氯吡格雷个体差异的遗传药理学研究进展

氯吡格雷是临床上常用的抗血小板药物,疗效显著但是存在明显的个体差异。如何更多了解可能引起氯吡格雷抵抗的因素,从而提高氯吡格雷的疗效,降低不良心血管事件,是目前临床工作者关心的问题。本文综述了影响氯吡格雷药代动力学和药效学的遗传因素,旨在为氯吡格雷临床个体化给药提供一定的参考依据。

肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)免疫疗法在实体瘤治疗中的研究进展

基于肿瘤浸润淋巴细胞(tumor-infiltrating lymphocytes,TILs)的过继性细胞疗法(adoptive cell therapy,ACT)是继免疫检查抑制剂(immune checkpoint inhibitors,ICIs)之后的癌症治疗新型策略之一,其在多种实体瘤患者中实现完全缓解。但是,与传统药物的体内生物学行为不同,作为一种“活细胞”药物,回输TILs药物在体内具有独特并且复杂的分布、归巢、迁移以及增殖动力学过程,并与患者疗效与安全性密切相关。本文综述近年来TILs疗法在实体瘤中研究进展,包括TILs的药动学研究、在多种实体瘤治疗中药效研究、影响药效因素和相关机制研究等,以期为TILs药物开发以及临床转化提供参考。

刺五加果肉化学成分的研究(Ⅱ)

应用多种色谱技术进行分离纯化,从刺五加果肉水提取物中分离得到12个化合物,经理化性质和波谱分析鉴定其结构分别为:(-)-3,4-二香草基四氢呋喃(1)、桧脂素(2)、5α,8α-桥二氧麦角甾-6,22-双烯-3-醇(3)、刺五加苷A(4)、刺五加苷B(5)、尿嘧啶(6)、2-呋喃甲酸(7)、琥珀酸(8)、Phthalic acid bis-(2-ethyl-hex-yl)ester(9)、硬脂酸甘油酯(10)、正二十四烷酸(11)和正三十八烷(12)。其中化合物1、3、6、7、8和9为首次从本植物中分得。

华法林的基因组学研究进展

华法林是临床上广泛使用的香豆素类口服抗凝血药,其狭窄的抗凝治疗指数范围和抗凝不当所致的并发症一直困扰着临床医生,如何合理使用已经成为一个难题。近年来随着分子生物学的快速发展,研究发现药动学和药效学多个相关基因的多态性造成了个体差异,影响了华法林的使用剂量。本文综述了药物基因组学研究在华法林使用中的国内外最新进展,为华法林个体化使用提供参考依据。

群体药代动力学用于西罗莫司个体化给药研究进展

西罗莫司(免疫抑制剂)是一种新型免疫抑制剂,在临床上用于预防实体器官移植后的排斥反应。本文将影响其吸收、分布、消除的各种因素,如人口学特征、合并用药、血液生化指标、CYP3A5基因多态性、肝肾功能等,对西罗莫司群体药代动力学(PPK)参数的影响进行了综述。

HPLC法测定血浆中伊立替康及其代谢产物SN-38、SN-38G浓度及方法学研究

目的:建立同时测定晚期结直肠癌患者血浆中伊立替康(CPT-11)及其活性代谢产物7-乙基-10-羟基喜树碱(SN-38)和非活性代谢产物的SN-38葡萄糖醛酸化(SN-38G)的浓度测定方法,并进行方法学验证。方法:以Kromacil C_(18)为色谱柱,甲醇-水(含5 mmol·L^(-1)KH_2PO_3,p H=3.0)=55∶45为流动相,激发波长λ_(ex)=385 nm、发射波长λ_(em)=535 nm。结果:CPT-11在20~5000 ng·m L^(-1)范围内线性良好,SN-38在2~500 ng·m L^(-1)范围内线性良好,r值均为0.999。CPT-11和SN-38的提取回收率分别为53.26%~59.86%和66.83%~71.30%。CPT-11低、中、高三种浓度的日间和日内精密度均小于6.32%;SN-38低、中、高三种浓度的日间和日内精密度均小于7.02%。血浆样品反复冻融3次、室温放置8 h、进样器中放置24 h及长期冻融,稳定性均良好,样品浓度均未见显著改变。结论:使用高效液相色谱-荧光定量检测法简便、准确、灵敏,适用于晚期结直肠癌患者血浆中伊立替康及其代谢产物SN-38、SN-38G的血药浓度测定。

