蔬菜抗旱性鉴定研究进展

干旱是长期无雨或少雨导致土壤或空气干燥的现象,给蔬菜生产造成极大的经济损失。筛选蔬菜抗旱材料,选育抗旱品种是解决这一问题的有效途径。本文综述了国内外蔬菜抗旱性鉴定的方法与指标、抗旱性的综合评价方法,分析了目前蔬菜抗旱性鉴定存在的问题,探讨了未来研究的方向。

姜四倍体离体诱导及其形态学分析

以丛生芽为材料,在离体培养条件下比较了秋水仙素不同浓度、不同处理时间诱导姜体细胞染色体加倍的效果。结果表明:以0.20%秋水仙素液体培养基处理8d的诱导效果最好,诱变率和成活率分别达到了42.86%和70.00%。根尖染色体压片检查发现,四倍体染色体数为2n=4x=44,二倍体对照为2n=2x=22。四倍体与二倍体相比表现出植株高大,茎秆变粗,叶片长、宽、厚均增大,叶片下表皮气孔密度减小,气孔和保卫细胞增大,保卫细胞内叶绿体数增加等特征,其中气孔密度及保卫细胞内的叶绿体数可作为鉴别四倍体与二倍体的重要性状。

芸薹属蔬菜抽薹性状遗传机理研究进展

植株在生长初期就通过低温春化,引起花芽分化及抽薹开花,以致植株不能形成叶球的现象称为先期抽薹,这给蔬菜生产造成了很大损失。选育耐先期抽薹品种是解决这一问题的最有效途径,掌握抽薹性状的遗传机理有助于耐先期抽薹品种的选育。本文对国内外有关芸薹属蔬菜抽薹性状的遗传规律、分子标记及抽薹分子机理的研究进行了综述,并结合目前的研究现状提出了今后的研究方向。

分类方法在蔬菜种质资源研究中的应用

对应用于蔬菜种质资源分类中的各种不同方法——形态学方法、地理方法、数量学方法、花粉学方法、细胞学方法、遗传学方法和分子生物学技术等进行了概述。

油菜素内酯在蔬菜上的应用研究进展

油菜素内酯作为一种新型的植物激素,同其他的五大类植物激素一样能够对植物的生长发育起重要的调节控制作用,近30多年来的研究取得了很大的进展。从油菜素内酯的生理作用及近年来的研究成果来概述其在蔬菜生产中的应用,以期为蔬菜生产中的应用提供参考。

不同甘蓝类蔬菜材料对根肿病的抗性鉴定及分子标记辅助选择

根肿病是十字花科蔬菜主要病害之一,严重影响十字花科蔬菜生产,选育抗病品种是防治根肿病的有效途径之一。本试验采用灌根法苗期人工接种根肿菌4号生理小种,对29份甘蓝类蔬菜材料进行根肿病抗性鉴定;并利用与抗病基因CRb连锁的SCAR标记(OA)和与抗病基因CRb^(Kato)连锁的SSR标记(B0902)对人工接种鉴定表现免疫、高抗、抗病、耐病的材料进行分子标记辅助鉴定。结果表明:人工接种鉴定筛选出8份抗病材料,其中Cr7表现免疫,绿抗9号、青莲甘蓝表现高抗,S148、Cr5、Cr6表现抗病,S146、S296表现耐病。分子标记鉴定结果显示,4份材料含有CRb基因,8份材料含有CRb^(Kato)基因,验证了这8份抗病材料的真实性;其中Cr5、绿抗9号、青莲甘蓝、S296含有CRb基因和CRb^(Kato)基因2个抗性位点,可将这4份材料直接应用到甘蓝抗根肿病育种中。

蔬菜中硝酸盐积累的遗传特性

蔬菜中硝酸盐的过量积累给人类的健康带来了危害。本文探讨了不同蔬菜中硝酸盐积累的差异性以及蔬菜中硝酸盐积累的遗传行为规律,为降低蔬菜中硝酸盐含量的育种工作提供参考。

结球甘蓝对根肿病的抗性鉴定与评价

分别利用室内人工接种鉴定、田间人工接种鉴定、田间自然诱发鉴定3种方法,对19份甘蓝材料的抗性进行鉴定,并进行了综合评价,结果表明:‘日本甘蓝’、‘皱叶甘蓝’、‘大楠木’3份材料对根肿病表现为抗病,可以作为抗病育种的材料.3份材料‘天津圆球甘蓝’、‘北黑大平头’、‘小楠木’对根肿病表现为感病.

不同培养料对鸡腿菇胞外酶活性影响的研究

实验设计了6个不同鸡腿菇培养基配方,分别提取其在菌丝半袋、菌丝满袋、原基、幼菇、成熟5个生长阶段粗酶液,通过测定纤维素酶、漆酶和淀粉酶活性,初步揭示出不同培养基对鸡腿菇纤维素酶、漆酶、淀粉酶活力的影响及规律.结果表明:不同培养基配方对各种酶的活力大小有影响,但各种酶活性在不同基质中变化规律一致,基质成分对酶活性的变化规律无影响.

