NOS及NO在介导Aβ神经毒性和阿尔茨海默病发病机制中的作用(英文)

目的观察诱导型一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂胍氨酸(AG)及神经元型一氧化氮合酶(nNOS)抑制剂7-硝基吲哚(7-NI)对β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)在体神经毒性的干预,进一步探讨一氧化氮合酶(NOS)及一氧化氮(NO)在Aβ神经毒性和Alzheimer病(AD)发病机制中的介导作用。方法雄性SD大鼠35只,随机分为正常对照,生理盐水注射,Aβ1-40注射,AG+Aβ1-40,7-NI+Aβ1-40,花生油(Peanutoil,PO)+Aβ1-40、生理盐水+Aβ1-40共7组,每组5只。观察各组大鼠的Y迷宫学习记忆作业及局部神经元损伤情况。结果Aβ1-40海马组大鼠Y迷宫作业的获得和再现尝试次数均显著增加,分别是(27.8±2.3)和(19.7±4.7)次,与前两组比较有显著性意义(F获得=146.438,P获得=0.000;F再现=113.654,P再现=0.000)。海马齿状回颗粒细胞背侧带受损长度为(1.93±0.26)mm,局部胶质细胞反应明显。AG可逆转Aβ1-40导致的学习记忆和神经元损伤,其获得和再现尝试次数分别为(14.6±4.9)次和(8.5±2.1)次,与Aβ1-40注射组比较明显减少(F获得=146.438,P获得=0.000;F再现=113.654,P再现=0.000)。细胞带受损长度为(0.41±0.21)mm,胶质细胞反应减轻。7-NI则无干预作用。结论iNOS/NO参与了在体条件下对Aβ神经毒性的介导,在AD发病机制中具有重要作用。

β淀粉样蛋白诱导脑内神经元凋亡的研究

目的 探讨凋亡机制在β-淀粉样蛋白 (β- amyloid protein,Aβ)脑内致病作用中的意义。方法 用微量注射器将 Aβ1 - 4 0 注射到大鼠右侧海马 CA1 区诱发 Aβ在脑内该区域的沉积。7d后 ,用 HE染色、TUNEL法及透射电镜检测该区细胞凋亡 ;用免疫组化 SABC法检测 Bax/ Bcl- 2的表达。结果 在 Aβ组右侧海马 CA1 区 HE、TUNEL染色及电镜均发现大量凋亡细胞 ,而假手术对照组和生理盐水对照组未发现细胞凋亡 ;Aβ组 Bax表达增强 ,而Bcl- 2表达在 3组间无明显差异。结论 本研究结果表明 Aβ能诱导脑内神经元的凋亡 ,Bax高表达可能在上述凋亡机制中起一定作用 ,支持细胞参与 Alzheimer病 (Alzheimer,s Disease,AD)发病的观点。

促红细胞生成素对大鼠脑缺血海马CA_1区神经元凋亡和细胞色素C释放的影响

目的 探讨促红细胞生成素 (Erythropoietin ,EPO)的神经保护机制。方法 采用 4 VO法制作大鼠全脑缺血模型。将SD大鼠随机分为假手术组、生理盐水组、EPO组。全脑缺血前 3h ,EPO组大鼠脑室立体定向注射重组人促红细胞生成素 (recombinantHumanErythropoietin ,rHuEPO) ,生理盐水组则给予生理盐水 ,假手术组只进行假手术处理。观察缺血后 2 4h海马CA1区细胞色素C(CytochromeC ,CytC)的变化 ,及缺血后 72h海马CA1区细胞凋亡情况。结果 EPO组海马CA1区呈现点状分布的CytC表达较生理盐水组增强 (P <0 .0 1) ,并且较生理盐水组呈现较少的凋亡细胞 (P <0 .0 1)。结论 EPO预处理可以抑制海马CA1区CytC从线粒体向胞浆释放及减少神经元凋亡。

碱性成纤维细胞生长因子影响痴呆大鼠海马神经发生

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对海马伞切断造成的阿尔茨海默氏病 (AD)模型大鼠海马齿状回神经发生的影响。方法 AD处理组及AD对照组大鼠左侧海马伞切断制造阿尔茨海默病模型 ;正常对照组注射生理盐水。AD处理组造模后每天侧脑室注射bFGF共 7d ;AD对照组及正常对照组同时间注射生理盐水。BrdU标记增殖细胞。TUNEL方法标记DNA片段 ,原位检测凋亡细胞。计数海马齿状回BrdU阳性细胞与凋亡细胞数。结果 AD处理组大鼠与AD对照组大鼠相比 ,海马齿状回BrdU阳性细胞增加非常显著 (P <0 .0 1) ,而凋亡细胞差异不显著 (P >0 .0 5 ) ,AD对照组大鼠与正常对照组大鼠相比 ,海马齿状回BrdU阳性细胞数及凋亡细胞差异均不显著 (P >0 .0 5 )。结论 bFGF可刺激AD模型大鼠海马神经发生。