基因与临床因素对华法林剂量的影响研究

目的:探讨中国汉族人群相关基因多态性以及患者临床因素对华法林剂量的影响。方法:采用限制性片段长度多态性技术和碱基淬灭探针技术,检测197名心脏机械瓣膜置换术后患者的VKORC1rs9923231、CYP2C9rs1057910以及CYP4F2rs2108622单核苷酸多态性,结合患者临床特征,分析对华法林剂量的影响。结果:VKORC1rs9923231、CYP2C9rs1057910和CYP4F2rs2108622基因多态性及年龄、体质量对华法林剂量的影响在统计学上有显著性差异(P<0.05),并解释了45.2%的华法林剂量差异。结论:中国汉族人群VKORC1rs9923231、CYP2C9rs1057910和CYP4F2rs2108622以及体质量和年龄都是影响华法林剂量的因素。

肾移植病人西罗莫司血药浓度/剂量比与CYP3A5基因多态性的关系

目的:研究肾移植术后病人CYP3A5基因多态性与免疫抑制剂西罗莫司临床个体化给药剂量的关系。方法:采用聚合酶链反应(PCR)和限制性内切片段多态性(RFLP)的方法对105例健康受试者和50例肾移植术后病人进行CYP3A5基因分型。使用高效液相色谱(HPLC)测定病人的西罗莫司血药浓度。比较不同基因型之间的西罗莫司的血药浓度与每千克体重的剂量(C/D)比值的差异。结果:健康受试者和肾移植病人的CYP3A5 A6986G SNPs,CYP3A5*3的发生频率分别为72.9％和71％,差异无显著意义(P>0.05)。肾移植*1/*3型病人的C/D比值(362±s108)μg·L^(-1)per mg·kg^(-1)和*3/*3型病人的C/D比值(375±123)μg·L^(-1)per mg·kg^(-1)差异无显著意义(P>0.05),但两者C/D值均明显高于*1/*1型病人(199±65)μxg·L^(-1)per mg·kg^(-1),差异具有显著意义(P<0.05)。结论:肾移植病人的CYP3A5基因多态性与西罗莫司血药浓度具有相关性,*1/*3型和*3/*3型病人拟取得相似的血药浓度要比*1/*1型病人服用更低剂量的西罗莫司。研究肾移植病人的CYP3A5基因型,有利于肾移植病人术后西罗莫司个体化用药方案的制定。

高效液相荧光检测法同时测定人体内5-羟色胺、5-羟吲哚乙酸

目的建立高效液相荧光检测法(HPLC-FLD)来同时测定人体血浆、血小板、脑脊液中5-羟色胺、5-羟吲哚乙酸的含量。方法样本经预处理后用高效液相色谱仪进行测定。色谱柱为KromasilC18(250mm×4.6mm,7μm),流动相:甲醇和0.1mol/L磷酸二氢钾(15:85),流速1.5ml/min,Ex=254.nm,EM=338nm,柱温为35℃。结果5-羟色胺和5-羟吲哚乙酸得到良好分离,线性范围5-羟色胺为1.1328～1160ng/ml,5-羟吲哚乙酸为0.9765～2000ng/ml,日内RSD分别为0.743%和1.470%,日间RSD分别为1.310%和2.043%;5-羟色胺和5-羟吲哚乙酸的平均回收率:血浆中分别为98.32%、98.50%,血小板中分别为91.41%、88.05%,脑脊液中分别为92.84%、93.51%。结论该法具有取样量少、简单、快速、准确、灵敏等特点,可作为临床检测的常规方法。

华法林剂量与国际标准化比率监测

目的探讨影响华法林抗凝治疗剂量的可能因素，以便更正确地使用华法林。方法服用华法林的患者196例，观察华法林治疗起始剂量、维持剂量、国际标准化比率（INR）监测及出血等不良反应。结果多元线性回归分析提示年龄和体重与华法林维持剂量存在相关性（分别为r=0.307，P〈0.01和r=0．276，P〈0.01；两者一起r=0.390，P〈0.01）。而体表面积和身高与华法林维持剂量无相关性，回归模型解释了约15％的剂量差异。目标INR在1.5—3．0时，华法林维持剂量为0.62-6.25mg／d，平均为（2.03±0．90）mg／d。其中维持剂量≤2．0mg／d的患者占63.3％，维持剂量在2．1～2．5mg／d的患者占17．3％，维持剂量在2．6～3．5mg／d的患者占10-2％，维持剂量〉3．5mg／d的患者占9．2％。INR达到1．5需3-12d，稳定于1.5-3．0需要8—40d，中位时间为21d。结论华法林临床剂量使用个体差异大，与年龄、体重相关性较强，尚有85％的剂量差异在回归模型中无法解释，这可能与饮食、合并用药以及遗传等因素有关。

