RORα过表达病毒载体尾静脉注射对多柔比星诱导小鼠心脏毒性的抑制作用及其机制

目的观察维甲酸相关孤核受体α(RORα)过表达病毒载体尾静脉注射对多柔比星(DOX)诱导小鼠心脏毒性(DIC)的影响,并探讨其可能的机制。方法将80只雄性C57BL/6小鼠随机分为Con组、DIC组、DIC+RORα组、DIC+RORα+EX527组,每组20只。DIC+RORα组和DIC+RORα+EX527组经尾静脉注射过表达RORα基因的腺相关病毒9型(AAV9)载体,DIC组经尾静脉注射AAV9空白对照载体;AAV9载体注射3周后,除Con组外均采用尾静脉注射DOX的方法建立DIC小鼠模型;DIC+RORα+EX527组每次DOX注射后腹腔注射沉默信息调节因子(SIRT1)信号通路特异性阻断剂EX527。各组分组处理后4周,经胸超声心动图检查测算左心室射血分数(LVEF)和左心室缩短分数(LVFS),处死后取眼眶血和心肌组织。采用HE染色观察心肌组织病理情况,ELISA法检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌钙蛋白I(cTnI)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α),TUNEL染色后计算细胞凋亡率,二氢乙锭法检测心肌组织活性氧(ROS)表达,比色法检测心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)表达,免疫荧光染色观察心肌组织巨噬细胞浸润和NF-κB p65表达,Western blotting法检测心肌组织cleaved Caspase-3、RORα、SIRT1蛋白表达并计算Ac-NF-κB p65/NF-κB p65、Ac-Foxo1/Foxo1,实时荧光定量PCR法检测心肌组织RORα、SIRT1 mRNA表达。结果与Con组比较,DIC组小鼠心肌纤维排列紊乱且断裂明显,心肌细胞空泡化显著;与DIC组、DIC+RORα+EX527组比较,DIC+RORα组小鼠心肌纤维断裂及心肌细胞空泡化均减轻。LVEF、LVFS及心肌组织SOD、GSH-Px:Con组>DIC+RORα组>DIC组、DIC+RORα+EX527组(P均<0.05)。血清CK-MB、LDH、cTnI、IL-1β、IL-6、TNF-α及心肌组织细胞凋亡率、cleaved Caspase-3蛋白、ROS、MDA、巨噬细胞浸润、NF-κB p65:Con组<DIC+RORα组<DIC组、DIC+RORα+EX527组(P均<0.05)。RORαmRNA及蛋白:Con组、DIC+RORα组、DIC+RORα+EX527组>DIC组(P均<0.05)。SIRT1 mRNA及蛋白:Con组、DIC+RORα组>DIC组、DIC+RORα+EX527组(P均<0.05)。Ac-Foxo1/Foxo1、Ac-NF-κB p65/NF-κB p65:Con组、DIC+RORα组<DIC组、DIC+RORα+EX527组(P均<0.05)。结论RORα过表达病毒载体尾静脉注射可以减轻DOX诱导的小鼠DIC,其机制可能与激活SIRT1信号通路从而抑制心肌组织氧化应激损伤和炎症反应有关。

