机能实验学教学改革的实践与探索

机能实验学教学改革是目前医学教育改革的热点问题。我校开设的机能实验学课程通过对生理学、病理生理学、药理学实验课的整合、重组 ,建立了新的机能学科教学体系。经过近些年的改革实践表明 ,机能实验学教学改革对加强医学生实践能力、知识综合运用能力和学生创新意识的培养发挥了积极的作用。

我校机能实验学教改存在的问题及对策探讨

机能实验学是当前基础医学实验教学改革的大方向之一。自实施这一项改革来已取得了显著的成效，但仍存在诸多迫切需要解决的问题。教师的教育思想和观念要不断更新，教材尚需进一步改进，教师队伍还需要加强，考核模式有待于完善，如何及时、妥善地解决这些问题直接关系到改革能否进一步深入和取得最后的成功。

IHC-93对大鼠缺血心肌脂质过氧化和超微结构的影响

目的 观察 3,6 [二甲氨基 ] 二苯并碘杂六环葡萄糖酸盐 (IHC 93)对缺血大鼠心肌脂质过氧化和超微结构的影响。方法 选用SD健康大鼠 ,结扎冠状动脉制备心肌损伤模型。结果 IHC 930 2 5和 0 50mg/kg能够明显升高心肌SOD活性 ,减少血清MDA生成 ,并改善缺血区氧供 ,改善缺血心肌电镜下的细胞损伤。结论 提示IHC 93对大鼠心肌缺血损伤的保护作用机制可能与抗脂质过氧化反应有关。

应用cDNA微矩阵基因芯片筛选运动性心肌肥大相关基因的初步研究

目的 :应用cDNAchip(cDNA芯片或微矩阵基因芯片 )技术筛选运动性心肌肥大相关基因。方法 :摘取运动组和对照组小鼠心脏 ,按一步法抽提总RNA并纯化mRNA ,将 2 30 4个点包括10 3个阴性及对照基因和 2 2 0 1条小鼠靶基因的PCR扩增产物 ,按微矩阵 (12× 12点× 16亚矩阵 ,点间距离 375 μm)点制于硅烷化玻片上 ,制备成cDNA芯片。将等量抽提纯化的运动组和对照组小鼠心肌组织mRNA ,分别与掺入的荧光分子Cy3和Cy5经逆转录合成cDNA荧光探针 ,混合后再与cD NA芯片杂交 ,通过芯片扫描仪对荧光信号图像进行扫描 ,经计算机分析比较运动组和安静对照组心肌组织中基因表达谱的变化。结果 :在 2 2 0 1条待研究基因中 ,两组小鼠心肌组织间存在差异表达的基因。具有显著表达差异的基因有 71条 ,其中上调基因有 37条 ,下调基因有 34条。结果显示 :cDNA芯片技术筛选运动性心肌肥大相关基因具有高通量、高敏度、高效率、大规模和并行性等优点。

AngⅡ对成年大鼠心肌成纤维细胞分泌ET-1、NO功能的影响

目的 :探讨血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )对成年大鼠心肌成纤维细胞 (MFs)分泌内皮素 - 1(ET - 1)、一氧化氮 (NO)的影响。方法 :采用酶消化法和差速贴壁分离法获取MFs ,应用放射免疫分析法、硝酸还原酶法分别测定不同条件下培养的第二代心肌MFs培养液中的ET - 1、NO水平。结果 :一定浓度范围内的AngⅡ可按剂量依赖方式促MFs分泌ET - 1,血管紧张素Ⅱ 1型受体 (AT1R)拮抗剂losartan可阻断AngⅡ的上述作用 ;AngⅡ可抑制心肌MFs分泌NO ,加losartan后再加AngⅡ培养发现 ,MFs分泌NO能力不但不降低 ,而且还高于对照组 (P <0 0 1)。结论 :AngⅡ可通过AT1R促成年大鼠心肌MFs分泌ET - 1,主要通过AT1R影响MFs分泌NO ,从而改变ET - 1/NO比值。AngⅡ可能通过影响MFs分泌的生物活性物质网络平衡关系改变 ,发挥其促心肌肥厚及心力衰竭效应。

稳心颗粒对家兔左心室内、外膜电生理特性的影响

目的通过研究步长稳心颗粒对家兔左心室内、外膜电生理特性的影响,探讨步长稳心颗粒抗心律失常的机制。方法应用浮置玻璃微电极记录技术,在不同频率刺激下,记录应用步长稳心颗粒前后家兔左室游离壁内、外膜心肌细胞跨膜动作电位(TAP)各种参数的变化。结果①步长稳心颗粒延长内、外膜心肌细胞的动作电位时程(APD),当基础周长(BCL)为1000 m s时,使用步长稳心颗粒后心内膜层肌细胞的APD90由216±15 m s延长为(243±8)m s(P<0.01),外膜层肌细胞的APD90由(182±11)m s延长为(228±10)m s(P<0.01)。②步长稳心颗粒能显著缩短心室跨壁复极离散度(TDR),当BCL为1000 m s时,用药后TDR由(33±9)m s减小为(21±10)m s(P<0.01)。结论步长稳心颗粒可延长内外膜心肌细胞的APD,使左室TDR缩短。

