益胃胶囊中部分有效成分的薄层鉴别及芍药苷的HPLC测定

目的 拟建立益胃胶囊的质控方法 .方法 采用TL C法对益胃胶囊中的芍药、黄芪、延胡索和黄连定性 ,HPL C法测定芍药甙的含量 .结果 在 TL C色谱中能检出黄芪甲苷、芍药苷、延胡索乙素和黄连小蘖碱 ;芍药苷在 0 .10 6～ 6 .36 μg范围内呈线性关系 ,平均回收率为 95 .6 % ,RSD为1.78% .结论 所建立的方法对处方的各组成药材 ,可快速地定性。

测定铜原子量的微型实验

利用自制的简易气体发生器和洗气装置对铜原子量测定微型实验作了进一步的探索与实践 .测定结果不仅能达到无机化学实验对测定精度的要求 。

丙型肝炎病毒小鼠实验模型的研究进展

丙型肝炎病毒(HCV)感染是导致慢性肝病的主要原因。大部分HCV感染者呈持续性感染,这与肝硬化和肝细胞癌紧密相关。近十年来,许多学者通过不懈的努力建立了各种行之有效的小鼠实验模型,基于这些模型的研究极大地丰富和加深了对HCV感染、致病、免疫等方面分子机理的认识,同时也极大地促进了新的抗病毒策略和特异药物筛选的发展。本文就目前最常见和未来有应用前景的两类小鼠实验模型作一综述。

白介素-10和一氧化氮对内毒素诱导肺泡巨噬细胞核因子-κB活化及肿瘤坏死因子释放的调节

目的 :探讨白介素 10和外源性一氧化氮 (NO)对内毒素 (L PS)诱导肺泡巨噬细胞 (PAM)核因子 κB(NFκB)活化及肿瘤坏死因子 α(TNFα)基因表达的调节 ,为临床运用提供理论依据。方法 :用支气管肺泡灌洗法收集 PAM进行培养 ,分为正常对照组、L PS组、IL 10 +L PS组和 NO+L PS组。用凝胶电泳迁移率改变分析 (EMSA)法和酶联免疫吸附 (EL ISA)法分别检测核提取物中 NFκB活性和细胞培养上清中TNFα含量。结果 :L PS组 NFκB活性和 TNFα含量在刺激后 3小时显著高于正常对照组 ;IL 10 +L PS组和 NO+L PS组 NFκB活性和 TNFα含量均显著低于 L PS组。结论 :L PS诱导 PAM的 NFκB活化 ,导致 TNFα基因表达增强 ;白介素 10和外源性 NO可抑制 NFκB活化而减少

5-羟色胺对心肌细胞内游离钙浓度的影响

目的 观察 5 -羟色胺 (5 - HT)对新生大鼠心肌细胞内游离 Ca2 + 浓度的影响 ,并探讨其作用机制 .方法 培养 SD大鼠 (1～ 3d)心肌细胞 ,应用特异性 Ca2 +荧光指示剂 Fluo- 3/AM负载细胞 ,激光共聚焦显微镜检测游离 Ca2 + 浓度 .结果 5 - HT在 10 - 6 ,10 - 5,10 - 4 m ol· L- 1 时均可升高心肌游离Ca2 + 浓度 ,且随剂量增加而加强 ;二氢吡啶类钙通道阻断剂lacidipine可部分拮抗 5 - HT的作用 ;心肌肌浆网内钙释放通道 ryanodine受体调节剂 ryanodine,在 10 - 5mol· L- 1 时也可部分拮抗 5 - HT的作用 ;用 EGTA络合细胞外液中游离Ca2 + ,5 - HT升高心肌游离 Ca2 + 作用明显减弱 ;此外 ,5 - HT二型受体 (5 - HT2 R)阻断剂赛庚定具有显著抑制 5 - HT升高心肌游离 Ca2 + 的作用 .结论 5 - HT具有升高心肌游离 Ca2 + 的作用 ,其机制可能与细胞外 Ca2 +经 5 - HT2