和厚朴酚对心肌梗死小鼠心脏的保护作用

目的研究和厚朴酚对心肌梗死(MI)小鼠心脏的保护作用。方法小鼠随机分为假手术组(sham组)、MI组及和厚朴酚(HK)组(MI+HK组)。通过结扎小鼠冠状动脉左前降支建立MI模型,腹腔注射给药的方式进行HK干预。术后28 d时用小动物心脏超声及小鼠心脏压力容积导管法检测小鼠心脏功能,Masson染色检测小鼠心肌梗死后心脏纤维化,TUNEL法检测小鼠心肌细胞的凋亡,蛋白质免疫印记检测纤维化关键分子(Tgfb1、Col1a1和Acta2)和凋亡相关分子(Bax/Bcl-2)。结果与sham组相比,MI组小鼠的左心室射血分数(LVEF)显著下降(P<0.001),左心室舒张末压力(LVEDP)显著升高(P<0.001),等容收缩期左心室内压力上升的最大速率(dP/dt_(max))显著降低(P<0.001);与MI组相比,和厚朴酚组小鼠LVEF显著提高(P<0.05),LVEDP显著下降(P<0.001),左心室等容收缩期dP/dt_(max)显著升高(P<0.05)。与sham组相比,MI组小鼠的心脏质量与胫骨长度比值(HW/TL)显著升高(P<0.01),梗死远端纤维化指数显著升高(P<0.001),梗死边缘组织心肌细胞凋亡显著增加(P<0.001),心脏纤维化关键分子Tgfb1、Col1a1和Acta2的转录水平显著升高(P<0.001),凋亡相关分子Bax/Bcl-2的比值也显著升高(P<0.001);与MI组相比,和厚朴酚组小鼠HW/TL显著降低(P<0.05),梗死远端纤维化指数显著下降(P<0.001),梗死边缘组织心肌细胞凋亡受到显著抑制(P<0.001),心脏纤维化关键分子Tgfb1、Col1a1的转录水平显著下降(均P<0.05),以及Acta2的转录水平显著下降(P<0.01),凋亡相关分子Bax/Bcl-2的比值也有降低(P<0.05)。结论和厚朴酚能够改善心肌梗死后小鼠心脏功能,抑制梗死边缘区域细胞凋亡及降低纤维化程度,发挥心肌梗死后小鼠心脏保护作用。

miR-21-5p改善阿霉素诱导的心脏毒性及其作用机制

目的探究miR-21-5p对阿霉素(doxorubicin,DOX)引起的心脏毒性的影响及潜在的作用机制。方法将C57BL/6小鼠分为对照组(Con组)、阿霉素组(DOX组)、NC agomir处理组(DOX+ago NC组)、miR-21-5p agomir处理组(DOX+ago-miR-21-5p组)、NC antagomir处理组(DOX+anta NC组)、miR-21-5p antagomir处理组(DOX+anta-miR-21-5p组)。DOX组小鼠采用腹腔注射DOX构建小鼠阿霉素心脏毒性模型。DOX+ago NC组、DOX+ago-miR-21-5p组、DOX+anta NC组和DOX+anta-miR-21-5p组小鼠在DOX处理前分别经尾静脉连续注射NC agomir、miR-21-5p agomir(上调靶基因)、NC antagomir及miR-21-5p antagomir(下调靶基因)载体3 d。通过qRT-PCR检测各组小鼠心肌组织miR-21-5p的表达情况。测定小鼠心脏功能,包括左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短率(LVFS),观察心肌组织病理变化,检测血清乳酸脱氢酶(LDH)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平,观察心肌组织氧化应激及炎症和心肌细胞凋亡情况。结果与Con组相比,DOX组小鼠心肌组织损伤明显加重,LVEF和LVFS值显著降低,血清LDH及CK-MB水平明显升高(P<0.05),表明阿霉素心脏毒性小鼠模型构建成功,并且心肌组织miR-21-5p的表达明显下降(P<0.05)。与DOX组相比,DOX+anta-miR-21-5p组小鼠心肌组织miR-21-5p的表达被抑制,同时心肌组织损伤加重,LVEF和LVFS值降低且血清LDH及CK-MB水平增加(均P<0.05)。与DOX组相比,DOX+ago-miR-21-5p组小鼠心肌组织miR-21-5p的表达水平显著提升,心肌组织损伤明显改善,同时LVEF和LVFS值明显提高且血清LDH及CK-MB水平显著降低(均P<0.05)。此外,与DOX组相比,DOX+ago-miR-21-5p组小鼠心肌细胞凋亡明显减少,心肌组织ROS的产生及氧化应激损伤明显被抑制,同时心肌组织炎症因子的表达也显著降低(均P<0.05)。结论miR-21-5p可通过抑制心肌氧化应激和炎症减轻心肌细胞凋亡,进而改善了阿霉素诱导的心脏毒性作用。

