秦皇岛市城近郊肠易激综合征症状患病率及其心理、健康相关生活质量状况

目的明确河北省秦皇岛市城近郊社区居民中肠易激综合征(Irritable Bowel Syndrome,IBS)症状患病率及其心理、健康相关生活质量(HRQOL)状况。方法(1)用整群、分层、随机抽样的方法对秦皇岛市城近郊区中3个小区的的常住居民进行面访式问卷调查。问卷包括人口学资料、生活习惯、既往及现患症状情况、SCL-90心理量表和SF-36健康相关生活质量量表。(2)从症状调查结果中选择符合IBS罗马Ⅱ标准者,分析其心理及生活质量状况。(3)结果经SPSS软件由专业统计公司完成。结果(1)调查纳入850人,有效问卷840张(98.8%)。(2)符合RomeⅡ标准的IBS症状患病率为4.6%,男女比为1:1.6,女性60岁以上组发病率明显高于其他年龄段。(3)IBS症状人群较其他人群存在更多的心理问题,主要表现为抑郁、焦虑、躯体化、强迫、敌对等;其生活质量较其他人群有不同程度的下降,在总体健康状况、躯体疼痛、躯体角色、社会功能、躯体功能等各维度的积分尤为明显,其中总体健康状况下降最为突出。结论秦皇岛市城近郊区居民中IBS症状患者存在明显的心理问题,生活质量也有不同程度地下降。

生长抑素与前列地尔联合治疗对高脂血症性急性胰腺炎患者血小板、消化功能的影响

目的研究生长抑素与前列地尔联合治疗对高脂血症性急性胰腺炎患者血小板和消化功能的影响。方法2013年2月至2015年2月治疗的86例高脂血症性急性胰腺炎患者,将其随机分为对照组和治疗组,每组43例。对照组采用常规的治疗方法,治疗组在对照组的基础上加用生长抑素联合前列地尔治疗。比较两组患者的治疗效果,血小板相关指标和消化功能相关指标。结果治疗后,治疗组的治疗总有效率95.3%高于对照组的76.7%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后1 d,3 d和7 d的血小板相关指标治疗组均低于对照组,消化功能相关指标也均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论生长抑素联合前列地尔能够显著改善血小板指标和消化功能相关指标,治疗高脂血症性胰腺炎效果显著,有效减少治疗时间,是治疗高脂血症性急性胰腺炎的新方法。

急性胰腺炎患者血清CXC趋化因子配体10和CC类趋化因子22水平与疾病严重程度关系及临床诊断价值研究

目的:分析急性胰腺炎患者血清CXC趋化因子配体10(CXCL10)和CC类趋化因子22(CCL22)水平与疾病严重程度的关系及临床诊断价值。方法:选取急性胰腺炎患者102例,分为轻症组(轻症急性胰腺炎患者,47例)、中度重症组(中度重症急性胰腺炎患者,31例)和重症组(重症急性胰腺炎患者,24例)。选择52例体检健康者为健康组。采用全自动生化分析仪检测受试者肝功能指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)]、肾功能指标[肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)]以及淀粉酶(AMY)水平。采用酶联免疫吸附法检测血清中CXCL10、CCL22水平。采用急性胰腺炎严重程度床边指数(BISAP)评分评估急性胰腺炎患者疾病严重程度。采用Logistic回归分析中度重症和重症急性胰腺炎发生的影响因素。采用Pearson法分析急性胰腺炎患者血清CXCL10、CCL22水平及BISAP评分间的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清CXCL10、CCL22水平诊断中度重症和重症急性胰腺炎的价值。结果:与健康组比较,轻症组ALT、Scr、BUN、AMY水平升高,中度重症组和重症组ALT、AST、Scr、BUN、AMY水平升高(均P<0.05)。与轻症组比较,中度重症组BUN水平升高,重症组ALT、AST、Scr、BUN水平升高(均P<0.05)。与中度重症组比较,重症组BUN水平升高(P<0.05)。四组血清CXCL10、CCL22水平及BISAP评分依次升高(均P<0.05)。急性胰腺炎患者血清CXCL10和CCL22水平呈正相关(P<0.05);血清CXCL10、CCL22水平与BISAP评分呈正相关(均P<0.05)。血清CXCL10、CCL22、BISAP评分是中度重症和重症急性胰腺炎发生的独立危险因素(均P<0.05)。血清CXCL10、CCL22对中度重症和重症急性胰腺炎均有一定诊断价值,且两项联合诊断价值更高(均P<0.05)。结论:急性胰腺炎患者血清CXCL10、CCL22水平呈高表达,且随疾病严重程度的加重而升高,两者联合诊断中度重症和重症急性胰腺炎的价值较高。