禁食大鼠胃肠肌电活动和胃动素与熊去氧胆酸的关系

目的 研究大鼠禁食状态下不同起源的胃肠移行性复合肌电活动 (MMC)的特征异同以及胃动素 (MTL)和熊去氧胆酸 (UDCA)对不同起源MMC的作用。方法 2 4只大鼠被随机分为两组。在胃窦、十二指肠及空肠慢性埋置银丝电极。术后 7d在大鼠清醒、禁食状态下实验。第一组静脉注入合成猪MTL ,第二组给予UDCA灌胃。记录给药前 1h至给药后 2h胃肠肌电活动。结果 实验共观察到 6 8个正常的MMC波形 ,其中 33%起源于胃窦 ,6 7%起源于十二指肠。起源于胃窦的MMC波的周期和Ⅲ期的时程明显长于十二指肠起源的MMC波的相应参数。静脉注射合成猪MTL可引发起源于胃窦的不成熟Ⅲ相波 ,UDCA灌胃可使起源于十二指肠的MMC波周期缩短 ,Ⅲ期时程延长。结论 禁食大鼠MMC波可起源于胃窦和十二指肠 ,不同起源MMC波形特征不同。MTL和UDCA可分别影响禁食状态下不同起源的胃肠肌电活动。

改进并应用双电极埋植技术记录大鼠胃肠肌电活动

目的 改进并应用双电极埋植技术记录大鼠的胃肠肌电活动。方法 选用外径仅 0 .5mm的聚四氟乙烯薄膜包绕的 7股银丝绝缘导线制作记录电极 ,采用套针埋植电极。结果 共埋植双电极 160对 (每只大鼠 1～ 5对 ) ,约 1周时 ,15 4对 ( 96.3 % )电极可持续有效地记录胃肠肌电活动 ,5周后仍有 12 3对电极 ( 76.9% )可正常工作。结论 改进的肌电记录法具有以下优点 :①方法简便可行 ,成功率高 ;②对研究对象损伤轻微 ,在小动物及人体上均适用 ;③可同时埋植多对电极 ,记录多处肌电活动 ;④电极工作稳定持久 ,可行慢性试验 。

神经营养因子-3对大鼠胃肠肌电活动的影响

目的 探讨进行人重组神经营养因子 3(rh NT 3)对大鼠胃肠动力及消化间期移行性复合肌电 (MMC)的影响。方法 在大鼠的胃窦、十二指肠、空肠及结肠处手术埋植银丝电极 5～ 7d后 ,在清醒空腹状态下通过尾静脉注射2 0 μg·kg- 1 的rh NT 3或安慰剂 ,对照分析注射前后各 2h大鼠的胃肠肌电活动变化。结果 rh NT 3对胃窦及小肠处的肌电活动有增强效应 (P <0 .0 5 ) ,但对其MMCs周期无显著影响 ;在横结肠 ,rh NT 3不但可显著增强峰电的频率、振幅及延长峰电周期 ,而且可以使MMCs周期延长 [(2 5± 11)minvs.(19± 6 )min ,P <0 .0 5 ) ];在远端结肠处 ,rh NT 3打断MMC模式 ,引起类似MMCⅢ相的连续的峰电活动 ,持续约 (48± 6 )min。结论 外源性的rh NT

围产期高盐饮食程控雄性子代大鼠动脉血压盐敏感性

目的探讨围产期高盐饮食对子代Sprague-Dawley大鼠动脉血压及盐敏感性程控作用的性别差异及其可能机制。方法围产期给予高盐饮食(8%NaCl)和正常饮食(1%NaCl),监测雄性及雌性子代体重发育,并采用无创性尾套法测量血压及心率变化;后给予各组子代高盐饮食14 d观察其盐敏感性,并于测量结束后以放射免疫学方法检测血清及脑组织肾素-血管紧张素-醛固酮系统各成分及应激相关激素水平。结果围产期高盐饮食对子代大鼠青春期动脉血压无显著影响,但显著提高雄性子代的盐敏感性,且雄性子代血清血管紧张素II升高,而肾上腺皮质激素释放激素和皮质醇低于正常组,雌性子代则未观察到相同效应。结论围产期高盐饮食对子代动脉血压盐敏感性具有程控作用,并具有显著的性别差异,其机制可能与子代肾素-血管紧张素-醛固酮系统功能异常及应激反应性变化有关。

