CBL与PBL融合教学法在结构性心脏病临床带教中的作用

目的探讨在实施结构性心脏病临床带教中,CBL教学法与PBL教学法联合应用对教学效果的影响。方法将该院2019年5月—2020年4月80名结构性心脏病实习生进行数字奇偶法分组;联合教学组(40名):采用CBL(case based learning,基于案例学习)+PBL(problem based learning,基于问题学习)教学法完成临床带教;对照组(40名):采用传统临床教学法完成临床带教;就组间实习效果以及实习生教学满意度评分进行对比。结果联合教学组实习生操作技能(22.29±2.52)分、专业理论(22.31±2.41)分、病历书写(22.42±1.52)分、病例分析(22.43±1.53)分以及总分(83.99±2.15)分值均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);联合教学组实习生师生互动评分(90.59±2.41)分、课堂气氛(92.39±4.02)分、学习兴趣(94.14±2.59)分、临床技能提高(93.25±2.71)分、独立学习能力(93.31±3.02)分以及综合分析能力(94.02±3.11)分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论CBL+PBL教学法有效运用,可使结构性心脏病临床带教效果及教学满意度显著提升,最终实现结构性心脏病实习生综合素质显著提升。

PBL教学法在冠心病及结构性心脏病介入诊疗医师培训中的应用

目的比较以问题为基础的教学法(PBL)与传统以授课为基础的教学模式(LBL)在冠心病及结构性心脏病介入诊疗医师培训中的应用效果。方法选择西安交通大学第一附属医院介入培训基地从事冠心病及结构性心脏病介入诊治培训学员60人。随机分为LBL组和PBL组。培训结束后进行理论知识、操作技能考试及教学评估问卷调查。结果 PBL组对于激发学习兴趣、培养团队精神及锻炼语言表达的认同率高于LBL组(P<0.05)。PBL组理论考试总成绩及介入操作技能总成绩均高于LBL组(P<0.01)。结论 PBL教学法在冠心病及结构性心脏病介入诊治培训中可以更好地发挥学员主观能动性,达到较好的教学效果,是值得推广的教学模式。

LncRNA SNHG5在冠状动脉粥样硬化性心脏病患者外周血中的表达及临床意义

目的探讨长链非编码RNA SNHG5(lncRNA SNHG5)在冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary atherosclerotic heart disease,CAHD)患者外周血中的表达及临床意义。方法收集受试者的临床资料,通过逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)测定对照组(n=82)和CAHD组(n=78)受试者外周血中lncRNA SNHG5的表达,通过单多因素Logistic回归分析法探究影响CAHD的独立危险因素,通过受试者工作特征(ROC)曲线分析lncRNA SNHG5在CAHD中的诊断价值。结果与对照组相比,CAHD组受试者外周血中lncRNA SNHG5的表达水平显著降低(P<0.05);lncRNA SNHG5在心功能Ⅰ级-Ⅳ级CAHD患者外周血中的表达水平逐渐降低各级间差异P<0.05,隔级间差异P<0.01。高血压、高血脂及lncRNA SNHG5表达水平为CAHD的独立危险因素。lncRNA SNHG5诊断CAHD的ROC曲线下面积为0.872,灵敏度为78.2%,特异度为97.60%。结论lncRNA SNHG5可能是潜在的诊断CAHD的生物标志物。