P21活化激酶4在胃肠道间质瘤中的表达及意义

目的通过研究不同危险度胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)中P21活化激酶4(P21-activated kinase 4,PAK4)的表达量,探讨PAK4与GIST危险度的关系。方法选取2020年10月至2021年4月秦皇岛市第一医院病理诊断为GIST患者24例,根据共识将患者分为高危组、中危组、低危组,通过病理切片来确定不同危险度组的PAK4的表达量,并根据Callow计算方法对不同危险度组进行评分。结果PAK4随着GIST危险度增加表达升高,并且与正常对照组织及瘤旁组织相比,GIST中的PAK4表达量升高。结论PAK4表达量与GIST危险度相关,并且随着危险度升高,表达量也升高。

腹泻型肠易激综合征患者MTL、BDNF表达水平与病情严重程度的关系

目的研究腹泻型肠易激综合征(diarrhea-predominant irritable bowel syndrome,IBS-D)患者胃动素(motilin,MTL)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)表达水平与病情严重程度的关系。方法选取102例我院于2020年8月至2022年8月收治的IBS-D患者作为研究组,另选取102名于同期在我院进行体检的健康受试者作为健康对照组。评估两组患者症状严重程度及内脏敏感度;采用酶联免疫吸附法测定血清中MTL、BDNF水平。分析患者血清MTL、BDNF水平及其与疾病严重程度的关系。结果与健康对照组相比,研究组血清MTL水平较高、BDNF水平较低,且具有较高的内脏敏感度(P<0.05)。患者血清MTL和BDNF水平与疾病严重程度分别呈正相关和负相关(P<0.05)。多因素分析结果显示,内脏敏感指数(visceval sensitivity index,VSI)、MTL是IBS-D患者病情严重程度的独立危险因素,客观内脏敏感度评分、BDNF是IBS-D患者病情严重程度的独立保护因素。结论IBS-D患者血清MTL呈高表达,BDNF呈低表达,与疾病严重程度具有明显相关性,可用于临床判断患者疾病的严重程度。

血清Cys C、β_2-MG联合尿α_1-MG、β_2-MG在亚临床肝肾综合征诊断中的意义

目的探讨肾功能正常肝硬化患者血清Cys C、血清β_2-MG;尿α_1-MG、尿β_2-MG的变化在亚临床肝肾综合征(hepatorenal syndrome,HRS)诊断中的意义。方法选取2011年8月-2013年8月符合标准的秦皇岛市第一医院住院肝硬化患者90例,根据不同表现及病因分组,采用生化仪检测血清β_2-MG、血清Cys C,尿α_1-MG、尿β_2-MG。结果肝硬化腹水组与肝硬化无腹水组、对照组比较,血清Cys C、血清β_2-MG、尿β_2-MG、尿α_1-MG明显升高(P<0.05);肝硬化无腹水组与对照组比较,血清Cys C、尿β_2-MG、尿α_1-MG轻度升高,差异无统计学意义(P>0.05);血清β_2-MG显著升高(P<0.05);不同病因肝硬化腹水患者之间血清Cys C、血清β_2-MG、尿β_2-MG、尿α_1-MG差异均无统计学意义(P>0.05)。结论血清Cys C、β_2-MG联合尿α_1-MG、β_2-MG可及早识别亚临床HRS,为HRS的早期预防和治疗提供依据。

血清25(OH)维生素D与非酒精性脂肪肝肝脏脂肪含量的相关性

目的探讨血清25(OH)维生素D与非酒精性脂肪肝(NAFLD)肝内脂肪含量的关系。方法选取2017年6~8月我院健康体检及住院的NAFLD者120例,将患者分为血清25(OH)维生素D>75nmol/L(n=25,A组),50~75nmol/L(n=35,B组),25~50nmol/L(n=32,C组),<25nmol/L(n=28,D组)。采用ELISA法检测血清25(OH)维生素D浓度,应用T1WI同/反相位测定肝内脂肪含量。全部计量资料用均数±标准差表示,多组间比较采用方差分析及Spearman相关分析,两两比较采用LSD-t检验。P<0.05表示差异有统计学意义。结果B组(28.66±6.45)%及C组(38.74±11.47)%肝脏脂肪含量高于A组(22.79±6.10)%,但差异无统计学意义(P>0.05)。D组(54.79±5.28)%肝脏脂肪含量高于A、B、C三组,差异有统计学意义(P>0.05)。随着血清25(OH)维生素D含量减低,肝脏脂肪含量升高,呈负相关关系(P<0.05,r=-0.125)。结论血清25(OH)维生素D越低,肝脏脂肪含量越高,血清25(OH)维生素D有望成为NAFLD的预测指标。

