NDRG2在人胚胎组织中的表达分布特点

本文旨在研究NDRG2在不同胎龄人胚胎组织中的表达水平及细胞定位。利用RT-PCR和Western blot研究NDRG2 mRNA和蛋白在胎心、肺、肝和肾中的表达水平,免疫组织化学分析NDRG2蛋白在多种胚胎组织中的分布特点。结果表明,NDRG2在胚胎组织中的表达随胚龄的延长而增加。NDRG2 mRNA和蛋白在胎心和肺中的变化一致；在胎肝中mRNA表达低而蛋白表达高,在胎肾中则相反。NDRG2蛋白阳性反应产物存在于细胞胞浆,见于小肠绒毛上皮细胞、结肠上皮细胞、皮肤表层细胞及毛囊、肺内小气道内衬上皮细胞、肝细胞、心肌细胞、胸腺小体、肾小管上皮细胞。结果提示,NDRG2蛋白可能不是一个组织特异性蛋白,并在组织和器官的形成中起作用。

大鼠消化道促性腺激素释放激素受体的免疫组织化学研究

目的探讨大鼠消化道是否存在ＧｎＲＨ受体及其定位。方法采用兔抗ＧｎＲＨ抗独特型抗体的免疫组织化学ＡＢＣ法。结果胃底腺壁细胞、胃小凹上皮细胞及肌间神经丛的副交感神经节细胞呈ＧｎＲＨ受体免疫反应性。三段小肠绒毛上皮细胞、潘氏细胞、十二指肠腺上皮细胞以及小肠肌间神经丛副交感神经节细胞，均呈较强的ＧｎＲＨ受体免疫反应性。在盲肠、结肠和直肠，粘膜上皮细胞、肠腺上皮细胞及肌间神经丛呈ＧｎＲＨ受体免疫反应性。阳性物质均分布在胞质内，胞核呈阴性。结论大鼠消化道广泛分布有ＧｎＲＨ受体，其分布模式与先前ＧｎＲＨ及ＧｎＲＨ－ｍＲＮＡ的相类似。说明胃肠道的一些细胞分泌的ＧｎＲＨ可能以自分泌或旁分泌的方式参与消化功能的调节。

5－羟色胺及其受体在大鼠颌下腺的免疫组织化学定位

用５－ＨＴ抗体和５－ＨＴ抗独特型抗体的免疫组织化学反应，研究了５－ＨＴ及５－ＨＴ受体在大鼠颌下腺的分布。雄性大鼠颌下腺的浆液性腺泡的腺上皮细胞、各级导管的上皮细胞、颌下腺内副交感神经节细胞、毛细血管及小血管的内皮细胞均呈５－ＨＴ和５－ＨＴ受体免疫反应阳性。但是，雌性大鼠的颌下腺只有一些导管的上皮细胞呈５－ＨＴ和５－ＨＴ受体免疫反应阳性。以上结果提示，５－ＨＴ及５－ＨＴ受体在雄性大鼠颌下腺的分布比在雌性大鼠的广泛，大鼠颌下腺内所有５－ＨＴ阳性细胞都可能具有自分泌５－ＨＴ的功能。

大鼠颌下腺GnRH及其受体的免疫组织化学双标记和年龄变化

用免疫组织化学法，以邻片双标记技术研究了大鼠颌下腺内ＧｎＲＨ及ＧｎＲＨ受体的分布；并对不同发育阶段大鼠颌下腺内ＧｎＲＨ及其受体进行了原位定量分析。结果表明，雄性成年大鼠颌下腺浆液性腺泡的腺上皮细胞及各级导管上皮细胞既呈ＧｎＲＨ又呈ＧｎＲＨ受体免疫反应性。６０ｄ龄内，大鼠颌下腺的ＧｎＲＨ及其受体的含量随年龄的增长而增多，６０ｄ龄～９０ｄ龄，其含量相对恒定。以上结果提示，ＧｎＲＨ可能以自分泌的方式参与了颌下腺的发育成熟过程及分泌功能的调节。

GnRH类似物对大鼠回肠组织胰高血糖素释放的影响

目的 :研究促性腺激素释放激素 (GnRH)类似物 (阿拉瑞林 )对大鼠回肠L细胞释放胰高血糖素的影响。方法 :应用放射免疫分析法对体内和体外大鼠回肠进行观察。结果 :大鼠回肠灌注GnRH类似物后 ,血中及肠液中胰高血糖素的含量较对照组明显升高 ;体外孵育大鼠回肠组织后 ,在一定浓度范围内 ,孵育液中胰高血糖素含量随GnRH类似物浓度升高而升高 ;当浓度高于一定范围时 ,则随浓度升高而降低。GnRH类似物浓度为 1 .0× 1 0 - 4mol/L时孵育液中胰高血糖素含量是升高的。结论 :GnRH可能对大鼠回肠L细胞分泌胰高血糖素呈现双向调节作用。但是GnRH类似物为 1 .0× 1 0 - 4mol/L ,不论是体内还是体外 。

