胃给药28 d。采用Masson染色及天狼星红染色法检测6组小鼠心肌纤维化及胶原沉积情况;Western blot检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、增殖细胞核抗原(PCNA)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)及TGF-β1/smad2/3信号通路相关蛋白TGF-β1、p-smad2/3、smad2/3的蛋白表达量。结果 与空白组比较,模型组小鼠心肌细胞出现明显纤维化及胶原沉积,心脏组织中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、PCNA、α-SMA及FN的蛋白表达显著增加(P<0.05),通路相关蛋白TGF-β1表达、p-smad2/smad2比值及p-smad3/smad3比值显著上调(P<0.05),而乙氧基血根碱给药后,心肌的纤维化及胶原沉积情况均明显改善,Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、PCNA、α-SMA、FN、TGF-β1等蛋白表达及p-smad2/smad2和p-smad3/smad3比值均显著下调(P<0.05),且乙氧基血根碱对小鼠心肌纤维化改善的作用呈剂量依赖性(P<0.05)。结论 乙氧基血根碱可改善AngⅡ诱导的心肌纤维化,通过抑制TGF-β/smad2/3通路的活化可能是其发挥作用的机制之一。

基于网络药理学和细胞实验探讨清解扶正颗粒逆转大肠癌耐药的作用机制

目的通过网络药理学、分子对接技术并结合细胞实验,探讨清解扶正颗粒(QFG)逆转结直肠癌(CRC)耐药的活性成分、潜在靶点及作用机制。方法体外实验验证人大肠癌HCT-8/ANRIL细胞多药耐药性以及QFG对HCT-8/ANRIL细胞耐药性的逆转作用。依托TCMSP数据库筛选QFG的有效活性成分,利用PubChem、SwissTargetPrediction数据库预测对应靶点,通过GeneCards、OMIM、PharmGKB数据库收集与CRC耐药相关的疾病靶点,取两者交集。通过Cytoscape 3.9.1软件构建中药-活性成分-靶点网络,STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络并筛选核心靶点;DAVID平台对交集靶点进行基因本体论(GO)功能和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;使用AutoDock Vina软件对QFG主要活性成分和关键靶点进行分子对接。进一步通过qPCR检测预测核心靶点的mRNA相对表达水平;Western blot检测预测关键通路相关蛋白表达量。结果实验结果显示,HCT-8/ANRIL细胞具有多药耐药性,QFG对其耐药性具有逆转作用。网络药理学分析显示,QFG活性成分对应靶点465个,CRC耐药靶点1802个,QFG与CRC耐药交集靶点175个;筛选出QFG的主要活性成分黄芩素、高车前素、木犀草素等;QFG逆转CRC耐药的可能关键靶点为Akt1、IL-6和EGFR等,信号通路涉及PI3K/Akt、Ras、MAPK、EGFR等;分子对接显示,QFG主要活性成分与关键靶点对接活性良好。体外实验结果表明QFG可明显下调HCT-8/ANRIL细胞中IL-6和EGFR的mRNA表达及p-PI3K、p-Akt蛋白的表达(P<0.05)。结论QFG逆转结直肠癌耐药的物质基础主要为黄芩素、高车前素、木犀草素等,IL-6、EGFR及PI3K/Akt信号通路是其关键作用靶点和重要途径。

