细菌潜生体与IBS关系的初步研究

目的探讨肠道细菌潜生体(cryptic growth cell,CGC)与肠易激综合征(IBS)的关系。方法应用显微培养结合形态观察等方法对IBS患者的粪便标本进行CGC检测,并在实验室进行CGC诱导产生和体内定植的模拟研究。结果IBS患者粪便标本中常存在大量CGC并可在体外传代;在发病期间,其粪便标本中CGC出现明显的自溶现象。模拟实验显示IBS患者常使用的抗生素多可诱导CGC形成和体内定植。结论初步可推断CGC与IBS的发病有一定联系。

生物波调控因子对脑梗死大鼠脑组织TNF-α表达的影响

目的探讨生物波调控因子(Bio-wave regulation factor,BRF)对大鼠局灶性脑缺血损伤后行为学及脑组织内肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达的影响。方法成年健康雄性SD大鼠90只随机分为3组,即假手术组、生理盐水组、BRF治疗组,每组分为6、24、48、72h、7d,5个亚组,每亚组6只大鼠。参照Longa等的线栓法制成大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,术后1h以1ml/100g体重的剂量分别腹腔注射1.25%BRF溶液和生理盐水,此后1次/d重复注射,至相应时间点处死动物。采用Longa等4种方法进行行为学评分、干湿重法测定脑组织含水量、HE染色观察组织病理学改变、免疫组织化学方法观察脑组织TNF-α的动态变化。结果1.行为学评分:MCAO大鼠对侧肢体存在不同程度瘫痪,在术后48h和72h神经功能缺损最为明显,7d基本恢复正常;2.脑组织含水量测定:脑梗死组脑组织含水量在各时间段均增加,其中术后48hBRF组低于同期的生理盐水组(P<0.05);3.脑组织HE染色观察:除假手术组外,其余各组在脑梗死后6h局部可见炎性细胞浸润,48h明显增多,并持续到7d;4.脑组织TNF-α的表达:与假手术组相比,脑梗死组TNF-α阳性细胞在各时间段均增加,术后48h、72hBRF组低于同期的生理盐水组(P<0.05)。结论BRF通过减轻脑水肿,降低脑内肿瘤坏死因子-α的表达,对大鼠缺血脑组织产生保护作用。

生物波调控因子对实验性脑梗死大鼠脑组织NF-κB表达的影响

目的:探讨生物波调控因子(BRF)对实验性脑梗死大鼠脑组织NF-κB表达的影响。方法:成年健康雄性SD大鼠90只随机假手术组、生理盐水组、BRF治疗组。制备大脑中动脉梗死(MCAO)模型,术后1h以1ml/100g的剂量分别腹腔注射1.25%BRF溶液和生理盐水,此后1次/d。进行行为学评分、干湿重法测定脑组织含水量、HE染色观察组织病理学改变、免疫组织化学方法测定脑组织NF-κB的表达。结果:(1)MCAO模型大鼠术后各时间点BRF治疗组的行为学评分较生理盐水组降低。(2)与假手术组比较,BRF治疗组和生理盐水组缺血脑组织含水量于24h开始明显升高,48h达高峰,持续至72h,7d明显下降。除6h外在各时间点均有显著性差异。BRF治疗组脑组织水肿程度减轻,48h脑含水量明显低于生理盐水组。(3)缺血区炎细胞浸润和NF-κB阳性细胞表达于梗死后6h开始增多,48h达高峰,持续至7d。假手术组未见明显炎细胞浸润,可见少量散在的NF-κB阳性细胞。BRF治疗组病理损伤减轻,术后48h、72h脑组织NF-κB阳性细胞表达明显低于生理盐水组。结论:生物波调控因子可以减轻梗死后脑水肿,降低脑组织NF-κB的表达,对大鼠脑组织的缺血损伤产生保护作用。

