自制头颈肿瘤专用定位装置配合三维TPS进行精确放疗定位的应用

目的 探讨应用自制头颈部专用立体定位装置配合三维TPS进行精确定位和放射治疗的方法。方法 采用自制头颈专用CT立体定位装置与STAR 2 0 0 0三维TPS配合应用 ,对模拟靶和 8例头颈癌患者进行了CT定位和治疗计划设计 ,并采用模拟定位机对其进行了对比和验证。结果 模拟靶和患者CT立体定位的结果均在模拟定位机上得到验证 ,达到临床精确定位和精确放射治疗的要求。

以发热为主要症状恶性肿瘤的诊断

目的 深入探讨发热与恶性肿瘤的关系 ,提高临床医生对恶性肿瘤临床表现多样化的认识 ,从而提高诊断水平。方法 回顾自 1996年以来国内公开发表讨论“不明原因发热”的文章 2 6篇 ,涉及病例数 12 5 1例 ,其中恶性肿瘤 2 36例。结果 以发热为主要临床表现的肿瘤涉及多系统、各年龄层次 ,热型多样 ,容易误诊。结论 肿瘤在发热性疾病中占有重要的地位 ,并有发病率增高的趋势。重视病史采集、系统查体 ,积极开展活组织检查技术。

恶性血液病患者肠道双歧杆菌的定量调查

目的 研究恶性血液病患者化疗前后肠道双歧杆菌 (Bifidobacterium)数及检出率的变化情况。方法 用自制改良BS培养基对 5 2例恶性血液病患者化疗前后大便进行双歧杆菌定量检测。结果 恶性血液病患者肠道双歧杆菌数较正常人明显减少 ,化疗前肠道双歧杆菌检出率为 44 2 % ,化疗后肠道双歧杆菌检出率为 15 4% ,较化疗前检出率显著降低 (P <0 0 1)。结论 恶性血液病患者化疗前后肠道双歧杆菌数有明显的变化 ,调节恶性血液病患者肠道微生态平衡 ,有助于促进恶性血液病患者健康状况的改善。

耐药肿瘤细胞β-1整合素表达及对细胞凋亡的影响研究

目的 探讨耐药肿瘤粘附分子 β 1整合素的表达以及其对细胞凋亡的影响 ,并寻找逆转耐药的途径。 方法 采用人肺腺癌细胞株A5 49及耐阿霉素细胞株A5 49 ADR ,免疫组化方法检测耐药细胞 β 1整合素的表达 ;TUNEL法检测其对细胞凋亡的影响。结果 耐药细胞 β 1整合素表达水平高于敏感细胞 (P <0 0 1) ;敏感细胞及耐药细胞加FN后其凋亡率较未结合FN细胞明显降低 (P <0 0 1) ;用抗 β 1整合素抗体阻断与FN结合耐药细胞株 β 1整合素 ,其凋亡率与未阻断 β 1整合素 ,但与FN结合的的耐药株相比 ,有显著差异 (P <0 0 1)。结论 耐药肿瘤细胞 β 1整合素表达增加 ,成为耐药表型 ;其机制主要通过抑制细胞凋亡产生耐药 ;

CTLA4Ig基因修饰的BMSCs支持CD34^+细胞扩增的实验研究

目的 通过腺病毒介导CTLA4Ig在骨髓基质细胞 (BMSCs)中的表达 ,探讨CTLA4Ig基因修饰的BMSCs支持CD34+ 细胞扩增的功能变化 ,为该基因修饰的BMSCs联合造血干细胞移植 (HSCT) ,达到预防移植物抗宿主病 (GVHD )和纠正预处理损伤的造血微环境 (HIM)积累实验依据。方法 以CTLA4Ig 重组腺病毒按感染复数 (Multiplicityofinfection ,MOI) 5 0转染BMSCs ,以RT PCR检测目的基因转录 ;免疫磁珠 (MACS)阳性选择分选骨髓CD34+ 细胞 ,流式细胞仪检测其纯度 ;通过骨髓基质细胞支持CD34+ 扩增的细胞总数及集落形成细胞数 (CFC)的变化 ,比较转染和未转染BMSCs在支持CD34+ 细胞扩增方面的差异。结果 RT PCR在转染组及转染后传两代BMSCs中检测到CTLA4Ig基因的转录 ;通过观察扩增后细胞总数及CFC数的变化 ,发现CTLA4Ig基因转染组与未转染组BMSCs支持CD34+ 细胞扩增的能力也无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论 CTLA4Ig 重组腺病毒有效介导目的基因对BMSCs的转染 ,在MOI为 5