大鼠脑缺血时脑组织中NOS1阳性神经元变化的连续观察

目的探讨脑缺血时含神经型一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）神经元变化及一氧化氮（ＮＯ）的相关作用。方法采用大脑中动脉梗塞模型，对３４只雄性ＳＤ大鼠脑缺血后不同时点ＮＯＳ１免疫组化、ＮＡＤＰＨ－ｄ染色及其病理学进行了对照研究。结果缺血后２～４８小时，梗塞侧的ＮＯＳ１神经元数量明显高于对侧，４小时达高峰。梗塞后２４～４８小时，神经元出现边界不清、膨胀，而含ＮＯＳ１神经元则保持形态学的完整性。１周时，大部分神经元死亡，但仍有完整的ＮＯＳ１阳性细胞散在。结论含ＮＯＳ１神经元对脑缺血有一定的抵抗能力。

神经元型一氧化氮合酶在学习记忆过程中的变化和作用

目的 探讨神经元型一氧化氮合酶 (neuronalnitricoxidesynthase,nNOS)及一氧化氮 (nitricoxide ,NO)在学习记忆机制中的相关作用。方法 采用免疫组化方法观察Y迷宫空间辨别学习训练后大鼠不同脑区nNOS表达变化 ,并探讨特异性nNOS抑制剂 7 nitroindozal(7 NI)、钙拮抗剂尼莫通 (nimotop)腹腔注射对大鼠学习获得和记忆再现能力的影响。结果 学习训练后海马各亚区nNOS样神经元数量及染色强度明显增加 ,而皮层和纹状体区则无显著变化 ;7 NI以剂量依赖方式损伤大鼠的学习获得能力 ,但不影响记忆再现 ,尼莫通则对这两种能力均有破坏。结论 提示学习记忆过程可能伴有nNOS合成及活性增加 ,nNOS/NO在学习获得阶段具有重要作用。

成年大鼠纹状体神经干细胞的体外培养及分化

目的探讨成年大鼠纹状体神经干细胞多向分化的可能性。方法分离成年大鼠纹状体神经干细胞,单克隆连续传代培养并诱导分化,将分化产物进行免疫细胞化学染色及RT-PCR检测分析。结果无血清单克隆培养时期可见大量的细胞团出现,以血清诱导分化后出现多种细胞类型,免疫细胞染色发现分化细胞中有Nestin阳性、NSE阳性、GFAP阳性细胞,RT-PCR法分析mRNA水平有脑因子-1、γ-氨基丁酸α-受体γ-亚单位、酪氨酸羟化酶及色氨酸羟化酶等基因的表达。结论成年大鼠纹状体内分离出的干细胞样细胞具有自我增殖和多向分化潜能。

蛛网膜下腔出血大鼠模型脑组织中神经肽YmRNA表达的变化

目的检测蛛网膜下腔出血大鼠模型脑组织中神经肽YmRNA表达的变化,为进一步研究防治蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛提供线索。方法建立大鼠蛛网膜下腔出血模型,并设生理盐水模型和假手术模型对照,用RT-PCR方法半定量检测各模型分别存活15、30min和1、4、8、12、24、48h时纹状体、大脑皮层、下丘脑中神经肽YmRNA的含量。结果蛛网膜下腔出血后脑组织中神经肽YmRNA的含量显著升高;随时间的推移,含量逐渐下降,但仍显著高于同一时点的生理盐水组和假手术组。结论蛛网膜下腔出血后脑组织中神经肽YmRNA的含量显著升高,这可能在诱发脑血管痉挛中起重要作用。

脑反射治疗仪治疗神经系统疾病的临床观察

脑反射治疗仪治疗神经系统疾病的临床观察朱利元郑文权田时雨（第一军医大学珠江医院神经内科，广州５１０２８２）脑反射治疗仪是目前一种新的治疗方法，最先在我科使用。因在治疗神经系统疾病中取得较好疗效，而引起医学界的重视。现将我科应用脑反射治疗仪治疗神经系统...