CRP/ALB比值对先天性心脏病相关肺动脉高压患者长期预后的评估价值

目的 探讨C反应蛋白(CRP)/白蛋白(ALB)比值对先天性心脏病相关肺动脉高压患者长期预后的评估价值。方法 选取2014年6月至2018年5月于西安交通大学第一附属医院就诊的先天性心脏病(CHD)合并肺动脉高压(PAH)患者216例,根据3年随访结果将患者分为生存组(174例)和死亡组(42例)。全自动生化分析仪检测CRP、ALB并计算CRP/ALB。绘制受试者工作特征曲线(ROC)并计算曲线下面积(AUC)分析CRP/ALB对CHD合并PAH患者预后的预测价值,多因素Logistic回归分析探讨CHD合并PAH患者预后的相关因素。结果 死亡组血肌酐、血钾、N末端脑钠肽前体(NTproBNP)、高敏肌钙蛋白T(hs-cTnT)、静息心率、CRP和CRP/ALB明显高于生存组,ALB显著低于生存组(P<0.05)。CRP/ALB比值与血肌酐、NT-proBNP、hs-cTnT、NYHA心功能分级存在显著正相关(r=0.413、0.583、0.621、0.677,P<0.05)。CRP、ALB在预测CHD合并PAH患者预后的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.720(95%CI:0.656~0.798)、0.662(95%CI:0.608~0.713)。在85.3 mg/L的临界值下,CRP预测的灵敏度为74.4%,特异度为71.2%;在27.5 g/L的临界值下,ALB预测的灵敏度为66.4%,特异度为83.2%。CRP/ALB的AUC为0.837(95%CI:0.768~0.903),灵敏度为85.1%,特异度为84.5%。多因素Logistic回归分析结果显示:模型1(未校正前)、模型2(校正性别、年龄、收缩压、舒张压后、静息心率、血钾)、模型3(在模型2基础上再校正NT-proBNP、hs-cTnT、血肌酐、NYHA心功能分级)的CRP/ALB比值的OR及95%CI分别为2.036(1.284~3.227)、1.944(1.558~2.426)、1.868(1.594~2.189),CRP/ALB比值是CHD合并PAH患者预后不良(死亡)的独立预测因素(P<0.05)。结论CRP/ALB比值是CHD合并PAH患者预后死亡风险的独立预测因子,且与NYHA心功能分级有关,有望成为CHD病情早期并发症筛查的生物标志物,CRP/ALB比值升高预示预后死亡风险高。

先天性心脏病相关性肺动脉高压可逆性的临床评估方法

尽管近些年来靶向药物治疗取得了很大的进步,肺动脉高压(pulmonary artery hypertension,PAH)预后仍较差。不同于其他类型PAH,先天性心脏病相关性肺动脉高压(PAH associated with congenital heart disease,PAH-CHD)在早期得到治疗后其肺血管病变可以逆转[1]。在PAH-CHD可逆期关闭缺损会得到血流动力学及血管形态学的缓解,而在不可逆期关闭缺损会加速疾病进展。据统计CHD患者成功地行关闭缺损术后仍有5.7%~13.3%的患者PAH进一步进展[2-3],且这部分患者预后与未关闭缺损患者相比较差,甚至比艾森曼格综合征患者预后更差[4-5]。

介入封堵术对巨大房间隔缺损患者心脏重塑的影响

目的探讨巨大房间隔缺损(atrial septal defect,ASD)患者介入封堵治疗后的心脏重塑情况。方法选取2012年10月至2017年11月在西安交通大学第一附属医院接受介入封堵术的137例巨大ASD患者,根据术前是否并发心房颤动(简称房颤)分为房颤组(28例)和非房颤组(109例)。两组均使用国产ASD封堵器治疗并随访观察6个月,所有患者在术后第3天和6个月进行经胸超声心动图、心电图检查,观察封堵效果、心脏大小、肺动脉压及心律失常发生情况。结果经胸超声心动图检查显示,术后第3天房颤组和非房颤组ASD堵闭完全率分别为82.14%、85.32%,而术后6个月时分别为100.00%、99.08%,组间比较差异均无显著性(P>0.05)。房颤组患者右心房左右径、右心室左右径、右心室前后径和肺动脉收缩压手术前后比较差异无显著性(P>0.05),而术后6个月时左心房左右径明显高于术前(P<0.05)。非房颤组术后第3天和6个月时右心房左右径、右心室左右径、右心室前后径和肺动脉收缩压明显低于术前,且术后6个月时明显低于术后第3天,差异均有显著性(P<0.05),而左心房左右径手术前后比较差异无显著性(P>0.05)。两组患者术前均出现右心肥大,术后6个月时非房颤组有98例(89.91%)患者右心恢复正常,而房颤组无一例患者右心恢复正常。随访至术后6个月,非房颤组新发生房性心律失常26例,而房颤组28例心电图均示仍为持续房颤。结论巨大ASD介入治疗安全、有效,纠正ASD可明显改善非房颤患者的心脏结构,但对房颤患者的作用仍需进一步随访观察。