新橙皮苷治疗溃疡性结肠炎的网络药理学研究及实验验证

目的 基于网络药理学及动物实验探讨新橙皮苷治疗溃疡性结肠炎(UC)的作用及其机制。方法选择TCMSP、TCMIP、Swiss Target Prediction、SymMap、BATMAN-TCM数据库检索新橙皮苷潜在蛋白靶点,在DisGenet及Genecards数据库中检索UC的基因靶点,获取新橙皮苷治疗UC的潜在交集靶点。采用KEGG信号通路和GO功能富集分析筛选新橙皮苷治疗UC的关键信号通路;使用STRING生物信息学数据库构建蛋白相互作用(PPI)网络,筛选获取新橙皮苷治疗UC的核心靶标。采用随机数字表法将30只雄性SPF级C57BL/6小鼠分为对照组、模型组和低、中、高剂量组,每组6只。采用2%的葡聚糖硫酸钠(DSS)构建UC小鼠模型。低、中、高剂量组分别给以0.5、5、50 mL/(kg·d)新橙皮苷溶液灌胃造模的小鼠,对照组和模型组予等量蒸馏水灌胃,持续7 d。采用小鼠疾病活动指数(DAI)及小鼠体质量变化评估小鼠疾病情况;IHC检测网络药理学预测获得的相关核心靶标蛋白表达情况。结果 网络药理学分析获得2 374个UC疾病靶点、101个新橙皮苷作用靶点和51个新橙皮苷与UC共同靶点。GO富集功能分析显示这些共同靶点涉及50个生物过程、20个细胞组分和42个分子功能。KEGG通路分析筛选获得MAPK信号通路、癌症的发病途径、癌症中的蛋白多糖、内分泌耐药、雌激素信号通路、糖尿病并发症的AGE-RAGE通路、IL-17信号通路等66条通路。PPI网络拓扑分析获得MAPK14、ALB、ESR1、FN1、CASP3、PTGS2、CAT、IFNG、HRAS、FGF2及AR等核心靶点。动物实验证实新橙皮苷可降低UC小鼠DAI评分,减少UC小鼠体质量的下降,显著下调UC小鼠结肠组织中p38(MAPK14)蛋白的磷酸化水平(P<0.05)。结论 新橙皮苷治疗溃疡性结肠炎的作用机制可能与降低MAPK通路中p38磷酸化水平有关。

白藜芦醇治疗溃疡性结肠炎的网络药理学研究及实验验证

目的基于网络药理学探讨白藜芦醇调控溃疡性结肠炎(UC)的作用机制并进行体内实验验证。方法在DisGenet数据库中检索UC的疾病靶点,在TCMSP、Swiss Target Prediction、SymMap、BATMANTCM数据库中检索白藜芦醇对应的蛋白靶点,两者相映射,得到白藜芦醇治疗UC的潜在靶点。将预测的潜在靶点进行GO生物学过程和KEGG信号通路富集分析,筛选出白藜芦醇治疗UC的关键信号通路;构建靶点相互作用(PPI)网络,筛选出白藜芦醇治疗UC的核心靶点。采用葡聚糖硫酸钠(DSS)化学诱导法构建UC小鼠模型,检测小鼠疾病活动指数(DAI)评分评估小鼠疾病情况,HE染色观察肠组织的病理学改变,Western blot检测网络药理学预测的信号通路相关蛋白表达情况。结果DisGenet数据库检索得到UC疾病靶点1458个,TCMSP、Swiss Target Prediction、SymMap、BATMAN-TCM数据库中获取白藜芦醇作用靶点358个,两者相映射后,获得白藜芦醇可能作用于UC的潜在靶点127个。GO富集功能分析显示涉及生物过程272个,细胞组分28个,分子功能40个。KEGG通路分析筛选得到131条通路,主要富集在PI3K-Akt信号通路、脂质与动脉粥样硬化、乙肝、糖尿病并发症的AGE-RAGE通路、TNF信号通路等。PPI网络拓扑分析可得到Akt1、TNF、IL-6、TP53、STAT3、IL-1β、MAPK3及PTGS2等核心靶点。体内实验结果显示,白藜芦醇可缓解UC小鼠DAI评分升高,降低UC小鼠结肠组织病理组织学评分,下调UC小鼠结肠组织中PI3K、p-Akt/Akt蛋白表达(P<0.05)。结论白藜芦醇治疗溃疡性结肠炎的作用机制可能与PI3K/Akt通路有关。