NAG、α1-MG、β2-MG测定对亚临床肝肾综合征的诊断意义

目的:探讨尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl-β-glucosaminase,NAG)、尿α1-微球蛋白(α1-microglobulin,α1-MG)、尿β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)和血β2-MG对肝硬化患者亚临床肝肾综合征(hepatorenal syndrome,HRS)的诊断意义。方法:将30例代偿期肝硬化患者和30例失代偿期肝硬化患者以及30例体检正常者分3组,检测尿NAG、α1-MG、β2-MG及血β2-MG。结果:与正常对照组比较,肝硬化患者尿NAG、α1-MG、β2-MG和血β2-MG均明显升高,差异有统计学意义(均P<0.01)。肝硬化失代偿组尿NAG、α1-MG、β2-MG明显高于肝硬化代偿组,差异有统计学意义(均P<0.01);肝硬化失代偿组的血β2-MG也明显高于肝硬化代偿组(P<0.05)。结论:尿NAG、α1-MG、β2-MG和血β2-MG有助于发现肝硬化患者早期肾损害,并可反映随肝功能下降而加重的损害程度,对预测HRS的发生具有一定的意义。

结肠镜引导下腹腔镜治疗结肠息肉32例

目的探讨结肠镜引导下腹腔镜下治疗结肠息肉的安全性和可行性。方法 2008年4月~2009年10月32例基底直径〉1.0 cm结肠镜下无法切除的结肠息肉在结肠镜引导下行腹腔镜下切除,其中21例广基息肉在结肠镜指导下腹腔镜切除并缝合修补肠管;11例腹腔镜辅助下小切口切除病变肠段。结果 32例均顺利完成手术,无中转开腹。手术时间平均70 min（40~150 min）,肠功能恢复时间平均28 h（20~30 h）。32例术后随访平均12个月（8~14个月）,未见复发。结论在结肠镜引导下腹腔镜切除结肠镜切除困难的结肠息肉,定位准确,切除彻底,是治疗结肠息肉有效、安全可行的方法。

丙氨酰-谷氨酰胺联合柴芍承气汤治疗重症急性胰腺炎的临床观察

目的探讨丙氨酰-谷氨酰胺联合柴芍承气汤治疗重症急性胰腺炎的临床疗效。方法将72例重症急性胰腺炎患者随机分为对照组和治疗组,各36例。对照组采用常规治疗,治疗组在常规治疗的基础上加用丙氨酰-谷氨酰胺和柴芍承气汤,两组均监测各项生化指标,治疗结束后进行对比并做统计学分析。结果治疗后治疗组患者血清C反应蛋白水平较对照组显著降低,白细胞计数恢复正常时间、血淀粉酶恢复正常时间、腹痛缓解时间、腹腔积液消失时间、住院时间均较对照组显著缩短,差异有统计学意义(P<0.05);但两组患者的并发症发生率及病死率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论对于重症急性胰腺炎患者,在常规治疗的基础上尽早使用丙氨酰-谷氨酰胺与柴芍承气汤,可以降低炎症因子C反应蛋白水平,缩短病程,尽早改善症状。

