外周血循环中肿瘤细胞检测的临床意义与研究现状

越多的资料表明,恶性实体瘤的复发转移主要是通过淋巴及血液系统播散.

甲胎蛋白变异体作为肝细胞癌预后指标的研究

目的探讨AFP变异体作为HCC预后指标的意义,为临床应用提供依据.方法本研究涉及1991～1994年在我院第一次行肝癌根治性切除术的AFP阳性HCC患者129例,术前采用小豌豆凝集素亲和免疫电泳自显影法测定血清AFP变异体含量,术后随访至1999年,将相关资料进行归纳整理,分析血清AFP变异体含量与HCC复发率、生存率的关系,并进行统计学分析.结果 129例HCC患者1,3,5年累计复发率分别为32.6%,66.7%和86.8%.AFP变异体含量≥20%组(A组,83例)和AFP变异体含量＜20%组(B组,46例)的累计复发率分别为37.3%和23.9%(1年),73.5%和54.3%(3年),92.8%和76.1%(5年).A组累计复发率明显增高(P＜0.05).129例HCC患者1,3,5年生存率分别为88.4%,63.6%和41.1%.A组和B组累计生存率分别为84.3%和95.7%(1年),56.7%和76.1%(3年),32.5%和56.5%(5年).B组生存时间明显延长(P＜0.01).结论AFP变异体是恶性生物学的良好指标,作为一个独立的预后标志物,可在临床上用于预测HCC预后和复发.

腺病毒介导的VEGF启动子-胸苷激酶表达系统对肝癌细胞的选择性杀伤作用

目的 :构建携带受血管内皮生长因子 (VEGF)启动子调控的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 (HSV- tk)的重组腺病毒载体 ,并探讨该重组腺病毒对体外培养的肝癌细胞的特异性杀伤活性。方法 :采用 Ad Easy System构建携带受 VEGF启动子或巨细胞病毒 (CMV)启动子调控 tk基因表达的 Ad VEGF- tk和 Ad CMV- tk,这两种重组腺病毒载体在 2 93细胞中包装、扩增后 ,体外感染正常肝细胞系 L 0 2和肝癌细胞系 Hep G2 ,并用不同浓度的丙氧鸟苷 (GCV)处理后以 MTT法检测受染细胞的增殖情况。 结果 :Ad VEGF- tk的病毒滴度为 1× 10 1 0 pfu/ ml,Ad CMV- tk为 5× 10 1 0 pfu/ ml。 L 0 2细胞感染 Ad VEGF- tk后对GCV的敏感性无明显改变 ,而 Hep G2细胞感染 Ad VEGF- tk后对 GCV的敏感性明显增加 ,在感染复数 (MOI)为 10 0并用 5 0μg/ m l GCV处理时 ,则有 90 %以上 Hep G2细胞被杀死 ;而 Ad CMV- tk可杀死 95 %Hep G2细胞和 80 %以上 L 0 2细胞。 结论 :VEGF启动子调控的 HSV- tk基因表达可特异性地杀死肝癌细胞 ,同时对正常肝细胞几无影响。

中期因子转录物及其蛋白在肝细胞癌中的定位与表达研究

目的了解中期因子 (Midkine,MK)转录物及其蛋白产物在肝细胞癌 (hepatocellularcarci noma ,HCC)中的定位情况与表达特点。方法应用原位杂交、免疫组织化学染色等方法对 33例人HCC组织、10例良性肝肿瘤组织及其配对瘤旁肝组织进行了MKmRNA及蛋白的定位与表达研究。结果免疫组织化学结果与原位杂交结果具有一致性 (χ2 =0 5 0 0 ,P >0 0 5 )。MK在HCC组织中呈高表达。MKmRNA及蛋白的阳性信号聚集于HCC细胞质。在HCC细胞外组织中亦有MK表达 ,尤以血管密集处明显。HCCMK表达率与肝癌组织学类型、分级等临床病理学特点无相关性。结论HCC在mRNA和蛋白水平上表达MK增加 。

肝细胞癌高表达中期因子蛋白与肝内转移的关系

目的 探讨中期因子 (midkine ,MK)蛋白在肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)中的表达特点、水平及其与肝内侵袭、转移的可能关系。方法 应用免疫组织化学染色、Western印迹等方法 ,对 33例人HCC组织、10例良性肝肿瘤组织及其配对瘤旁肝组织进行了MK蛋白定位表达及表达水平的研究 ,并结合肝内有无卫星灶形成进行分析。结果 免疫组织化学结果与Western印迹结果具有一致性 (P >0 .0 5 )。在正常肝组织及良性肝病变组织中 ,MK无表达 ;而在HCC组织中 ,MK高表达。在癌旁肝硬化组织中 ,MK微量表达 ;而在肿瘤侵袭前沿区域 ,MK表达则增强。HCC中MK表达率与其组织学类型、组织分级、瘤体大小、包膜状况、AFP值之间差异均无显著性 (P >0 .0 5 ) ,但在有卫星灶形成的HCC中 ,MK蛋白表达率显著高于无卫星灶形成者 (P <0 .0 5 )。结论 HCC在蛋白水平上表达MK增加 ,并可能与肝内侵袭、转移有关。

中期因子mRNA在原发性肝癌中的表达及其意义

目的 探讨中期因子 (MK)mRNA在原发性肝细胞癌 (HCC)中的表达及其意义。方法 收集 33例人肝细胞癌组织、配对癌旁肝组织及 1 0例肝良性肿瘤组织、5例正常肝组织 ,采用TRIzol一步抽提法提取总RNA ,应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测MKmRNA的表达。结果 2 8例肝细胞癌可见MKmRNA表达 ,阳性率为 84.8% ,而配对的癌旁组织中仅见 3例表达 ,正常肝脏和肝脏良性肿瘤组织无 1例阳性。统计学分析表明 ,肝细胞癌MKmRNA表达率与其他各组的差异有非常显著性 (P <0 .0 1 ) ,但肝细胞癌MKmRNA表达与其组织学类型、病理分级、瘤体大小、包膜状况及其甲胎蛋白 (AFP)值之间差异无显著性 (P >0 .0 5)。结论 肝细胞癌在mR NA水平上表达MK增加 ,检测MK表达情况可作为HCC的辅助诊断指标之一 。