乙型肝炎病毒HBcAg免疫优势CTL表位多肽在HBV转基因小鼠体内的免疫学功能研究

目的 探讨基于乙型肝炎 (Hepatitisbvirus,HBV)核心抗原免疫优势细胞毒性T淋巴细胞 (CytotoxicTlympho cyte,CTL)表位的治疗性多肽抗原组分、结构以及在HBV转基因小鼠体内的免疫学功能。方法 用分子设计的理论和方法 ,设计基于HBV核心抗原免疫优势性CTL表位、Pre S2B细胞表位及破伤风类毒素通用TH 表位的治疗性多肽疫苗候选分子 ,经Merrifield固相多肽合成技术合成 ,经高效液相色谱 (HPLC)纯化、鉴定。以HBV转基因小鼠为试验对象 ,进行体内免疫学功能研究。结果 所设计治疗性多肽分子可在体诱导较强的抗原特异性CD8+ T细胞应答和适度的抗体反应 ,并抑制HBV特异性抗原的分泌和乙型肝炎病毒复制。结论 提示所设计基于HBV核心抗原免疫优势性CTL表位、Pre S2B细胞表位及破伤风类毒素通用TH 表位的多肽分子可作为乙型肝炎治疗性多肽疫苗候选分子。

宫颈癌治疗性多肽疫苗的分子设计及免疫学功能研究

目的:探讨基于人乳头瘤病毒抗原优势表位的治疗性多肽抗原组分、结构与诱导免疫应答之间的关系。方法:以芴甲氧羰基固相法合成多肽,用高效液相色谱分析多肽的纯度,对所合成的多肽采用质谱进行定性鉴定,用标准51Cr释放试验检测特异性细胞毒性T淋巴细胞活性。结果:合成的多肽经纯化后纯度都达到80%以上,经质谱分析,各肽的分子量测定值与理论值相符,所设计的治疗性多肽在体内外均诱导出较强的表位特异性细胞毒性T淋巴细胞活性。结论:在治疗性表位多肽设计中,将辅助性T细胞表位及脂类分子构建于分子内部可提高细胞毒性T淋巴细胞表位肽的免疫原性。

可食性转基因植物疫苗的免疫学特性研究

转基因植物疫苗是疫苗研究的一个新热点 ,本文综述了转基因植物疫苗在体诱导的免疫学特点 ,包括实验动物和人免疫应答情况 ,讨论了未来转基因植物疫苗研究重点及将面临的问题和解决对策 。

流感病毒感染人扁桃体类器官的免疫效应

目的 建立人扁桃体免疫类器官模型并探讨流感病毒感染后产生的免疫学效应。方法 经扁桃体腺样体肥大手术摘除后的人扁桃体组织在经过单个核细胞梯度离心后,利用2.5D-Transwell进行体外培养并添加IL-2及Baff等成细胞因子促扁桃体类器官(tonsil organoids, TO)的形成。通过单细胞转录组测序(single cell RNA sequencing, scRNA-seq)技术,分析流感病毒细胞受体在类器官各细胞亚群的分布;体外感染流感病毒,使用免疫荧光法(IF)和流式细胞术(FCM)检测扁桃体类器官感染病毒后的免疫学效应。结果 于体外成功诱导扁桃体类器官;scRNA-seq分析结果显示流感病毒细胞受体广泛表达于所有的细胞类型中。流感病毒感染48 h后,刺激扁桃体类器官产生大量可分泌特异性IgG抗体的浆细胞和记忆性B细胞。病毒直接感染还促进CD8^(+)T细胞分泌细胞因子TNF-α与IL-2及CD4^(+)T细胞分泌细胞因子TNF-α、IFN-γ和IL-2。结论 人扁桃体类器官在体外可以被成功诱导且在培养第6天左右达到成熟;流感病毒受体广泛分布于人扁桃体类器官的各细胞亚型;流感病毒可通过受体直接感染T细胞,刺激T细胞活化并分泌细胞因子;同时流感病毒直接感染也可促B细胞分化为浆细胞分泌IgG抗体,并在后期诱导记忆性B细胞的形成。