CYP450氧化还原酶基因多态性的临床研究进展

CYP450氧化还原酶(POR)是所有肝微粒体的细胞色素P450氧化酶(CYP450)的唯一电子供体,负责甾醇激素、胆固醇、胆酸、维生素以及临床上超过80%药物的氧化代谢。POR本身具有高度的多态性,国内外报道显示POR基因的突变可使其本身活性或它与CYP450酶之间的相互作用发生改变,致使它与临床某些疾病的发生及某些药物体内代谢活性的改变密切相关。而POR基因多态性与CYP介导的药物代谢之间存在着CYP酶种类及底物的特异性,且国内相关研究相对较少。因此,我们通过对近年来POR基因多态性的临床研究进展进行综述,为今后相关研究及临床药物的个体化治疗提供参考。

2002-2003年我院3种抗癫痫药物血药浓度监测结果分析

采用荧光偏振免疫分析法(FPIA)监测2002年至2003年3种抗癫痫药物血药浓度。结果表明,药物的毒副作用直接影响药物的使用量,其中苯妥英钠毒副作用最大,过量的检出率最高,受检例数最少。提示监测血药浓度是实施个体化给药的重要手段之一,具有重要的临床意义。

HPLC法测定阿莫西林/舒巴坦的含量

目的:建立同时测定阿莫西林和舒巴坦含量的方法,为进一步考察在不同输液中阿莫西林和舒巴坦稳定性提供检测依据。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为C18柱(250mm×4.6mm,7μm);流动相:5mmol/L四丁基氢氧化铵溶液(1mol/L磷酸溶液调pH=5.0):乙腈(65∶35),流速:1.0ml/min,检测波长为230nm。结果:阿莫西林和舒巴坦分别在5.0～160μg/mL和2.5～80μg/mL检测浓度范围范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.9999和0.9997,平均回收率为95.5%和95.4%,RSD%分别为1.26和1.18。结论:该方法能简便、快速、准确地同时测定输液中阿莫西林和舒巴坦的含量。

HPLC法测定注射用头孢地嗪钠的含量

目的 为注射用头孢地嗪钠与输液配伍的稳定性研究建立其含量测定的反相高效液相色谱方法.方法 采用HPLC-UV法测定,Kromasil C18柱（4.6mm×250mm,5μm）为分析柱,50mmol·L^ -1磷酸二氢钠溶液-5mmol·L^-1辛烷磺酸钠溶液- 乙腈（75：15：10）,流速为1.0mL·min-1,检测波长为262nm,茶碱为内标.结果 头孢地嗪钠在10～160μ g·mL^-1 检测浓度范围内呈良好线性关系（r=0.9999）,平均回收率为（98.69±1.40） %;日内差异RSD≤1.7%（n=5）,日间差异RSD≤1.7% （n=5）.结论 该方法操作简便、灵敏、准确,适用于头孢地嗪钠的含量的检测.

造血干细胞移植患者他克莫司的群体药动学研究

本研究建立了造血干细胞移植患者他克莫司的群体药动学(population pharmacokinetics,PPK)模型,估算其群体药动学参数,为造血干细胞移植患者他克莫司的个体化给药提供参考。研究过程中,回顾性收集了68例造血干细胞移植患者671份常规监测的血药浓度数据,用NONMEM软件的一级估算法(first-order estimation,FO)对数据进行分析,用自举法和数据分割法对模型稳定性和可信度进行验证。基本模型选择一级吸收和一级消除的单室模型,定量考察了人口学特征、血生化和血常规指标、合用药物,及原发疾病、术后时间、移植类型、供体来源等因素对药动学参数的影响,同时对药动学参数的周期间变异(inter-occasion variability,IOV)也进行了考察。他克莫司清除率(CL)、分布容积(V)、绝对生物利用度(F)的群体典型值分别为12.1L·h-1、686L和42.2%,这些参数的个体间变异分别为23.5%、96.4%和43.8%,浓度观测值与预测值之间的残余误差为3.03ng·mL-1;研究发现,肝药酶抑制剂(INHI)、术后时间(POD)、年龄(AGE)对清除率(CL)有显著影响,血红蛋白(HGB)浓度对分布容积(V)有显著影响;CL、V和F的IOV分别为22.2%、6.23%和30.3%。本研究结果对他克莫司在造血干细胞移植患者中实现个体化给药具有重要应用价值。

