《中兽医学》实验课程教学改革探讨与实践

《中兽医学》实验是动物医学专业的一门重要专业课。为了提高《中兽医学》实验课教学效果,针对传统实验教学过程存在的诸多不足,从教学内容、教学手段、方法和考核方式上进行课程教学改革。通过精心设计实验、丰富教学手段和改进教学方法,优化考核方式,充分发挥学生的积极性和主动性,增强学生分析问题和解决问题的能力,提高教学质量。

中药复方对猪蓝耳病阳性场母猪繁殖性能及血液生理生化指标的影响

为探讨中药对猪蓝耳病阳性场母猪繁殖性能及血液生理生化指标的影响,试验随机选取20头胎次相近、妊娠90 d的长大二元母猪,随机分成0.1%、0.3%、0.5%中药组和空白对照组,试验期20 d,停药当日早上空腹采血当天检测外周血血液免疫细胞数及生化指标,考察死胎数、弱仔数、木乃伊胎数等繁殖指标。结果表明:与空白对照组比较,0.5%和0.3%中药组死胎数显著降低(P<0.05);0.3%中药组弱仔数显著降低(P<0.05);0.3%中药组淋巴细胞数提高53.6%(P<0.05);0.3%中药组总蛋白含量提高6.9%(P<0.05);0.1%和0.3%中药组球蛋白含量分别提高22.3%(P<0.05)和15.1%(P>0.05),0.5%中药组降低9.1%(P>0.05),0.5%中药组显著低于0.3%中药组(P<0.05),极显著低于0.1%中药组(P<0.01);0.3%中药组丙氨酸氨基转移酶活性显著降低(P<0.05);0.1%和0.3%中药组的血糖含量分别降低了19.3%(P<0.05)、14.9%(P<0.05);0.1%中药组的总胆红素含量显著降低(P<0.05)。说明自拟中药复方能降低猪蓝耳病阳性场母猪产弱仔及死胎数,提高母猪繁殖性能;提高母猪外周血免疫细胞数量,调节免疫功能;改善母猪血浆生化指标,改善肝脏功能。0.3%中药组效果最好。

福建白羽肉鸡鸡毒支原体的分离鉴定及最小抑菌浓度测定

为了解福建白羽肉鸡中鸡毒支原体(MG)对临床常用药物的敏感性,本研究从2个商品代白羽肉鸡养殖场采集了疑似患慢性呼吸道病(CRD)的鸡喉拭子40份,接种于适宜的支原体培养基上进行纯化。通过对菌株生物学特性分析、细菌形态学观察、PCR测序及动物回归试验进行鉴定,并利用最低抑菌浓度(MIC)测定了分离株对临床常用抗菌药的敏感性。结果显示,本试验成功获得2株MG,命名为MX和HY。将分离株接种于含有酚红的支原体液体培养基中能分解葡萄糖产酸使培养基颜色由红变黄;固体培养基于低倍镜下观察到典型的“荷包蛋”状菌落;分离株经过Dienes染色后的菌落中心呈致密深蓝色,边缘淡蓝,且30 min后不褪色,并具有较强吸附红细胞的能力,呈现典型MG培养特征;动物回归试验和分离株pvpA基因测序结果显示,2株MG分离株均具有较强致病性,证实其与R株的亲缘关系最近;药敏试验结果显示,MX和HY对泰妙菌素、氟苯尼考和泰乐霉素表现出了高度敏感性,其次是盐酸恩诺沙星、盐酸大观霉素,而对具有与泰乐霉素类似分子结构和抗菌谱的畜禽专用抗生素替米考星敏感性较差,此差异可能与临床上长期应用该药有关。研究结果表明,福建地区商品代白羽肉鸡中存在致病性MG流行,泰妙菌素可以作为临床防治MG的首选药物。

蛋鸡的产业发展现状及中药在蛋鸡非传染性疾病防治中的作用

中药具有增强蛋鸡免疫、提高产蛋率、改善蛋品质的作用。概述国内外蛋鸡产业的发展现状,总结影响蛋鸡生产的非传染性因素及其机制,对中药调节营养吸收和缓解应激的进行分析,为阐明中药在治疗蛋鸡非传染性疾病的作用提供参考。