生物波调控因子对实验性脑梗死大鼠脑组织IL-6表达的影响

目的:探讨生物波调控因子(BRF)对实验性脑梗死大鼠脑组织IL-6表达的影响。方法:成年健康雄性SD大鼠90只随机分为BRF组、生理盐水组和假手术组。制备大脑中动脉梗死(MCAO)模型,术后1h以1ml/100g的剂量分别腹腔注射1.25%BRF溶液和生理盐水,此后1次/d。进行行为学评分、测定脑组织含水量、HE染色观察组织病理学改变、免疫组织化学方法测定脑组织IL-6的动态变化。结果:生理盐水组及BRF治疗组脑梗死组织周围组织含水量于24h开始明显升高,48h达高峰,持续至72h,7d时明显下降,在各个时间点与假手术组比较均有统计学意义。除假手术组外,其余各组梗死区炎细胞浸润和IL-6阳性细胞表达于梗死后6h开始增多,48h达高峰,并持续至7d;假手术组未见明显炎细胞浸润,可见少量IL-6阳性细胞。BRF治疗组大鼠行为学评分降低,脑组织水肿程度减轻,术后48h最显著,病理损伤减轻,脑组织IL-6阳性细胞减少,术后48h、72h最显著。结论:生物波调控因子可以通过减轻梗死后脑水肿,降低脑内IL-6的表达,从而对大鼠缺血性脑组织损伤产生保护作用。

细菌潜生体相关的IBS动物模型建立实验研究

目的:建立一种新的IBS动物模型。方法在CGC与IBS发病相联系的临床调查基础上,建立CGC定植相关的IBS动物模型,判断指标选择了动物体内的CGC定植状况、粪便含水量、排便次数、结肠肌电特征、张力改变以及肠道组织的病理切片观察。结果上述指标在模型动物中均有特定的改变,并分别地反映出病人的腹泻特征,肠道动力异常改变特征及无明显病理损伤特征,同时在发病的特点上也显示出体内细菌CGC定植,反复应用抗生素以及反复发作的特征,并且建模阳性率在45%～50%之间。结论本文所建立的模型在与临床的相似性及模型本身的重复性方面均达到了要求,是一种理想的IBS动物模型,可以为IBS的研究提供一个新的更为合理的实验基础。

缓激常泰拮抗细菌潜生体对肥大细胞激活作用的实验研究

目的观测缓激常泰拮抗细菌潜生体激活肥大细胞的作用。方法以头孢呋辛钠诱导大肠杆菌产生,体外以细菌潜生体为对照,分别观测不同剂量缓激常泰对细菌潜生体激活肥大细胞的拮抗作用。结果中、高剂量的缓激常泰具有显著的拮抗作用,与对照组有显著性差异。结论一定剂量的缓激常泰具有稳定肥大细胞的作用。

小鼠EP瘤细胞株建立的初步研究

背景与目的:探讨淋巴细胞通过诱导能否成为肿瘤细胞。材料与方法:应用小鼠黑色素瘤细胞培养液离心的上清液,再经过滤所获滤液,稀释成不同浓度,用于淋巴细胞体外培养诱导,通过体外培养和动物试验进行成瘤性及体内体外传代特性观察。结果:荷B16瘤体4个月的小鼠淋巴结内分离细胞,体外诱导成瘤细胞,命名为EP瘤细胞。其体内可稳定成瘤传代,体外初期呈肿瘤细胞生长特征,传代中逐步丧失。结论:初步证明淋巴细胞可以在特定环境中转变为肿瘤细胞。

双歧杆菌在5-氟尿嘧啶作用下的适应性变化

目的:研究双歧杆菌在5-氟尿嘧啶(5-fluorou-racil,5-FU)作用下的适应性变化特点.方法:采用药敏实验、染色形态观察、原子力显微镜扫描观察以及耐药菌株生长实验鉴定等方法观察双歧杆菌的生长情况及形态特征.结果:在5-FU作用下,双歧杆菌菌体加长,断裂减少,转变成丝状体,长度在10μm以上,两端呈分枝状,相对高度约1μm,并且在抑菌环内还产生了耐药菌株.这些丝状体在正常的生长条件下又可以恢复正常生长.结论:化疗药物可以直接影响双歧杆菌的生长,而双歧杆菌对化疗药的作用可产生显著的适应性变化.