肝细胞癌中p16基因及其甲基化的检测与意义

目的 研究P16、P16甲基化在肝细胞癌 (Hepatocellularcarcinoma ,HCC)与癌旁组织中的表达特点 ,探讨其与HCC生物学行为的关系。方法 分别以免疫组化及PCR技术检测 3 3例人肝细胞癌及其癌旁组织中p16基因表达及其甲基化的水平 ,并结合临床资料进行分析。结果 肝癌的p16基因表达率 (63 64 % )明显低于癌旁组织 (10 0 % ) (P <0 0 5 ) ;p16基因阳性表达率在无转移的肝癌中为 85 7% ,有转移组为 2 5 0 % ;高、中和低分化的肝癌分别为 5 2 4% ,2 8 6%和 19 1%。p16基因阳性表达在肝癌患者高分化与中和低分化比较有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,转移与非转移组比较有非常显著性差异 (P <0 0 1)。 3 3例HCC组织中 11例发生p16甲基化 ,均伴肿瘤转移 ,其中高、中和低分化肿瘤各占 2、4、5例 ;相应癌旁组织中未发现p16基因甲基化。结论 p16基因异常表达及其甲基化在肝细胞癌的发生、发展过程中起重要作用。

人DNA MTase反义基因转染对肝癌细胞DNA MTase基因mRNA表达的影响

目的 观察人DNAMTase反义基因转染对肝癌细胞系SMMC 772 1内源性DNAMTase基因mRNA表达的影响。方法 将构建的包含正、反义DNAMTase基因片段的真核表达载体用脂质体法将其转染入肝癌细胞系SMMC 772 1 ;采用RT PCR法观察DNAMTase基因mRNA表达变化。结果 PCR法扩增外源性NeoR基因证实用脂质体法成功将重组载体转染入细胞 ;RT PCR法检测DNAMTase基因mRNA表达 ,显示转染反义DNAMTase基因片段的SMMC 772 1细胞中DNAMTase基因mRNA表达下调。结论 人DNAMTase反义基因转染是一种有效、可靠的抑制肝癌细胞系SMMC 772 1DNAMTase基因表达的方法。它为更多了解DNAMTase在肝癌发生。

首例中国可视化人体头颈部CT影像三维重建的初步研究

目的 对首例中国可视化人体头颈部CT影像进行三维重建研究。方法 将首例中国可视化人体头颈部的轴位断层CT图像 (层厚 1mm ,连续扫描 ) ,应用SiemensCRT3 .0图像处理软件在SGIGraphics计算机工作站上进行三维重建和观察。结果 头面部结构得到良好重建 ,其面部轮廓包括鼻翼、唇、外耳廓、下颏等均能清晰显示。头颈部骨骼的精细三维重建 ,显示出颅底圆孔、卵圆孔、棘孔等细微结构。头颈部三维剖面观察可使包括垂体、脑干、颈髓、蝶窦、鼻咽等结构获得良好显示。结论 本研究实现了对首例中国可视化人体头颈部CT影像的三维重建和可视化 。

人DNA MTase反义基因转染对诱导肝癌SMMC7-721细胞凋亡的影响

目的 观察人DNAMTase反义基因转染对肝癌细胞系SMMC 772 1凋亡的影响。方法 采用脂质体法将构建的包含正、反义DNAMTase基因片段的真核表达载体转染入肝癌细胞系SMMC 772 1;采用MTT法绘制生长曲线 ;流式细胞法和原位末端标记法检测细胞凋亡改变。结果 PCR法扩增外源性NeoR基因证实用脂质体法成功将重组载体转染入细胞 ;生长曲线显示转染反义DNAMTase基因片段的SMMC 772 1细胞增殖速度减慢 ;流式细胞法测得其凋亡率由 3 1%增加到 13 5 %。末端标记法也显示其凋亡指数增加。结论 人DNAMTase反义基因转染可诱导肝癌细胞系SMMC 772 1凋亡。

rhGM-CSF对胎儿口腔粘膜成纤维细胞增殖及DNA合成的影响

目的 探讨rhGM CSF促进口腔溃疡愈合的作用机制。方法 取体外培养的胎儿口腔粘膜成纤维细胞 ,用rhGM CSF刺激成纤维细胞后第 2、4、6天用细胞计数及3 H 胸腺嘧啶掺入法 (3 H TdR)测定其增殖情况。结果 rhGM CSF对胎儿口腔粘膜成纤维细胞增殖及DNA合成有刺激作用 ,在 80～ 10 0ng/ml时 ,细胞生长达到最佳状态 ,过高浓度rhGM CSF的刺激作用反而下降。结论 rhGM