胃肠道动力障碍的相关因子在家兔重症急性胰腺炎模型的变化

目的:研究重症急性胰腺炎(SAP)家兔引起胃肠道动力障碍的相关因子。方法:选择30只SPF级新西兰白兔随机分为对照组和实验组,每组各15只。实验组白兔通过注射胰管内牛磺胆酸钠,建立重症急性胰腺炎模型,对照组白兔操作同实验组,但注射等容积蒸馏水。术后24h,观察白兔腹腔内大体情况,计算胃肠传递指数(TI),并检测血清胃泌素(GAS)、胃动素(MTL)、P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)、CCK(胆囊收缩素)、肿瘤杀伤因子-α(TNF-α)、白介素-1(IL-1)及白介素-6(IL-6)浓度,取胰腺组织制作病理切片,显微镜下观察,并进行病理学评分(PSP)。结果:实验组白兔腹腔内可见大量浑浊腹水,多处皂化斑,胰腺大范围出血坏死,胃肠道明显充血水肿扩张伴有部分坏死,镜下可见胰腺组织叶间隙增宽,细胞水肿,部分腺泡细胞坏死,并有大量炎性细胞浸润。实验组TI明显低于对照组,PSP明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);实验组白兔GAS、SP和VIP浓度高于对照组,MTL、CCK浓度低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);实验组白兔TNF-α、IL-1及IL-6浓度均高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。结论:SAP白兔存在胃肠动力障碍,与胃肠激素GAS、MTL、SP、VIP、CCK的异常表达影响胃肠道运动功能,以及炎性因子的TNF-α、IL-1及IL-6大量表达加剧胃肠道损伤有关。

生长抑素与前列地尔联合治疗对高脂血性急性胰腺炎患者血脂、炎性因子的影响

目的探讨生长抑素与前列地尔联合治疗对于高脂血性急性胰腺炎患者体内血脂和炎性因子水平的影响。方法回顾性分析2011年6月至2014年6月进行治疗的64例高脂血性急性胰腺炎患者的临床资料。随机将其分为实验组(采用生长抑素与前列地尔联合用药)和对照组(仅采用生长抑素治疗),各32例。观察两组患者的临床疗效和腹痛、腹胀等基本临床症状,以及比较两组患者治疗前后血清中炎性因子[白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和超敏C反应蛋白(hs-CRP)]水平和血脂水平。结果实验组患者的治疗有效率显著高于对照组(P<0.05),且实验组患者的基本症状缓解时间也短于对照组(P<0.05);两组患者治疗前各项生理指标均无显著性差异(P>0.05),但治疗后实验组患者的炎性因子水平较对照组降低的更明显(P<0.05),治疗后实验组患者体内总甘油三酯量较对照组降低更明显,高密度脂蛋白胆固醇水平升高更明显(P<0.05)。结论生长抑素和前列地尔联合治疗可以显著降低高脂血性急性胰腺炎患者体内血脂和炎性因子水平,提高治疗有效率。

血清Cys C在亚临床肝肾综合征中的诊断价值

目的探讨肾功能正常肝硬化患者血清胱抑素C(Cys C)在亚临床肝肾综合征(hepatorenal syndrome,HRS)诊断中的价值。方法选取2011年8月-2013年8月秦皇岛市第一医院住院的肝硬化患者90例,根据病因分组,采用生化仪检测血清Cys C、尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr),彩色多普勒测量肾主动脉内径及肾动脉主干收缩期最大流速(PSV)、舒张末期血流速度(EDV),并计算出肾动脉阻力指数(RI),分析不同组患者血清Cys C与肾动脉RI相关性。结果肝硬化腹水组与肝硬化无腹水组、对照组比较,血清Cys C、肾动脉RI明显升高(P<0.05);肝硬化无腹水组与对照组比较,Cys C、肾动脉RI轻度升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。不同病因肝硬化腹水患者血清Cys C及肾动脉血流动力学指标差异均无统计学意义(P>0.05)。肝硬化腹水患者血清Cys C与肾动脉RI呈正相关(P<0.05)。结论血清Cys C可及早识别亚临床HRS,为HRS的早期预防和治疗提供依据。