多媒体技术在心脏超声诊断教学中的应用

目的研究心脏超声诊断教学中应用多媒体技术的效果。方法选取2018年5月-2019年5月在我院参与心脏超声培训学习的学生64名,随机分成两组,包括30名对照组和34名研究组,对照组采用传统的超声科教学措施,研究组采用多媒体技术教学法。在两组学生完成教学大纲学习后,进行笔试和技能操作考试。同时利用问卷方式开展调查,了解学生对于多媒体教学方式的看法。结果教学结束后出科时进行考核和测试,考试结果显示,研究组的实践操作成绩(93.78±4.53)分和理论成绩(95.74±4.96)分显著高于对照组(90.26±4.15)分、(92.13±4.25)分,差异有统计学意义(P<0.05)。经过问卷调查发现,96.7%~99.5%的学生认可多媒体教学方式,认为有利于形成诊断思路并且提升操作手法,在学习中加深了对于心脏超声的理解和认识。结论在心脏超声诊断教学中,应用多媒体技术可更为直观的进行相关知识以及案例的展示,便于学生的理解,也能够加深学生的印象,对于实现整体教学质量的优化具有积极作用。

急性心肌梗死患者血清Perilipin 5、生长激素释放肽水平对MACE发生的预测价值

目的探讨急性心肌梗死(AMI)患者血清脂滴包被蛋白5(Perilipin 5)、生长激素释放肽(Ghrelin)水平对主要不良心血管事件(MACE)发生的预测价值。方法选取2020年2月至2023年7月于西安交通大学第一附属医院接受治疗的148例AMI患者作为AMI组,依据患者MACE发生情况分为发生组(46例)与未发生组(102例)。另选取同期在该院体检的健康者148例作为对照组。采用酶联免疫吸附试验检测血清Perilipin 5、Ghrelin水平。多因素Logistic回归分析AMI患者MACE发生的影响因素,以及绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清Perilipin 5、Ghrelin对AMI患者MACE发生的预测价值。结果AMI组血清Perilipin 5、Ghrelin水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。发生组心功能分级Ⅲ~Ⅳ级占比、超敏C反应蛋白水平、病变累及冠状动脉3支血管占比均明显高于未发生组,而血清Perilipin 5、Ghrelin、左心室射血分数水平均明显低于未发生组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,心功能分级为Ⅲ~Ⅳ级及病变累及冠状动脉3支血管是AMI患者MACE发生的危险因素(P<0.05),Perilipin 5、Ghrelin是AMI患者MACE发生的保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清Perilipin 5、Ghrelin二者联合预测的曲线下面积为0.915,优于血清Perilipin 5、Ghrelin各自单独预测。结论血清Perilipin 5、Ghrelin水平对AMI患者MACE发生具有较高的预测价值。