基于网络药理学和实验验证探讨异莲心碱治疗高血压的作用机制

目的探讨异莲心碱治疗高血压病及改善血管平滑肌细胞增殖的作用及分子机制。方法①动物实验:采用随机数字表法将24只雄性SPF级C57BL/6小鼠分为对照组、模型组、异莲心碱组和缬沙坦组,每组6只。模型组和给药组采用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)皮下埋泵法建立高血压小鼠模型,持续4周,收缩压≥140 mm Hg和(或)舒张压≥90 mm Hg即视为造模成功。异莲心碱组按10.5 mL/(kg·d)予异莲心碱药液灌胃,缬沙坦组按15 mL/(kg·d)予缬沙坦药液灌胃,对照组和模型组予等量双蒸水灌胃,连续给药4周。小动物无创血压仪检测造模前1 d及造模后第1、2、3、4周小鼠血压;小动物超声仪检测小鼠腹主动脉脉冲波的传播速度和血管壁厚度;HE染色法观察小鼠腹主动脉病理情况。②网络药理学:应用TCMSP、Swiss Target Prediction、SymMap、BAT⁃MAN-TCM数据库检索异莲心碱对应的蛋白靶点,在DisGeNET和GeneCards数据库中检索高血压的疾病靶点,两者相映射,得到异莲心碱治疗高血压的作用靶点。构建靶点相互作用(PPI)网络,筛选出异莲心碱治疗高血压的核心靶标。将预测的核心靶点进行KEGG信号通路富集分析,筛选出异莲心碱治疗高血压的关键信号通路。③细胞实验:采用CCK8法筛选AngⅡ和异莲心碱干预大鼠胸大动脉平滑肌细胞A7R5的最适宜浓度。将A7R5细胞分为对照组、模型组和2.5、5、10μmol/L异莲心碱组,除对照组外,其余各组加入1μmol/L的AngⅡ溶液进行造模刺激,2.5、5、10μmol/L异莲心碱组同时分别加入2.5、5、10μmol/L的异莲心碱溶液进行干预,各组均干预24 h。Western blot检测A7R5细胞p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt和PCNA蛋白表达量。结果①动物实验:与对照组比较,模型组干预1、2、3、4周的收缩压、舒张压和平均动脉压明显升高(P<0.05);与模型组比较,异莲心碱组和缬沙坦组干预1、2、3、4周的收缩压、舒张压、平均动脉压明显降低(P<0.05)。4组小鼠干预1、2、3、4周的体质量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,模型组脉冲波传播速度和血管壁厚度均明显提高(P均<0.05);与模型组比较,异莲心碱组和缬沙坦组脉冲波传播速度和血管壁厚度均明显降低(P均<0.05)。HE染色显示,与对照组比较,模型组小鼠腹主动脉管壁厚度明显增厚;而经异莲心碱和缬沙坦干预后,小鼠腹主动脉管壁增厚程度明显改善。②网络药理学:通过TCMIP、Swiss Target Prediction、BATMAN-TCM等数据库筛选得到异莲心碱和高血压的共同靶点90个,信号通路81条,PPI网络拓扑分析可得到PIK3CA、LYN、MAPK8、PRKCD、BLK、PDG⁃FRP、FGR、RAF1、ABL1、PRKCB、TBXA2R、SYK、PRKCQ、PDPK1等核心靶点。③细胞实验:与0μmol/L AngⅡ比较,0.01、0.1、1、10μmol/L AngⅡ干预A7R5细胞后细胞活力明显提高(P<0.05);与0μmol/L异莲心碱比较,20、40、80μmol/L异莲心碱干预A7R5细胞后细胞活力明显降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组PCNA蛋白表达量和p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt比值均明显提高(P<0.05);与模型组比较,10μmol/L异莲心碱组PCNA蛋白表达量和p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt比值均明显降低(P<0.05)。结论异莲心碱具有抑制AngⅡ诱导的小鼠血压升高和改善AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞增殖等作用。异莲心碱可能通过PI3K/Akt通路改善血管平滑肌细胞增殖治疗高血压。

福建海洋中药现代化研究现状及其发展建议

本文以传承精华、守正创新为发展方向,以中医理论为核心,以海洋中药的古籍文献及临床疗效为依据,建议开展福建海洋中药资源保护与可持续利用、物质基础及作用机制、标准化和质量控制技术、复方新药、大健康产品、数据库建设与应用服务等方面的基础研究,建立系统的福建海洋中药现代化研究体系,以期服务于福建省海洋经济的发展。