大鼠消化道促性腺激素释放激素受体和胰高血糖素的免疫组织化学

目的 :观察大鼠胃肠道胰高血糖素免疫反应阳性细胞 (EG细胞 )分布情况及大鼠回肠促性腺激素释放激素(GnRH)受体和高血糖素的共存关系。方法 :免疫组化SABC法。结果 :EG细胞散在分布于大鼠回肠和结肠的腺上皮细胞间 ,阳性物质分布于细胞质。大鼠胃、十二指肠、空肠未见EG细胞分布。回肠邻片免疫染色结果显示EG细胞呈GnRH受体免疫反应阳性。结论 :大鼠胃肠道内只有回肠和结肠存在胰高血糖素细胞。回肠内的胰高血糖素细胞可能存在GnRH受体 ,GnRH可能以自分泌或旁分泌的方式对肠道内EG细胞所分泌的胰高血糖素进行调节。

八肽胆囊收缩素在猪、大鼠和豚鼠肠道的免疫组织化学定位和分布

实验采用ＡＢＣ免疫组织化学方法研究了八肽胆囊收缩素样免疫反应（ＣＣＫ－８－ＩＲ）物质在猪、大鼠和豚鼠肠道的定位与分布，并用相邻切片免疫双标记法观察了它与５－羟色胺（５－ＨＴ）的关系。结果表明，ＣＣＫ－８－ＩＲ细胞主要位于肠腺的底部，少数位于绒毛上皮。节段性分布上，在猪可见于从十二指肠到结肠全长的粘膜，大鼠和豚鼠ＣＣＫ－８－ＩＲ细胞则见于从十二指肠至回肠的粘膜，但均以十二指肠密度最高；免疫双标记法证实，在三种动物肠道中均有ＣＣＫ－８与５－ＨＴ共存的现象。

豚鼠胃和小肠5-羟色胺及其受体免疫组织化学双标记研究

实验用邻片免疫组织化学双标记法,对豚鼠胃和小肠5-羟色胺(5-HT)及5-HT受体进行双标记研究.结果显示,胃底腺壁细胞,小肠的绒毛上皮细胞和小肠腺上皮细胞均呈5-HT受体阳性,5-HT阳性内分泌细胞散在分布于5-HT受体阳性的细胞间,一些5-HT阳性的内分泌细胞同样呈5-HT受体阳性.胃及小肠肌层的平滑肌细胞呈5-HT阴性反应但呈5-HT受体阳性反应,肌间神经丛的神经纤维呈5-HT阳性,神经元胞体则呈5-HT受体阳性,结果提示,豚鼠胃、肠内分泌细胞产生的5-HT主要以旁分泌方式对胃的壁细胞,小肠的绒毛上皮细胞的小肠腺上皮细胞起调节作用.一些胃肠5-HT阳性的内分泌细胞有自分泌5-HT功能.肌间神经丛产生的5-HT可能以旁分泌方式对平滑肌细胞起调节作用,以旁分泌或自分泌方式对节细胞起调节作用.

大鼠胃肠胰系统中降钙素基因相关肽的免疫组织化学定位

用免疫组织化学ABC法,对降钙素基因相关肽(CGRP)在大鼠胃肠胰系统中的分布进行了研究,结果表明:整个胃肠胰系统都有CGRP免疫反应阳性的神经纤维分布,在胃窦部和胰岛还分布有CGRP免疫反应阳性的内分泌细胞,这些结果说明,胃肠膜系统中的CGRP有两种来源,即来源于神经和内分泌细胞.文内还对CGRP在胃肠胰系统中的可能功能进行了讨论.