术前心脏CT血管成像左心耳形态学评价对房颤患者左心耳封堵术后残余分流发生的危险因素分析

目的探究房颤患者左心耳封堵(LAAC)术后残余分流(PDL)发生率,分析基于术前心脏CT血管成像(CCTA)左心耳形态学指标中与房颤患者LAAC术后PDL发生的潜在危险因素。方法选择西安交通大学第一附属医院2021年6月~2022年6月间成功实施LAAC的房颤患者72例,收集其临床资料,评估术前CCTA图像左心房与左心耳形态学指标。根据LAAC术后45 d复查结果将其分为有PDL组(n=29)及无PDL组(n=43)。对两组患者之间差异具有统计学意义的术前指标进行Logistic回归分析,寻找危险因素。结果有PDL组LAA孔口长径[(35±5)mm vs.(31±7)mm,P<0.01]、短径[(26±6)mm vs.(22±4)mm,P<0.01]、着陆区面积[(576±166)mm^(2) vs.(480±161)mm^(2),P<0.05]均大于无PDL组,梳状肌发达率也较无PDL组高(P<0.05)。PDL组左心房及左心耳体积、着陆区直径、左心耳深度较无PDL组大,但两组间无统计学差异,左心耳孔口形状、左心耳形态及分叶等定性指标在两组间也无统计学差异。将组间比较有统计学差异的指标纳入单因素Logistic回归进行分析,结果显示LAA孔口长径(OR=1.118,95%CI:1.024-1.220,P<0.05)、短径(OR=1.200,95%CI:1.073-1.343,P<0.01)、着陆区面积(OR=1.004,95%CI:1.000-1.007,P<0.05)及梳状肌发达程度(OR=3.580,95%CI:1.314-9.756,P<0.05)均与术后PDL相关。经多因素Logistic回归校正后,LAA孔口短径与梳状肌发达程度为PDL的独立危险因素。结论术前CCTA左心耳形态学评估对房颤患者LAAC术后PDL的发生具有一定的预测价值,当梳状肌较发达、左心耳口部短径较大时,需警惕PDL的发生。

卵圆孔未闭相关疾病研究2023 年度进展

卵圆孔未闭(PFO)是一种在人群中患病率较高的先天性心脏病,既往研究已明确其与脑卒中之间的关联,并认可封堵治疗对于PFO相关脑卒中的意义。近年来,关于PFO相关疾病的研究逐渐增多,认识进一步加深,同时国内PFO封堵治疗的例数也增长明显。本文盘点了2023年度PFO领域最新研究进展,主要包括PFO相关疾病谱的扩展(癫痫、不明原因晕厥等),发病机制的探究以及风险评估的手段;针对PFO封堵治疗,本文介绍了关于封堵效果与预后的最新研究结果,以及封堵治疗与心房颤动之间关系。国内在PFO封堵新器械的研发上一直处于领先地位,本文也对该方面的最新成果进行了介绍。

案例教学法结合Seminar教学法在康复医学教学中的应用研究

为了研究案例教学法结合Seminar教学法在康复医学教学中的应用效果,文章选取2020年7月至2021年5月在西安交通大学第一附属医院康复医学科实习的57名康复治疗专业本科生作为研究对象,通过随机分组将其分为对照组和实验组,对照组采用常规教学方法,实验组在常规教学基础上采用案例教学法结合Seminar教学法,结果显示,实验组学生的各项成绩均高于对照组学生,实验组学生的理论知识掌握、实践能力、自学能力、学习兴趣、团队协作能力、学习表达能力、师生交流能力、医患沟通能力评分均明显高于对照组学生,且实验组学生的授课满意度明显高于对照组学生。

微格教学联合角色教学法在心内科教学中的应用

目的探讨心内科教学中采用微格教学联合角色教学法的应用效果。方法选取2022年1月—2024年1月西安交通大学第一附属医院心内科54名进修生,以随机数字表法分成研究组(n=27)与对照组(n=27)。对照组采用常规角色教学法,研究组采用微格教学联合角色教学法,对两组课程综合评价、综合考核成绩、自主学习能力及临床思维能力进行比较。结果研究组为课程综合评价满意度为100.00%(27/27),较对照组的77.78%(21/27)更高,差异有统计学意义(χ^(2)=4.688,P<0.05);研究组综合考核成绩较对照组更高,研究组自主学习能力、临床思维能力得分较对照组更高,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论微格教学联合角色教学法应用于心内科教学中,能够使教学直观形象,提高综合成绩及自我导向学习能力,培养临床思维,提升教学满意度。

卵圆孔未闭相关非卒中性疾病防治中国专家共识

随着近年来对卵圆孔未闭(PFO)研究的不断深入,PFO相关卒中的循证医学证据充分,其处理策略已得到国内外的一致认可,相继制定了PFO相关共识或指南。目前,临床上除对PFO相关卒中患者进行介入封堵PFO外,PFO合并其他疾病患者接受PFO封堵的数量也快速增长,但PFO相关非卒中性疾病的循证医学证据尚不充分,国内外尚缺乏指导性文件。为了规范PFO介入治疗,结合国内外PFO临床应用和临床研究领域的最新进展,中国人体健康科技促进会结构性心脏病专委会和中国医师协会神经内科分会组织国内相关领域专家,经多次讨论形成了《卵圆孔未闭相关非卒中性疾病防治中国专家共识》。