补肾纳气中药对COPD大鼠膈肌细胞形态及相关肌细胞特异性microRNA下游指标的影响

目的探讨全真一气汤的作用机制及横膈在肾不纳气证形成中的意义。方法将80只SD大鼠按照随机数字表法分为六组,正常组(A组)10只、慢性阻塞性肺疾病(COPD)肾不纳气证组(B组)60只[模型组(B_(1)组)15只、中药实验组(B_(2)组)15只、中药对照组(B_(3)组)15只、西药对照组(B_(4)组)15只]及COPD非肾不纳气证组(C组)10只,A组、B_(1)组大鼠给予氯化钠,B_(2)组给予全真一气汤,B_(3)组给予六君子汤,B_(4)组给予氨茶碱片,共60 d。HE染色观察A组、B_(1)组及C组的肺、膈肌病理形态,实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测各组microRNA-1(以下简写为“miR-1”)、组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)及过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助因子1α(PGC-1α)表达,Western blot(WB)法检测以上指标的蛋白含量。结果B_(1)组膈肌纤维细胞排列紊乱、变形、间隙增宽,且重于C组。qPCR结果显示,其他各组miR-1表达皆低于A组(P<0.05),且B_(2)组、B_(4)组低于B_(1)组(P<0.05),B_(2)组低于B_(3)组(P<0.05);B_(2)组、B_(3)组和B_(4)组HDAC4表达高于B_(1)组,且B_(2)组HDAC4、PGC-1α表达皆高于B_(3)组(P<0.01),B_(1)组与C组HDAC4、PGC-1α表达差异均有统计学意义。WB结果显示,B_(2)组HDAC4蛋白表达高于B_(1)组和B_(3)组,PGC-1α蛋白表达高于B_(1)组、C组及B_(3)组、B_(4)组,C组PGC-1α蛋白表达高于B_(1)组。结论膈肌参与肾不纳气证的形成,全真一气汤可通过下调miR-1,影响HDAC4、PGC-1α的蛋白表达,改善COPD膈肌损伤。

青娥方对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织PI3K/Akt信号通路的影响

目的 探讨青娥方对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路的影响。方法 采用随机数字表法将72只3月龄SPF级雌性SD大鼠分为假手术组、模型组和青娥方组,每组24只。大鼠均按40 mg/kg腹腔注射2%戊巴比妥钠溶液麻醉,于下腹部正中作切口,模型组和青娥方组均切除双侧卵巢,假手术组切除卵巢周围少量脂肪组织后立即关腹,缝合伤口。造模1周后,假手术组和模型组予2 mL0.9%氯化钠溶液灌胃,青娥方组按浸膏量0.42 g/(kg·d)予青娥方药液灌胃,每日1次,连续灌胃12周。3组分别于干预4、8、12周后各处死8只并取材。Masson染色法观察股骨颈形态;检测股骨骨密度和骨生物力学指标最大载荷;ELISA法检测血清PI3K、Akt含量;qPCR和Western blot检测腰椎PI3K、Akt和糖原合成酶激酶3β(GSK3β)mRNA相对表达水平和蛋白表达量。结果 与假手术组比较,模型组干预第4周腰椎Akt mRNA相对表达水平明显升高(P<0.05);第12周股骨最大载荷明显降低(P<0.05);第8、12周股骨骨密度明显降低(P<0.05),腰椎PI3K mRNA相对表达水平均明显升高(P<0.05),PI3K蛋白表达量明显升高(P<0.05);第4、8、12周血清PI3K、Akt含量均明显升高(P<0.05),腰椎Akt、GSK3β蛋白表达量均明显升高(P<0.05),GSK3β mRNA相对表达水平明显升高(P<0.05)。与模型组比较,青娥方组干预第4周腰椎Akt mRNA相对表达水平和蛋白表达量明显降低(P<0.05);第12周股骨最大载荷明显升高(P<0.05),血清Akt含量均明显降低(P<0.05),腰椎Akt蛋白表达量明显降低(P<0.05);第8、12周股骨骨密度明显升高(P<0.05),腰椎PI3K、GSK3β mRNA相对表达水平均明显降低(P<0.05),PI3K蛋白表达量明显降低(P<0.05);第4、8、12周血清PI3K含量明显降低(P<0.05)。结论青娥方可改善去卵巢骨质疏松模型大鼠骨密度及骨生物力学性能,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路有关。