人胎盘绒毛调节肽的免疫组织化学研究

本文用免疫金银法对人胎盘绒毛进行促性腺激素释放激素(GnRH)、生长抑素(SS)和β-内啡肽(β-EP)的免疫组织化学定位及定量研究。GnRH和SS的免疫反应阳性物质,主要分布于人胎盘绒毛细胞滋养层细胞和个别绒毛的合体滋养层细胞。β-EP的免疫反应阳性物质,则主要分布于绒毛的合体滋养层细胞和个别绒毛的细胞滋养层细胞,提示胎盘绒毛的细胞滋养层细胞和合体滋养层细胞都能产生以上3种调节肽。但是GnRH和SS主要产生于细胞滋养层细胞,β-EP则主要产生于合体滋养层细胞。GnRH和β-EP的相对含量都随胎盘的周龄而改变,而且两者的含量呈负相关性,提示它们可能有相互抑制作用。

培养的大鼠胃平滑肌细胞GnRH受体的免疫组织化学及原位杂交研究

目的 观察培养的大鼠胃平滑肌细胞中是否能表达GnRH受体 ,为进一步研究GnRH对胃平滑肌细胞的功能提供形态学依据。 方法 采用免疫组织化学SABC和原位杂交方法。 结果 培养的大鼠胃平滑肌细胞呈GnRH受体免疫反应阳性 ,阳性物质分布于细胞浆和细胞膜上 ,细胞核呈阴性反应。培养的胃平滑肌细胞同样含有GnRH受体mRNA杂交信号 ,信号物质亦分布于细胞浆内 ,细胞核呈阴性反应。 结论 胃平滑肌细胞能自身表达GnRH受体 。

用免疫组织化学法检测自制NPY抗体的特异性和敏感性

本实验用戊二醛作偶联剂,将神经肽Y(NPY)偶联到牛血清白蛋白(BSA),制成NPY-BSA免疫原复合物。用它免疫新西兰大白兔,成功地制备了兔抗NPY抗血清。经免疫组織化学检测,其最高使用效价为1:1000～1:2000。替代试验和吸收试验均呈阴性反应。该抗血清能显示胃肠血管壁和脑底动脉管壁的神经纤维以及大鼠脑内的神经纤维及神经元胞体。它们的分布特点与进口NPY所显示的相一致。以上结果表明,该抗血清是对NPY特异性的且有较高使用效价。

胰抑素在人、猪和豚鼠胰腺分布的免疫组织化学研究

胰抑素(pancreastatin,PS)是一种具有抑制胰岛分泌作用的新肽。本研究用ABC免疫染色法,在Bouin液固定的常规石蜡切片上,研究了胰抑素在豚鼠,猪和人胰腺内的定位和分布,并用相邻切片双标记法,观察了它与胰岛素的共存关系。结果发现,在人胰腺胰抑素样免疫反应(PLI)细胞主要分布于胰岛的周边部。在猪和豚鼠,大部分胰岛细胞呈阳性胰抑素样免疫反应。用相邻薄切片免疫染色技术证明,猪和豚鼠的PLI细胞主要是B细胞。在3个种属胰腺外分泌部的导管和腺泡等处,也均见有PLI细胞分布,在豚鼠胰腺尤为多见。本文对胰抑素在3个种属胰腺不同分布方式的意义进行了讨论。

大鼠睾丸和附睾中钙调素免疫组织化学定位的研究

用免疫组织化学ＡＢＣ法，观察了钙调素在大鼠睾丸和附睾的定位与分布。结果表明，钙调素免疫反应产物分布在精母细胞、精子细胞和精子中，而精原细胞、Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞和Ｌｅｙｄｉｇ细胞呈阴性反应。钙调素免疫反应既见于胞质中，也见于胞核中。相邻曲细精管钙调素免疫反应强度呈明显的不均一性。不同发生阶段的生精细胞间免疫反应强度也存在差异。在附睾，钙调素免疫反应见于附睾管尾段主细胞顶端胞质内，偶见于主细胞的基底部。附睾管体段和尾段腔内精子对钙调素抗体呈强阳性反应。本研究提示，钙调素可能与精子发生和／或精子的某些功能有密切关系。

人胎盘蜕膜细胞5-羟色胺及其受体的免疫组织化学及原位杂交研究

目的 观察 5 -羟色胺 (5 - HT)及其受体在人胎盘的定位及其含量的周龄变化。 方法 采用免疫组织化学、原位杂交及图像分析技术。 结果 人胎盘蜕膜细胞呈 5 - HT及其受体免疫反应性 ,两种阳性反应物质均分布于胞质 ,胞核为阴性。蜕膜细胞同样含有 5 - HT1 A受体 m RNA杂交信号。蜕膜细胞 5 - HT及其受体免疫反应产物的相对含量随妊娠周龄的增加而增加。 结论 人胎盘蜕膜细胞既能产生 5 - HT,又能表达 5 - HT受体。说明 5 -HT对蜕膜细胞可能具有自调节作用。