血清GDF-11、S100A4对冠状动脉造影术后对比剂肾病的预测效能

目的探讨血清生长分化因子11(GDF-11)、钙卫蛋白A4(S100A4)对冠状动脉造影(CAG)术后对比剂肾病(CIN)的预测效能。方法选取2020年12月至2023年11月于西安交通大学第一附属医院行CAG术的528例患者为研究对象,根据患者是否发生CIN将其分为非肾病组(472例)与肾病组(56例)。采用酶联免疫吸附试验检测血清GDF-11、S100A4水平,采用多因素Logistic回归分析探讨CAG术后CIN的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清GDF-11、S100A4对CAG术后CIN的预测价值。结果肾病组血清GDF-11、S100A4水平高于非肾病组(P<0.05)。肾病组对比剂剂量、术后血肌酐水平高于非肾病组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,对比剂剂量≥131.84 mL(OR=2.158,95%CI 1.284~3.627)、术后血肌酐≥87.57μmol/L(OR=2.445,95%CI 1.533~3.898)、GDF-11≥450.84 ng/mL(OR=3.043,95%CI 1.789~5.177)是CAG术后发生CIN的影响因素(P<0.05)。血清GDF-11、S100A4预测CAG术后CIN的曲线下面积(95%CI)分别为0.861(95%CI 0.810~0.912)、0.798(95%CI 0.747~0.849),最佳临界值分别为450.84 ng/mL、86.98 pg/mL,特异度分别为65.89%、57.62%,灵敏度分别为94.74%、94.74%,二者联合诊断的曲线下面积为0.906(95%CI 0.856~0.957),特异度为87.09%,灵敏度为84.26%。结论血清GDF-11、S100A4水平升高与CAG术患者术后发生CIN密切相关,可作为评估CAG术患者术后发生CIN的生物学指标,且二者联合预测的效能更高。

问题式学习联合案例教学法在心内科教学中的应用

目的研究心内科教学中应用问题式学习联合案例教学法的效果。方法选择2021年8月—2022年8月在西安交通大学第一附属医院实习的57名实习生为研究对象。按随机数字表法分成对照组和研究组。对照组29名,采用常规教学;研究组28名,采用问题式学习联合案例教学法。对比两组实习生实习成绩、教学满意度。结果教学后,研究组理论知识和实践操作成绩高于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。研究组教学满意度(96.43%)高于对照组,差异有统计学意义(χ^(2)=4.994,P<0.05)。结论问题式学习联合案例教学法针对心内科实习生教学效果显著,可有效提高实习生学习成绩和教学满意度。

两种不同封堵器对不明原因脑卒中合并大量右向左分流患者卵圆孔未闭的疗效对比

目的:对比两种不同封堵器对不明原因脑卒中(CS)合并大量右向左分流(RLS)患者卵圆孔未闭(PFO)封堵治疗的疗效。方法:2013-05至2016-08期间连续入选CS合并大量RLS的123例PFO患者,应用Cardi-O-fix PFO封堵器(Cardi-O-fix PFO封堵器组,80例)或Amplatzer PFO封堵器(Amplatzer PFO封堵器组,43例)行经皮PFO介入封堵术。所有患者先行影像学检查并经3位经验丰富的神经内科专家明确CS的诊断,然后经胸超声心动图及右心声学造影诊断PFO及大量RLS。回顾患者的基线特征、临床症状、手术及随访数据,观察两种封堵器封堵治疗的疗效。结果:术后两组各有1例发生阵发性心房颤动,Cardi-O-fix PFO封堵器组1例术后出现腹股沟血肿。随访期间两组无复发性脑卒中及死亡事件发生。两组各随访时期残余分流的差异无统计学意义。结论:在预防脑卒中复发方面,PFO介入封堵可为CS伴大量RLS的PFO患者带来获益。Cardi-O-fix PFO封堵器与Amplatzer PFO封堵器在安全性和有效性方面相似。

