美国人类受试者使用的历史

所有关于研究伦理的国际法典及实际中的关于人体受试者研究领域的各国立法及规则都表明了保护主义的姿态。他们的主旨是保护个人不受伤害和剥削。这种保护主义姿态有其重要的历史原因 ,起草这些文件具有这样的目的 :保证像被纳粹医生—研究者犯下的罪行。试验药物Thalidomide引发的灾难及Tuskegee梅毒研究对伦理道德的亵渎永远不会重演。近些年来社会对临床研究的理解已发生了戏剧性转变。如经AIDS积极分子努力的结果 ,人们已以宽容和有益的心态广泛接受临床试验。虽然这种姿态的转变已产生了在指导进行临床研究方面的政策及实践某些重要的改善 ,但人们必须认识到 ,这种新的接受正像先前的过度保护主义一样的错误 ,其应该维护一个平衡的比例。我们的政策应反映出鼓励符合伦理学的研究的要求 ,同时要保持必要的防范以保护受试者的权益。

小鼠原代淋巴细胞增殖过程中RNA编辑酶ADAR1的变化

目的 探索淋巴细胞增殖时RNA编辑酶ADAR1的变化。方法 ①ADAR1底物的合成 ,利用含有α -tropomyosin基因的质粒pBluescriptSK(+/- ) ,体外转录的方法 ,合成双链RNA底物 ,掺入α - 3 2 P -ATP标记 ;②分离小鼠脾脏和淋巴结内的淋巴细胞 ,加入IL - 2 /ConA刺激淋巴细胞增殖 ,于不同的时间点收取细胞 ,裂解后用合成好的底物测定ADAR1的活性 ;③应用薄层色谱 ,观察细胞裂解物作用后的RNA中有多少腺嘌呤核苷变成了次黄嘌呤核苷 ;④用MTT法测定细胞的增殖率。结果 加入IL - 2 /ConA的淋巴细胞与未加入的比较 ,前者于 30h起ADAR1的活性升高 ,72h达高峰 ,其变化与细胞增殖曲线相一致。结论 首次发现淋巴细胞增殖过程中ADAR1的活性升高 。

突触前代谢型谷氨酸受体调节神经递质的释放

谷氨酸通过激活离子型受体(iGluR)介导快速兴奋性突触传递,参与脑内几乎所有生理过程。谷氨酸过量释放可导致与脑缺血、缺氧及变性疾病有关的兴奋毒作用,最终引起神经元的死亡。代谢型谷氨酸受体(mGluRs)是一个与G-蛋白偶联的受体家族,分三型共八个亚型。其中Ⅱ和Ⅲ型mGluRs主要位于突触前,发挥对谷氨酸释放的负反馈调节。Ⅲ型mGluRs中的mGluR,位于谷氨酸能末梢突触前膜的活性区,发挥自身受体的作用,对正常情况下突触传递过程的谷氨酸释放进行负反馈调节;而属于Ⅱ型的mGluR2及属于Ⅲ型的mGluR4和mGluR8,则位于远离突触前膜活性区的外突触区,因而正常突触传递过程中释放的谷氨酸量不能激活它们。只有在突触传递增强的情况下才被激活,抑制递质的释放。另外,mGluRs还分布在GABA能纤维末梢,通过突触前机制抑制GABA的释放。对突触前膜受体尤其是位于外突触区的mGluRs受体的研究,将有可能开发出理想的工具药,从而预防和阻止谷氨酸过量释放引起的神经毒及神经元的死亡。