中西医结合研究生医学实验方法与技术课程体系构建及其科研能力培养的实践

研究生教育是培养高级医学人才的重要组成部分,在医学教育研究领域占有重要地位。在中西医结合研究生的培养过程中,医学实验方法和技能的训练对医学研究生科研素养培育至关重要。从教学理念模式、课程设计内容、成绩评价以及科研素养培育等方面,总结了中医药大学医学实验方法与技术课程体系构建及其研究生科研能力培养中的教学实践和思考体会,探索出合理的中西医结合研究生培养模式,为切实提高中西医结合人才培养质量奠定基础。

狗脊多糖调控lncRNA NEAT1延缓椎间盘终板软骨细胞衰老的作用研究

目的:探讨狗脊多糖通过调节lncRNA NEAT1延缓椎间盘终板软骨细胞衰老的作用机制。方法:将15只C57BL/6小鼠的椎间盘终板软骨细胞进行体外培养;经10 ng·mL-1白细胞介素-1β(IL-1β)干预24 h诱导软骨细胞;将软骨细胞随机分为空白对照组、模型对照组(10 ng·mL-1IL-1β)和狗脊多糖各剂量组(100,200,400μg·mL-1);Real-time PCR及Western blot分别检测狗脊多糖对IL-1β诱导软骨细胞lncRNA NEAT1、衰老相关通路p53-p21中p53、p21水平及衰老相关分泌表型的基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、CollagenⅡ、Caspase-3蛋白表达情况;流式细胞术检测各组软骨细胞凋亡率情况。结果:Real-time PCR结果显示,经IL-1β诱导的椎间盘终板软骨细胞中lncRNA NEAT1、p21、p53水平显著增高;与模型对照组比较,狗脊多糖各剂量组lncRNA NEAT1、p21、p53水平显著降低;与空白对照组比较,经IL-1β诱导的椎间盘终板软骨细胞中MMP-13、Caspase-3蛋白表达含量显著增高,CollagenⅡ蛋白表达降低;经狗脊多糖干预后,可显著改善MMP-13、CollagenⅡ、Caspase-3蛋白表达;此外,与模型对照组比较,狗脊多糖各剂量组椎间盘终板软骨细胞凋亡率呈现下降趋势。结论:狗脊多糖通过调控lncRNA NEAT1影响p53、p21、MMP-13、CollagenⅡ、Caspase-3表达,降低软骨细胞凋亡率,进而延缓椎间盘终板软骨细胞衰老。

基于“肾主骨生髓通于脑”理论探析膝骨关节炎疼痛的神经调控

膝骨关节炎是一种以关节软骨、软骨下骨、滑膜病变为表现的慢性、退行性关节疾病,疼痛是其首发症状及主要就诊原因。肾气不足,导致骨、髓、脑三者功能紊乱,可引发膝骨关节炎局部病变及中枢神经环路的病变。肝肾亏虚、筋骨失和,骨髓化生乏源、骨失所养,无力生髓养脑、神经环路功能紊乱,可引发疼痛。因此,文章在“肾主骨生髓通于脑”理论指导下,以肾-骨-脑轴为切入点,从膝骨关节炎疼痛的神经调控入手,探析膝骨关节炎疼痛的神经调控机制,旨在丰富“肾主骨生髓通于脑”理论的科学内涵,为膝骨关节炎疼痛的中西医结合临床治疗提供新策略。