上调GDF-15表达对H_2O_2诱导的H9C2心肌细胞生物学特性及PI3K/AKT信号通路的影响

目的:探讨上调生长分化因子-15(GDF-15)的表达对H_2O_2诱导的H9C2心肌细胞增殖、凋亡及PI3K/AKT信号通路的影响。方法:CCK8法检测不同浓度的H_2O_2处理H9C2心肌细胞后的细胞增殖情况;H9C2心肌细胞分为Control组、NC组、H_2O_2组、GDF-15+H_2O_2组,各组细胞处理24 h后收集细胞,RT-PCR及Western blot分别检测各组细胞中GDF-15的mRNA及蛋白表达;CCK8法及流式细胞术分别检测细胞的增殖和凋亡情况;2',7'-二氯二氢荧光素黄二乙酸酯(DCFH-DA)探针检测细胞活性氧簇(ROS)水平;Western blot检测Ki67、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、PI3K、pAKT蛋白表达。10μmol/L的PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002处理H9C2心肌细胞,通过CCK8法及流式细胞术分别检测GDF-15+H_2O_2组及PI3K/AKT信号通路抑制剂组细胞活力及凋亡率,Western blot检测Ki67、Bcl-2、Bax、PI3K、p-AKT蛋白表达。结果:不同浓度H_2O_2处理H9C2心肌细胞后,细胞活力均受到抑制,且有浓度依赖性(P<0.05),由于200μmol/L的H_2O_2处理H9C2心肌细胞后可抑制将近一半的细胞增殖,选择200μmol/L的H_2O_2作为研究对象;与Control组比较,H_2O_2组GDF-15的mRNA及蛋白表达均显著升高,细胞增殖显著降低,凋亡率增加,ROS水平升高,Ki67、Bcl-2、PI3K、p-AKT蛋白表达降低,Bax蛋白表达升高(P<0.05);与H_2O_2组比较,GDF-15+H_2O_2组细胞GDF-15的mRNA及蛋白表达均显著升高,细胞增殖显著增加,凋亡率降低,ROS水平降低,Ki67、Bcl-2、PI3K、p-AKT蛋白表达升高,Bax蛋白表达降低(P<0.05)。PI3K/AKT信号抑制剂组细胞活力及Bcl-2、PI3K和p-AKT的蛋白表达均显著低于GDF-15+H_2O_2组,细胞凋亡率及Bax蛋白表达显著高于GDF-15+H_2O_2组(P<0.05)。结论:上调GDF-15表达可促进H_2O_2诱导的H9C2心肌细胞增殖,降低细胞凋亡,其机制可能与调节细胞中ROS水平,Ki67、Bcl-2、Bax表达及PI3K/AKT信号通路有关。

急性心肌梗死患者循环血浆中miR-133a、miR-133b表达的研究

目的分析miR-133a、miR-133b在急性心肌梗死(AMI)患者血浆中的表达,并探讨miR-133a、miR-133b在诊断AMI中的应用价值。方法选取2017年1月至2017年12月于西安交通大学第一附属医院胸痛中心就诊的AMI患者为观察组(n=89),同期就诊于西安交通大学第一附属医院体检中心的既往无心脏病史,心电图正常的对照人群37例为正常对照组(n=37)。收集所有受试者的临床资料并提取血浆标本,实时定量PCR法检测循环血浆中miR-133a及miR-133b的表达水平。应用受试者工作特征曲线ROC评估对AMI的辅助诊断价值。结果AMI患者血浆中miR-133a及miR-133b的含量较正常对照组显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);受试者工作特征曲线(ROC)分析表明:miR-133a的ROC曲线下面积AUC值为0.845(P<0.01),敏感度为84.5%,特异性为69.0%,漏诊率为15.5%,误诊率31.0%;miR-133b的ROC曲线下面积AUC值为0.702(P<0.01),敏感度为70.2%,特异性为51.7%,漏诊率为29.8%,误诊率为48.3%。结论循环miR-133a及miR-133b在诊断AMI方面具有较好的特异性和敏感性,可作为AMI诊断的生物学标志物。