VEGF-C MMP9及TIMP-1在宫颈癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF-C)、基质金属蛋白酶MMP9及其抑制物TIMP-1在宫颈癌组织中的表达,及与宫颈癌临床病理特征的关系。方法:采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接染色法(SP法),检测62例宫颈癌Ⅰ、Ⅱ期患者癌组织中VEGF-C、MMP9及其抑制物TIMP-1的表达,并进行统计学分析。结果:VEGF-C、MMP9及其抑制物TIMP-1在宫颈鳞癌Ⅰ、Ⅱ期均为高表达。VEGF-C在宫颈癌Ⅰ、Ⅱ期和有淋巴转移者的表达率分别为73.8%、85%、100%。MMP9为66.7%、75%、93.3%。TIMP-1为64.3%、60%、66.7%,VEGF-C、MMP9及TIMP-1在浸润间质≥1/2的表达高于<1/2(P<0.05)者;其表达与浸润深度及淋巴结转移相关。结论:VEGF-C与宫颈癌的侵袭和转移密切相关;MMP9及其抑制物TIMP-1与肿瘤的浸润及侵袭转移有关,VEGF-C、MMP9及TIMP-1在宫颈癌转移中发挥了重要作用。

美洲钩虫及十二指肠钩虫细胞色素C氧化酶1基因测序

目的：比较美洲钩虫及十二指肠钩虫线粒体细胞色素Ｃ氧化酶１（ＣＯ１）基因序列，确定两种钩虫间ＣＯ１基因差异。方法：现场采集钩虫成虫样本，蛋白酶Ｋ消化抽提线粒体基因组ＤＮＡ，ＰＣＲ方法扩增ＣＯ１基因，ＤＮＡ测序及分析。结果：ＰＣＲ扩增获得约７００ｂｐ美洲钩虫及十二指肠钩虫ＣＯ１基因片段，其序列比较显示两种钩虫ＣＯ１基因同源性达８９．７％，存在特定的核苷酸差异。结论：ＣＯ１基因可作为鉴别两种人体钩虫虫种标记性基因。

大鼠侧脑室注射δ-阿片受体拮抗剂naltrindole或激动剂TAN-67对急性脑缺血的影响

本文旨在探讨δ-阿片受体(δ-opioid receptor,DOR)在急性脑缺血/再灌注损伤中的作用。除假手术组外,其余各组均用大脑中动脉线栓法(middle cerebral artery occlusion,MCAO)制备大鼠右侧局灶性缺血/再灌注模型,缺血1h再灌注24h。于缺血前30min侧脑室分别注射DOR拮抗剂naltrindole(20nmol,50nmol,100nmol)、激动剂TAN-67(30nmol,60nmol,200nmol)或人工脑脊液,用Longa5分制评分标准对大鼠进行神经功能评分,焦油紫(cresyl violet,CV)染色和图像分析处理系统测量梗死灶大小,Western blot检测纹状体DOR蛋白的表达。结果表明,60nmol TAN-67显著减小梗死体积(P<0.05),提高神经功能缺损评分(P<0.05),约60kDa的DOR蛋白表达也倾向于上升(P>0.05);100nmol的naltrindole加重脑缺血损伤,约60kDa的DOR蛋白表达下降(P<0.05)。上述结果提示,激动DOR对急性缺血/再灌注大鼠的脑损伤有保护作用,而阻断DOR则加重其损伤。

大脑可塑性和儿童认知能力研究进展对我国学校体育改革的启示

以大脑认知开发为着眼点的教育改革是国际上新近出现的一个值得关注的现象。本文全面介绍和分析了脑科学、认知能力和体育活动关系研究方面的新动态、重点关注的问题和主要结论,包括:人的大脑结构和功能是变化发展的,教育对大脑可塑性影响很大;依据大脑可塑性理论,儿童的认知能力是发展变化的;体育活动对大脑的发展和认知能力发展有积极的作用。这些研究将对我国的教育改革、体育活动在教育中的地位和价值带来一定的影响。