清心解瘀颗粒抗动脉粥样硬化的药效学及调控机制

目的基于网络药理学探讨清心解瘀颗粒(QXJYG)抗动脉粥样硬化(AS)的药效学及其调控机制。方法通过网络药理学挖掘QXJYG抗AS的关键靶点和信号通路。采用高脂喂养合并腹腔注射维生素D3的方式构建AS大鼠模型,将造模成功后的30只大鼠随机分为模型组、阿托伐他汀组(13.15 mg·kg^(-1)·d^(-1))、低剂量组(0.99 g·kg^(-1)·d^(-1))、中剂量组(1.98 g·kg^(-1)·d^(-1))、高剂量组(3.96 g·kg^(-1)·d^(-1)),每组6只;另外将6只SD大鼠给予正常饮食作为对照组。实验动物干预8周后,通过小动物超声检测大鼠腹主动脉血管内径、血管壁厚度、脉冲波传播速度、搏动指数,通过HE染色检测大鼠腹主动脉病理形态,通过全自动生化仪检测每组大鼠的血脂水平,通过ELISA检测试剂盒测定血清中AngⅡ、ET-1、TXA2、PGI2、ox-LDL含量。采用免疫组化法检测大鼠腹主动脉中LOX-1、PPARγ、RXRα、p-P65、VCAM-1、ICAM-1蛋白的表达。结果与正常组相比,模型组的腹主动脉血管壁厚度、脉冲波传播速度、搏动指数升高(P<0.05),血管内径减小(P<0.05),且平滑肌细胞增生、排列紊乱,TC、LDL-C、AngⅡ、ET-1、TXA2含量显著升高(P<0.05),HDL-C、PGI2含量显著下降(P<0.05)。与模型组相比,QXJYG和阿托伐他汀干预后,显著降低腹主动脉血管壁厚度、脉冲波传播速度、搏动指数(P<0.05),增大血管内径(P<0.05),减轻平滑肌细胞排列紊乱情况,显著降低TC、LDL-C,AngⅡ、ET-1、TXA2(P<0.05),显著升高HDL-C、PGI2含量(P<0.05),通过网络药理学预测发现QXJYG可能通过调控脂质,PPAR和NF-κB等信号通路发挥抗AS的作用。与正常组相比,模型组的ox-LDL含量、LOX-1、p-P65、VCAM-1、ICAM-1蛋白表达水平显著升高(P<0.05),PPARγ、RXRα蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组相比,QXJYG干预后,ox-LDL含量、LOX-1、p-P65、VCAM-1、ICAM-1蛋白表达水平显著降低(P<0.05),PPARγ、RXRα表达显著升高(P<0.05)。结论QXJYG显著改善AS大鼠脂代谢紊乱,扩大腹主动脉血管内径,减小腹主动脉血管壁厚度,抑制腹主动脉血管病理损伤,调节血管收缩和舒张功能。QXJYG发挥抗AS的作用机制可能是抑制血脂中ox-LDL水平,降低LOX-1的表达,激活PPARγ、RXRα蛋白,抑制P65的磷酸化,从而降低VCAM-1、ICAM-1蛋白表达。

Fe_(3)O_(4)@ZIF-8-表面辅助激光解吸/电离质谱法检测美洲大蠊多肽

本实验在室温下合成了以Zn作为金属中心,2-甲基咪唑作为连接剂的磁性金属有机框架材料Fe_(3)O_(4)@ZIF-8,以Fe_(3)O_(4)@ZIF-8作为固体基质,通过建立Fe_(3)O_(4)@ZIF-8-表面辅助激光解吸/电离质谱(SALDI-MS)法,实现了美洲大蠊小分子多肽IPMTAPGL-NH_(2)、LTAPGL-NH_(2)、SLMTGPGL-NH_(2)、SLHTAPGL-NH_(2)的快速检测。实验优化了基质浓度、检测限和点样方法等条件,考察了该基质对美洲大蠊多肽IPMTAPGL-NH_(2)的质谱信号影响。与传统基质辅助激光解析电离质谱法(MALDI-MS)相比,Fe_(3)O_(4)@ZIF-8-SALDI-MS法检测背景更干净,目标多肽响应更强,检测灵敏度更高。该法可应用于血样中美洲大蠊多肽IPMTAPGL-NH_(2)的快速检测。