肠道细菌CGC定植及其对局部细胞活性的影响

目的:探讨肠道细菌CGC在体内定植分布的主要位置及这种定植对局部细胞活性的影响.方法:采用头孢呋辛钠诱导CGC产生,以体内细菌定植的原位检测方法对结肠各段CGC定植情况进行检测.在建立了IBS动物模型基础上,采用高效液相色谱法对CGC定植较多的回盲部肠黏膜上皮细胞的腺苷酸能荷及ATP与腺苷酸库比值进行测定,以反映细胞活性状态.结果:正常大鼠检测未见大量细菌CGC,在模型鼠标本的连续检测结果中检出大量CGC.通过肠道细菌定植检测,细菌CGC主要定植在回盲部和升结肠段;与正常组相比,IBS模型组回盲部三个肠段的细胞线粒体ATP能荷值以及ATP与总腺苷酸库比值检测结果明显降低,相应肠段之间数值差异显著(均P<0.05).结论:细菌CGC在大鼠体内定植显优势分布,在局部定植后能引起细胞活性降低.

肠道细菌潜生体形成的诱导因素实验分析

目的:探讨肠道细菌潜生体诱导因素的种类及特点。方法:采用药敏试验和大鼠体内用药后分离肠道细菌进行显微培养的方法,观察抗生素和人类生活中常接触的化学物质对大鼠肠道常见细菌形成肠道细菌潜生体的诱导作用。结果:新型抗生素如西力欣、氧氟沙星和氨苄青霉素几乎全部可以导致肠道菌群出现肠道细菌潜生体,诱导作用强,而氯霉素、土霉素等诱导作用弱。此外,残留量的杀虫剂、洗涤剂,以及市售的部分化妆品如口红等可不同程度地诱导大鼠肠道内或分离的肠道菌形成肠道细菌潜生体。这些肠道细菌潜生体主要由大肠杆菌、变形杆菌、假单胞菌等肠道中常见细菌形成。结论:人类生活和医疗实践中常接触的物质大多可诱导肠道细菌潜生体产生,尤其是目前临床常用抗生素诱导作用较强。提示细菌肠道细菌潜生体可能是在现代社会中伴随新抗生素、新型生活用品的广泛应用,某些疾病如肠易激综合征发病率上升的一个重要相关因素。

重新审视肠易激综合征

肠易激综合征(IBS)作为新近日益受到重视的疑难疾病,以其固有的复杂性冲击着西医传统的疾病观。以其高发病率和对人类生活质量的严重影响促使复杂性探索研究在医学中应用并促进东方整体观在现代医学中复兴,从而用于解决诸如肠易激综合征等的医学疑难。重新审视IBS这种典型的心身相关特点显著的功能性疾病,促进对医学疑难问题研究和认识中观念的更新,特别是促进整体观在医学研究中的深化,从而有助于寻找到更有效的医学疑难病的解决方法。

小鼠黑色素瘤生长动态观察

目的:观察小鼠黑色素瘤生长特征。方法:常规肌肉接种小鼠黑色素瘤B16细胞,接种后动态观察瘤体生长情况,并解剖观察瘤体结构特征及内部变化情况。结果:接种B16细胞后3d,接种局部出现红肿;瘤体直径达1.5cm左右,肿瘤外层包膜形成;瘤体达3.0cm左右,肿瘤出现内层;解剖发现,大瘤体两层包膜下有囊状结构存在,在瘤体内层包膜下有大量小体积个体细胞团存在。结论:小鼠黑色素瘤体增大主要与包膜及包膜下的细胞生长有关。

细菌潜生体相关的IBS大鼠模型建立的影响因素

目的研究细菌潜生体(CGC)相关的IBS大鼠模型建立的影响因素,以完善该模型的建立。方法采用二步刺激法建立IBS大鼠模型,先用不同浓度组的头孢呋辛钠刺激大鼠产生CGC,然后用辣椒液刺激。模型建成判定指标为CGC定植、粪便含水量和排便次数等。结果不同浓度组的头孢呋辛钠刺激大鼠,引起CGC的动态变化特点和定植率不一样。获得IBS大鼠雄性与雌性比例为1.5∶1。结论CGC相关的IBS大鼠模型建立,头孢呋辛钠浓度组合对CGC动态变化特点和定植起关键作用,并且该动物模型建立有性别差异,对IBS的发病机制与性别差异研究有重要意义。