急性髓系白血病患者骨髓细胞相关分子标志物表达研究

本研究旨在探讨急性髓系白血病患者骨髓细胞相关分子标志物(PTEN、mTOR、NF-kB、CD44、PI3K)表达。选取20例住院患者,抽取骨髓液,先涂片检查骨髓白血病细胞百分比,并分临床缓解(9例)与未缓解(11例)两组。再将剩余的骨髓液以石蜡包埋,常规切片,免疫组化技术检测PTEN、mTOR、NF-kB、CD44、PI3K表达。结果表明:光学显微镜观察缓解组与未缓解组PTEN、mTOR、NF-kB、CD44、PI3K阳性细胞表达率分别为33.3、33.3、77.8、22.2、0与63.6,18.2,90.9,63.6,0。经统计学处理,PTEN和CD44两组比较,有统计学意义(P<0.05),荧光表达强度与图像分析也得出同样的研究结果。结论表明:急性白血病骨髓细胞PTEN、CD44高表达可作为急性髓系白血病难治诊断和预后判定的重要参考指标。

重组γ-干扰素作用人Tenons囊成纤维细胞体外研究

目的 体外研究人重组γ－干扰素对人Ｔｅｎｏｎｓ囊成纤维细胞作用。方法 以人Ｔｅｎｏｎｓ囊成纤维细胞作为实验对象，分别加入０．１～１０＾６ Ｕ／ｍｌ人重组γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）、０．００１～１０ｍｇ／Ｌ丝裂霉素（ＭＭＣ）、０．１～１０３ｍｇ／Ｌ５－氟尿嘧啶（５－Ｆｕ）孵育４８ｈ，然后以ＭＴＴ法进行检测。结果 高浓度和低浓度ＩＦＮ－γ实验组ＯＤ值较对照组升高（Ｐ〈０．０５）。

肾缺血再灌注损伤及其保护的研究进展

缺血再灌注损伤是急性肾衰竭的常见原因,也是肾脏移植术后影响移植物早期功能恢复和长期存活的主要因素之一。本文综述了肾缺血再灌注损伤的机制以及内源性和外源性防治肾缺血再灌注损伤的机制研究概况。

大脑能量代谢和神经传递动力学的NMR测定方法

能量代谢和神经传递是生命的基石,它们与所有神经性和精神性疾病都有互为因果的关系,因此其研究对于脑功能的认识具有重要意义.正常情况下,葡萄糖代谢是大脑能量的主要来源,但定量描述大脑内糖类物质与神经传递动力学参数的研究方法是该领域内的一个瓶颈问题.核磁共振(NMR)方法以其特有的优势迅速成为该研究领域内的重要的研究工具.本文重点旨在对大脑中能量代谢和神经传递动力学进行研究的NMR技术、方法及其应用进行较详细的介绍.

大鼠脑内δ-阿片受体在累加电针抗缺血性脑损伤中的作用

目的探讨δ-阿片受体(DOR)在累加电针抗脑缺血损伤中的作用。方法大鼠随机分为7组:假手术组、单纯脑缺血组、脑缺血+电针组、脑缺血+假电针组、脑缺血+TAN-67(DOR激动剂)组、脑缺血+naltrindole(DOR拮抗剂)组、脑缺血+naltrindole+电针组。除假手术组外,其余各组均用大脑中动脉线栓法致大鼠局部脑缺血再灌注,缺血1 h再灌7 d。于缺血前30 min及再灌第2、4、5、6、7天,侧脑室注射naltrindole或TAN-67;于再灌开始及第2、4、5、6、7天,电针"水沟"和"内关"穴30 min。再灌后24 h评测神经功能缺损程度,再灌第7天后检测脑梗死体积。结果脑缺血+电针组或脑缺血+TAN-67组与单纯脑缺血组相比梗死体积减小、神经功能缺损减轻(P<0.05);脑缺血+naltrindole组与单纯脑缺血组相比梗死体积增大、神经功能缺损加剧(P<0.05);脑缺血+naltrindole+电针组与累加电针组相比,梗死体积增大、神经功能缺损评分加剧(P<0.05);假电针组与单纯脑缺血组相比梗死体积、神经功能缺损评分无显著性差异(P>0.05)。结论DOR拮抗剂naltrindole能够翻转累加电针对缺血/再灌大鼠的神经保护作用,提示其活动可能是累加电针抗脑缺血损伤中的重要机制。

