DCLK1和ITGA5在非小细胞肺癌患者中的表达及其与临床病理特征及预后的关系研究

目的 检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者血清双皮质素样激酶1(doublecortin-like kinase 1,DCLK1)和整合素α5(integrin alpha5,ITGA5)水平并讨论二者与临床病理特征及预后的关系。方法 选取2017年6月1日至2020年7月1日在我院收治的116例NSCLC患者(NSCLC组)作为研究对象,收集同期100例健康受试者作为对照组,采用酶联免疫吸附法检测NSCLC组和对照组受试者血清中DCLK1和ITGA5的水平;根据预后情况将患者分为生存组和死亡组,ROC曲线分析血清DCLK1、ITGA5的水平对NSCLC患者3年发生死亡的预测价值,多因素Cox回归分析影响NSCLC患者发生死亡的因素。结果 NSCLC组患者血清DCLK1、ITGA5的水平高于对照组(P<0.05);不同吸烟史、TNM分期、分化程度、肿瘤直径以及淋巴结转移的NSCLC患者血清DCLK1、ITGA5的水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);死亡组患者血清DCLK1、ITGA5的水平均高于生存组(P<0.05);血清DCLK1、ITGA5单独及联合预测患者发生死亡的AUC分别为0.895(95%CI=0.824~0.944)、0.828(95%CI=0.747~0.892)、0.926(95%CI=0.862~0.966);DCLK1、ITGA5及淋巴结转移是影响NSCLC患者发生死亡的独立危险因素(P<0.05)。结论 NSCLC患者血清DCLK1、ITGA5的水平异常升高,二者的表达水平与NSCLC患者临床病理特征和不良预后有关。

姜黄素对A549肺癌细胞增殖、侵袭和迁移的抑制作用及与Keap1/Nrf2信号通路的关系

目的探究姜黄素对肺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移的抑制作用及其机制。方法通过MTT法检测姜黄素对A549细胞增殖能力的影响;通过流式细胞术测定姜黄素对A549细胞凋亡的调节作用;通过Transwell试验,观察姜黄素对肺癌A549细胞的侵袭和迁移能力的影响;采用Western blot实验和RT-PCR实验,观察姜黄素对其Keap1/Nrf2信号通路的调节作用。结果增殖实验、凋亡实验和Transwell实验显示,姜黄素能够显著性抑制癌细胞的增殖、侵袭和迁移,并能够促进其凋亡。Western blot检测显示姜黄素能够显著抑制Keap1和Nrf2表达;RT-PCR实验结果显示姜黄素能够显著抑制Keap1mRNA和Nrf2 mRNA表达。结论姜黄素可能通过抑制Keap1/Nrf2信号通路蛋白的表达而抑制肺癌A549细胞的增殖、迁移和侵袭,并促进其凋亡。

汉防己甲素通过促进HIF-1α降解增强p53缺陷型非小细胞肺癌的放疗敏感性

目的:探讨汉防己甲素(tetrandrine,TET)增强非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)放疗敏感性的作用机制。方法:通过CCK-8法检测H1299和Calu-1细胞活力,并结合克隆形成实验检测在常规或缺氧条件下,TET对NSCLC放疗敏感性的影响。研究TET对NSCLC中由辐射和缺氧诱导的缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响,并敲低HIF-1α基因进一步验证。通过逆转录聚合酶链反应(reverse tran⁃scription-polymerase chain reaction,RT-PCR)、环己酰亚胺(cycloheximide,CHX)追踪及免疫沉淀法检测TET对HIF-1α降解的影响,并探讨p53在TET放疗增敏中的作用。结果:TET可显著增强p53缺陷型NSCLC细胞的放疗敏感性,而对p53野生型的细胞作用不明显。辐射和缺氧暴露后,TET明显抑制HIF-1α及VEGF的表达。TET可通过蛋白泛素化降解系统加速HIF-1α的降解。野生型p53基因转染到H1299细胞中可减弱TET抑制HIF-1α表达的作用。结论:TET通过促进HIF-1α降解抑制HIF-1α通路,使p53缺陷型NSCLC细胞对辐射敏感,而p53在TET诱导的HIF-1α降解中发挥抑制作用。