基于Notch信号通路探讨夏枯草抑制大肠癌细胞增殖及干性的机制

目的以肿瘤干细胞为切入点,基于Notch信号通路探究夏枯草对大肠癌细胞增殖及干性的调控机制。方法体外培养大肠癌SW480细胞,待细胞处于对数生长期后,随机分成对照组和0.1 mg/mL组、0.2 mg/mL组、0.4 mg/mL组。对照组不进行药物干预;剩余3组分别添加0.1 mg/mL、0.2 mg/mL、0.4 mg/mL的夏枯草药液,并将各组所含DMSO补足至等量,干预24 h后进行后续实验。采用倒置显微镜观察大肠癌SW480细胞生长形态及密度,0.4%台盼蓝染色法检测活细胞数并计算细胞存活率;CCK8法检测大肠癌SW480细胞的增殖抑制率;流式细胞术检测大肠癌SW480细胞群中干细胞比例;克隆球形成实验检测大肠癌SW480细胞的自我更新能力;Western blot法检测大肠癌SW480细胞内增殖调控蛋白c-Myc,肿瘤干细胞特征标记物CD44、CD133、SOX2以及Notch信号通路相关蛋白Notch1、Hes1蛋白相对表达量。结果与对照组比较,0.1 mg/mL组、0.2 mg/mL组、0.4 mg/mL组大肠癌SW480细胞生长和细胞存活率随着加药浓度增加而受到明显抑制(P<0.05);大肠癌SW480细胞增殖能力随着加药浓度增加而明显下降(P<0.05);大肠癌SW480细胞群中肿瘤干细胞比例随着加药浓度增加而明显下降(P<0.05);大肠癌SW480细胞自我更新能力随着加药浓度增加而明显抑制(P<0.05)。Western blot结果显示,与对照组相比,0.1 mg/mL组、0.2 mg/mL组、0.4 mg/mL组大肠癌SW480细胞增殖调控蛋白c-Myc,肿瘤干细胞特征性标记物CD44、CD133、SOX2蛋白及通路相关蛋白Notch1、Hes1的相对表达量随着加药浓度增加而明显下调(P<0.05)。结论夏枯草可以抑制大肠癌细胞的增殖及干性,抑制Notch通路的活化可能是其发挥作用的重要机制。

从“髓充骨”理论初探干细胞归巢改善绝经后骨质疏松症骨代谢紊乱的机制

绝经后骨质疏松症是全身性骨代谢紊乱性疾病,属中医学“骨痿”范畴,病在骨,本在肾。“髓充骨”源于《黄帝内经》,肾藏精、精生髓、髓充骨;女子增龄衰老,肾虚髓亏,骨髓生化乏源,骨失所养,则为骨痿。骨髓间充质干细胞属中医学“精”“髓”范畴,是骨髓中的重要细胞群之一,具有多向分化潜能,能分化为成骨细胞,参与调节骨形成-骨吸收耦联,在绝经后骨质疏松症病理过程发挥重要的调节作用。基于中医“髓充骨”理论,探讨肾、精、髓、骨在骨痿过程中的作用,并阐释精、髓现代内涵及骨髓间充质干细胞在绝经后骨质疏松症骨代谢紊乱中的角色,为临床治疗绝经后骨质疏松症提供新的防治策略。