碱性成纤维细胞生长因子对海马伞切断大鼠海马神经的影响(英文)

目的了解碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对海马伞切断造成的阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马齿状回神经发生的影响,探讨bFGF治疗AD的前景。方法36只SD大鼠随机分成正常对照组(n=12)、AD对照组(n=12)和AD处理组(n=12)。AD处理组及AD对照组大鼠左侧海马伞切断制造AD模型;正常对照组注射生理盐水。AD处理组造模后每天侧脑室注射bFGF共7d;AD对照组及正常对照组同时间注射生理盐水。BrdU标记增殖细胞。TUNEL方法标记DNA片段,原位检测凋亡细胞。计数海马齿状回BrdU阳性细胞与凋亡细胞数。结果AD处理组大鼠与AD对照组大鼠相比,海马齿状回BrdU阳性细胞增加犤两组在颗粒细胞层阳性细胞分别为(163±37),(53±5)个/切片平面;海马门(28.5±5.5),(12.3±2.8)个/切片平面;分子层(10.7±2.2),(6.0±1.4)个/切片平面犦,差异有非常显著性意义(F=103.4,83.4,33.4,P<0.01),而凋亡细胞差异无显著性意义(P>0.05)。AD对照组大鼠与正常对照组大鼠相比,海马齿状回BrdU阳性细胞数及凋亡细胞差异均无显著性意义(P>0.05)。结论bFGF可刺激AD模型大鼠海马神经发生。

去卵巢、去松果体对大鼠学习记忆及海马胆碱能神经的影响

目的 探讨雌激素 (E)、褪黑素 (MT)缺乏对大鼠学习记忆及海马胆碱能纤维密度的影响。方法 用Y型迷宫测试淘汰学习记忆障碍大鼠 ,将学习正常大鼠分为正常、假去卵巢 (假OVX)、OVX、假去松果体 (假PX)、PX、假OVX +假PX、OVX +PX 7组。 90d后再行Y型迷宫测试 ,乙酰胆碱酯酶 (AChE)组织化学检测海马CA1 4区AChE。结果 大鼠学习记忆能力及AchE阳性纤维密度在正常、假手术各组间无显著差别 ,在OVX、PX、OVX +PX组间依次显著降低 ,三组均比正常及假手术各组显著降低。结论 OVX、PX可使大鼠学习记忆及海马胆碱能纤维密度降低。PX作用大于OVX ,联合作用大于单独作用。

碱性成纤维细胞生长因子对海马伞切断大鼠海马神经细胞增殖的影响

目的 探讨碱性成纤维细胞生成因子 (bFGF)对海马伞切断造成的阿尔茨海默氏病 (AD)模型大鼠海马齿状回神经细胞增殖的影响。方法 AD处理组及AD对照组大鼠单侧海马伞切断制造阿尔茨海默病模型 ;正常对照组注射生理盐水。AD处理组造模后每天侧脑室注射bFGF共 7天 ;AD对照组及正常对照组同时间注射生理盐水。BrdU标记增殖细胞。TUNEL方法标记DNA片段 ,原位检测凋亡细胞。计数海马齿状回各区域BrdU阳性细胞与凋亡细胞数。结果 AD处理组大鼠与AD对照组大鼠相比 ,海马齿状回BrdU阳性细胞增加明显 (P <0 .0 1 ) ,而凋亡细胞差异不显著 (P >0 .0 5)。AD对照组大鼠与正常对照组大鼠相比 ,海马齿状回BrdU阳性细胞数及凋亡细胞数差异均不显著 (P >0 .0 5)。结论 bFGF可促进AD模型大鼠海马神经细胞的增殖。

促红细胞生成素对海马CA1区缺血神经元凋亡和bcl-xl表达的影响

目的 :探讨促红细胞生成素 (Erythropoietin ,EPO)预处理的神经保护机制。方法 :采用 4-VO法制作大鼠全脑缺血模型。将SD大鼠随机分为假手术组、生理盐水组、EPO组。全脑缺血前 3h ,EPO组大鼠脑室立体定向注射重组人促红细胞生成素(rHu -EPO) 5μl,生理盐水组则给予等体积生理盐水 ,假手术组只进行假手术处理。观察缺血后 2 4h海马CA1区bcl -xl蛋白表达和缺血后 72h细胞凋亡。结果 :缺血后 2 4h ,EPO组海马CA1区bcl -xl蛋白表达与假手术组比较有显著差异 (P <0 .0 1) ,较生理盐水组表达增强 (P <0 .0 1)。缺血后 72h ,EPO组海马CA1区较生理盐水组有较少的凋亡细胞 (P <0 .0 1)。结论 :EPO预处理减少缺血海马细胞凋亡 ,促进bcl

误诊为运动神经元疾病5例分析

运动神经元疾病是一组病因未明的缓慢进行性的运动系统变性疾病，主要影响脊髓前角细胞，脑干动神经元和（或）锥体束。目前，随着临床诊断技术手段不断提高，尤其是ＣＴ和ＭＲＩ等先进技术的应用，对运动神经元疾病的诊断水平有了进一步提高，本文就我科近年来临床初诊为...