深化医学免疫学实验教学改革的探讨

医学免疫学是一门重要的基础医学课程，作为生命科学的前沿学科，与基础医学以及临床医学的各个学科相互交叉和渗透，是沟通基础医学和临床医学的重要桥梁。同时，免疫学作为一门实验学科，其知识更新迅速，且理论知识密切联系实际应用。因此，医学免疫学教学不仅要培养学生对免疫学理论的认知能力，更重要的是培养学生严谨的逻辑思维能力及独立的实践操作能力。这就要求我们教学过程中不仅要重视理论教学，同时要加强实践教学［1］，即免疫学实验教学。医学免疫学实验通过实验教学环节，巩固学生对免疫学知识的理解和掌握程度，同时培养学生严谨的科学态度以及分析问题和解决问题的能力。实验教学的质量直接影响学生对免疫学基本理论的认知能力和实践应用能力。

人源轮状病毒转基因马铃薯口服免疫小鼠的免疫应答研究

目的分析人源轮状病毒转基因植物抗原的口服免疫应答反应。方法在根癌脓杆菌介导获得系列转基因马铃薯植株的基础上,用ELISA分析转基因马铃薯中目的蛋白表达水平。马铃薯块茎直接口服免疫Balb/c小鼠,ELISA分析免疫小鼠血清、唾液、粪便提取物特异抗体水平。结果获得一株最高表达量的转化株;口服免疫可诱导较强的血清IgG反应和强烈的黏膜sIgA反应,粪便的sIgA最高,唾液次之,尿液中无sIgA;加霍乱毒素B亚单位(CTB)佐剂免疫组小鼠和霍乱毒素(CT)佐剂免疫组小鼠抗体水平无显著差异,无佐剂免疫组小鼠抗体水平略低。结论人源轮状病毒转基因植物疫苗联合黏膜佐剂免疫动物可诱导特异的系统与黏膜免疫应答,且黏膜免疫强度略高于系统免疫。

颗粒性肽-DNA复合疫苗抗肿瘤免疫的研究

诱导有效的抗肿瘤免疫应答是肿瘤免疫治疗的主要目标 ,由于肽疫苗和DNA疫苗具备较高的安全性和实用性 ,因而成为肿瘤疫苗学领域中发展最为迅速的肿瘤免疫治疗方案之一。但是这两种疫苗形式仍然具有各自的缺点 ,其抗原呈递动力学存在显著差异 ,提示这两种疫苗可能存在互补性。本研究对多肽疫苗和DNA疫苗进行综合 ,设计出新型肽 DNA复合疫苗 ,并以P815A为模式抗原 。

骨髓来源的原代树突状细胞对细菌颗粒抗原交叉呈递的动力学研究

目的研究小鼠骨髓细胞来源的树突状细胞对细菌颗粒抗原交叉递呈的动力学特点。方法取小鼠骨髓细胞,采用GM-CSF诱导培养。用倒置显微镜观察培养过程中细胞形态,用流式细胞仪进行细胞纯度和表型测定。采用第7天未成熟的DC细胞进行细菌抗原的交叉递呈能力检测和动力学分析。结果小鼠骨髓细胞经GM-CSF诱导培养,第7天获得大量具有典型形态和免疫表型的树突状细胞,并且在细菌脂多糖刺激后,其表型也发生特征性变化表现在共刺激分子CD80由刺激前的27.7%上调到71.6%,CD86从刺激前的36.0%上调到80.3%,DEC205从刺激前的6.5%上调到26.2%。同时该细胞吞噬低剂量的细菌抗原即可有效活化T细胞,其动力学曲线为:1～3h,该细胞抗原递呈能力呈对数增加,3～8hDC抗原递呈能力进入一个平台期,10～12h,抗原递呈能力又迅速增强。结论采用GM-CSF可以从小鼠骨髓中获得大量纯度高并且具有典型免疫表型的DC,该DC细胞能有效的递呈外源性细菌抗原,并具有特殊的抗原递呈动力学曲线。

