甲醛和戊二醛应用于神经系统免疫组织化学组织固定的特性分析

七十年代以来,免疫组织化学技术已成为识别神经元化学特性及其纤维联系的重要方法,近年来并被迅速地引入到神经递质受体的定位研究、原位杂交组化技术、神经元第二信使系统和第三信使—c-fos癌基因(张遐,鞠躬,待发表)的显示之中。在免疫组化染色过程中,有许多因素影响其结果,组织固定就是主要因素之一。非固定或固定不佳的组织其结构将在免疫组化的抗体孵育等过程中受到不同程度的损害,同时组织中的抗原也将从其原位弥散。而各种形式的组织固定虽然可使组织结构得到不同程度的保存,但所研究的抗原的特性。

重叠重复人心钠素基因的化学合成及其克隆

根据人心钠素的氨基酸序列,借助于计算机,设计了8个寡核苷酸片段,并在DNA自动合成仪上合成了这些片段。经5′磷酸化、退火、连接等操作,这些片段组装成由两个心钠素基因首尾以终止起始码TGATG相连的串联体。将它插入质粒pRC_(23)转化E.coli TAP_(106)后,获得pY X_(40)对重组子的酶切图谱、原位杂交及DNA序列的分析表明,插入基因的方向、读框正确。

金属螯合四肽的化学合成及单克隆抗体的制备

目的：为了合成金属螯合四肽并制备其单克隆抗体。方法：从初始原料起，采用液相接肽等方法，合成三乙撑四胺钴（Ⅲ）－Ｎ－（α－羧基－苯乙基）－β－Ａｌａ－Ｐｈｅ－β－Ａｌａ－ＧｌｙＯＨ半抗原，并将其偶联到载体蛋白ＢＳＡ上制成抗原，免疫小鼠，采用杂交瘤方法制备单克隆抗体；结果：成功地合成了该金属螯合四肽，获得了８株单克隆抗体杂交瘤细胞系，并对这８株ＭｃＡｂ类与亚类等特性进行了鉴定，结论：可根据需要化学合成一些分子量很小的肽，并制备其单克隆抗体。

人表皮生长因子基因化学及酶促合成与克隆

作者利用DNA自动合成仪及酶促反应合成了全长175bp的人表皮生长因子基因,由计算机辅助进行基因序列、化学合成片段和酶切位点的设计,片段退火预测以及重复顺序和发夹结构的搜寻,所设计的基因具有多种克隆及表达途径。全基因先由DNA合成仪合成8个片段,经5端磷酸化及退火,再由DNA聚合酶合成4个缺口片段,用连接酶连接而形成,将基因插入pUC12质粒,转化JM103大肠杆菌,20ng的连接质粒转化后,在含X-gal及氨苄青霉索的营养琼脂平板上获得约200个白色克隆。随机选择7个克隆提取质粒作限制性内切酶鉴定,4个符合实验设计,取1个克隆作插入基因的DNA序列分析,结果与设计完全相符。

R3 cDNA探针的化学发光标记

作者用化学发光物质N-(4-氨基丁基)-N-乙基异鲁米诺(ABEI)与琥珀酸酐反应得ABEI-半琥珀酰亚胺.然后在二环己基碳二亚胺(DCC)存在下,用N-羟基琥珀酰亚胺活化为ABEI-半琥珀酰亚胺活性酯(ABEI-HSAE).同时,在亚硫酸氢钠催化下用乙二胺对核酸探针单链进行化学修饰,引入具有高反应活性的伯胺基.将修饰后的探针与ABEI-HSAE在室温下反应制得了化学发光探针,并用发光测定方法对标记效果进行了检验.以H_2O_2-K_3Fe(CN)_6激发化学发光时,检测限为50pg.本实验为进一步利用化学发光法对靶核酸进行定量测定打下了基础.

高等医学院校医学化学教材改革的几点思考

医学的发展已进入分子水平,医学生必须具有扎实的化学基础才能适应专业学习及临床、科研工作的需要.现行医学化学教材大多沿用几十年前的模式,部分内容陈旧滞后,实用性不强.面对现实,改革势在必行.我们认为,突出重点、注重实用、体现医学特色应作为改革的方向.

多媒体技术在生物无机化学“互动式”教学中的应用

通过多媒体技术在生物无机化学教学中的应用,探讨利用现代教育技术手段提高授课质量和教学水平的有效方法和途径,以达到教与学互动、活跃课堂气氛、激发学员学习兴趣和挖掘潜能的目的.