川芎嗪对大剂量化疗小鼠骨髓基质细胞损伤的保护作用

目的 观察川芎嗪对大剂量甲氨喋呤 (MTX)化疗所致骨髓基质细胞 (BMSC)损伤的保护作用及其量效关系。方法 建立大剂量MTX化疗损伤BMSC的小鼠模型后 ,按每千克体重腹腔注射川芎嗪 0mg(对照组 )、2 0mg(Ⅰ组 )、40mg(Ⅱ组 ) ,1次 /d ,第2 1天采取骨髓细胞进行体外BMSC培养、成纤维细胞集落 (CFU F)计数、BMSC层粘附率测定和BMSC层上造血细胞混合集落培养。结果 BMSC生长、CFU F计数、BMSC层粘附率、BMSC层上造血细胞混合集落数目均表现为Ⅱ组 >Ⅰ组 >对照组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。结论 川芎嗪对大剂量MTX引起的BMSC损伤有明显的保护作用 。

脂质体介导ANG反义核酸对A549细胞作用的研究

目的 研究脂质体介导ANG反义核酸转染A5 49细胞后 ,对其中ANG蛋白表达的影响 ,探讨其作为抗血管生成与抗肿瘤药物的可行性。方法 用人工合成的人ANG反义寡聚核苷酸 ,以脂质体为载体转染人肺癌A5 49细胞 ,研究A5 49细胞在基因转染后 ,其ANG蛋白表达的变化。结果 脂质体转染程序优化后 ,得到最佳转染效率 ;免疫组化显示细胞内ANG蛋白表达明显减少 ;培养基ELISA检测显示每细胞分泌的ANG蛋白量与对照组相比有显著差异。结论 ANG反义寡聚核苷酸抑制A5 49细胞中ANG的表达 。

F68及其联合DMSO对脐血造血细胞的低温保护作用

目的研究普鲁兰尼克(F68)及其联合DMSO在-80℃条件下对脐血造血干细胞的低温保护作用,为临床应用提供依据.方法脐血造血细胞冻存30、60、90 d后复苏,应用台盼蓝拒染率、集落形成试验、3H-TdR掺入率等,测定经F68保护体系冻存的脐血活力,并与目前通用的冷冻保护剂二甲亚砜及CP-1进行了对比研究.结果在-80℃条件下,F68对脐血造血细胞具有明显的冷冻保护作用,并与DMSO具有协同保护效果,联合F68及DMSO的保护体系可使MNC、CFU-GM的平均回收率及台盼蓝拒染率在第90天时分别达到(83.4±6.3)%,(68.8±7.9)%, (92.5±5.1)%,优于目前通用的细胞冻害保护液CP-1及DMSO.90 d的冻存期内,脐血细胞活力无明显下降.结论 F68及其与DMSO组成的冻存方案对脐血造血干细胞具有良好的冻存保护效果.

rhGM—CSF对小鼠口腔粘膜损伤的防治作用

目的观察rhGM-CSF对MTX致实验性小鼠口腔粘膜损伤的疗效.方法按随机分组原则将501只昆明种小白鼠分成8组,分别在相应时间给予不同药物(MTX、CF或rhGM-CSF)的处理因素,于第1～10天光镜下观察小鼠口腔粘膜的病理改变和积分情况.结果 IDMTX致口腔粘膜损伤病变率(45%～63%)和积分率(19.4%～56%)较其它组高,且死亡率很低(小于5%);IDMTX+GM0(或GM2)组的口腔粘膜损伤病变率(30.53%和30.99%)和积分率(19.47%和17.25%)比IDMTX组(55.56%和36.31%)明显减少,且溃疡严重程度较轻,二者相差显著(P<0.01).结论 IDMTX致小鼠口腔粘膜损伤模型可以用于粘膜损伤的研究;rhGM-CSF可以减少MTX致小鼠口腔粘膜损伤,并促进粘膜损伤恢复.