饲粮添加姜黄粉对黄羽肉鸡生产性能和免疫性能的影响

本试验旨在研究饲粮添加姜黄粉对黄羽肉鸡生产性能和免疫性能的影响。试验选用320羽1日龄黄羽肉鸡,随机分成4组,每组8个重复,每个重复10羽。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加150 mg/kg姜黄素(姜黄素组)、5 g/kg姜黄粉(0.5%姜黄粉组)和10 g/kg姜黄粉(1.0%姜黄粉组),其中姜黄粉组饲粮用姜黄粉替代等量的谷壳糠。试验期70 d。结果表明:1)与对照组相比,姜黄粉组肉鸡29~70日龄料重比显著降低(P<0.05),1.0%姜黄粉组1~70日龄料重比显著降低(P<0.05),且饲粮添加姜黄粉对屠宰性能、肌肉剪切力和肉色无显著影响(P>0.05)。2)与对照组相比,0.5%姜黄粉组肉鸡肌肉必需氨基酸、总氨基酸和总脂肪酸含量显著提高(P<0.05)。3)与对照组相比,饲粮添加姜黄粉可显著提高肉鸡胸腺指数、血清禽流感抗体含量以及血清免疫球蛋白、补体、白细胞介素、干扰素-γ和溶菌酶含量(P<0.05)。4)与对照组相比,饲粮添加姜黄粉可显著下调肉鸡免疫器官核因子-κB(NF-κB)、转化生长因子β活化激酶1(TAK1)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA相对表达量(P<0.05)。综上所述,饲粮添加姜黄粉能降低黄羽肉鸡料重比,促进其生长;提高肉品质,提升其营养价值;调节NF-κB信号通路相关基因的表达,减轻炎症,调节黄羽肉鸡免疫性能,提高其生产性能。

太子参多糖对卵清白蛋白诱导免疫抑制小鼠肠道免疫应答影响的研究

为研究太子参多糖(PHPS)对模式抗原卵清白蛋白(OVA)引起免疫抑制小鼠肠道免疫应答能力的影响,本研究将84只雄性ICR小鼠随机均分为7组,即PBS对照组(PBS组)、环磷酰胺对照组(CY组)、OVA单独免疫组(OVA-CY组)、铝佐剂对照组(OVA-CY-AL组)、OVA-CY-PHPS低、中、高剂量组(OVA-CY-PHPS-L组、OVACY-PHPS-M组、OVA-CY-PHPS-H组)。除PBS组以外,各组小鼠均于实验开始后1 d~3 d和18 d分别经腹腔注射环磷酰胺(CY,50 mg/kg),建立免疫抑制小鼠模型。于实验开始后4 d~8 d和19 d~23 d,OVA-CY-PHPS-L组、OVA-CY-PHPS-M组、OVA-CY-PHPS-H组小鼠分别灌胃对应剂量PHPS (50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg),PBS组、CY组、OVA-CY组和OVA-CY-AL组小鼠灌胃等体积双蒸水;第9 d和24 d,OVA-CY-PHPS-L组、OVA-CY-PHPS-M组、OVA-CY-PHPS-H组、OVA-CY组小鼠均经腹股沟皮下注射100μg OVA (0.2 m L/只)进行一免和二免。PBS组与CY组小鼠经相同方式注射等体积无菌PBS,OVA-AL组小鼠经相同方式注射OVA/铝佐剂混合液(OVA 100μg+Alum 200μg) 0.2 m L/只。第38 d剖杀各组小鼠,制作十二指肠、空肠、回肠病理切片观察小鼠肠道病变,采用Image-Pro Plus 6.0软件计算各肠段绒毛高度、隐窝深度、肠道上皮中的淋巴细胞数量;采用ELISA法检测各组小鼠各肠段IL-6、TNF-α含量、分泌型免疫球蛋白A (SIgA)抗体水平;采用荧光定量RT-PCR (qRT-PCR)法检测各组小鼠各肠段细胞因子m RNA的相对转录水平。结果显示,与OVA-CY组相比,各剂量PHPS均能改善免疫抑制小鼠肠道绒毛稀疏、肿胀、破裂的情况,低剂量的PHPS能够显著提高免疫抑制小鼠十二指肠、空肠绒毛高度与隐绒比(V/C)值(P<0.05),低、高剂量的PHPS均能够显著提高免疫抑制小鼠回肠的肠绒毛高度与V/C值(P<0.05);较OVA-CY组,高剂量PHPS能够显著提高免疫抑制小鼠空肠上皮内淋巴细胞的数量(P<0.05),低、高剂量PHPS能够显著提高免疫抑制小鼠回肠上皮内淋巴细胞的数量(P<0.05);与OVA-CY组相比,各剂量PHPS均能够显著提高免疫抑制小鼠十二指肠中IL-6含量及各肠段中TNF-α含量和SIg A抗体水平(P<0.05);与OVA-CY组相比,各剂量PHPS均能够显著上调免疫抑制小鼠各肠段IL-6和TNF-α m RNA的相对转录水平(P<0.05)。上述结果表明,PHPS能在一定程度上修复免疫抑制小鼠肠道黏膜结构的损伤,调节其细胞因子的分泌及其基因的转录水平,增强肠道黏膜免疫功能,从而提高免疫抑制小鼠对OVA的免疫应答能力。本研究为PHPS对动物肠道免疫调节作用的研究提供参考,为进一步开发PHPS提供借鉴。