腹膜透析相关腹膜炎患者万古霉素腹腔内药物浓度与血药浓度的相关性研究

目的建立腹膜透析液中万古霉素浓度测定的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)检测方法,考察腹膜透析相关性腹膜炎(PDAP)患者腹膜透析液(以下简称腹透液)和血清万古霉素浓度的相关性,以期为临床PDAP患者万古霉素腹腔给药和浓度监测提供参考。方法采集我院18例PDAP患者万古霉素腹腔给药后(1 g,q4d~q6d)的腹透液样本,利用经方法学验证的LC-MS/MS方法测定腹透液万古霉素浓度,并通过Pearson相关性分析法进一步评价腹透液中药物浓度和血药浓度的关系。结果建立的腹透液万古霉素LC-MS/MS测定方法在0.1~16μg·mL^(-1)内线性关系良好,专属性、准确度、精密度等均符合要求。PDAP患者腹腔给与万古霉素后24、48、72、96和120 h的质量浓度分别为(5.99±3.33)、(4.08±2.13)、(3.40±1.23),(2.58±1.56)和(2.05±1.15)μg·mL^(-1);各时间点腹透液中药物浓度与血药浓度呈显著正相关关系。结论建立的LC-MS/MS方法适用于临床腹透液样本的万古霉素检测,万古霉素血药浓度能够在一定程度上反映腹透液中药物浓度并指导临床合理用药。

循环肿瘤DNA突变检测方法研究进展

循环肿瘤DNA(Circulating Tumor DNA,ctDNA)含有肿瘤的遗传信息,与肿瘤组织具有高度的一致性,可代替肿瘤组织用于肿瘤的早期诊断,预后监测和药物疗效监测,是一种具有良好临床应用前景的液体活检标记物。但血液中的ctDNA片段化程度高,含量稀少,且与野生型DNA混合存在(约1%甚至更低),并会随着患者肿瘤分期等情况动态变化,造成了ctDNA检测困难,需要高灵敏度高特异性的突变检测方法,才能够从大量的野生型DNA中检测出微量突变型ctDNA。目前,灵敏度和特异性能够满足ctDNA检测需求的方法主要有扩增阻滞突变系统PCR(Amplification Refractory Mutation System PCR,ARMS-PCR)、钳制PCR(Clamping-PCR)、数字化PCR(Digital-PCR)、西格诺公司的质谱分辨技术(Sequenom UltraseekTM)和高通量测序技术。本文对这些方法的原理、特点、最新进展和应用前景进行了综述,为研究人员选择合适的ctDNA检测方法提供理论依据。

中国健康志愿者头孢地尼干混悬剂生物等效性研究

目的评价国产头孢地尼干混悬剂与参比头孢地尼胶囊的生物等效性,评价其临床疗效。方法 24名健康男性志愿者交叉口服100 mg的头孢地尼干混悬剂(试验制剂)和头孢地尼胶囊(参比制剂,全泽复),采用UPLC-MS/MS测定血浆中头孢地尼药物浓度。采用WinNonlin 6.3软件处理得到药动学参数并进行统计学分析。结果头孢地尼干混悬剂及参比胶囊的主要药动学参数分别为:ρ_(max)分别为(1 034.78±358.17),(969.71±297.38)ng·mL^(-1);t_(max)分别为(2.98±0.60),(3.44±0.70)h;AUC_(0-12)分别为(4 911.24±1 675.30),(4 522.35±1 600.13)h·ng·mL^(-1);AUC_(0-∞)分别为(5 026.24±1 735.32),(4 680.69±1 699.93)h·ng·mL^(-1);t_(1/2)分别为(1.71±0.23),(1.79±0.39)h。ρ_(max),AUC_(0-12),AUC_(0-∞)的90%置信区间分别为95.6%~115.3%,99.9%~117.2%,99.0%~116.0%。结论头孢地尼干混悬剂与参比头孢地尼胶囊具有生物等效性。

羧酸酯酶1和2基因多态性在药物代谢中的研究进展

人类羧酸酯酶属于α/β水解酶家族,负责许多内源性和外源性化合物的水解,广泛位于药物代谢的主要组织,例如肝脏和小肠等。人羧酸酯酶主要有羧酸酯酶1(CES1)和2(CES2)。单核苷酸多态性(SNPs)对药物代谢酶的表达和(或)活性有重要的影响,这可能解释部分药物反应的个体差异。本篇综述主要介绍了由CES1和CES2单核苷酸多态性导致的CES酶多态性。对于含有酯键的药物,一些有意义的SNP可能影响CES酶的功能从而影响其药动学,进而对其药理和毒理作用发挥重要影响。