冠心病PCI术后Ⅱ期心脏康复患者的自我管理行为现状及其影响因素分析

目的分析冠心病经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后Ⅱ期心脏康复患者的自我管理行为现状及其影响因素。方法选取2019年1月至2021年12月于我院完成冠心病PCI术且进入Ⅱ期心脏康复的216例患者作为研究对象。调查患者人口学资料,评估自我管理行为、健康知识掌握及健康素养,分析自我管理行为的影响因素。结果患者的自我管理行为和健康素养评分均处于中等水平,健康知识掌握评分处于低水平。单因素分析结果显示,年龄、文化水平、婚姻状态、亲属冠心病患病史、健康知识掌握评分、健康素养评分是影响冠心病PCI术后Ⅱ期心脏康复患者自我管理行为的可能因素(P<0.05)。多因素分析结果显示,文化水平、婚姻状态、健康知识掌握评分、健康素养评分是冠心病PCI术后Ⅱ期心脏康复患者自我管理行为的独立影响因素(P<0.05)。结论冠心病PCI术后Ⅱ期心脏康复患者的自我管理行为受到文化水平、婚姻状态、健康知识掌握评分、健康素养评分的影响。

miR-210-5p对脓毒症小鼠心肌损伤的调控作用及其分子机制

目的观察miR-210-5p对脓毒症小鼠心肌损伤的调控作用并分析其分子机制。方法将40只C57BL/6小鼠随机分为对照组、脓毒症组、脓毒症+miR-210-5p激动剂组、脓毒症+miR-210-5p拮抗剂组,每组10只。除对照组外均采用盲肠结扎穿孔术建立小鼠脓毒症模型,对照组小鼠采用不结扎、不穿刺的剖腹手术进行对照。脓毒症+miR-210-5p激动剂组、脓毒症+miR-210-5p拮抗剂组小鼠在建模前1 d及建模术后即刻分别经尾静脉注射miR-210-5p激动剂agomir及miR-210-5p拮抗剂antagomir,对照组和脓毒症组在相同时间经尾静脉注射等体积生理盐水。比较各组心功能指标左心室射血分数(LVEF)、左心室缩短分数(LVFS),心肌组织病理改变,血清心肌损伤标志物肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(cTnI),细胞凋亡率,凋亡蛋白剪切半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved Caspase-3)表达,髓过氧化物酶(MPO)活性,炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达,抗氧化物超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化物丙二醛(MDA)表达及超氧化物阴离子荧光探针(DHE)荧光强度,沉默调节蛋白1(SIRT1)通路相关蛋白SIRT1、叉头框蛋白O1(FOXO1)、乙酰化FOXO1(Ac-FOXO1)、核因子κB亚基p65(NF-κB p65)、乙酰化NF-κB p65(Ac-NF-κB p65),计算Ac-FOXO1/FOXO1、Ac-NF-κB p65/NF-κB p65。结果小鼠LVEF、LVFS对照组>脓毒症+miR-210-5p激动剂组>脓毒症组>脓毒症+miR-210-5p拮抗剂组(P均<0.01)。HE染色显示,小鼠心肌组织病理损伤对照组<脓毒症+miR-210-5p激动剂组<脓毒症组<脓毒症+miR-210-5p拮抗剂组。小鼠血清CK-MB、cTnI水平对照组、脓毒症+miR-210-5p激动剂组<脓毒症组<脓毒症+miR-210-5p拮抗剂组(P均<0.05)。小鼠心肌细胞凋亡率对照组<脓毒症+miR-210-5p激动剂组<脓毒症组<脓毒症+miR-210-5p拮抗剂组,cleaved Caspase-3蛋白表达对照组、脓毒症+miR-210-5p激动剂组<脓毒症组<脓毒症+miR-210-5p拮抗剂组(P均<0.05)。小鼠心肌组织MPO活性及TNF-α、IL-1β、IL-6、MCP-1表达对照组、脓毒症+miR-210-5p激动剂组<脓毒症组<脓毒症+miR-210-5p拮抗剂组(P均<0.05)。小鼠心肌组织SOD、GSH、GSH-Px表达对照组、脓毒症+miR-210-5p激动剂组>脓毒症组>脓毒症+miR-210-5p拮抗剂组,心肌组织MDA、DHE荧光强度对照组、脓毒症+miR-210-5p激动剂组<脓毒症组<脓毒症+miR-210-5p拮抗剂组(P均<0.05)。小鼠心肌组织SIRT1蛋白表达对照组、脓毒症+miR-210-5p激动剂组>脓毒症组>脓毒症+miR-210-5p拮抗剂组,AcFOXO1/FOXO1、Ac-NF-κB p65/NF-κB p65对照组、脓毒症+miR-210-5p激动剂组<脓毒症组<脓毒症+miR-210-5p拮抗剂组(P均<0.05)。结论miR-210-5p可通过抑制心肌组织炎症反应和氧化应激减轻脓毒症诱导的小鼠心肌损伤,其分子机制可能与激活SIRT1信号通路、减轻SIRT1下游分子NF-κB p65及FOXO1乙酰化程度有关。