CBX7基因在非小细胞肺癌中的表达及对患者预后的影响--基于生物信息学分析的研究

目的通过生物信息学分析探讨CBX7基因在非小细胞肺癌中的差异性表达及其对患者预后的影响。方法利用TCGA公共数据库,采用Oncomine分析非小细胞肺癌组织中CBX7 mRNA的特异性表达;利用Kaplan-Meier plotter分析CBX7基因mRNA表达水平对非小细胞肺癌患者预后的影响。结果Oncomine数据库分析显示,肺腺癌、肺鳞癌组织中CBX7均呈低表达状态(P=1.54E-19,1.71E-15)。利用Kaplan-Meier plotter分析,在982例可手术的非小细胞肺癌患者中,CBX7高表达患者DFS的上四分位数是CBX7低表达患者的3倍(HR=0.51,32.00个月对比10.00个月,P=1.7E-12);CBX7高表达患者的中位OS优于CBX7低表达患者(HR=0.54,95.50个月对比42.18个月,P<1E-16)。结论生物信息学分析得出,相较于正常肺组织,CBX7在非小细胞肺癌中低表达,且CBX7表达降低是非小细胞肺癌不良预后的预测指标,提示CBX7低表达在非小细胞肺癌的疾病进展过程中发挥重要作用。

前列地尔联合波生坦治疗先天性心脏病术后肺动脉高压疗效及对血流动力学影响

目的探讨前列地尔联合波生坦治疗先天性心脏病术后肺动脉高压的疗效及对血流动力学的影响。方法选取自2014年10月至2018年10月收治的先天性心脏病术后肺动脉高压患儿300例,采用随机数字表法分为A组(n=150)与B组(n=150)。A组给予波生坦治疗,B组给予前列地尔联合波生坦治疗,两组患儿均连续治疗3个月。治疗后,观察两组患儿临床疗效及不良反应发生情况。记录并比较患儿治疗前后肺动脉高压情况、血氧饱和度、6 min步行实验距离、脑钠尿肽水平、血管内皮因子水平、心功能分级、Borg评分以及血流动力学参数。结果治疗后,B组患儿总有效率显著高于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。在治疗过程中,两组患儿均未发生严重不良反应。治疗后,两组组患儿肺动脉收缩压、肺动脉平均压、肺动脉收缩压/体循环动脉收缩压水平均较治疗前显著降低,且B组低于A组;肺循环血流量/体循环血流量水平较治疗前显著升高,且B组高于A组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患儿血氧饱和度、6 min步行实验距离均较治疗前显著升高,且B组高于A组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患儿脑钠尿肽、血管内皮因子水平均较治疗前显著降低,且B组低于A组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患儿心功能分级、Borg评分均较治疗前显著降低,且B组低于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患儿体血管阻力、肺血管阻力、肺动脉压力均较治疗前显著降低,且B组低于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论前列地尔联合波生坦治疗先天性心脏病术后肺动脉高压临床疗效较好,能改善肺循环血流动力学参数,降低肺动脉阻力。

非小细胞肺癌患者血清HMGB2和HMGB3水平及临床意义

目的探究非小细胞肺癌(NSCLC)患者的血清高迁移率族蛋白(HMGB)2和HMGB3水平及临床意义。方法选取2020年1月—2022年1月西安医学院第一附属医院收治的137例NSCLC患者作为NSCLC组,另选取同期健康体检者90例作为健康组,比较两组血清HMGB2、HMGB3水平,分析血清HMGB2、HMGB3水平与NSCLC患者临床病理特征的关系;根据NSCLC患者预后情况分为预后良好组(n=86)和预后不良组(n=51),并比较两组的临床资料;采用多因素logistic回归分析NSCLC患者预后的影响因素;采用受试者操作特征(ROC)曲线分析血清HMGB2、HMGB3对NSCLC患者预后的预测价值。结果NSCLC组的血清HMGB2[(6.35±1.66)ng/ml比(2.58±0.76)ng/ml,t=20.19,P<0.001]、HMGB3[(2.48±0.56)ng/ml比(1.09±0.13)ng/ml,t=23.13,P<0.001]水平均高于健康组。有吸烟史(t=2.80,P=0.006;t=5.04,P<0.001)、有淋巴结转移(t=3.53,P=0.001;t=4.02,P<0.001)、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期(t=2.58,P=0.011;t=3.82,P<0.001)的NSCLC患者血清HMGB2、HMGB3水平均显著高于无吸烟史、无淋巴结转移、TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期的患者。预后不良组患者的血清HMGB2[(7.80±1.83)ng/ml比(5.49±1.56)ng/ml,t=7.85,P<0.001]、HMGB3[(2.91±0.78)ng/ml比(2.23±0.43)ng/ml,t=6.58,P<0.001]水平均高于预后良好组,有淋巴结转移(χ^(2)=4.81,P=0.028)、有吸烟史(χ^(2)=11.67,P=0.001)、TNM分期的Ⅲ~Ⅳ期(χ^(2)=6.18,P=0.013)患者占比均显著高于预后良好组。多因素logistic回归分析结果显示,淋巴结转移(OR=1.96,95%CI为1.14~3.36,P=0.015)、吸烟史(OR=2.02,95%CI为1.33~3.06,P=0.001)、TNM分期(OR=2.28,95%CI为1.35~3.86,P=0.002)、HMGB2(OR=2.01,95%CI为1.40~2.91,P<0.001)、HMGB3(OR=1.99,95%CI为1.25~3.15,P=0.003)水平均为NSCLC患者预后的独立影响因素。ROC曲线分析显示,血清HMGB2、HMGB3单独和联合预测NSCLC患者预后情况的曲线下面积(AUC)分别为0.833、0.862、0.922,二者联合预测的AUC显著高于血清HMGB2(Z=2.44,P=0.015)、HMGB3(Z=2.54,P=0.011)单独预测。结论NSCLC患者血清HMGB2、HMGB3水平上调,且与不良预后密切相关,二者联合检测对NSCLC患者预后具有一定的预测效能。

