合浦珠母贝生殖腺及消化道GnRH及其受体的免疫组织化学研究

目的 :观察合浦珠母贝生殖腺及消化道促性腺激素释放激素 (Gonadotropin releasinghormone,GnRH)及其受体的表达及分布 ,为进一步研究GnRH对合浦珠母贝生殖和消化功能的调控提供形态学依据 .方法 :利用免疫组织化学ABC法和SP法 .结果 :在消化道的上皮细胞 ,固有层细胞和生精小管上皮细胞 ,GnRH及其受体均呈阳性反应 ,阳性反应物分布在细胞质内 ,细胞核呈阴性反应 ,卵巢间质细胞均呈弱阳性反应 .结论 :合浦珠母贝生殖腺及消化道既能分泌GnRH又能表达其受体 ,说明GnRH可能通过自分泌或旁分泌作用来调节合浦珠母贝的繁殖及消化功能 。

5-HT受体亚型在大鼠颌下腺的免疫组织化学定位及5-HT的功能研究

目的 研究探讨了大鼠颌下腺中 5 羟色胺受体亚型的分布以及 5 HT功能。方法 免疫组织化学法和免疫酶联检测法。结果 大鼠颌下腺的浆液性腺泡上皮细胞、闰管、颗粒曲管、纹状管和排泄管的管壁上皮细胞均呈 5 HT1AR和 5 HT3 R免疫反应阳性 ,阳性物质位于胞质中 ,胞核为阴性。ELISA结果显示 ,在一定浓度范围内 ,外源 5 HT能刺激离体培养的颌下腺分泌神经生长因子 (NGF) ,但是 ,当外源 5 HT浓度大于 10 7时却抑制NGF的分泌。结论 提示 5 HT对颌下腺NGF的分泌可能起双向调节的作用。

5-羟色胺及其受体在大鼠舌下腺的免疫组织化学研究

用免疫组织化学ABC法研究了大鼠舌下腺中5-羟色胺及其受体的分布情况,结果表明大鼠舌下腺的混合性腺泡的浆液性腺细胞、纹状管的上皮细胞均呈5-羟色胺免疫反应阳性.邻片双标染色发现5-羟色胺免疫反应阳性细胞也呈5-羟色胺受体免疫反应阳性,提示大鼠舌下腺有自分泌5-羟色胺之功能.

卵裂球的存活状况对冻融胚胎种植率的影响

目的:观察冻融胚胎卵裂球存活状况与冻融胚胎种植率的关系.方法:对134个冻融胚胎移植周期进行回顾性分析.根据冻融胚胎移植周期中卵裂球存活状况分为3组:A组(n=46)为所有移植胚胎卵裂球全部存活;B组(n=65)为混合移植;C组(n=23)为所有移植胚胎均有卵裂球受损.结果:在134个FET治疗周期中,共解冻胚胎642个,复苏胚胎455个.有33个周期获临床妊娠,每个冻融胚胎移植周期的临床妊娠率为24.6%.A组的临床妊娠率和种植率为34.7%和18.5%,B组的临床妊娠率和种植率为23.1%和8.2%,C组的临床妊娠率和种植率为8.7%和3.8%.A组种植率明显高于C组(P<0.05).随着移植胚胎中含100%卵裂球存活胚胎数的增加(0,1,2,3),其临床妊娠率(8.7%,15.0%,31.4%,38.9%)和种植率(3.8%,6.1%,16.2%,18.5%)均明显增加(P<0.05).结论:卵裂球的存活状况是影响冻融胚胎种植率的重要因素.

人早期胎盘SP受体的免疫组织化学研究

目的：探讨人胎盘绒毛是否存在P物质（SP）受体及其细胞定位，为其对胎盘及胚胎发育的作用提供形态学依据．方法；采用免疫组织化学ABC法．结果：绒毛两层滋养层细胞，绒毛中轴的基质细胞，毛细血管的内皮细胞，毛细血管腔内的淋巴细胞以及血岛细胞均呈SP受体免疫反应阳性，阳性物质分布于胞质和胞膜上，胞核呈阴性反应．结论：胎盘产生的SP可能在其受体介导下参与胎盘激素合成和释放、胎盘毛细血管发生、微循环以及胚胎免疫功能的调节．