ProGlide血管缝合器在经皮穿刺静-动脉模式体外膜肺氧合血管通路中的应用

目的 评价ProGlide血管缝合器预缝合技术(PCT)在经皮穿刺静-动脉模式体外膜肺氧合(VA-ECMO)血管通路撤机止血中应用的有效性及安全性。方法 研究为前瞻性、观察性研究,连续入选2019年3月~2020年6月期间在空军军医大学西京医院心脏内科接受经皮穿刺VA-ECMO治疗的患者。将成功撤机并利用PCT技术完成血管通路缝合的患者纳入研究,分别记录PCT技术在股动、静脉的成功率及住院期间穿刺部位相关并发症发生率。结果 研究共纳入37例接受经皮穿刺VA-ECMO治疗患者,排除5例患者(其中1例是未采用PCT技术,4例在ECMO撤机前死亡),最终纳入32例患者,结果发现PCT技术在股动脉的技术成功率为97%、股静脉成功率为100%。所有患者住院期间未发生主要血管并发症,次要血管并发症发生率为6%。结论 ProGlide预缝合技术在经皮穿刺VA-ECMO撤机时可以安全有效地实现股动、静脉的快速止血,且血管并发症发生率低。

金丝桃苷在主动脉弓缩窄所致心肌肥厚中的作用

目的探讨金丝桃苷(Hyp)对主动脉弓缩窄所致心肌肥厚的保护作用及可能机制。方法主动脉缩窄术(TAC)建立心肌肥厚模型,将40只8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为4组:假手术(Sham)组、TAC组、Hyp治疗TAC(Hyp+TAC)组和Hyp联合核因子E2相关因子2(Nrf2)抑制剂ML385治疗TAC(Hyp+ML385+TAC)组。术后4周,超声检测左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、左室舒张末期后壁的厚度(LVPWd);HE染色观察心肌横截面积;Masson染色检测心肌纤维化;计算心脏质量/体质量比(HW/BW);DHE染色观察活性氧(ROS)生成;qRT-PCR检测心房钠尿肽(ANP)、脑钠肽(BNP)和β-肌球蛋白重链(β-MHC)的mRNA表达;Western blot检测Nrf2、血红素氧合酶1(HO-1)、超氧化物歧化酶2(SOD2)、NADPH氧化酶2(gp91phox)蛋白表达;多组间差异采用单因素方差分析进行比较,两组间比较采用LSD-t检验。结果与Sham组比较,TAC组LVEF和LVFS值降低,LVPWD值增加(P<0.01),心肌细胞横截面积增大,心肌纤维化、HW/BW值以及ANP、BNP和β-MHC的mRNA表达增加(P<0.01),ROS生成和gp91phox的表达增多(P<0.01),而Nrf2、HO-1和SOD2表达减少(P<0.01);与TAC组比较,Hyp+TAC组心脏LVEF和LVFS值增加,LVPWD值降低(P<0.01),心肌细胞横截面积减小,心肌纤维化和HW/BW值均减小(P<0.01),ANP、BNP和β-MHC的mRNA表达减少(P<0.01),ROS生成和gp91phox的表达降低(P<0.01),而Nrf2、HO-1和SOD2的表达增加(P<0.01);然而,ML385能部分逆转Hyp对TAC心脏各指标的改善作用。结论Hyp可以通过抑制氧化应激和心肌纤维化,改善压力负荷所致心肌肥厚,其机制可能与调控Nrf2/HO-1信号有关。