大鼠胃的主细胞分离纯化培养及功能测定

目的 通过建立分离纯化大鼠胃的主细胞培养系统 ,为进一步深入研究主细胞的生理调节和病理变化提供新的方法。方法 采用链霉蛋白酶的消化、淘析法分离纯化大鼠胃的主细胞。主细胞的纯化率在光镜下根据细胞的大小、结构和颜色计算。用血红蛋白法测定胃蛋白酶。在主细胞的短期培养系统中 ,主细胞的最佳功能状态通过比较胆囊收缩素 (CCK 8)、卡巴可林和异丙肾上腺素在不同培养时间和刺激状态下 ,主细胞分泌胃蛋白酶原的量而定。结果 在泵速为 37ml/min收集分离的主细胞化率为 83%～ 92 %。细胞的存活率 >95 %。CCK 810 -5mol/L、卡巴可林 10 -4 mol/L和异丙肾上腺素 10 -5mol/L刺激 30min后 ,主细胞分泌胃蛋白原的量在培养 2 4h明显高于培养 6、12、36h(P <0 .0 5 )。在主细胞培养 2 4h后 ,CCK 810 -5mol/L、卡巴可林 10 -4 mol/L和异丙肾上腺素 10 -5mol/L刺激主细胞 45min时胃蛋白酶原的分泌量明显高于刺激 30、6 0、90min(P <0 0 5 )。卡巴可林EC50 为 2× 10 -7mol/L ,在浓度为 10 -5mol/L时最大分泌量是对照组的 1.82倍 (P <0 .0 5 )。CCK 8的EC50 为 10 -8mol/L ,在浓度为 10 -5mol/L时最大分泌量是对照组的 1.5 2倍 (P <0 .0 5 )。结论 具有良好功能的分离纯化大鼠胃的主细胞培养系统已被建立?

青蒿琥酯与氯喹和槟榔碱配伍对体外培养的布氏锥虫杀灭效果研究

目的研究青蒿琥酯与其它药物配伍对体外培养锥虫是否具有杀灭效果。方法采用单剂量青蒿琥酯及与氯喹和槟榔碱不同药物浓度配伍对体外连续培养的布氏锥虫杀灭效果观察。结果单剂量青蒿琥酯所需有效剂量大作用时间长,而与氯喹配伍两种药物比例为1:1浓度在0.03mg/ml条件下,体外培养的锥虫48小时全部被杀死,随配伍药物剂量增加杀灭锥虫的时间缩短。结论大剂量的青蒿琥酯对体外培养的锥虫具有杀灭作用,但与氯喹配伍使用其效果更佳。

IRAK-M在TLR9信号通路诱导小鼠肝组织淋巴细胞浸润中的作用

目的探讨固有免疫信号通路分子IRAK-M在TLR9信号诱导肝组织淋巴细胞浸润过程中的作用。方法应用野生型B6小鼠及IRAK-M基因敲除小鼠,腹腔注射TLR9配体CpG寡核苷酸激活肝内TLR9信号系统,提取小鼠肝内浸润淋巴细胞,并采用流式细胞术检测肝内浸润不同淋巴细胞群的比率及细胞因子的表达情况。结果 CpG ODN激活TLR9信号通路后,IRAK-M基因敲除小鼠肝内浸润CD4+和CD8+T细胞比率较野生型B6小鼠显著增加[CD4+:(22.50±0.73)% vs. (20.03±0.75)%;CD8+:(17.83±0.67)%vs.(15.55±0.75)%;P均<0.05];肝内淋巴细胞细胞因子白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-α)合成增加[IL-6:(1.91±0.26)% vs. (0.93±0.12)%;TNF-α:(13.23±1.23)% vs. (8.16±0.66)%;P均<0.01]。结论 IRAK-M具有负调节肝内TLR9信号系统的作用。