人类线粒体tRNAs基因在CagA阳性Hp培养滤液诱导转化的胃上皮细胞中表达

目的 研究CagA阳性Hp培养滤液对人胃粘膜上皮细胞 (GES 1)作用的机制。方法 将CagA阳性Hp培养滤液诱导恶性转化的GES 1细胞与CagA阴性Hp培养滤液处理的GES 1细胞进行mRNA差异显示 ,以寻找Hp致胃癌发病的相关基因。结果mRNA差异显示片断之一命名为PFN2 ,仅在Hp(CagA+ )培养滤液处理的GES 1细胞中表达 ,斑点杂交结果与之一致。与GeneBank资料序列同源性比较分析提示PFN2与人类线粒体tRNAs同源性 10 0 % ,即为人类线粒体tRNAs基因的一部分。结论 人类线粒体tRNAs基因可能参与了Hp的CagA诱导的胃上皮细胞恶性转化过程。

人脐血CD34^+细胞和贴壁细胞体外诱导树突状细胞及其鉴定

目的 从人脐血中不同的前体细胞扩增树突状细胞 (DCs) ,并对其进行鉴定。方法 用免疫磁珠法分离人脐血CD3 4+ 细胞 ,以GM CSF、TNF α、FL、SCF和IL 4诱导生成DC ;用Ficoll分离脐血单个核细胞 ,2h贴壁后的细胞 ,以GM CSF、IL 4和TNF α诱导生成DC。观察细胞形态 ,流式细胞仪分析表面标志 (CD1a、CD80、HLA DR) ,并检测其刺激同种异体T细胞增殖的能力。结果 人脐血CD3 4+ 细胞和贴壁细胞体外诱导生成的细胞均具有典型的DC形态特征 ,表达高水平的DC分化抗原CDla ,MHCⅡ类抗原递呈分子HLA DR和CD80共刺激分子 ,并具有刺激同种异体T细胞增殖的能力。前者扩增DC的效率更高。结论 从人脐血CD3 4+ 细胞和贴壁细胞均可诱生出功能性DC 。

腺病毒介导CTLA4Ig基因转染骨髓基质细胞及其对CD34^+细胞粘附力的影响

目的 通过腺病毒介导CTLA4Ig在骨髓基质细胞 (Bonemarrowstromalcells ,BMSCs)中的表达 ,探讨CTLA4Ig基因修饰的BMSCs对CD3 4+ 细胞的粘附力的变化。方法 以CTLA4Ig 重组腺病毒按感染复数 (Mutiplicityofinfection ,MOI) 5 0转染BMSCs ,免疫组织细胞化学确定CTLA4Ig的表达 ,免疫磁珠 (MACS)阳性选择分选骨髓CD3 4+ 细胞 ,流式细胞仪检测其纯度 ,通过测定粘附于BMSCs的3 H TdR标记CD3 4+ 细胞的cpm值观察CTLA4Ig基因修饰的骨髓基质细胞的粘附力变化。结果 免疫细胞化学染色示CTLA4Ig表达阳性率达 85 % (MOI =5 0 ) ,弥漫性定位于细胞质 ;免疫磁珠阳性选择获取的骨髓CD3 4+ 细胞纯度可高达 97 8% ;转染组与对照组BMSCs对CD3 4+ 细胞的粘附力无显著差异 (P >0 0 5 )。结论 CTLA4Ig 重组腺病毒能有效介导CTLA4Ig基因在BMSCs中表达 。

人DNA MTase反义基因转染诱导E-Cadherin基因启动子区域去甲基化

目的 观察人DNAMTase反义基因转染对肝癌细胞系SMMC 772 1E Cadherin基因启动子区域甲基化状态的影响。方法 采用脂质体法将已构建的包含正、反义DNAMTase基因片段的真核表达载体转染入肝癌细胞系SMMC 772 1;用甲基化特异的PCR法检测E Cadherin基因启动子区域甲基化状态的改变。结果 PCR法扩增外源性NeoR基因证实用脂质体法成功将重组载体转染入细胞 ;甲基化特异的PCR法检测显示转染反义DNAMTase基因片段的SMMC 772 1细胞中的E Cadherin基因启动子区域呈现去甲基化状态。结论 人DNAMTase反义基因片段可诱导E Cadherin基因启动子区域去甲基化 ;实验结果有助于进一步了解DNAMTase在肝癌发展中的作用。