miR-145-5p对脓毒症小鼠心肌损伤的保护作用及其机制

目的 探讨miR-145-5p对脓毒症小鼠心肌损伤的保护作用及其机制。方法 80只雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术+尾静脉注射agomir-NC组(sham+ago-NC)、假手术+尾静脉注射agomir-miR-145-5p组(sham+ago-miR)、脓毒症+尾静脉注射agomir-NC组(CLP+ago-NC)和脓毒症+尾静脉注射agomir-miR-145-5p组(CLP+ago-miR),每组20只。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症模型。绘制小鼠生存曲线,ELISA法检测血清心肌损伤标志物肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)和肌钙蛋白I(cTnI)水平以及促炎细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达,HE染色观察心肌组织微观结构,超声仪检测心脏收缩功能(LVEF、LVFS),免疫荧光染色检测CD68、Ly6G、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)和凋亡相关斑点样蛋白(ASC)表达情况,碘化丙啶染色评估心肌细胞焦亡,qRT-PCR检测miR-145-5p表达,Western blot检测NLRP3、ASC、裂解的半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(cleaved Caspase-1)、白细胞介素18(IL-18)和GasderminD蛋白N端片段(N-GSDMD)蛋白表达。结果 与sham+ago-NC组相比,CLP+ago-NC组小鼠生存率明显下降(P<0.001),血清CK-MB和cTnI水平显著升高(P<0.01),心肌纤维排列紊乱且断裂明显,LVEF、LVFS值显著降低(P<0.01),心肌CD68阳性巨噬细胞和Ly6G阳性中性粒细胞明显增多(P<0.01),IL-1β、IL-6和TNF-α表达显著上调(P<0.01),心肌组织炎症小体和心肌细胞焦亡明显增多(P<0.01)。与CLP+ago-NC组相比,CLP+ago-miR组小鼠生存率明显上升(P<0.05),血清CK-MB和cTnI水平显著下降(P<0.01),心肌纤维紊乱及断裂程度明显减轻,LVEF、LVFS值显著升高(P<0.01),心肌巨噬细胞和中性粒细胞明显减少(P<0.01),IL-1β、IL-6和TNF-α表达显著下调(P<0.01),心肌组织炎症小体和心肌细胞焦亡明显降低(P<0.01)。结论 过表达miR-145-5p可通过抑制心肌组织炎症反应和心肌细胞焦亡来改善心脏功能,进而发挥保护脓毒症小鼠心肌损伤的作用。

有氧康复运动联合压力管理对急性心肌梗死患者的应用效果观察

目的探讨对急性心肌梗死(AMI)患者实施有氧康复运动联合压力管理的临床效果。方法选取AMI患者90例,随机分为对照组和研究组,各45例。两组均给予常规护理,研究组在此基础上给予患者压力管理,并指导患者进行有氧康复运动,比较两组干预3个月后心肺功能指标、负面情绪评分和生活质量的差异。结果干预后,研究组MET_(max)、VO_(2max)/HR和VO_(2peak)/kg水平均高于对照组(P<0.05);研究组负面情绪评分低于对照组,生活质量评分高于对照组(P<0.05)。结论AMI患者实施有氧康复运动联合压力管理一方面可以提高其心肺功能,另一方面可以缓解患者的负面情绪,从而促进其生活质量的改善,临床干预效果显著。