NRG-1对缺氧复氧心肌细胞凋亡及氧化损伤的影响

目的:探讨神经调节蛋白1(NRG-1)对缺氧复氧环境下的心肌细胞凋亡及氧化损伤影响及机制。方法:以心肌细胞(HCM)为研究对象,构建缺氧复氧心肌细胞模型,在缺氧前加入0.8 mg/L的NRG-1。噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,二硝基苯肼显色法检测上清中乳酸脱氢酶(LDH)含量,二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(DCFH-DA)法检测活性氧簇(ROS)水平,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)水平,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)水平,Western blot检测蛋白激酶B(Akt)、磷酸化的Akt(p-Akt^(Thr308))、cleaved caspase-3的蛋白水平。结果:心肌细胞缺氧复氧后细胞吸光度(A)从0.66±0.03降低至0.36±0.04,细胞凋亡率从(4.62±0.97)%升高至(29.07±3.43)%,ROS水平从69.29±7.96升高至280.84±20.52,LDH、MDA水平也升高,SOD、p-Akt/Akt水平均下降。而NRG-1处理后的细胞吸光度(A)从0.36±0.04升高至0.47±0.05,细胞凋亡率从(29.07±3.43)%下降至(19.76±3.41)%,ROS水平从280.84±20.52下降至128.23±12.32,LDH、MDA水平也下降,SOD、p-Akt^(Thr308)/Akt水平均升高。结论:NRG-1能够部分抑制缺氧复氧诱导的心肌细胞凋亡和氧化损伤,影响心肌细胞中p-Akt/Akt的水平。

微小RNA-133b对心肌纤维化的影响

目的研究微小RNA-133b(miR-133b)对心肌纤维化的影响。方法选取人心肌成纤维细胞(CFs),采用CCK8检测过表达及敲低miR-133b时细胞增殖情况,qRT-PCR及Westernblot检测结缔组织生长因子(CTGF)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)及Ⅲ型胶原蛋白(collagenⅢ)的表达水平;生物学软件预测miR-133b的靶基因,双荧光素酶报告实验证实miR-133b与靶基因的直接调控作用。结果qRT-PCR检测结果显示,转染miR-133bmimic后miR-133b的表达水平明显高于阴性对照组(t=26.219,P=0.000),转染miR-133binhibitor后miR-133b的表达水平明显低于阴性对照组(t=6.738,P=0.003)。转染CFs21、45、69、93和117h后,与阴性对照组相比,miR-133bmimic组CFs增殖能力明显降低,而miR-133binhibitor组CFs增殖水平明显上升(P均<0.05)。与阴性对照组相比,过表达miR-133b后,CTGF(t=9.213,P=0.001;t=8.195,P=0.001)、α-SMA(t=6.511,P=0.003;t=4.434,P=0.011)、collagenⅠ(t=3.172,P=0.034;t=4.053,P=0.015)及collagenⅢ(t=6.404,P=0.003;t=5.319,P=0.006)的mRNA和蛋白表达水平均明显下调;敲低miR-133b后,CTGF(t=9.439,P=0.001;t=14.100,P=0.000)、α-SMA(t=4.519,P=0.011;t=4.377,P=0.012)、collagenⅠ(t=5.966,P=0.004;t=5.514,P=0.005)及collagenⅢ(t=4.622,P=0.010;t=4.996,P=0.008)的mRNA和蛋白表达水平均明显上升。共转染miR-133bmimic和WT3’UTR表达载体细胞的相对荧光素酶活性明显低于共转染mimiccontrol和WT3’UTR表达载体的细胞(t=5.654,P=0.005),共转染miR-133bmimic和MUT3’UTR表达载体细胞的相对荧光素酶活性与共转染mimiccontrol和MUT3’UTR表达载体的细胞差异无统计学意义(t=0.380,P=0.724)。结论miR-133b可能是通过靶向抑制CTGF来影响CFs的活化增殖,从而改善心肌纤维化。