芪蓝复方对妊娠母猪免疫增强作用研究

【目的】揭示芪蓝复方对妊娠母猪免疫功能的增强作用,为缓解妊娠母猪免疫抑制提供参考,为芪蓝复方的临床应用提供数据支撑。【方法】采用加热回流、浓缩冻干工艺制备芪蓝复方提取物,利用硫酸-苯酚法、高效液相色谱法和紫外分光光度法检测芪蓝复方的主要有效成分含量。选取25头长白二元母猪(30~40胎龄),分为空白组(N),0.1%(L)、0.2%(M)和0.4%(H)芪蓝复方组以及阳性对照组(A),5头/组,试验期30 d,分别于试验开始后1、15和29 d采集血液,检测血清生化指标(总蛋白、白蛋白、尿素氮、葡萄糖、血钙、血磷和甘油三酯)、血清抗氧化指标(总抗氧化能力、谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶和丙二醛)、免疫球蛋白(IgG、IgM和IgA)、炎症因子(白细胞介素-6(IL-6)和IL-1β)以及猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体水平。【结果】芪蓝复方中多糖、(R,S)-告依春以及淫羊藿苷含量分别为56.0%、0.035%和0.39%。妊娠15、29 d,与N组相比,A组猪血清白蛋白、IgM、IgA含量及总抗氧化能力、谷胱甘肽过氧化物酶活性均显著升高(P<0.05);L、H组谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶活性均显著升高(P<0.05);各组丙二醛、IL-1β含量均显著降低(P<0.05);M、H组S/P值均显著降低(P<0.05)。与A组相比,妊娠15 d, L组血清总蛋白、血钙水平、总抗氧化能力及IgM、IgA含量均显著降低(P<0.05);H组超氧化物歧化酶活性显著升高,血清总蛋白、血钙、甘油三酯水平及IgM、IL-6含量、S/P值均显著降低(P<0.05)。妊娠29 d, L组血清总抗氧化能力、血钙水平、IgG、IgA含量均显著降低(P<0.05);M组血钙水平、超氧化物歧化酶活性、IL-1β含量均显著降低(P<0.05)。【结论】芪蓝复方对妊娠母猪免疫功能具有显著增强作用,可用于妊娠母猪免疫抑制疾病防控。

猪源葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

为明确从福建某规模猪场分离到的病原菌及其生物学特性、致病性与耐药等特征,为疫病的防治提供参考依据。对分离菌进行纯化,采用革兰氏染色、PCR鉴定、药敏试验、消毒剂消杀试验、耐药基因检测及动物攻毒试验等,对分离菌进行生物学特性、耐药等相关检测。结果显示,分离菌为猪源葡萄球菌。该菌对30种常用抗菌药物中的苯唑西林、诺氟沙星、头孢类等14种药物高度敏感,对阿米卡星、庆大霉素、四环素、万古霉素、氟苯尼考5种药物中度敏感,对氨苄西林、哌拉西林、卡那霉素等11种药物不敏感,检测cfr、tetM、floR、mcr-1、bla NDM-1、optrA 6种耐药基因均为阴性;该菌对26种中药中的单宁酸高度敏感,对五味子、五信子多酚中度敏感,对叶下珠、厚朴、虎杖低度敏感,对半边莲、铁苋菜、艾叶、重楼等20种中药不敏感;在8种消毒剂中,84消毒液对该分离菌的消杀效果差,新洁尔灭、月苄三甲氯铵、复合酚3种消毒剂对该分离菌消杀效果好;动物攻毒试验表明,该菌对25日龄健康断奶仔猪具有强致病性,能导致猪出现典型的葡萄球菌病临床症状和病理特征,攻菌猪组织病理可见脾脏红髓淤血、肺泡腔内见红细胞渗出及少量粉染的渗出物。研究结果可为在养殖饲料端禁止添加抗生素的背景下,为猪葡萄球菌病的防治提供理论参考和技术支撑。