老年性痴呆模型大鼠海马结构nNOS神经元的变化

目的 研究老年性痴呆模型大鼠海马结构nNOS神经元的变化情况。方法 用 15月龄老年Wistar大鼠以D 半乳糖腹腔注射 4周加上鹅膏蕈氨酸 (ibotenicacid ,IBO)脑内Meynert核注射造模 ,然后运用免疫组织化学方法检测大鼠海马CA1、CA3和齿状回nNOS神经元数目。结果 老年性痴呆模型大鼠海马CA1、CA3和齿状回nNOS阳性神经元数目及其积分光密度较正常老年组和正常青年组有明显减少的趋势 ,组间比较有差异显著性。

促红细胞生成素在中枢神经系统缺氧 缺血时的保护作用

促红细胞生成素 (Erythropoietin ,Epo)因在红细胞生成时发挥重要作用而被认识 ,但是Epo也产生和分布于中枢神经系统 (centralnervoussystem ,CNS)。缺氧时 ,Epo通过对神经干细胞的调节 ,对抗细胞凋亡 ,发挥神经营养作用 ,因而对CNS具有保护功能。目前 ,对Epo所介导的细胞内信息传递已有所认识 ,很可能为CNS缺氧 缺血性疾病的治疗开辟新途径。

Aβ_(1-40)海马注射对大鼠神经胶质细胞S100β和iNOS表达的影响

目的 在体条件下观察 β-淀粉样蛋白 (Aβ)对 S10 0 β和诱导型一氧化氮合酶 (i NOS)表达的影响 ,探讨三者之间的相互关系。方法 以不同浓度 Aβ1 - 4 0 溶液及生理盐水做海马立体定向注射后 ,采用刚果红染色、尼氏染色及免疫组织化学方法 ,显示胶质细胞反应、神经元损伤情况及 S10 0 β、i NOS表达变化。结果 胶质细胞增生与神经元缺失程度以及 S10 0 β与 i NOS的表达水平均随 Aβ1 - 4 0 浓度增大而增加 ,4μg/ μl Aβ溶液注射组 S10 0 β阳性细胞数 (个 /视野 )为 42 .39± 3.46 ,显著多于盐水对照组 (34.5 0± 3.5 7) ,P<0 .0 1;i NOS阳性染色面积与 S10 0 β阳性细胞数存在较强的相关性 (r=0 .873)。结论 在体条件下高含量 Aβ强烈诱导胶质细胞 S10 0 β和 i NOS的表达 ,结果提示三者之间的相互作用在 Alzheimer病发病机制中有重要作用。

碱性成纤维细胞生长因子对阿尔茨海默病模型大鼠脑内神经细胞增殖的影响

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对红藻氨酸损毁Meynert基底核造成的阿尔茨海默病 (AD)模型大鼠室管膜下层及海马齿状回神经细胞增殖的影响。方法 AD处理组及AD对照组大鼠前脑Meynert基底核注射红藻氨酸制造阿尔茨海默病模型 ;正常对照组注射生理盐水。AD处理组造模后每天侧脑室注射bFGF共 7d ;AD对照组及正常对照组同时间注射生理盐水。BrdU标记增殖细胞。TUNEL方法标记DNA片段 ,原位检测凋亡细胞。计数室管膜下层和海马齿状回BrdU阳性细胞与凋亡细胞数。结果 AD处理组大鼠与AD对照组大鼠相比 ,室管膜下区及海马齿状回BrdU阳性细胞明显增加 (P <0 0 1) ,而凋亡细胞无明显差异 (P >0 0 5 )。AD对照组大鼠与正常对照组大鼠相比 ,室管膜下区与海马齿状回BrdU阳性细胞数及凋亡细胞均没明显差别 (P >0 0 5 )。结论 bFGF可促进AD模型大鼠脑内神经细胞的增殖 。

诱导型一氧化氮合酶介导β淀粉样蛋白在体神经毒性

目的 :探讨一氧化氮合酶 (NOS)及一氧化氮 (NO)在 β淀粉样蛋白 (Aβ)神经毒性和Alzheimer病 (AD)发病机制中的介导作用。方法 :应用行为学及病理学方法 ,观察海马内注射Aβ1-40 对大鼠Y迷宫学习记忆的影响及对局部神经元的损伤作用 ;观察特异性诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)抑制剂胍氨酸 (AG)及特异性神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)抑制剂 7 硝基吲哚 (7 NI)腹腔注射对海马内注射Aβ1-40 神经毒性的干预。结果 :海马注射Aβ1-40 后 ,大鼠Y迷宫学习记忆能力及海马局部神经元明显受损 ,特异性iNOS抑制剂AG能够阻止Aβ1-40 海马注射对大鼠学习记忆和局部神经元的损伤作用 ,而特异性nNOS抑制剂 7 NI无此干预效应。结论 :iNOS/NO参与了在体条件下对Aβ神经毒性的介导 。