显示切割bcl－2mRNA的核酶在HL－60细胞内表达的免疫组织化学和原位杂交双染色法

显示切割ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的核酶在ＨＬ－６０细胞内表达的免疫组织化学和原位杂交双染色法王剑波，赵永同，王伯（第四军医大学病理学教研室西安７１００３３第四军医大学生物化学教研室）关键词凋亡；核酸；原位杂交；免疫组织化学中图号Ｒ４４６．６２核酶（ｒｉｂｏ...

艾滋病毒-env26肽基因的化学合成及克隆

选用HTLV-Ⅲ前病毒核酸序列中的6333—6410作为合成HIV-env26肽结构基因,加上必要序列及接头共104bp,分成8个寡核苷酸片段,使结构基因能自身连接成多重串联体。用DNA合成仪合成。组装后与高效表达质粒pRC23重组,转化TAP106。经筛选、鉴定及DNA序列分析,得到一株含有HIV-env26肽基因4重串联体的重组菌,命名为pXY104。

四(苯甲酰甲硫基)四硫富瓦烯的合成及其有关电化学性质的研究

本文通过4,5-二(苯甲酰甲硫基)-1,3-二硫杂环戊烯-2-硫酮与乙二醇反应生成其缩酮,然后在亚磷酸三甲酯作用下偶联,最后水解,首次成功地制得了四(苯甲酰甲硫基)四硫富瓦烯(TBMT-TTF)。用循环伏安法和UV-Vis光谱研究了有关电化学性质。为制备含羰基四硫富瓦烯提供了一条可行途径。

生物化学的教与学

在医学院校中,生物化学被认为是一门最难学的学科.传统的观念认为学习是一件"非常辛苦"的事情,从这种观念出发,导致我们的教学方式完全成为一种强迫性的任务,教师辛苦,学生辛苦.由于突出了这种"苦"字,而将学习的乐趣掩盖起来了.实际上教和学并非是一件很辛苦的事,本文试图分析在生物化学"教与学"中,从"寓教于乐"和"晓之以理"方面,浅谈几点教学体会.

柱前衍生化高效液相色谱法分析当归多糖的单糖组成

采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化反相高效液相色谱(HPLC)法,建立了9种常见单糖的分离模式,并成功地用于当归多糖的单糖组成分析,具有良好的重复性。结果表明,当归多糖由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖及阿拉伯糖7种单糖组成,其摩尔比为0.57∶1.00∶0.13∶3·06∶8.16∶7.17∶12.69。该HPLC方法是简单、快速、灵敏、方便的分析技术,可用于当归多糖的质量控制。

自由基与细胞凋亡

细胞凋亡是指细胞在生理和病理情况下的一种死亡模式，广泛涉及到肿瘤、衰老和退行性病变等一系列疾病．最近有实验表明自由基与细胞凋亡有密切的关系．

高效液相色谱法测定魔芋精粉中葡甘露聚糖的含量及其单糖组成

目的:建立魔芋精粉中葡甘露聚糖(Konjac glucomannan,KGM)的含量及其单糖组成分析的测定方法。方法:还原单糖用1-苯基-3-甲基-5-吡啉唑酮衍生化后采用反相高效液相色谱法,分段梯度洗脱,检测波长250 nm。通过内标法和外标法的结合对2种单糖的定量进行了方法学研究,同时测定了魔芋精粉中KGM含量。结果:该方法甘露糖在1.001～8.008nmoL线性关系良好(r=0.9994);葡萄糖在1.002～8.016nmoL线性关系良好(r=0.9990),KGM平均回收率为98.1％,相对标准偏差为1.84％,重现性为1.72％,KGM含量为79.5％,其单糖组成为Glc:Man=1:1.51。结论:此方法简便、快速,可同时测定KGM含量及其单糖组成,便于魔芋精粉的质量评价。

补硒与锌对梭曼中毒大鼠乙酰胆碱酯酶活力和抗氧化力的影响

目的 探讨抗氧化剂硒 (Se)和锌 (Zn)预防梭曼中毒的可能性。方法 雄性大鼠 4 0只 ,按体重随机分为正常对照组、染毒组、硒治疗组、锌治疗组。正常对照组和染毒组每日 5mL·kg- 1的生理盐水(NS)ig ;硒治疗组每日 1mg·kg- 1Na2 Se0 3的NS液ig和锌治疗组每日 4mg·kg- 1Zn(C6 H11O7) 2 的NS液ig ,共ig 9d。d 10除正常对照组外其余各组大鼠均sc 0 .9LD50 梭曼 ,2h后断头处死并取样 ,测定大鼠全血乙酰胆碱酯酶 (AChE)活性及血清、大脑、肝脏的超氧化物歧化酶 (SOD)活性、总抗氧化力 (T AOC)和一氧化氮合酶 (NOS)活性。结果 梭曼中毒大鼠后 ,染毒组大鼠全血AChE活性被明显抑制 ,血清、大脑、肝脏的SOD活性、T AOC显著下降 ,NOS含量明显升高 ,而硒和锌预防组大鼠对梭曼引起的AChE、SOD、NOS活性和T AOC变化明显减轻。