牛至香酚对LPS免疫应激小鼠血清细胞因子含量和肠道细胞因子、紧密连接蛋白表达水平的影响

【目的】旨在探究牛至香酚是否能有效改善脂多糖(LPS)免疫应激小鼠免疫功能的损伤。【方法】将80只小鼠随机分成空白对照组、模型组和牛至香酚低、中、高剂量组。牛至香酚低、中、高剂量组分别按25、50、100 mg·kg^(-1)的剂量灌胃牛至香酚,空白对照组和模型组按10 mL·kg^(-1)的剂量灌胃橄榄油,每日1次,连续14 d。第15天时,牛至香酚组和模型组小鼠腹腔注射8 mg·kg^(-1)LPS,空白对照组注射等量生理盐水,6 h后采集血液和肠道组织,检测小鼠血清细胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10)含量和肠道细胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10)、紧密连接蛋白(ZO-1、Occludin、Claudin-1)mRNA的表达水平。【结果】(1)与空白对照组相比,模型组小鼠血清TNF-α、IL-10、IL-1β含量上升(P>0.05),IL-6含量极显著上升(P<0.01);模型组回肠和结肠组织TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA表达水平极显著上调(P<0.01),回肠和结肠组织ZO-1 mRNA表达水平下调(P>0.05),结肠组织Occludin、Claudin-1 mRNA表达水平极显著下调(P<0.01)。(2)与模型组相比,牛至香酚试验组小鼠血清IL-6含量极显著下降(P<0.01),IL-1β含量显著下降(P<0.05);牛至香酚高剂量组血清TNF-α含量极显著下降(P<0.01);牛至香酚中、高剂量组血清IL-10含量显著上升(P<0.05)。(3)同模型组相比,牛至香酚中、低剂量组回肠组织IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA表达水平极显著下调(P<0.01);牛至香酚中、高剂量组回肠组织ZO-1、Occludin mRNA表达水平极显著上调(P<0.01);牛至香酚高剂量组结肠组织IL-10 mRNA表达水平极显著上调(P<0.01),TNF-αmRNA表达水平极显著下调(P<0.01),Occludin、Claudin-1 mRNA表达水平极显著上调(P<0.01)。【结论】牛至香酚通过改变小鼠血清细胞因子含量和肠道细胞因子、紧密连接蛋白mRNA的表达水平,调节LPS免疫应激小鼠的免疫功能。

RAA-LFD检测RHdV-2方法的建立

【目的】建立基于重组酶介导的核酸等温扩增(RAA)的侧流层析试纸条(LFD)方法,用于快速诊断兔出血症病毒(RHdV)2型(RHdV-2)。【方法】采用生物信息学软件分析RHdV-2、RHdV 1型(RHdV^(-1))基因组,筛选RHdV-2特异且保守的片段,设计RAA-LFD探针与特异性引物,以筛选最适引物及其浓度;对RAA-LFD检测的最适反应温度和时间进行优化,并对该方法的灵敏性、特异性、重复性进行评价及临床样品检测。【结果】同源性分析表明,RHdV-2的VP60基因存在特异且保守的序列。基于VP60基因设计3对引物,发现上游引物序列为5'-TCATTTGTACCCTTCAGCGGTACCACCATCC-3'、下游引物序列为5'-CCCGGCTGTTGTCTGGTTTATGCCATTT-3'的扩增效果最好,引物与探针混合液的最适浓度为5.000μmol·L^(-1)。用LFD-RAA方法检测RHdV-2的最适反应温度为39℃,最适反应时间为30 min。敏感性检测结果显示:以RHdV-2 VP60重组质粒为模板的最低检出量为6.7×103 ng·μL^(-1)。用建立的RAA-LFD方法对RHdV^(-1)的检测结果呈阴性,对RHdV-2的检测结果呈阳性,表明该方法的特异性良好。重复性检测结果显示,同一批次和不同批次试剂盒的检测结果均一致,表明重复性好。31份临床样品检测结果显示,5份为RHdV-2阳性样品。【结论】建立的检测RHdV-2的RAA-LFD方法具有简捷、易操作的特点,适合养殖场对RHdV-2的快速诊断。