4个不同地区十字花科根肿病菌生理小种鉴定及甘蓝新组合的抗性鉴定

采用Willimas鉴别系统对采自重庆市涪陵区、四川省成都市新都区、云南省昆明市嵩明县、四川省攀枝花市盐边县的4份根肿病菌菌样进行生理小种鉴定,结果表明:4个地区生理小种分别为4号,11号,7号,7号.利用田间自然鉴定法在4号为优势小种的重庆市涪陵区发病区对79个甘蓝新组合进行了抗性鉴定,其中表现高抗、抗病、耐病和感病的分别有8,20,20,31个.从中选择8个具有抗性且经济性状较优良的组合进行室内接种鉴定,结果表明:甘蓝新组合GZ04,GZ09,GZ40,GZ76和GZ80为耐病杂种组合,GZ03,GZ19和GZ78为抗病杂种组合,其中GZ78表现为高抗.

芋芽继代培养中激素、水解乳蛋白、碳源的调节研究

在继代培养中，为提高芋组培苗的增殖效果，降低组培苗生产成本，获得健壮的芋头组培苗。实验从激素、水解乳蛋白、碳源三个方面研究了其对芋组培芽继代培养的调节作用。结果表明：BA4．0mg／L＋NAA0．1～0．2,mg／L的激素配比有利于芋芽的增殖，但当NAA的浓度为0．1mg／L时，可大大抑制多次继代后根的发生。不同浓度水解乳蛋白（LH）对芋芽的分化率无显著差异，但添加LH可提高芋芽的生长速度，当LH为500mg／L时，芋苗最高。蔗糖、食用白糖、葡萄糖对芋芽的增殖和生根效果较好，麦芽糖稍差；从降低生产成本度考虑，可选用食用白糖作为芋芽继代培养的碳源。

果实特异性RNAi介导的Lcy基因沉默来增加番茄中番茄红素的含量

根据GenBank中番茄的番茄红素β-环化酶(Lcy)基因序列和八氢番茄红素去饱和酶基因(Pds)启动子序列设计特异引物从番茄基因组DNA中分别扩增出了Lcy基因的高度保守的长302bp的DNA片段和长1790的Pds启动子片段。根据RNAi的原理,将Lcy基因的DNA片段以正反两个方向通过一段内含子序列连接在一起形成RNAi片段,将该片段与Pds启动子一起插入到pVCT2020的表达载体中,通过农杆菌介导的方法转化番茄,获得转基因植株5棵,PCR检测证实外源片段已成功导入番茄基因组中。收获转色期后20d左右的完全成熟的番茄果实提取番茄红素进行含量分析,结果显示转基因番茄果实中番茄红素的含量极大的增加了。上述结果表明通过RNAi果实特异性的抑制类胡萝卜素代谢途径中生物合成酶基因的表达能够极大的增加番茄果实中番茄红素的含量。这为通过基因工程手段提高番茄果实中的营养价值提供了参考。

十字花科作物根肿病生防菌研究进展

根肿病严重危害油菜、白菜、甘蓝、芥菜在内的十字花科作物,因此研究一种有效的防治方法以降低该病害的发生是非常重要的。十字花科作物根肿病的病原菌—根肿菌能以休眠孢子的形式长期存在于土壤中,一旦环境条件适宜即可萌发并迅速传播。生防菌是从拮抗病原菌和诱导植物抗性的角度寻求防治病害的一种方法。作者首先对获得十字花科作物根肿病生防菌的方法进行阐述,重点总结了生防菌的来源和筛选的方法。为了更好地利用生防菌,又简要综述了生防菌菌株的分类鉴定、发酵及拮抗物质等方面的研究进展,分析了施用生防菌的方式和时间。并指出了目前存在的问题及开发应用的前景。

利用Cre/lox定位重组系统获得无选择标记GFP转基因烟草

【目的】利用Cre/lox系统具有的特异重组特性,以绿色荧光蛋白GFP为目的基因,获得无选择标记的GFP转基因烟草。【方法】将Bar基因表达盒置于两个同向lox位点之间并与GFP基因表达盒融合后获得相应植物表达载体,转化烟草后获得抗除草剂Basta的GFP转基因植株。GFP转基因植株叶盘二次转化导入重组酶Cre基因后,实现与GFP基因连锁的Bar基因表达盒剔除,剔除Bar基因的植株开花后自交使重组酶Cre基因分离,获得无选择标记的GFP转基因烟草。【结果】将含Bar基因表达盒以及GFP基因表达盒的植物表达载体转化烟草Wisconsin38后获得了抗除草剂Basta以及GFP荧光表达的转基因植株。随机抽取5株转基因植株二次转化导入Cre基因,所获得的再生植株叶盘进行Basta的抗性检测,绝大多数单株对应叶盘在含8mg·L-1PPT(phosphinothricin)的筛选培养基上无法再生死亡,删除效率在76%～100%。对Bar基因删除后区域片段进行克隆测序分析显示,Bar基因表达盒已经被精确删除。Bar基因删除植株开花后自交,获得的自交后代进行NPTⅡ抗性检测,NPTⅡ敏感植株分子检测显示均只含有GFP基因。【结论】利用Cre/lox系统获得烟草无选择标记的转基因植物是稳定可行的,可广泛应用于其它无选择标记转基因植物的培育。