胰抑素在豚鼠、猪和人胃肠道的免疫组织化学定位与分布

胰抑素是近年来新发现的一个具有抑制胰岛素分泌作用的多肽,广泛分布于神经组织和内分泌系统中。作者采用ABC免疫染色法及金标免疫电镜技术研究了胰抑素在豚鼠、猪和人胃肠道的定位和分布,并用ABC结合IGSS双重染色技术及相邻切片法观察了胰抑素与其它调节肽和5-HT的关系。结果发现,胰抑素样免疫反应(PLI)细胞分布于胃窦部和肠道全长的粘膜中,在猪还可见于胃底和胃体部,但以十二指肠、胃窦部和空肠上部为多,直肠次之,其他节段较少。PLI细胞主要位于胃腺和肠腺底部,偶可见于绒毛上皮中。细胞呈三角形、卵圆形或烧瓶状。有的细胞顶端达上皮游离面。少部分细胞有基底突向周周延伸。免疫电镜结果显示:所有观察到的内分泌细胞的分泌颗粒上均见有金颗粒附着。在猪十二指肠,免疫双标记染色和相邻切片法分别证实了大部分PLI细胞内含有5-HT、CCK-8或M-ENK等免疫阳性物质。少数PLI细胞内含有生长抑素(SS)阳性颗粒。用同样方法观察到,豚鼠肠道内胰抑素与5-HT也有共存现象。结果提示,胰抑素广泛分布于哺乳类动物的胃肠道。它可能是胃肠内分泌细胞的一个新的标志物,在胃肠功能调节上,胰抑素也可能发挥着重要作用。

大鼠颌下腺及其离体培养细胞脱氢表雄酮(DHEA)的免疫组织化学定位

用免疫组织化学ABC法 ,研究了颌下腺及无血清培养的颌下腺上皮细胞DHEA的定位。结果显示 ,大鼠颌下腺的浆液性腺泡的上皮细胞及各级导管上皮细胞均呈DHEA免疫反应阳性 ,无血清培养腺上皮细胞也呈DHEA免疫反应阳性 ,阳性物质分布于胞质 ,胞核呈阴性反应。此结果提示 :大鼠颌下腺能自身合成DHEA ,DHEA对消化功能可能具有重要的调节作用。

IAPP与SS在大鼠和家兔背根神经节细胞内分布与共存的免疫组织化学研究

应用免疫组织化学ABC法,观察到在大鼠和家兔背根神经节内存在胰岛淀粉样多肽免疫阳性反应细胞.用相邻镜像邻片免疫双标记技术,证实胰岛淀粉样多肽存在于背根神经节内那些生长抑素免疫反应阳性的细胞中,说明胰岛淀粉样多肽在大鼠和家兔背根神经节内与生长抑素共存.实验结果为胰岛淀粉样多肽的胰腺外研究提供了新的资料,为进一步研究背根神经节内生物活性物质间的关系及生理作用提供了形态学证据.

胰岛淀粉样多肽和甲硫氨酸-脑啡肽在家兔和大鼠背根神经节细胞内共存的免疫组织化学研究

为进一步探讨背根神经节细胞间生物活性物质内的关系，用免疫组织化学ＡＢＣ法，观察到家兔和大鼠背根神经节细胞内有胰岛淀粉样多肽免疫反应。用相邻镜像邻片免疫双标记技术，证实甲硫氨酸－脑啡肽免疫反应的细胞内同时含有胰岛淀粉样多肽免疫反应物质。胰岛淀粉样多肽与甲硫氨酸－脑啡肽在哺乳类动物背根神经节细胞内的共存结果，为进一步探讨背根神经节细胞内生物活性物质间的关系提供了形态学证据，并为胰岛淀粉样多肽的胰腺外研究提供了新的资料。

人早期胎盘绒毛运动神经诱向因子1及其受体的免疫组织化学定位

为了解人胎盘绒毛是否存在运动神经诱向因子１（ＭＮＴＦ１）及其可能的功能意义，本实验用ＭＮＴＦ１单克隆抗体及抗独特型单克隆抗体在人早期胎盘绒毛石蜡切片上进行免疫组织化学反应，对人早期胎盘绒毛的ＭＮＴＦ１及其受体进行定位。结果显示，胎盘绒毛的细胞滋养层细胞、合体滋养层细胞和基质细胞均呈ＭＮＴＦ１强免疫反应，ＭＮＴＦ１样免疫反应物质分布在胞质内，胞核为阴性。在相邻切片上，以上３种细胞同样显示为ＭＮＴＦ１受体免疫反应，ＭＮＴＦ１受体样免疫反应物质也分布在细胞质内，胞核无免疫反应。以上结果显示，人胎盘绒毛可能会产生ＭＮＴＦ１，而且其产生的ＭＮＴＦ１可能通过自分泌和旁分泌方式对胎盘绒毛起局部调节作用。