Liguzinediol调控心肌细胞线粒体动力学和自噬改善心肌梗死后大鼠心功能的机制

目的:观察川芎嗪衍生物2,5-二羟甲基-3,6-二甲基吡嗪(liguzinediol,Lig)对左冠状动脉前降支结扎致心肌梗死大鼠的心功能改善作用及其潜在机制。方法:结扎大鼠心脏左冠状动脉前降支复制大鼠心肌梗死模型,给予不同剂量Lig(5、10、20 mg/kg)及阳性药地高辛(0.0332 mg/kg)治疗12周。超声心动图检测心功能;试剂盒检测心肌损伤标志物脑钠肽(brain natriuretic peptides,BNP)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)含量;HE染色观察心肌形态;电镜检测线粒体形态;Western blot检测线粒体动力学相关蛋白的表达水平;免疫组织化学染色检测线粒体自噬相关蛋白的表达水平。复制氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)H9C2细胞模型。使用Lig干预细胞,并将自噬激动剂和抑制剂与Lig结合使用。Western blot检测线粒体自噬相关蛋白的表达;转染LC3B腺病毒检测自噬水平;荧光标记检测线粒体膜电位、活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平和细胞凋亡。结果:Lig各个剂量均能显著升高心肌梗死模型大鼠射血分数(ejection fraction,EF)、左室短轴缩短率(fractional shortening,FS),减小左室收缩末期内径(left ventricular dimension in systole,LVIDs)。Lig可显著降低心肌梗死模型大鼠血清BNP、LDH,并增加大鼠心脏中ATP水平。Lig改善心肌梗死大鼠心肌细胞及线粒体形态,调节心肌梗死大鼠心脏中线粒体动力学相关蛋白表达并促进自噬。在体外,Lig减少OGD模型H9C2细胞的ROS含量,促进线粒体自噬和融合,保护线粒体膜电位,减少H9C2细胞凋亡。自噬激动剂与Lig的合用部分增加了Lig对OGD模型H9C2细胞的保护作用,自噬抑制剂则可改变Lig对OGD模型H9C2细胞线粒体的调节作用及对凋亡的抑制作用。结论:Lig可促进线粒体自噬和融合,维持线粒体形态和功能完整,减少心肌细胞凋亡,改善心肌梗死大鼠的心功能。

黄芪甲苷对糖尿病心肌病小鼠的治疗作用及其机制

目的 观察黄芪甲苷对糖尿病心肌病(DCM)小鼠的治疗作用,并探讨其可能的分子机制。方法 将60只C57BL/6小鼠随机均分为Sham组、DCM组、AS-Ⅳ组和AS-Ⅳ+LY组,每组15只。Sham组正常喂养,除Sham组外均采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法诱导建立DCM模型;建模后DCM组小鼠继续给予高脂饮食喂养,AS-Ⅳ组小鼠高脂饮食喂养的同时给予黄芪甲苷50 mg/(kg·d)灌胃,AS-Ⅳ+LY组小鼠高脂饮食喂养的同时给予黄芪甲苷50 mg/(kg·d)+PI3K抑制剂LY294002 0.3 mg/(kg·d)灌胃,共8周。各组分组处理8周后行心脏超声检查,比较各组左心室射血分数(LVEF)、左心室缩短分数(LVFS)和左心室收缩末期内径(LVIDs);处死后取血清和心脏组织,比较各组血清心脏损伤标志物乳酸盐脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK-MB)和肌钙蛋白T(cTnT)水平,心肌组织纤维化面积百分比、心肌细胞凋亡百分比,心肌组织活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)表达,心肌组织促炎因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和趋化因子单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)mRNA表达,心肌组织磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路相关蛋白表达。结果 与Sham组和AS-Ⅳ组比较,DCM组和AS-Ⅳ+LY组小鼠心脏LVEF、LVFS均降低,心脏组织GSH、GSH-Px表达及p-PIK/PI3K、p-Akt/Akt均降低,LVIDs及血清LDH、CK-MB、cTnT水平均升高,心肌组织纤维化百分比、细胞凋亡百分比、MDA表达及TNF-α、IL-1β、IL-6、MCP-1 mRNA相对表达量均明显升高(P均<0.01);Sham组和AS-Ⅳ组上述指标比较,DCM组和AS-Ⅳ+LY组上述指标比较均无统计学差异(P均>0.05)。与Sham组比较,DCM组、AS-Ⅳ组、AS-Ⅳ+LY组小鼠心肌组织ROS表达均升高,以DCM组、AS-Ⅳ+LY组升高更明显(P均<0.01)。结论 黄芪甲苷可通过激活PI3K/Akt信号通路,抑制心肌氧化应激和炎症反应,从而减轻心肌细胞凋亡和心肌组织纤维化,最终抑制DCM小鼠的心肌损伤而发挥心脏保护作用。