国产生长抑素联合前列地尔治疗高脂血症性急性胰腺炎临床观察

目的探讨国产生长抑素联合前列地尔治疗高脂血症性急性胰腺炎的疗效及安全性。方法选取2012年5月至2015年5月于我院消化内科治疗的120例高脂血症性急性胰腺炎患者,按随机数表法分为对照组和观察组各60例。两组患者均给予常规治疗,对照组患者在此基础上给予前列地尔注射液10μg加生理盐水20 m L静脉注射;观察组患者在对照组治疗的基础上给予注射用国产生长抑素0.25 mg加入5%葡萄糖注射液250 m L中静脉滴注,疗程均为两周。比较两组患者治疗后的血清甘油三脂(TG)、C反应蛋白(CRP)、前白蛋白(PA)、血液流变学、血尿淀粉酶(AMS)指标;记录两组患者腹痛持续时间、腹膜炎体征消失时间、胃肠功能恢复时间、血淀粉酶恢复正常时间及住院时间,比较两组患者的临床疗效、并发症和不良反应发生率。结果观察组患者的治疗总有效率为96.7%(58/60),明显高于对照组的81.7%(49/60),差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组患者的血清TG、CRP、PA及各种血液流变学指标均显著优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),而血、尿AMS水平与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05);观察组腹痛持续时间、腹膜炎体征消失时间、胃肠功能恢复时间、血淀粉酶恢复正常时间及住院时间分别为(7.3±4.3)d、(10.3±5.8)d、(4.3±1.1)d、(6.1±5.2)d、(17.4±9.5)d,均明显低于对照组的(9.3±5.3)d、(13.7±6.4)d、(7.1±1.8)d、(7.7±6.0)d、(24.4±10.8)d,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组患者并发症发生率(6.7%)及不良反应发生率(3.3%)均显著低于对照组的30.0%和15.0%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论国产生长抑素联合前列地尔治疗高脂血症性急性胰腺炎疗效显著,其能够显著提高治愈率,缩短病程,且安全性较好。

复方甘草酸苷联合川芎嗪治疗酒精性肝病的疗效观察

目的:观察复方甘草酸苷联合川芎嗪治疗酒精性肝病的疗效。方法:将160例酒精性肝病患者随机分为对照组、复方甘草酸苷组、川芎嗪组及联合治疗组,治疗4周后观察肝功能、肝纤维化指标、转化生长因子β1(TGFβ1)、白细胞介素-6(IL-6)、瘦素(Leptin)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。结果:各组治疗后肝功能较治疗前均显著好转,肝纤维化指标、TGFβ1、IL-6、Leptin及TNF-α较治疗前均显著下降(P<0.05),对照组、复方甘草酸苷组及川芎嗪组之间治疗后肝功能、肝纤维化指标、TGFβ1、IL-6、Leptin及TNF-α无显著性差异(P>0.05),联合治疗组治疗后肝功能较对照组、复方甘草酸苷组及川芎嗪组显著改善(P<0.05),肝纤维化指标、TGFβ1、IL-6、Leptin及TNF-α较对照组、复方甘草酸苷组及川芎嗪组显著下降(P<0.05)。结论:复方甘草酸苷联合川芎嗪治疗酒精性肝病有效。

IL-33/ST2系统在溃疡性结肠炎中的免疫调节

免疫系统防止病原体进入人体及体内传播,免疫系统受损可以引起肠道炎症反应,导致包括炎症性肠病(inflammatory bowel diseases,IBD)在内的慢性疾病.溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种患病率增加且病因不明的炎症性肠病,UC患者肠黏膜中IL-33/ST2轴失衡.本文就IL-33/ST2系统在肠道免疫中的作用及在IBD特别是UC中的重要性进行综述.

原发性病理性十二指肠胃反流病理、胆汁反流及碱反流的相关分析

目的通过胃内胆汁反流和pH值联合动态监测,探讨原发性病理性十二指肠胃反流病理、胆汁反流和碱反流之间的关系。方法应用便携式胆汁监测仪和便携式pH监测仪监测86例原发性病理性十二指肠胃反流患者胃内24小时胆汁反流和pH变化情况,所有病例均行胃镜检查,取胃黏膜组织活检,分别行快速尿素酶试验,以确定有无幽门螺杆菌感染和采用新悉尼系统病理积分,同时采用Dixon积分。结果 Hp阳性组和阴性组胆红素吸收值≥0.25的时间百分比和胃窦、胃角部黏膜新悉尼系统病理积分均呈正相关,和胃体部黏膜新悉尼系统病理积分均无相关性。Hp阳性与阴性组胆红素吸收值≥0.25的时间百分比和胃窦、胃角及胃体部黏膜Dixon积分均无相关性。Hp阳性组pH≥4的时间百分比和Hp阴性组之间差异无显著性,在Hp阳性和阴性组,胆红素吸收值≥0.25的时间百分比与胃内pH≥4的时间百分比之间均无相关性,在Hp阳性与阴性组,pH≥4的时间百分比与胃窦、胃角及胃体部黏膜新悉尼系统病理积分均无相关性。结论原发性病理性十二指肠胃反流导致胃窦黏膜损伤的主要因素可能为胆汁反流,以胰液和十二指肠液为主的碱反流不是损伤胃黏膜的重要因素。Dixon积分不能反映原发性病理性DGR胃黏膜病变程度。