放疗剂量测量中相空间数据格式的标准与转换

相空间数据是放疗剂量测量的蒙特卡洛(Monte Carlo,MC)模拟中某一截面或某些截面处各种射线的类型、位置坐标、方向和能量等信息。相空间数据的使用是这类MC模拟的重要辅助手段。本文旨在介绍放疗剂量测量的MC模拟中相空间数据的概念和通用的国际原子能机构(IAEA)格式标准,并提出一种基于常用MC工具软件Geant4、将excel格式相空间文件转换为IAEA标准格式(phsp格式)的方法,以解决使用IAEA相空间数据格式标准,尤其是使用Geant4的研究人员在采用excel格式相空间数据时遇到的问题。通过引入一个存储并推送相空间数据的类,可以成功实现excel格式相空间文件到IAEA标准格式的转换。

erbB-2表达抑制与表皮生长因子刺激对信号转导与转录激活分子及细胞周期蛋白D1的影响

目的：观察胃癌细胞内原癌基因ｅｒｂＢ２表达降低前后信号转导与转录激活分子（ＳＴＡＴ１）和细胞周期蛋白Ｄ１（ｃｙｃｌｉｎＤ１）对表皮生长因子（ＥＧＦ）刺激的反应性。方法：采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ检测ｅｒｂＢ２表达下调前后及ＥＧＦ刺激前后ＳＴＡＴ１和ｃｙｃｌｉｎＤ１水平。结果：ｅｒｂＢ２表达抑制对ＳＴＡＴ１的ＥＧＦ反应性无显著影响；ｅｒｂＢ２表达下调后ｃｙｃｌｉｎＤ１的ＥＧＦ可诱导性显著降低。结论：ｅｒｂＢ２表达降低可抑制ＥＧＦ对ｃｙｃｌｉｎＤ１的诱导效应。

卵巢癌细胞浸润性的研究

目的：研究卵巢癌细胞的浸润性。方法：采用膜浸润培养系统（ＭｅｍｂｒａｎｅＩｎｖａ－ｓｉｏｎＣｕｌｔｕｒｅＳｙｓｔｅｍ．ＭＩＣＳ）及重建基底膜模式（ＲｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆＢａｓｅｍｅｎｔＭｅｍｂｒａｎｅ）定量研究卵巢癌细胞的浸润性。用细胞外介质胶（ｍｅｔｒｉｇｅｌ）涂布微孔碳素膜构成重建基底膜形成酷似活体中癌细胞所处的环境，以真实定量地反映癌细胞的浸润力。结果：用以试验的６种卵巢癌细胞株Ｂｉｘｌｅｒ、Ｂｉｘ３、Ｂｉｘ２ＮＭＢ．Ｈｅｙ、ＤＫ２ＮＭＡ及ＳＫＯＶ－３浸润基底膜的能力不同，Ｂｉｘｌｅｒ浸润能力最强，为１０．４４％。Ｈｅｙ次之，为８％，Ｂｉｘ３最弱。仅为０．６３±０．０８％。卵巢癌细胞株的浸润性与尿激酶类纤溶激活因子（ｕＰＡ）的基因转录表达有关，与克隆刺激因子（ＣＳＦ－１）的基因转录表达高度相关，ｒ＝０．Ｐ＜０．０１。以外源性ＣＳＦ－１处理癌细胞。则ｕＰＡＲＮＡ转录及该细胞的浸润性均增加２倍，说明卵巢癌细胞的浸润性受ｕＰＡ介导及ＣＳＦ－１调控。外源性ｕＰＡ抗体处理使卵巢癌细胞株的浸润能力阻断５０％。结论：卵巢癌细胞具有分泌ｕＰＡ的能力，是其具有浸润性的重要机制，但不是全部机制。