人胎盘脱氢表雄酮的免疫组织化学研究

目的 观察脱氢表雄酮 (DHEA)在人胎盘的定位及其含量的周龄变化。 方法 用免疫组织化学及定量方法。 结果 人胎盘两层滋养层细胞和基质细胞均呈 DHEA免疫反应性 ,反应物质分布于胞质 ,胞核无免疫反应。在人胎盘绒毛的不同发育阶段中 ,DHEA的相对含量随周龄的增加而增加。 结论 DHEA对胚胎及胎盘的发育可能具有重要的调节功能。

间充质干细胞在防治同种异体组织器官移植免疫耐受方面的作用研究

间充质干细胞（MSCs）是一种具有自我更新和多向分化潜能的成体干细胞,可被诱导成脂肪、骨、软骨、肌肉、神经和内皮细胞等多种组织细胞,已成为再生医学、组织工程和人工器官研究的重要种子细胞。近年研究发现,MSCs具有低免疫原性和免疫调节的特性，能在体外大量扩增，在组织器官移植可抑制树突状细胞（Dc）成熟，避免和减轻宿主免疫应答，诱导特异性免疫耐受的形成，而且还能通过分泌多种细胞因子，改善造血微环境，促进移植后造血功能的重建具有一定的作用。

饥饿状态下大鼠胰腺胰高血糖素和嗜铬颗粒素A的变化—定量免疫组织化学研究

饥饿状态下大鼠胰腺胰高血糖素和嗜铬颗粒素Ａ的变化—定量免疫组织化学研究陈丽华张远强苏慧慈（第四军医大学基础部组织学胚胎学教研室）本研究用免疫组织化学ＡＢＣ法结合图象分析技术，在Ｂｏｕｉｎ液固定的常规石蜡切片上，观察了正常大鼠、饥饿１、２、３、４、５天...

用免疫组织化学方法结合图象分析技术观察饥饿状态大鼠胰腺胰高血糖素和胰岛素的变化

用免疫组织化学方法结合图象分析技术观察饥饿状态大鼠胰腺胰高血糖素和胰岛素的变化陈丽华张远强（第四军医大学基础部组织学胚胎学教研室）本研究用免疫组织化学ＡＢＣ法结合图象分析技术对饥饿状态大鼠胰岛Ａ、Ｂ细胞中胰高血糖素和胰岛素的免疫染色强度进行定量分析。...

在小鼠着床前胚胎中c-myc的表达

目的:观察小鼠着床前胚胎细胞中cmyc基因的表达,了解其对早期胚胎发育可能影响的作用.方法:采用原位杂交及免疫组织化学ABC法,分别检测小鼠着床前胚胎细胞中cmycmRNA及cmyc蛋白.结果:在小鼠2细胞、4细胞、6细胞、8细胞和囊胚期胚细胞中均检测到原癌基因cmyc转录产物的表达,cmycmRNA分布于胚细胞的胞质和胞核.免疫组织化学方法也发现,2细胞至囊胚期胚胎细胞的cmyc蛋白均呈免疫反应阳性,阳性物质分布于胞质和胞核中,胚胎透明带则呈阴性反应.结论:小鼠早期胚胎有cmyc基因表达,cmyc基因对小鼠着床前胚胎发育可能起重要调节作用.

大鼠下颌下腺卵泡刺激素、黄体生成素的分布及与促性腺激素释放激素受体的共定位研究

目的 研究卵泡刺激素 (FSH)和黄体生成素 (LH)在大鼠下颌下腺中的定位、分布及与促性腺激素释放激素受体 (GnRHR)共定位的关系。 方法 采用邻片免疫组织化学共定位方法。 结果 大鼠颌下腺浆液性腺泡上皮细胞、分泌管、排泄管及颗粒曲管上皮细胞均呈FSH和LH免疫反应阳性 ,阳性颗粒分布在细胞质内 ,细胞核阴性。邻片共定位结果显示颌下腺GnRHR免疫反应阳性细胞同样呈FSH免疫反应阳性 ,大部分的GnRHR免疫反应阳性细胞呈LH免疫反应阳性 ,小部分呈免疫反应阴性。两种免疫反应阳性物质均分布在细胞质内 ,细胞核阴性。 结论 大鼠下颌下腺浆液性腺泡上皮细胞、分泌管、排泄管和颗粒曲管上皮细胞可能以自分泌或旁分泌的GnRH调节自身合成与分泌FSH和LH。