口服太子参多糖对鸡毒支原体弱毒活疫苗免疫增强作用的研究

为研究口服太子参多糖(RPP)对鸡毒支原体(MG)弱毒活疫苗的免疫增强作用,本实验选用SPF鸡90只,随机均分为空白对照组(CK组)、疫苗对照组(MG组)和3种不同剂量RPP组(RPP剂量分别为L组50 mg/kg、M组100 mg/kg和H组200 mg/kg)。除CK组和MG组外,L组、M组和H组均在接种前1 d~7 d口服适量RPP,第8 d时除CK组外各组鸡均经滴鼻MG弱毒活疫苗30μL(1羽份)。每日称饲料用量并在给药后7 d、21 d时各组随机抽9只鸡称重,计算平均日增重、平均日采食量和料肉比;给药前和给药后7 d、10 d、14 d、21 d时每组分别随机经翅下静脉采集6只鸡血液,采用间接ELISA测定细胞因子含量、抗体效价。给药后7 d、14 d、21 d,各组随机抽3只鸡剖杀无菌采集脾脏,分别测定脾脏指数。结果显示:与CK组、MG组相比,给药后21 d时L、M、H组鸡的平均日增重、平均日采食量均显著升高(P<0.05),L、H组鸡料肉比显著降低(P<0.05),21 d时L、M、H组鸡MG抗体效价均显著升高(P<0.05),并达到有效免疫保护水平。血清中相关细胞因子检测结果显示,在给药后14 d时M、H组IFN-γ、IL-4水平均显著上调(P<0.05),IL-1、IL-6含量均显著下调(P<0.05);给药后14 d、21 d时L、M、H组脾脏指数均显著升高(P<0.05)。分别选CK组、MG组和免疫效果最佳的H组5只鸡,于给药后21 d经滴鼻点眼MG MX-4株菌液,记录各组鸡攻毒后鸡体重、症状,2周后剖杀并采集攻毒后鸡肺脏,进行病变评分。结果显示,CK组鸡日增重显著低于(P<0.05)MG组、H组,而MG组和H组比较,MG组1只鸡日增重低于MG组平均值,其余鸡生长性能均无明显异常;CK组鸡肺脏病变较为严重(病变平均分值为6.8分),MG组鸡肺脏仅轻微病变(病变平均分值为1.8分),H组肺脏无明显病变(病变平均分值为0.6分)。上述结果首次表明,口服RPP能够使免疫MG弱毒活疫苗鸡的抗体效价快速上升,脾脏功能增强,提高鸡的生长性能,并升高Th1型细胞因子IFN-γ和Th2型细胞因子IL-4在鸡血清中的含量,从而促进免疫鸡的细胞免疫反应与抗原提呈能力;另外还可显著降低血清中促炎因子IL-1、IL-6含量,具有一定的抗炎作用;同时可有效降低攻毒鸡肺脏病变程度,减缓MG感染导致鸡的生长性能下降。本研究为RPP在MG弱毒活疫苗免疫中的应用提供了科学参考依据。