芥菜cDNA-AFLP反应体系的优化

选用红叶芥和青叶大头菜为试材,对cDNA-AFLP反应体系中的几个关键影响因素进行优化,建立了适合于芥菜的cDNA-AFLP反应体系.结果表明:在20μL PCR反应体系中,预扩增产物稀释30倍,Mg2+浓度1.2mmol/L,dNTP浓度0.2 mmol/L,TaqDNA聚合酶加入0.8 U时,选扩的效果最佳.

食荚型豌豆组织培养和植株再生研究

以豌豆子叶、茎、真叶为材料进行外植体筛选及组织培养研究,试验结果表明:豌豆带节茎段是最佳试验材料;在MS附加1 mg/L BA和1 mg/L NAA培养基中,愈伤组织诱导率达100%,愈伤组织在分化培养基中未分化出芽;带节茎段在MS附加2～3 mg/L BA和0.1 mg/L NAA培养基中,腋芽和丛生芽产生率达100%,芽增殖系数3以上;不定芽在MS附加3 mg/L NAA上生根率86%;试管苗移栽成活率85%左右.

人工老化芥菜种子活力与生理指标相关性研究

以6个不同的芥菜品种为试验材料,采用人工加速老化的方法获得不同老化程度的种子,对其种子活力和生理变化特性进行研究.结果表明:随着种子老化时间的延长,不同品种的芥菜种子发芽率、活力指数都逐渐降低,直至死亡;可溶性糖含量、可溶性蛋白含量和SOD活性也逐渐降低,并与活力指数呈正相关;而相对电导率和MDA含量却逐渐增加,且与发芽率及活力指数呈负相关关系.

红叶芥低温胁迫下苯丙氨酸解氨酶活性及其基因的克隆表达

用8℃低温处理红叶芥四叶期植株,在低温处理的52 h内分别取样6次,取样后分别提取叶片总RNA,再利用RT-PCR克隆得到红叶芥PAL基因开放阅读框内1 908 bp片段,核苷酸序列分析显示,红叶芥PAL基因与芜青PAL基因的同源性达到99%.半定量RT-PCR结果显示,在8℃低温胁迫下,红叶芥PAL基因表达量呈现先降低后升高的趋势,在处理18 h后达到最低点,随后迅速升高,这与PAL活性变化一致.

多效唑对生姜试管苗生理特性的影响

研究了在组培条件下多效唑（PP333）对生姜试管苗生理特性的影响．结果表明：不同浓度的PP333对生姜试管苗根、茎、叶的生长均有抑制作用，表现为植株明显变矮、根短且粗大等，同时PP333在一定范围内提高了试管苗的繁殖率，最高达到8．60．对试管苗的一些生理指标测定后发现，PP333（0．5～25mg／L范围内）对生姜试管苗的可溶性总糖、淀粉和蛋白质的合成有促进作用，对游离脯氨酸含量、SOD和POD活性也都有提高作用，而时MDA则会抑制其含量的增加，从而减轻对细胞膜的伤害，在一定程度上提高了生姜试管苗的抗性．

环境胁迫下大头芥花青素积累及其相关结构基因的表达

以大头芥(红叶大头芥)为试材,研究模拟干旱、低温和强光等环境胁迫下红叶大头芥中花青素含量及其与花青素合成途径中CHI、DFR和ANS等结构基因表达的关系。首先通过同源克隆法在红叶大头芥中克隆了CHI、DFR和ANS基因,其开放阅读框分别为759、1157、1004bp,分别编码253、385、334个氨基酸。实时荧光定量RT-PCR结果表明,在环境胁迫下,红叶大头芥中花青素的积累和结构基因的大量表达需要一定处理时间的诱导。CHI基因在强光、低温和模拟干旱胁迫下的表达量无明显变化,且表达量极低;而DFR和ANS基因在低温、强光胁迫下的转录表达量随胁迫时间的延长而增加,对红叶大头芥中花青素的合成起到了重要的调控作用,且强光胁迫下DFR和ANS的表达量约为低温胁迫的两倍,推测低温和强光胁迫可能诱导了红叶大头芥中花青素合成途径不同的调控机制。