哮喘小鼠肺内CGRP免疫反应阳性神经纤维的变化

目的 探讨 BAL B/c小鼠哮喘后肺内 CGRP免疫阳性神经纤维分布及形态变化 .方法 成年雄性小鼠随机分为正常组和哮喘组 ,采用免疫组织化学法观察小鼠肺内 CGRP免疫反应神经纤维的变化 .结果 哮喘组肺内 CGRP免疫反应神经纤维数量及分布发生了显著变化 ,从肺内支气管到终末细支气管均有较密集的 CGRP免疫反应阳性纤维分布 ,成束走行 ,以平滑肌外层和粘膜下层为主 .此外 ,粘膜表面可见裸露的阳性纤维 .哮喘组与正常对照组比较 CGRP免疫反应阳性纤维的数量显著增加 ( P<0 .0 1) .结论 肺内 CGRP免疫反应神经纤维增生与哮喘发病密切相关 ,并可能是导致哮喘持续和发展的原因之一 .

NO对内毒素诱导的肺泡巨噬细胞核因子-κB活化和TNF-α的调节

目的 探讨一氧化氮对内毒素 (lipopolysaccharide,L PS)诱导肺泡巨噬细胞核因子 -κB(NF-κB)活化及肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因表达的调节 .方法 用支气管肺泡灌洗法收集肺泡巨噬细胞 (pulmonary alveolar Macrophages,PAM)进行培养 ,分正常对照组 ,L PS组 ,NO+L PS组 .用凝胶电泳迁移率改变分析 (EMSA)法和 EL ISA法分别检测核提取物中 NF- κB活性和细胞培养上清中 TNF- α含量 .结果 L PS组 NF-κB活性和 TNF-α含量在刺激 2 4h后明显高于正常对照组 (P<0 .0 1) ;NO+L PS组 NF-κB活性和 TNF-α含量均显著低于 L PS组 (P<0 .0 1) .结论 L PS诱导 PAM的 NF- κB活化 ,导致 TNF- α基因表达增强 ;NO可抑制 NF-κB活化而减少 TNF-

白介素-10对内毒素诱导肺泡巨噬细胞核因子-κB活化及肿瘤坏死因子释放的调节

目的 探讨白介素 - 10对内毒素 (LPS)诱导肺泡巨噬细胞核因子 -κB(NF -κB)活化及肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因表达的调节 ,为临床运用白介素 - 10提供理论依据。方法 用支气管肺泡灌洗法收集肺泡巨噬细胞 (PAM)进行培养 ,分正常对照组、LPS组、IL - 10 +LPS组。用凝胶电泳迁移率改变分析 (EMSA)法和ELISA法分别检测核提取物中NF -κB活性和细胞培养上清中TNF -α含量。结果 LPS组NF -κB活性和TNF -α含量在刺激后 0 5～ 4h明显高于正常对照组 ;IL -10 +LPS组NF -κB活性和TNF -α含量均显著低于LPS组。结论 LPS诱导PAM的NF -κB活化 ,导致TNF -α基因表达增强 ;白介素 - 10可抑制NF -κB活化而减少TNF

新技术、新方法在病理学中的应用

随着科学技术的发展，新技术、新方法层出不穷，许多新的技术和方法已广泛应用于医学各领域，如用于肿瘤基因表达谱分析的基因芯片技术、分层表达扫描（layeredexpressionscanning，LES）分析技术等。本文简要介绍显色原位杂交和荧光原位杂交技术、基因芯片技术、生物信息学技术、多光谱成像技术以及分子成像技术在病理学领域的应用。