太子参多糖对OVA免疫小鼠肠道免疫应答能力的影响

【目的】研究太子参多糖(PHPS)对卵清白蛋白(OVA)免疫小鼠肠道免疫应答的影响,为了解PHPS能否增强小鼠机体的免疫应答能力提供依据。【方法】将72只健康清洁级(SPF)雌性ICR小鼠随机分成空白对照组(CK组)、OVA免疫对照组(OVA组)、铝佐剂阳性对照组(AL组)及PHPS各剂量组[50 mg·kg^(-1) PHPS(PHPS-L)组、100 mg·kg^(-1) PHPS(PHPS-M)组、200 mg·kg^(-1) PHPS(PHPS-H)组],每组12只小鼠。试验第1~5天和第16~20天,PHPS各剂量组小鼠灌胃对应剂量的PHPS,其余各组均灌胃双蒸水;试验第6天和第21天,CK组小鼠按0.2 mL·只^(-1)的剂量腹股沟皮下注射无菌PBS,AL组小鼠按0.2 mL·只^(-1)的剂量腹股沟皮下注射OVA与铝佐剂的混合液,其他组小鼠均按0.2 mL·只^(-1)的剂量腹股沟皮下注射OVA溶液;试验第36天采用颈椎脱臼法处死小鼠,采集样品,制作十二指肠、空肠、回肠切片检测小鼠肠道形态结构和上皮内淋巴细胞数量,检测小鼠肠道细胞因子(IL-6、TNF-α)和分泌性免疫球蛋白A(SIgA)的含量,以及IL-6、TNF-αmRNA的转录水平。【结果】(1)与OVA组相比,PHPS各剂量组小鼠十二指肠、空肠、回肠的绒毛高度和绒隐比提高,PHPS-M组十二指肠、PHPS-H组空肠、PHPS各剂量组回肠的隐窝深度显著降低(P<0.05);同时,PHPS各剂量组十二指肠、空肠、回肠的上皮内淋巴细胞数量均有所增加。(2)与OVA组相比,PHPS各剂量组小鼠十二指肠、空肠、回肠IL-6、TNF-α的含量增加,SIgA含量显著增加(P<0.05)。(3)与OVA组相比,PHPS各剂量组小鼠十二指肠、空肠、回肠IL-6、TNF-αmRNA的转录水平显著上调(P<0.05)。【结论】PHPS能在一定程度上改善肠道形态结构,促进肠道上皮内淋巴细胞分泌,调节相关免疫分子的释放与表达,从而增强肠道黏膜免疫反应,提高小鼠对OVA的免疫应答能力。

一株血清8a型禽腺病毒的分离鉴定及致病性分析

【目的】研究福建南平地区禽腺病毒(FAdV)血清8a型分离株的遗传演化情况及致病性,旨在为防控血清8a型FAdV感染提供参考。【方法】2022年8月,采集福建南平地区部分肉鸡养殖场出现的以包涵体肝炎为特征的肝脏病料,采用PCR技术检测FAdV核酸,将获得的阳性样品接种在无特定病原体(SPF)鸡胚上进行病原的分离纯化,利用hexon基因测序及序列分析等方法进行病毒鉴定,并在测定分离株毒力的基础上进行动物致病性试验。【结果】接种10 d后,鸡胚死亡,肝脏肿大、出血、坏死、呈土黄色;PCR鉴定和hexon基因序列分析表明,分离株与GenBank上的FAdV E型8a血清型澳大利亚TR59毒株的序列同源性高达99.5%,将该分离株命名为FJNP。FJNP株对1日龄SPF鸡的致死率为44%(11/25);剖检显示,感染鸡肝脏肿大、出血、边缘钝圆、呈土黄色、出现白色坏死点,脾脏和肾脏也出现肿大、出血等症状;肝脏组织病理学检查结果显示,感染鸡肝细胞大量变性坏死,肝细胞核可见嗜碱性包涵体及大量淋巴细胞浸润。实时荧光定量PCR检测显示,感染鸡体内多个组织器官均检测到病毒,且主要分布在肝脏,攻毒3、5、7、14、21 d在泄殖腔中均能检测到病毒。【结论】本研究从临床表现为包涵体肝炎的病鸡肝脏病料中分离到一株具有较强致病性的血清8a型FAdV。