人参皂苷和氯米帕明对慢性应激小鼠糖代谢和脂代谢的影响

目的研究人参皂苷和氯米帕明对慢性应激小鼠糖代谢和脂代谢的影响。方法建立慢性轻度不可预知性应激模型,观察人参皂苷和氯米帕明对小鼠血清葡萄糖、胰岛素、胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)以及小鼠体质量增长和脏体系数的影响。结果慢性应激使小鼠体质量增长缓慢,心脏、脾脏和肾上腺的脏体系数减小,血清葡萄糖和LDL-C升高,血清三酰甘油明显降低。人参皂苷和氯米帕明轻度增大慢性应激小鼠脾、肾上腺脏体系数,剂量依赖性地明显降低血糖浓度,降低血清三酰甘油浓度。此外,人参皂苷对血清胰岛素水平有升高趋势。结论人参皂苷和氯米帕明能降低小鼠血糖,可用于防治慢性应激诱发的高血糖。

绝对不应期电刺激对兔心室肌收缩功能影响的钙反应性

目的 观察绝对不应期电刺激增强兔离体乳头肌收缩作用的钙反应性 ,探讨绝对不应期电刺激增强心肌收缩功能的可能机制。方法 分离兔右心室乳头肌、灌流并给予 1HZ 刺激使其等长收缩 ,于该基础刺激的绝对不应期给予双相方波电流刺激 (称之CCM)。依次灌流不同Ca2 + 浓度 (0 .5、1.5、2 .5、3.5、4 .5、5 .5、6 .5mmol·L- 1 )的K H液 ,观察乳头肌的最大张力 (PT)的变化。结果 ①CCM刺激时PT比刺激前增加。②CCM对乳头肌张力的作用存在着Ca2 + 浓度量效反应 ,低Ca2 + 浓度下CCM增加PT的作用最明显 ,随着Ca2 + 浓度的增高而作用减弱。当Ca2 + 浓度进一步增高时 ,PT不再增加。结论 于绝对不应期电刺激能明显增强离体心肌的收缩功能 ,提示其可能机制为细胞外Ca2 + 内流增加 ,细胞 [Ca2 +

氨氯地平的心肌电生理作用及对触发活动的影响

目的 观察新的钙拮抗剂———氨氯地平对心肌快反应动作电位和触发活动的影响。方法 采用标准玻璃微电极细胞内记录方法观察不同浓度氨氯地平对豚鼠心肌快反应动作电位及异丙肾上腺素诱发的早期后除极和哇巴因诱发的延迟后除极及触发活动的作用。实验在同一细胞完成对照和药理作用。结果 氨氯地平10 μmol·L-1对动作电位时程明显缩短 (n =6 ,P <0 .0 5 ) ,用药前后APA、Vmax、ERP、DP3无变化 ;2 5 μmol·L-1氨氯地平可抑制异丙肾上腺素和哇巴因诱发的触发活动。结论 氨氯地平对异丙肾上腺素和哇巴因诱发的触发活动有一定的对抗作用 ,其机理与钙拮抗有关。

安神益脑胶囊主要药效学试验

安神益脑胶囊可减少小鼠走动时间和前肢上举次数 ;缩短阈剂量戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠的潜伏期 ,延长睡眠时间 ,加强阈下剂量戊巴比妥钠的催眠作用 ;对东莨菪碱致小鼠获得性记忆障碍有改善作用 ;升高急性失血性血虚小鼠血中的红细胞数和血红蛋白含量。但其本身并无直接催眠作用 ,对急性失血性低血压无升压作用。试验结果说明安神益脑胶囊具有镇静、安神、改善记忆力和补血作用。

胺碘酮对家兔急性心肌缺血左室跨壁复极离散度的影响

目的:探讨胺碘酮对家兔急性缺血左室心肌楔形组织块电生理特性和跨壁复极离散度(TDR)的影响及其抗缺血心律失常的机制。方法:建立冠状小动脉灌注家兔左室心肌楔形组织块模型,应用浮置玻璃微电极和心电图同步记录技术,观察急性无灌流心肌缺血时,胺碘酮对内外层心肌细胞的动作电位时程(APD)、TDR和心律失常的影响。结果:①左心室楔形组织块停止灌注后,胺碘酮组内、外膜心肌细胞的APD较对照组明显延长[(228±19)ms vs.(212±6)ms,P<0.05],且外膜APD的延长更明显[(203±15)ms vs.(180±5)ms,P<0.05]。②急性缺血各时间段,APD较缺血前均缩短,以外膜APD缩短更明显,导致TDR增大。用药后TDR明显短于对照组。结论:胺碘酮可延长内、外膜心肌细胞的APD,且外膜APD的延长明显,并可减小急性缺血心肌的TDR,这可能是其抗心律失常机制的细胞电生理基础。