不同类型PTCA及支架术后外周血白细胞粘附分子表达的变化

目的 研究不同类型 PTCA及支架术后外周血白细胞粘附分子表达的变化 .方法 选择 1999- 10 / 2 0 0 0 - 0 1我科住院行 PTCA并即刻支架植入术的冠心病患者 34例 .以同期行冠状动脉造影的患者 2 8例为对照组 ,分别于手术前后不同时间点采集股动脉血样 ,用 FCM直接免疫荧光法检测股动脉血中性粒细胞、单核细胞和淋巴细胞表面粘附分子 CD1 1 b表达水平 .结果 依据病变复杂程度分组 ,术前、术后 1d 3组白细胞表面粘附分子表达未见差别 .TCL 组与 TBL 组较TAL组术后 2 d和 3d中性粒细胞与单核细胞表面 CD1 1 b表达为高 (2 d P<0 .0 5 ,3d P<0 .0 5 ) ,TCL 与 TBL两组无明显差异 .术前、1d 3组白细胞表面粘附分子表达未见差别 .CGC组与 CGB组术后 2 d和 3d中性粒细胞与单核细胞表面CD1 1 b表达比 CGA更为明显 ,CGC组比 CGB组升高明显 .结论 PTCA及支架术可以激活中性粒细胞 ,导致中性粒细胞表面 CD1 1 b表达的升高 .PTCA及支架术后中性粒细胞表面 CD1 1

博莱霉素对肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖及功能的影响

目的 观察博莱霉素 (BL M)肺损伤早期肺泡 型上皮细胞 (AT )的超微结构和肺表面活性物质 (PS)中磷脂(PL)及其组分的变化 ,探讨与 AT 增殖活性及修复功能的关系 .方法 BL M气管内滴注 (4 mg· m L- 1 ,5 mg· kg- 1 )制作 2 8只大鼠肺损伤模型分为 3,7,14,2 8d组 ,分别行肺组织标本电镜组织化学染色和支气管肺泡灌洗液 (BAL F)的 PS中 PL 及其组分测定并把二者作对照分析 ,观察 PS形态组成成分的质与量的改变与 AT 结构的变化间的关系 .结果 1注药后各组均可见 PS层丧失连续、均匀绒状结构 ,脱落入肺泡腔或聚集成块现象或散落于肺泡腔内 .其中以 3d组较为明显 .钌红阳性表面层的厚度与对照组比较 ,3d组较厚 ,且染色深 ,7,14d组无明显差别 ,2 8d组较淡薄 .BAL F的PS中 PL含量趋于增加 .其中磷脂酰甘油 (PG)含量 3d组升高 ,7,14,2 8d组降低 .磷脂酰肌醇 (PI)含量变化则与此相反 .2 3,7d组可见 AT 变性坏死 ,甚至崩解 ,以 3d组较明显 .AT 增生各组均可见 ,以 7d组较明显 .板层小体 3d组数量减少 ,并呈空泡状 .7d组开始增多 ,以 14,2 8d组较为明显 .33,7d组基底膜水肿、裸露 ,甚至断裂 ,炎性细胞和间隔中的成纤维细胞等渗出到肺泡腔 .14d组可见有 AT 转化为 AT ,并逐渐伸展、粘附于裸露基底膜 ,14,2 8d?

扫描电镜观察高功率微波辐照后大鼠小肠的形态学改变

目的:利用扫描电镜观察高功率微波(HPM)辐照后大鼠小肠形态结构的变化.方法:雄性SD大鼠35只随机分为对照组和试验组,在源距4.5 m,场强100 kV/m,总脉冲数40万次微波辐射后3,24,72 h及7 d活杀大鼠,取小肠组织;甲醛固定制备光镜标本;30 mL/L戊二醛固定,进行常规扫描电镜标本制备.结果:扫描电镜观察对照组和HPM辐照后3 h小肠形态基本正常,小肠绒毛排列整齐.辐照后24～72h,主要以肠黏膜破坏、肠上皮细胞水肿和分泌物增多为主.辐照后7 d,分泌物减少,肠绒毛水肿减轻.结论:说明HPM辐照后扫描电镜观察大鼠小肠随作用时间的不同有不同程度的损伤.