口服太子参皂苷对鸡免疫功能和炎症反应的影响

【目的】旨在研究口服太子参皂苷(RP)对鸡免疫功能和炎症反应的影响,为使用RP作为免疫增强剂提供科学依据,对家禽养殖业的疾病预防和健康维护具有实际应用价值。【方法】试验以鸡毒支原体(MG)抗原、抗体均为阴性的30日龄健康河田鸡为研究对象,根据初始体质量平均分为5组,空白组不给药及疫苗,疫苗对照组口服灭菌生理盐水7 d后免疫MG弱毒疫苗,100,20,5 mg/kg RP试验组分别连续口服RP 7 d后免疫MG弱毒疫苗,一免后28 d进行二免,试验期49 d。采用间接ELISA法检测血清中MG特异性抗体消长规律及抗体阳性率和细胞因子(IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-1α、CCL4、IL-17A、IL-6)含量。【结果】(1)RP组与疫苗对照组相比,口服RP能有效提高一免及二免后7 d的MG特异性抗体滴度及抗体阳性率(P<0.05),其中以RP高剂量(100 mg/kg)效果最佳。(2)细胞因子表达水平中,与疫苗对照组相比,RP高剂量(100 mg/kg)和中剂量(20 mg/kg)组血清中免疫因子(IFN-γ、IL-4、IL-5)的含量在一免后3 d呈现显著上升(P<0.05),一免后7 d无明显差异;(3)与疫苗对照组相比,RP组炎症细胞因子(IL-1α、CCL4、IL-17A、IL-6)血清中的含量显著降低(P<0.05),高剂量组(100 mg/kg)下降最为显著。【结论】首免前口服太子参皂苷(RP)能够提高河田鸡的免疫功能,并降低由MG弱毒疫苗引起的炎症反应,其中100 mg/kg RP效果最佳。

猴头菇多糖对氧化应激状态下仔猪回肠形态结构及通透性的影响

本试验旨在探究氧化应激状态下猴头菇多糖(HEP)对断奶仔猪回肠形态结构及通透性的影响。将45头健康的(28±3)d断奶仔猪按体重相近原则分为5组,空白组和模型组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中分别添加0.2%、0.4%、0.6%的HEP。于试验第21天,对模型组和HEP组按体重注射100μg·kg-1脂多糖(LPS),空白组注射等剂量灭菌生理盐水;前腔静脉采血15mL,分离血清,用于检测抗氧化指标和肠黏膜完整性指标;宰杀试验猪,分离回肠,HE染色观察其形态变化;qPCR和Western blot法检测回肠紧密连接蛋白的表达情况。结果显示,同模型组比较,HEP能显著改善LPS应激造成的血清抗氧化指标下降(P<0.05);显著提高仔猪血清中谷氨酰胺(GLN)含量(P<0.05),降低二胺氧化酶(DAO)活性(P<0.05),缓解LPS导致的仔猪回肠黏膜损伤;使得LPS应激诱导的回肠上皮细胞紧密连接蛋白表达下降显著回升(P<0.05)。饲料中添加HEP能够有效改善氧化应激状态下仔猪的回肠形态结构及通透性。

番鸭呼肠孤病毒感染对雏番鸭肠黏膜组织结构及肠道免疫细胞的影响

为探究番鸭呼肠孤病毒(MDRV)感染对雏番鸭肠黏膜免疫的影响,本研究将100只1日龄MDRV抗原抗体阴性雏番鸭随机分为二组:空白对照组(NCG)和MDRV同居感染组(CIG),利用人工感染发病的20只番鸭对GIC组番鸭进行同居感染。NCG和CIG组番鸭分别于后者同居感染1 d、3 d、6 d、10 d、15 d、21 d后采集其十二指肠、空肠、回肠样品进行肠道形态结构(绒毛高度、宽度、V/C值、肠壁厚度、绒毛表面积)的观察及免疫相关细胞(上皮内淋巴细胞、杯状细胞、肥大细胞)的检测。结果显示:与NCG相比,CIG番鸭肠道绒毛高度下降、宽度变窄,排列稀疏,V/C值降低,绒毛表面积下降,肠壁厚度变薄,上皮内淋巴细胞、杯状细胞、肥大细胞数量下降,尤其是同居感染6 d以后其各项检查指标均与NCG差异极显著(p<0.01)。表明MDRV可导致肠道消化吸收功能障碍和黏膜免疫抑制。该研究结果进一步充实MDRV感染的致病机制。

“芪苓散”超微粉对河田鸡血清抗氧化性能及免疫生化指标的影响

为探讨"芪苓散"超微粉对河田鸡血清抗氧化性能及免疫生化指标的影响,试验选取630只1日龄河田鸡公雏随机分成3组(空白对照组、抗生素组、中药组)进行研究。试验期105 d。每组分别于28、56、105日龄采血分离血清,测定血清抗氧化、免疫和生化指标。结果显示:与对照组相比,复方中药超微粉显著提高28日龄河田鸡血清中总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性及溶菌酶、补体C4和免疫球蛋白M(IgM)含量,显著提高56日龄免疫球蛋白G(IgG)含量,显著提高105日龄T-SOD活性及IgG、总蛋白和球蛋白含量,显著降低105日龄河田鸡血清中总胆固醇含量(P<0.05)。试验表明"芪苓散"超微粉可以提高河田鸡抗氧化能力和免疫能力,具有一定降低河田鸡血脂的保健作用。