透骨消痛胶囊调控Nav1.7减轻膝骨关节炎小鼠软骨细胞退变

目的从Nav1.7调控软骨细胞外基质稳态角度,研究透骨消痛胶囊对减轻膝骨关节炎(KOA)软骨细胞退变的作用机制。方法选择40只2月龄C57BL/6小鼠,通过随机数字表法将其分为空白组(n=10)和造模组(n=30)。造模组小鼠通过Hulth法手术建立KOA模型后,随机分为模型组(生理盐水灌胃)、透骨消痛胶囊组(368 mg/kg剂量灌胃)、阳性药物组(10 mg/kg双氯芬酸钠灌胃),10只/组;空白组为生理盐水灌胃,干预6次/周,共4周。干预后5%异氟醚麻醉处死,获得膝关节软骨组织。形态学染色观察软骨组织结构变化,实时荧光定量PCR检测Nav1.7 mRNA水平,Western blotting分析Nav1.7、MMP-3、ADAMTS-5、COX-2蛋白表达变化。荧光原位杂交检测软骨细胞中Nav1.7的表达量。此外,利用慢病毒载体敲减Nav1.7(sh-Nav1.7)转染软骨细胞,实时荧光定量PCR分析转染后sh-Nav1.7在软骨细胞中mRNA水平变化。Western blotting分析在sh-Nav1.7条件下,透骨消痛胶囊对KOA软骨细胞MMP-3、MMP-13、ADAMTS-4、ADAMTS-5、COX-2蛋白的调控。结果形态学结果显示,和模型组对比,透骨消痛胶囊组和阳性药物组软骨层结构更完整,关节结构破坏程度减轻。透骨消痛胶囊组和阳性药物组的Nav1.7蛋白与mRNA水平降低(P<0.05),MMP-3、ADAMTS-5、COX-2蛋白表达减少(P<0.05)。荧光原位杂交结果显示,透骨消痛胶囊能降低IL-1β诱导的Nav1.7的荧光强度。在Nav1.7敲减实验中,与IL-1β组相比,IL-1β+sh-Nav1.7组中Nav1.7水平下降(P<0.05);与IL-1β+TGXTC组相比,IL-1β+sh-Nav1.7+TGXTC组中Nav1.7水平下降(P<0.05)。Western blotting结果表明,IL-1β组软骨细胞中升高的MMP-3、MMP-13、ADAMTS-4、ADAMTS-5、COX-2蛋白被透骨消痛胶囊干预后显著抑制(P<0.05),但在Nav1.7敲低后,透骨消痛胶囊对这些蛋白的调控作用减弱(P<0.05)。结论透骨消痛胶囊通过调控Nav1.7减轻KOA软骨细胞外基质代谢紊乱,从而发挥减轻软骨细胞退变的作用。

褪黑激素治疗骨关节炎的作用研究探析

骨关节炎是一种常见的退行性全关节疾病,其发病机制为软骨细胞密度降低、细胞外基质合成与分解代谢失衡、异常炎症信号转导和过度氧化应激反应。褪黑激素及其衍生物是一种高效的自由基解毒剂和广谱抗氧化剂,具有抗氧化、抗炎症反应和抗衰老作用,通过调节多种分子信号,能够针对骨关节炎的发病机制发挥保护作用。总结褪黑激素介导其作用对骨关节炎发病机制的影响,旨在为褪黑激素临床治疗骨关节炎提供支持。

透骨消痛胶囊干预兔膝骨关节炎蛋白多糖与MMP-2、MMP-13表达的实验研究

目的:通过透骨消痛胶囊对兔膝骨关节炎软骨基质多糖与基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-13表达影响的实验研究,进一步探讨该药保护骨关节炎软骨基质的作用机制。方法:将72只新西兰大白兔随机分为空白对照组,模型对照组,奥泰灵组,透骨消痛胶囊低、中、高剂量组,每组12只。除空白对照组外,其余各组均采用改良Hulth法造模,造模后5周给予药物治疗,灌胃8周。甲苯胺蓝染色、AB-PAS染色观察软骨蛋白多糖的表达,Western Blot检测MMP-2、MMP-13的表达。结果:与空白对照组比较,模型对照组甲苯胺蓝染色、AB-PAS染色显著减弱,MMP-2、MMP-13表达显著升高。与模型对照组比较,透骨消痛胶囊组甲苯胺蓝染色、AB-PAS染色均匀深染,MMP-2、MMP-13表达显著降低。结论:透骨消痛胶囊可通过下调软骨MMP-2、MMP-13表达,减缓软骨基质降解,降低软骨损伤程度,延缓骨关节炎病理进程。