主动免疫治疗复发型人乳头瘤病毒感染

目的 观察以树突细胞疫苗为主的主动免疫治疗 ,对人乳头瘤病毒感染致反复复发生殖器尖锐湿疣的临床疗效 .方法 将 39例反复复发 3次以上 ,顽固型尖锐湿疣患者 ,按知情同意原则 ,随机分为治疗组和对照组 ,两组均首先行冷冻或高频电刀治疗 ,以去除大部分疣体组织 ,随后对照组用干扰素、抗病毒药物治疗 ,治疗组则采用主动免疫治疗 .结果 治疗组复发率为 2 0 % ,复发间期平均 4wk,细胞免疫功能有显著改善 ;对照组复发率 80 % ,复发间期 7d.结论 主动免疫治疗方法对于反复复发、顽固型人乳头瘤病毒感染的生殖器尖锐湿疣有显著疗效 。

爆炸冲击波对羊肝形态的影响

目的：观察三硝基甲苯（TNT）炸弹爆炸对肝组织的病理损伤特征，为爆炸伤的临床救治提供依据。方法：将25只健康山羊围绕爆心呈扇形布放于5～30m不同距离处，用电启动引爆TNT致伤动物。严密观察动物伤情，存活至4h的以颈动脉放血方式处死后，解剖观察肝脏组织，用40mg／L多聚甲醛固定制备石蜡标本、HE染色、光镜观察其组织病理改变。结果：距爆心5m处动物全部死亡（2／2），10m处死亡3只（3／5），15m处死亡2只（2／5），20m处死亡1只（1／5），25m和30m处各4只动物无一死亡（0／4）。肝组织的损伤主要是肝细胞空泡样变性、血窦淤血、出血明显；汇管区均有不同程度淤血、出血、炎性细胞浸润及胆管上皮细胞坏死脱落；非即刻死亡动物可出现中性粒细胞浸润。结论：致伤情况与动物分布距离密切相关，距爆心越近，死亡率越高。炸弹爆炸产生的冲击波可造成肝组织明显损伤。

HBV截短core基因融合preS1基因在BCG中的表达及其免疫应答

目的:探讨HBV相关抗原在卡介苗(BCG)中的有效表达及其刺激产生的体液和细胞免疫应答效果。方法:将带有HBV截短C基因和preS1基因片段的穿梭载体转化BCG菌株,筛选重组菌,SDS-PAGE和Western blot实验分析其抗原表达特性;分别以生理盐水、BCG、BCG-pDE22、BCG-pDE22-CS1皮下注射BALB/c小鼠,进行连续抗体测定和细胞毒性T细胞杀伤实验。结果:与对照组相比,重组BCG可表达Mr为24000的新生蛋白,与CS1融合蛋白大小相符,Westernblot实验分析显示出良好的抗原结合特性;带有HBVCS1抗原基因的重组BCG免疫组抗体滴度显著升高,特异性杀伤能力更强。结论:BCG可以作为HBV相关抗原的活载体,为研制HBV新型疫苗提供了实验依据。

激光捕获显微切割技术新进展

激光捕获显微切割是一种先进的分离特定同质细胞群进行进一步研究的技术,尤其是在需要研究的细胞占样本细胞数很少时,以及需研究的细胞呈散在分布时,激光捕获显微切割的重要性尤为明显。与免疫组织化学、原位杂交技术、高通量基因分析、蛋白分析技术结合,显微切割技术显示出良好的发展前景。本文简述激光捕获显微切割的基本原理、应用以及可能的发展趋势。