高效毛细管区带电泳法分析南瓜多糖的单糖组成

目的测定南瓜多糖的单糖组成及摩尔比。方法以1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)为单糖的柱前衍生化试剂,用毛细管区带电泳(CZE)法测定南瓜多糖的单糖组成。电泳缓冲液为pH10.8的150mmol·L-1硼砂水溶液;熔融石英毛细管柱(58.5cm×75μm)的有效长度为48.5cm;分离电压10kV;柱温25℃;3.45kPa压力进样,进样时间5s;二极管阵列检测器检测。结果各单糖的检测限均低于10μg·mL-1。南瓜多糖由木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖醛酸组成,其摩尔比为1.33∶3.12∶7.33∶1.0∶3.67∶6.06。结论该方法具有简单、快速、高效等优点,可用于南瓜多糖的单糖组成测定及质量控制。

1,4-双(9-O-奎宁)-2,3-二氮杂萘的合成及其在烯烃不对称二羟基化反应中的应用

通过改进的文献方法制备 1 ,4 -双 (9-O-奎宁 ) -2 ,3-二氮杂萘 [(QN) 2 PHAL].在碱性条件下 ,奎宁与1 ,4 -二氯 -2 ,3-二氮杂萘之间的亲核取代反应以 72 %的化学产率生成 (QN) 2 PHAL.在 4种烯烃的不对称二羟基化反应中 ,(QN) 2 PHAL表现出很高的对映选择性 (83%～ 92 % e.e.)和催化活性 (产率 83%～ 93% ) .

高效毛细管电泳法测定唐古特大黄多糖中单糖的组成

目的测定唐古特大黄多糖中单糖的组成及其物质的量之比。方法将大黄多糖样品用2 mol.L-1的硫酸溶液降解成单糖后,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生化成单糖,应用毛细管区带电泳法测定各单糖。熔融石英毛细管柱(50μm×70 cm,有效长度60 cm);二极管阵列检测器;运行缓冲液为硼砂水溶液(浓度为150 mmol.L-1、pH值为10.8);分离电压10 kV;柱温25℃;0.5 Pa压力下进样,进样时间5 s。结果唐古特大黄多糖由木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、甘露糖、葡糖醛酸、半乳糖醛酸等8种单糖组成,其物质的量之比为1.00∶23.27∶15.93∶2.95∶1.34∶49.07∶2.62∶4.31。结论该方法具有简单、快速、分离效率高等特点,可用于唐古特大黄多糖中单糖组成的测定。

携载rhBMP-2微球的新型可注射自凝固复合人工骨的制备及特性研究

[目的]制备一种具有良好降解性和成骨活性、可注射的自凝固新型骨修复材料。[方法]制备携载rh-BMP-2的聚乳酸与聚乙醇酸共聚物(PLGA)微球,并将其与rhBMP-2/磷酸钙骨水泥(CPC)复合,制备出rhBMP-2/PLGA微球/CPC复合人工骨。探讨了材料的特性,包括形貌、固化时间、抗压强度及反映材料体外降解速度的指标—体外降解液Ca、P浓度变化,测定复合材料rhBMP-2的释药速度及体外诱导MSCs细胞成骨分化的能力。[结果]与单纯CPC-rhBMP-2相比,复合材料的固化时间少量增加,抗压强度下降明显。体外降解速度及体外释药明显提高,释放的rhBMP-2具有骨诱导活性。[结论]rhBMP-2/PLGA微球/磷酸钙骨水泥新型复合人工骨是具有良好应用前景的骨修复材料。

1,4-双(9-O-奎宁)-2,3-二氮杂萘-OsO_4催化烯烃的不对称氨羟化反应

在氧化 -供氮试剂 N -氯代氨基甲酸苄酯存在下 ,1 ,4-双 ( 9-O-奎宁 ) -2 ,3 -二氮杂萘 -Os O4催化剂在 5种烯烃的不对称氨羟化反应中表现出极高的对映选择性 ( 85 %～ 99% e.e.)和区域选择性 ,产率 48%～ 68% .