基于血清Betatrophin水平的非酒精性脂肪肝列线图预测模型的建立与分析

目的通过分析非酒精性脂肪肝(NAFLD)发生的相关危险因素,建立基于血清Betatrophin水平的列线图评价模型,并评价其预测的准确性。方法选取2017年1月～2018年4月秦皇岛市第一医院收治的NAFLD患者180例作为NAFLD组,另选取同期门诊体检肝脏脂肪含量(LF)正常(LF<9.15%)的体检者72例,作为对照组。单因素分析NAFLD发生的相关因素,并将有统计学意义的指标纳入多因素Logistic回归模型,分析NAFLD发生的危险因素。根据回归分析结果建立列线图预测模型。利用受试者工作特征曲线(ROC)及Hosmer-Lemeshow检验评价模型预测效能。结果多因素分析显示,Betatrophin、三酰甘油(TG)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)是NAFLD发生的危险因素,高密度脂蛋白(HDL)是NAFLD发生的保护因素(P <0.05)。利用R软件成功建立了预测NAFLD发生的列线图预测模型。Hosmer-Lemeshow检验结果显示,该模型预测效能为85.71%,模型拟合良好(P <0.05)。预测NAFLD发生的曲线下面积(AUC)为0.877,特异性为88.68%,敏感性为82.98%。结论基于血清Betatrophin水平的NAFLD发生风险的列线图预测模型具有良好的特异性和敏感性,模型拟合良好,临床价值较高。

原发性病理性十二指肠胃反流患者胃黏膜细胞增殖与凋亡的研究

目的:研究原发性病理性十二指肠胃反流患者胃黏膜组织中的凋亡细胞、增殖细胞,探讨原发性病理性十二指肠胃反流的发病机制。方法:应用脱氧核糖核酸转移酶介导的缺口末端标记技术和免疫组化方法分析86例原发性病理性十二指肠胃反流和42例正常对照胃黏膜细胞凋亡及增殖细胞核抗原的表达。结果:原发性病理性十二指肠胃反流组凋亡指数和增殖指数均显著高于正常对照组(P<0.05),Hp阳性和Hp阴性亚组之间凋亡指数和增殖指数无显著性差异(P>0.05)。结论:胃黏膜细胞增殖与凋亡增强可能是原发性病理性十二指肠胃反流的发病机制之一,Hp感染未加重原发性病理性十二指肠胃反流所致胃黏膜细胞凋亡和增殖反应。

肝癌血清肿瘤标志物适配体的筛选及其亲和力和特异性的鉴定

目的:采用指数富集的配基系统进化技术(SELEX)筛选获得一组已知和未知肝癌血清肿瘤标志物的适配体,为肝癌的早期诊断提供新的便捷方法。方法:收集50例首次经诊断证实为原发性肝癌的患者血清,以及50例体检无异常的正常人血清,并分别等比例混合制备成肝癌混合血清和正常人混合血清,作为筛选的靶标分子,磁珠作为分离载体。先将磁珠-正常人血清复合物与ssDNA文库结合,取上清再与磁珠-肝癌血清结合,经过洗脱、分离与肝癌血清结合的特异性ssDNA,并进行扩增,链霉亲和素磁珠法制备次级ssDNA,进行9轮筛选,将9轮筛选获得的饱和文库与PMD18-T载体连接进行转化、挑选单克隆送上海生工进行测序,同时利用流式细胞术测定肝癌血清肿瘤标志物适配体的亲和力(Kd值)。结果:经9轮筛选,成功分离出200个核酸序列,其中序列不同的有10个。特异性检测表明,筛选得到的肝癌血清肿瘤标志物适配体与肝癌血清的结合解离常数均在纳摩尔级水平,其中Seq-1、Seq-16、Seq-17、Seq-56、Seq-72号适配体能高特异性结合肝癌血清,与正常人血清不结合,再通过200例肝癌血清和200例正常人血清进一步鉴定5条肝癌血清肿瘤标志物适配体检出肝癌的阳性率,阳性检出率达91%以上。结论:利用随机单链寡核苷酸文库成功获得与肝癌患者血清特异性结合的适配体,所获得的适配体具有拮抗肝癌血清的能力,有可能为肝癌的早期诊断提供新的便捷方法。