爆炸冲击波致肝组织超微结构改变

目的：鉴于应激反应与器官损伤的重要关系,文章通过观察三硝基甲苯（TNT）爆炸致伤后羊肝组织超微结构的病理变化特征,为爆炸伤的临床救治提供依据。方法：将25只羊布放在离爆心5~30 m的距离上用电启动引爆TNT致伤,伤后取肝组织用30 mg/L戊二醛固定,进行常规透射电镜标本制备,观察其超微结构病理改变。结果：电镜下肝组织超微结构的病变表现为肝血窦内淤血明显,枯否细胞增生,可见中性粒细胞、淋巴细胞浸润。肝细胞溶酶体增生,髓鞘样膜结构形成,线粒体肿胀、畸形、嵴模糊不清,内质网扩张。在5 m处存活率为0,10、15和20m处分别为40%、60%和80%,25m、30m处动物存活率为100%。结论：爆炸伤后动物存在应激性肝细胞损伤。动物存活率随动物距爆心距离增加而上升。

流式细胞术外周血样品间标的方法

目的 建立一种新的用于流式细胞术 (FCM)外周血样品的间标荧光染色方法 .方法 抗凝全血 1 0 0 μL,加入一抗 5 0μL ,室温下反应 30 min,上 Q- PREP型免疫学样品制备仪 ,溶解红细胞和固定标品 ,加入荧光二抗 5 0 μL ,室温下反应 30 min,再加入 5 0 0 μL 的 PBS制成单细胞悬液 ,上流式细胞仪分析 ,同时与其他 5种常规方法进行比较 .结果 本方法与其他 5种方法的 FCM测定结果基本一致 (P>0 .0 5 ) ,而本方法样品用量少 ,操作简单 ,快速、染色时间仅需 70 m in.结论 我们建立的外周血样品间接荧光染色法 (方法 2 ) ,是外周血 FCM样品染色的理想方法 ,该方法对于 FCM在临床检验和基础研究的应用提供了技术支持 ,具有较强的实用价值 .

胃癌特异性转移因子诱导淋巴细胞表面IL-2受体表达

目的 观察胃癌特异性转移因子 (GSTF)对淋巴细胞进行诱导刺激后 ,淋巴细胞表面的 IL- 2受体 (IL- 2 R)表达的变化 .方法 应用流式细胞仪检测异硫氰基荧光素 (FITC)标记的淋巴细胞表面 IL - 2 R抗体的荧光强度 ,以观察其受刺激前后表面 IL- 2 R的表达 .结果 GSTF在与其特异性抗原共同存在下诱导刺激淋巴细胞 ,可使其表面的 IL- 2 R表达量增加 ,且 GSTF的这种作用具有抗原特异性 ,GSTF或胃癌抗原单独存在时此作用则不明显 .结论 为肿瘤特异性转移因子的活性检测建立了一种新型快速、客观科学的检测方法 ,也为今后肿瘤特异性转移因子的分离纯化及进一步研究转移因子的作用机制打下了基础 .

胃癌耐药细胞系SGC7901/VCR中P-gp与PK C同工酶亚型α的表达

目的 观察 P-糖蛋白 (P- gp)与蛋白激酶 C同工酶亚型 (PKCα)在 SGC790 1/ VCR耐药细胞系的相关表达及其功能 .方法 采用免疫细胞化学检测 P- gp在 SGC790 1/ VCR及其亲本药敏细胞 SGC790 1的表达 ;免疫荧光双标及激光共聚焦显微镜技术 (L CSM)观察 P- gp与 PKCα的相关表达 ;流式细胞仪检测细胞内罗丹明 12 3(R12 3)的荧光强度 .结果 P-gp及 PKCα在细胞膜上有共同表达部位 ,P- gp与 PKCα相关表达在 SGC790 1/ VCR 比 SGC790 1细胞明显增加 ;与SGC790 1相比 ,SGC790 1/ VCR细胞内罗丹明 12 3的荧光强度明显减弱 .结论 P- gp及 PKCα在 SGC790 1/ VCR耐药细胞系的耐药中起重要的作用 .