着丝粒蛋白F在非小细胞肺癌组织中的表达及其对A549细胞生物学行为的影响研究

背景非小细胞肺癌(NSCLC)占肺癌的85%左右,由于易错失最佳手术切除时机,且放化疗效果不佳,导致生存率偏低。而着丝粒蛋白F(CENPF)是在多种癌症中高表达的分子,探讨其对肺癌细胞生物学行为的影响,将有助于NSCLC的靶向治疗。目的探讨CENPF在NSCLC组织中的表达及其对A549细胞生物学行为的影响。方法收集2018年10月—2019年10月于西安医学院第一附属医院行外科切除手术的26例NSCLC患者的癌组织、癌旁组织标本。采用Western blotting法检测NSCLC组织、癌旁组织中CENPF表达水平。取生长良好的对数期A549细胞,将其分为对照组、阴性对照组、CENPF抑制组,其中对照组A549细胞不进行转染处理,阴性对照组、CENPF抑制组A549细胞使用Lipofectamine 2000转染试剂分别转染阴性对照(NC)-干扰性小核糖核酸(si RNA)、CENPF-si RNA。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)法检测三组A549细胞中CENPF m RNA表达水平,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测A549细胞增殖情况[吸光度(OD)值],流式细胞仪检测A549细胞凋亡情况、A549细胞周期,Western blotting法检测A549细胞中CENPF、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、B淋巴细胞瘤-2基因相关X蛋白(Bax)表达水平。结果 NSCLC组织中CENPF表达水平高于癌旁组织(P <0.05)。CENPF抑制组A549细胞中CENPF m RNA表达水平低于对照组、阴性对照组(P<0.05)。CENPF抑制组A549细胞OD值低于对照组、阴性对照组(P<0.05)。CENPF抑制组A549细胞凋亡率高于对照组、阴性对照组(P <0.05)。CENPF抑制组G0/G1期A549细胞所占比例高于对照组、阴性对照组,S期、G2/M期A549细胞所占比例低于对照组、阴性对照组(P <0.05)。CENPF抑制组A549细胞中CENPF、cyclin D1表达水平低于对照组、阴性对照组,Bax表达水平高于对照组、阴性对照组(P <0.05)。结论 CENPF在NSCLC组织中表达升高,其可通过影响cyclin D1、Bax表达水平来影响A549细胞周期进展及增殖、凋亡过程;下调其表达可将A549细胞周期阻滞于G0/G1期,抑制细胞增殖并诱导其凋亡。

着丝粒蛋白F表达对非小细胞肺癌生物学行为的影响和预后判断

目的研究非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中着丝粒蛋白F(centromere protein F,CENPF)的表达和生物学功能,及其与预后的关系。方法通过生物信息学方法对Oncomine数据库、人类蛋白质图谱、Kaplan-Meier Plotter、STRING数据库、DAVID数据库进行数据检索和分析,明确CENPF在肺癌患者正常组织和癌组织中的表达情况,并对CENPF及其关联基因进行蛋白质互作网络分析、功能注释和通路分析。结果CENPF在肺腺癌组织中高表达,在正常组织中不表达。在NSCLC患者中CENPF低表达组的中位总生存期(overall survival,OS)显著长于高表达组。进一步进行亚组分析,腺癌患者低表达组中位无瘤进展生存期和OS均明显长于高表达组。CENPF及关联基因在生物过程中主要影响泛素连接酶K11修饰蛋白,在细胞成分中主要影响后期促进复合物(anaphase-promoting complex,APC)代谢,在分子功能中主要影响ATP结合,KEGG通路功能注释主要体现在对细胞周期的影响。结论CENPF参与了NSCLC的发生和发展过程,其在肺腺癌中的蛋白表达水平具有早期诊断和预后评估的价值。CENPF通过改变APC及泛素连接酶活性影响肺癌细胞增殖周期,提示CENPF基因可能成为NSCLC分子靶向治疗的潜在靶点。