MAGE-12 B细胞表位联合应用的免疫原性研究

目的设计合成肿瘤抗原MAGE-12的B细胞表位并研究其表位联合应用的免疫原性。方法在MAGE-12的B细胞表位序列MAGE-123-14(LEQRSQHCKPEE)、MAGE-1282-93(QSDEGSSNEEQE)的基础上,采用4分枝多重抗原肽结构设计合成抗原肽后分MAGE-123-14组、MAGE-1282-93组、MAGE-123-14联合MAGE-1282-93组,分别以MAGE-123-14、MAGE-1282-93、MAGE-123-14联合MAGE-1282-93抗原肽免疫C-57BL/6小鼠,产生多克隆抗体,应用ELISA和免疫组化实验检测多克隆抗体是否为抗原肽的特异性抗体。结果免疫C-57BL/6小鼠后可产生MAGE-12的抗原特异性的多克隆抗体,且多表位抗原肽联合使用组抗体效价高于单表位抗原肽组产生的抗体效价。结论证明MAGE-12的B细胞多表位抗原肽联合使用的免疫原性强于单个B细胞表位抗原肽的免疫原性。

猪圆环病毒2型CAP蛋白新型表位抗原肽的设计、合成及免疫原性研究

目的设计合成PCV2 CAP的B细胞表位抗原肽并对其进行鉴定。方法采用DNAStar和BcePred分析软件并结合吴玉章氨基酸抗原指数计算方法预测PCV2 CAP的B细胞表位．以此合成4分支多重抗原肽结构．同时串联一个通用型n表位；采用Fmoc法合成4分支PCV2CAP多重抗原肽（MAP），通过高效反相液相色谱（RP-HPLC）、质谱（MS）分析对其进行初步鉴定。以合成的抗原肽免疫昆明系小鼠及兔，观察体液免疫反应。结果初步筛选出3种抗原指数较高的表位，即98～103aa（命名为B98），156～162aa（命名为B156），228～233aa（命名为B228）；合成的多重抗原肽经RP-HPLC层析后，纯度达到92.49％，MS鉴定其相对分子质量一致，误差小于0．1％。以合成的MAP疫苗免疫小鼠及兔后，可产生高滴度的特异性抗PCV2CAP抗体。结论PCV2CAP的B细胞新表位多重抗原肽有免疫原作用，将为PCV2CAP表位肽疫苗的研究奠定基础。

MAGE-12的新B细胞表位抗原肽的设计、合成及免疫原性研究

【目的】设计合成肿瘤抗原MAGE-12的B细胞表位并研究其免疫原性。【方法】在预测MAGE-12的B细胞表位序列为LEQRSQHCKPEE（3～14）、MAGE-1282-93（QSDEGSSNEEQE）的基础上，采用4分枝多重抗原肽结构设计合成抗原肽，免疫C-57BL／6小鼠，产生多克隆抗体，应用ELISA实验检测多克隆抗体是否为抗原肽的特异性抗体。【结果】免疫C-57BL／6小鼠后可产生MAGE-12的抗原特异性的多克隆抗体。【结论】证明所预测的表位LEQRSQHCKPEE（3—14）为MAGE-12的新B细胞表位。

基于人/鼠嵌合模型的人黑色素瘤mage-3基因疫苗的免疫学作用

目的:利用人/鼠嵌合模型评价人黑色素瘤基因mage-3基因疫苗的免疫效果。方法:建立并鉴定Trimera动物模型,并用重组质粒mage-3/pCI-neo作为基因疫苗对其进行免疫。检测免疫动物脾细胞CTL的杀伤活性和血清中mage-3特异性抗体。结果:构建的Trimera模型脾脏和腹腔中出现了大量的人淋巴细胞。接种后,Trimera模型体内出现了效价为1:256的mage-3特异抗体。免疫动物CTL体外杀伤实验显示,注射基因疫苗的Trimera小鼠脾脏淋巴细胞对靶细胞LB373的最大杀伤率为50%左右,而对照小鼠只有10%以下的杀伤水平。结论:mage-3是一种理想的肿瘤疫苗,在人源化动物模型中能激发出特异的细胞和体液免疫,对共享mage-3抗原的各种肿瘤细胞的临床治疗提供了实验依据。