猴头菇多糖对氧化应激的IPEC-J2细胞抗氧化能力及紧密连接蛋白ZO-1的影响

旨在探究在H_2O_2诱导的氧化应激损伤状态下,猴头菇多糖(HEPs)对IPEC-J2细胞的保护作用。将IPEC-J2细胞分为5组:空白组、模型组、HEPs低剂量组、HEPs中剂量组、HEPs高剂量组。采用MTT法分别选取试验用的H_2O_2和HEPs的最佳剂量;利用DCFH-DA染色观察并测定细胞内活性氧簇(ROS)的含量;通过比色法检测培养细胞上清液中丙二醛(MDA)的含量,细胞中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活力以及乳酸脱氢酶(LDH)的释放率;应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测紧密连接蛋白ZO-1基因的转录水平。结果显示,(1)构建IPEC-J2细胞氧化应激模型的H_2O_2浓度为0.4mmol·L-1。(2)H_2O_2能够极显著地增加细胞内的ROS含量,诱导细胞凋亡,同时极显著地降低了SOD和CAT的活力,极显著地升高MDA含量与LDH释放率。但是,与模型组相比,经过HEPs预处理后,细胞内ROS的含量极显著地降低(P<0.01);同时极显著地提高了SOD和CAT的活力(P<0.01),极显著地降低了MDA含量与LDH释放率(P<0.01)。(3)实时荧光定量PCR结果显示,H_2O_2能够极显著地降低ZO-1基因的转录量(P<0.01),与模型组比较,HEPs能够极显著的提高ZO-1基因的转录量(P<0.01);Western blot结果显示ZO-1蛋白的表达量与ZO-1基因类似。可见,猴头菇多糖对H_2O_2诱导氧化损伤状态下的IPEC-J2细胞具有保护作用。

猴头菇多糖对MDRV感染雏番鸭肠道修复作用与MAdCAM-1分泌量关系的研究

为研究猴头菇多糖(HEPS)对番鸭呼肠孤病毒(MDRV)感染雏番鸭肠道修复作用与黏膜地址素细胞黏附分子1(MAd CAM-1)分泌量的关系,将200只1日龄番鸭随机分为空白对照组(BCG)、猴头菇多糖对照组(HCG)、同居感染对照组(CICG)和猴头菇多糖预防组(HPG),其中后两组按建立MDRV自然感染发病模型进行同居感染;各组番鸭分别于同居感染3、6、10、15和21 d后取血液和十二指肠样品进行放射性免疫检测MAd CAM-1含量,并观察其肠道形态和淋巴细胞分布及数量变化。结果显示,HCG组番鸭肠道MAd CAM-1分泌量极显著高于HPG(P<0.01),且显著高于CICG(P<0.05),HEPS对MDRV感染番鸭血清中MAd CAM-1含量的调节作用不显著;HPG组与CICG组相比,肠道形态结构较完整,淋巴细胞的分布有向黏膜上皮移动的趋向,且分布在细胞顶端的数量增多。研究表明:HEPS可能通过调节MDRV感染番鸭肠道MAd CAM-1的分泌量,参与淋巴细胞归巢过程,起到修复和保护肠道黏膜,提高雏番鸭的黏膜免疫力的作用。

我国番鸭呼肠孤病毒研究文献统计分析

为了更好地认识我国番鸭呼肠孤病毒研究的现状,对2018年11月前中国知网数据库的177篇番鸭呼肠孤病毒研究文献的发表时间、发表刊物、研究机构、作者信息以及研究主题等进行统计分析。结果表明:目前番鸭呼肠孤病毒研究文献发表期刊整体质量较高,研究机构和作者以福建农林大学及福建省农业科学院畜牧兽医研究所占优势,对病原学、致病机理及分子流行病学等方面研究不够深入,对免疫学和防控技术的研究较为欠缺。