胺碘酮对犬左心室M细胞动作电位和心室跨壁复极离散度的影响

目的通过研究胺碘酮对犬左心室M细胞动作电位和心室跨壁复极离散度(TDR)的影响,探讨胺碘酮抗心律失常机制。方法应用标准玻璃微电极技术,在不同频率刺激下,记录应用胺碘酮前后犬左室游离壁内、外膜及中层心肌细胞跨膜动作电位(AP)各种参数的变化。结果:①胺碘酮延长内、外膜层心肌细胞的动作电位时程(APD),当基础周长(BCL)为1 000 m s时,使用胺碘酮后心内膜层肌细胞的APD90由(254±38)m s延长为(274±37)m s(P<0.01),外膜层肌细胞的APD90由(205±37)m s延长为(229±16)m s(P<0.01);但其明显缩短中层肌细胞的APD,其APD90由(331±50)m s缩短为(290±62)m s(P<0.01)。②胺碘酮能显著缩短TDR,当BCL为1 000 m s时,用药后TDR由(126±20)m s减小为(61±11)m s(P<0.01)。结论胺碘酮对左室三层肌细胞电生理具有不同影响,延长内外膜心肌细胞的APD,而缩短中层肌细胞的APD。使左室TDR缩短。

冠状动脉灌注兔心室楔形模型对预测药物致心律失常潜在危险性的应用

药物致尖端扭转型室速(TdP),为多种药物所引起的少见但又非常严重的副作用,致使多种临床使用有效药物被撤市。因此,探讨和选择有效的临床前实验方法,以预测研发药物发生TdP的倾向性是十分必要的。有学者采用盲法研究提示,兔左心室组织?型模型,在预测药物致TdP发生中具有很高的灵敏度和特异性。这项技术最初用于研究心肌的电异质性和发生QT间期延长及TdP的细胞基础,所应用的评价参数及指标,直接来源于引发TdP的各种关键因素;同时,利用此模型所得出TdP评分方法,还可用于评价候选药物致TdP发生的潜在可能性,以及其与市场上现有同类药物相比所产生TdP的相对危险程度。

氯丙嗪预处理对家兔缺血再灌注损伤后小肠功能的影响

目的研究不同剂量氯丙嗪预处理对家兔小肠缺血再灌注损伤的影响,探讨氯丙嗪的肠道保护作用。方法采用恒温平滑肌槽记录离体肠管收缩曲线的方法,观察不同处理方式下小肠的收缩张力及收缩频率的变化。结果缺血再灌注损伤后,小肠收缩张力及收缩频率较正常对照组显著降低,小剂量(1 mg/kg.BW)和中剂量(2 mg/kg.BW)氯丙嗪预处理后,缺血再灌注小肠的收缩张力及频率均有所恢复,显著高于未预处理组。大剂量(4 mg/kg.BW)氯丙嗪预处理组小肠的收缩张力和频率与单纯缺血再灌组相比无统计学差异。结论适量氯丙嗪预处理能够改善缺血再灌注造成的小肠运动功能异常,而大剂量氯丙嗪对其无改善作用。

莫索尼定滴眼液点眼对家兔眼压及血压的影响

目的探讨不同剂量莫索尼定(MOX)滴眼液点眼对眼压、瞳孔、血压和心率的影响。方法 32只家兔全身麻醉后行双眼前房穿刺并连接于生理记录仪描记眼压,行单侧颈动脉插管并连接于生理记录仪描记血压、心率波动。分别将质量分数0.05%、0.1%和0.2%的MOX单侧点眼,同步观察点眼后8h内双侧眼压、瞳孔、血压和心率的变化。结果 0.05%、0.1%、0.2%MOX组点眼后实验眼最大眼压下降幅度分别为3.01mmHg(18.31%)、3.70mmHg(22.13%)和4.46mmHg(25.60%),降眼压持续时间分别为6h、8h和8h以上。对侧眼眼压下降持续时间较短,最大眼压下降幅度分别为2.64mmHg(15.46%)、3.10mmHg(18.82%)和2.62mmHg(16.48%)。3组MOX滴眼液点眼均可使实验眼瞳孔散大,最大散瞳幅度分别为2.6、3.2、3.9mm。MOX滴眼液点眼对心率影响轻微,0.05%MOX组和0.1%MOX组点眼不影响实验动物的血压,0.2%MOX组可使实验动物舒张压下降,最大下降值为8.85mmHg(9.93%)。结论 MOX滴眼液点眼对家兔有降眼压作用,中低剂量的MOX对实验动物的血压、心率等无明显影响。