大鼠胃壁细胞的分离及培养

目的 完成胃壁细胞分离及纯化 ,建立原代培养胃壁细胞的方法 .方法 制备大鼠翻转的胃囊用含链霉蛋白酶E的消化液注入胃囊内孵育 ,并用磁力搅拌器轻轻搅拌而制备单个的胃底腺细胞 ,Percoll梯度离心富集胃壁细胞 ,用含10 0 m L· L- 1 血清的 PBS或培养液 ,时差贴壁去除成纤维细胞 ,然后 ,将壁细胞接种于培养板中 ,培养液用无血清的 1∶ 1Harm's F- 12 / DMEM培养 ,内含胰岛素 5 mg· L- 1 ,氢化可地松 4μg· L- 1 ,转铁蛋白 5 mg· L- 1 ,硒酸钠 5μg· L- 1 ,牛血清白蛋白 2 g· L- 1 ,表皮生长因子 2 5 μg· L- 1 ,葡萄糖 1.98g· L- 1持续培养可达 1wk以上 .结果 获得的壁细胞经吖啶橙 (acridine orange,AO)鉴定纯度达 80 %以上 ,原代培养经HE染色可见壁细胞呈分散小组式生长 ,且生长状态良好 .结论 此方法适宜于大鼠胃壁细胞的分离及体外培养 ,为体外进一步研究壁细胞的功能打下基础 .

桥本甲状腺炎中TRAIL及其死亡受体DR4,DR5的表达

目的 研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及其死亡受体 (DR4 ,DR5 )在桥本甲状腺炎发病机制及病理改变中的作用及意义 .方法 采用免疫组织化学方法和图像分析 ,检测 18例桥本甲状腺炎患者甲状腺标本中TRAIL,DR4和 DR5的表达及分布 .结果 桥本甲状腺炎组甲状腺滤泡细胞 TRAIL ,DR4和 DR5免疫反应产物的相对含量分别为 (0 .0 95± 0 .0 18) ,(0 .0 80± 0 .0 2 0 ) ,(0 .0 84±0 .0 15 ) ;结节性甲状腺肿组甲状腺滤泡细胞 TRAIL、DR4和DR5免疫反应产物的相对含量分别为 (0 .0 4 5± 0 .0 14 ) ,(0 .0 4 1± 0 .0 2 0 ) ,(0 .0 4 2± 0 .0 16 ) .桥本甲状腺炎组以上 3种免疫反应产物的相对含量均显著高于结节性甲状腺肿组 (P<0 .0 5 ) .桥本甲状腺炎病理改变越重 ,甲状腺滤泡细胞TRAIL ,DR4和 DR5免疫染色越强 ;浸润淋巴细胞中TRAIL,DR4和 DR5免疫染色较弱或呈阴性 .结论 TRAIL ,DR4和 DR5在桥本甲状腺炎中的甲状腺滤泡呈特征性分布的高表达 ,病理改变越重 ,表达越强 ;提示甲状腺滤泡细胞通过自身表达 TRAIL,DR4和 DR5 ,以细胞凋亡形式破坏甲状腺滤泡细胞 .

5-羟色胺对培养胃底平滑肌细胞内游离钙动员的影响

目的 研究 5 - HT诱导胃底平滑肌细胞内钙动员的机制 .方法 采用 Ca2 +指示剂 Fluo- 3/ AM作为细胞内钙离子的荧光探针负载培养的胃底平滑肌细胞 ,共聚焦技术检测细胞内钙荧光强度的变化 .结果 基础状态下 SFSMC[Ca2 + ]i 荧光强度 (FI)为 2 6 4± 15 ,5 - HT 10μmol· L- 1 使荧光强度的变化 ΔFI为 16 .5± 2 .6 ;细胞外无钙时 ,5 - HT升高[Ca2 + ]作用被减弱 ,但除去细胞外钙 ,并使用内罗啶 (ryan-odine)孵育后 ,5 - HT 不再引起荧光强度的变化 ;10μmol· L- 1 米安舍林 (mianserin)可部分拮抗 5 - HT升高[Ca2 + ]i 的作用 ,赛更定 (cyprohetadine)不能抑制 5 - HT升高的胞内钙 ;Mn92 0 2和拉西地平 (lacidipine)均能完全抑制 5 -HT升高 [Ca2 + ]i 的作用 .结论 5 - HT可通过促进外钙内流及钙池 (SR)释放使 [Ca2 + ]i 升高 ;在胃底平滑肌 5 - HT升高胞内钙部分通过 5 - HT2 受体 ,而不是通过 5 - HT1 C受体 ;5 -羟色胺通过 L型钙通道促外钙内流 ;二氢吡啶类钙拮抗剂能通过阻滞 L 型钙通道 ,而完全抑制 5 -