肿瘤内三级淋巴组织免疫治疗研究进展

三级淋巴组织常见于慢性炎症、自身免疫性疾病和肿瘤的病变组织局部。对疾病状态下机体的免疫调节发挥着重要作用。最近发现,肿瘤组织中成熟的三级淋巴结构能够募集T细胞并激活其抗肿瘤效应,但在三级淋巴组织形成的不同阶段,其对肿瘤的免疫抑制或耐受作用并不一致。因此,对肿瘤浸润的三级淋巴组织的发展阶段及其内部的免疫细胞群的动态变化进行分析、评估,可为免疫治疗策略提供一种有益借鉴。本文综述三级淋巴组织的免疫学特征、形成过程及临床相关性。

“网络互动”教学模式在医学免疫学教学中的应用

医学免疫学是医学生必修的一门重要的基础课程,如何积极推进新的医学免疫学教学模式,使教学形式多样化,激发学生的学习兴趣,对医学免疫学教学来说是一个重要的课题.就如何将"网络互动"的新型教学模式应用于医学免疫学教学中谈几点体会.

肿瘤抗原MAGE-12的B细胞新表位多重抗原肽的免疫原作用研究

目的 在已设计合成肿瘤抗原MAGE-12的B细胞新表位多重抗原肽基础上对其进行免疫原作用研究.方法 在预测MAGE-12的B细胞表位序列为LEQRSQHCKPEE（3～14）的基础上,采用4分支多重抗原肽（MAP）结构设计合成抗原肽,免疫C-57BL/6小鼠,产生多克隆抗体,应用ELISA实验及免疫组化实验检测多克隆抗体是否为人的抗原肽的特异性抗体.结果 免疫C-57BL/6小鼠后可产生MAGE-12的抗原特异性的多克隆抗体,抗体效价最高达1：256,免疫组化实验阳性证明为人MAGE-12抗原肽的特异性抗体.结论 MAGE-12的B细胞新表位多重抗原肽有免疫原作用.

重组cDNA表达文库血清学分析技术筛选肿瘤抗原的研究进展

1995年Sahin等首先建立了重组cDNA表达文库血清学分析法 (SEREX)以来 ,大量的人类肿瘤抗原被发现和鉴定 ,并建立了SEREX技术合作组及相应的数据库。

医学本科《医学免疫学》双语教学的探讨

免疫学专业知识抽象，未知领域很多，发展迅速。本文结合双语教学实践探讨了对医学本科生用中文和英文两种语言(即双语教学)讲授医学免疫学课程的优势，以及一些有待进一步完善的事项(英文免疫学教材的选择，授课过程中中、英文比例的确定以及该采取怎样的措施来提高教师和学生的英语水平等）。

现代教学理念在免疫学应用中的探索

免疫学是现代医学中尤为重要的一门学科,也是医学生必修课程之一。但在教学实践过程中学生往往反映免疫学的学习过程相当吃力,感觉是用一个新的概念在解释一个新的名词或者领域,而且在学习过程中研究对象大多都是看不见摸不着的分子及相互之间的调节作用,在如此繁琐、抽象、无味的学习过程中,学生也逐渐失去兴趣,不愿继续深究,从而影响教学质量。因此,运用新的教学模式、教学方法和教学手段有利于进一步提高学生学习的兴趣,促进学生对免疫学的学习,增强其分析和解决问题的能力。

基于创新人才培养的POPS教学模式研究

以往的医学免疫学教学常采用"结构式课堂教学",难以达到培养创新人才的教学目的。POPS(Patient-Oriented Problem Solving System(以患者为导向的问题求解系统,简称POPS))教学模式改变了传统课堂教学中重知识灌输、轻实践与运用;重理论体系、轻方法手段;重以教员为中心,轻学员参与的弊端与不足,提高了学员的主观能动性,将转换医学的概念贯穿学习的始终,激发了教员的教学创新能力,值得在推广。