人granzyme B基因在HeLa细胞中的表达

目的 构建携带人 granzym e B基因的真核表达载体 ,并将其在 He L a细胞中表达 .方法 用反转录 PCR获取人 granzyme B全长 c DNA序列 ,将其活性型序列克隆进 pc D-NA3重组表达质粒 .脂质体法转染 He L a细胞 ,间接免疫荧光检测目的蛋白表达 ,HE染色观察其对转染 He L a细胞形态的影响 .结果 成功获得了野生型 granzym e B c DNA,构建了编码活性型 granzyme B的真核表达载体 pc DNA3- G.转染He L a细胞后观察到目的蛋白表达 ,转染细胞形态发生变化 ,出现多核大细胞及固缩小细胞 .结论 活性型 granzyme B哺乳动物表达系统的建立 ,为进一步研究 granzym e

大鼠胰腺促性腺激素释放激素受体mRNA的原位杂交

目的 研究大鼠胰腺促性腺激素释放激素 (Gn RH)受体 m RNA的存在及细胞定位 .方法 采用原位杂交组织化学法 .结果 胰脏的外分泌部腺上皮细胞、胰导管上皮细胞及内分泌部胰岛细胞内均可检测到较强的 Gn RH受体m RNA杂交信号 .杂交阳性信号物质均分布在胞质内 ,胞核呈阴性 .结论 大鼠胰脏内、外分泌部均能合成 Gn RH受体 .Gn RH也是一种消化激素 ,它由胰脏自身合成 ,又作用于胰脏 ,可能参与胰脏内。

大鼠延髓和脊髓背角的PKCγ阳性神经元向孤束核投射

目的 观察延髓和脊髓背角内蛋白激酶 Cγ亚单位(PKCγ)阳性神经元向孤束核的投射 .方法 荧光金 (FG)逆行追踪与 PKCγ的免疫荧光组织化学染色相结合的双标记技术 .结果 PKCγ阳性神经元主要分布于延髓和脊髓背角的 , , 层及脊髓的外侧脊核 ;将 FG注入孤束核后 ,在延髓和脊髓背角的 , , 层及脊髓的外侧脊核内可见 FG标记神经元 ;部分 FG标记神经元呈 PKCγ阳性 ,FG/ PKCγ双标神经元也主要见于延髓和脊髓背角的 , , 层及脊髓的外侧脊核 .结论 延髓和脊髓背角的

不同浓度葡萄糖对MG63细胞株TRAIL表达的影响

目的观察不同浓度葡萄糖环境下人成骨肉瘤MG63细胞株肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及其护骨素(OPG)、护骨素配体(OPGL)的表达,探讨糖尿病骨质疏松症的发病机制.方法用不同浓度葡萄糖(5.5,16.7,33.3mmol/L)分别刺激培养的MG63细胞24h,RT-PCR法检测TRAIL,OPG,OPGLmRNA的表达,免疫组织化学法检测MG63细胞中TRAIL的表达及分布.结果葡萄糖对MG63细胞中TRAIL,OPGLmRNA的表达,均按照对照组、5.5mmol/L组、16.7mmol/L组、33.3mmol/L组顺序递增(P<0.05),OPGmRNA的表达按照此顺序递减(P<0.05).33.3mmol/L组TRAILmRNA的水平明显高于对照组[(1.004±0.070)vs(0.740±0.023),P<0.05],TRAIL免疫反应阳性物质密度也明显高于对照组.结论高糖环境可能导致成骨细胞中TRAIL和OPGL表达增多,OPG的表达减少,这可能是糖尿病骨质疏松症的重要发病机制之一.