德谷胰岛素治疗老年2型糖尿病对空腹血糖、体质量指数和血糖波动的影响

目的探讨德谷胰岛素治疗老年2型糖尿病对空腹血糖(FBG)、体质量指数(BMI)和血糖波动的影响。方法将2019年2-10月兵器工业五二一医院收治的120例老年2型糖尿病患者纳入研究对象,按随机数字表法分为观察组与对照组,每组60例,对照组采取预混胰岛素治疗,观察组给予德谷胰岛素联合阿卡波糖治疗,比较两组患者治疗前后糖化血红蛋白(HbA1c)、FBG及餐后2 h血糖(2 h BG)、体质量、BMI、平均血糖(MBG)、血糖变异系数(CV)、血糖波动幅度(MAGE)水平情况。结果两组治疗前FBG、2 h BG、HbA1c、BMI、MBG、血糖CV、MAGE、体质量、BMI比较,差异均无统计学意义(P>0.05);两组治疗后FBG、2 h BG、HbA1c、MBG、血糖CV、MAGE均较治疗前有改善,且观察组FBG、2 h BG、HbA1c、MBG、血糖CV、MAGE降低程度高于对照组(P<0.05);两组治疗后体质量、BMI水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论德谷胰岛素治疗老年2型糖尿病,可有效减轻氧化应激反应,改善FBG及MAGE。

冠心病不稳定型心绞痛合并冠脉狭窄患者CRP、Angptls 2、CTRP1水平变化及临床意义

目的探究冠心病不稳定型心绞痛合并冠脉狭窄患者C反应蛋白(CRP)、血管生成素样蛋白2(Angptls 2)、C1q TNF相关蛋白1(CTRP1)的水平变化及其临床意义。方法将西安国际医学中心医院心脏内科2018年2月至2019年2月间收治的53例冠心病不稳定型心绞痛合并冠脉狭窄患者作为观察组,同时选取同一时期入院体检的健康人群53例作为对照组,比较两组受检者的CRP、Angptls 2及CTRP1水平,以及不同冠脉病变支数患者的CRP、Angptls 2及CTRP1水平,并分析CRP、Angptls 2及CTRP1联合检测对患者的临床诊断价值。结果观察组和对照组患者的血清CRP[(5.35±1.83)mg/L vs(0.89±0.28)mg/L]、Angptls 2[(2.68±0.76)μg/L vs(0.91±0.24)μg/L]及CTRP1[(15.96±5.02)ng/mL vs(9.24±2.98)ng/mL]水平比较,观察组明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);冠脉单支狭窄患者血清CRP水平、Angptls 2水平、CTRP1水平为(4.25±1.55)mg/L、(1.47±0.35)μg/L、(13.18±4.02)ng/mL,明显低于多支狭窄患者的(6.48±1.98)mg/L、(3.15±0.97)μg/L、(19.15±5.25)ng/mL,差异均有统计学意义(P<0.05);CRP、Angptls 2及CTRP1检测结果显示,三者联合检测准确率明显高于CRP+Angptls 2、CRP+CTRP1以及CTRP1+Angptls 2两者联合检测,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论冠心病不稳定心绞痛合并冠脉狭窄患者CRP、Angptls 2及CTRP1水平明显升高,且多支狭窄患者CRP、Angptls 2及CTRP1水平明显高于单支狭窄患者,三项指标联合检测对患者临床诊断具有重要指导意义。

冠心病患者血清Sestrin2水平及其与基质金属蛋白酶及炎症因子的关系

目的探讨冠心病患者血清Sestrin2水平及其与基质金属蛋白酶(MMP)及炎症因子的关系。方法选择123例冠心病患者,根据疾病类型分为急性冠状动脉综合征(ACS)组69例和慢性心肌缺血综合征(CIS)组54例,另选择109例体检者为对照组。比较不同疾病类型、冠状动脉病变支数(单支组、双支组、多支组)、冠状动脉病变程度(轻度组、中度组、重度组)的冠心病患者,以及冠心病患者与对照组的血清Sestrin2、MMP-2、MMP-9、白细胞介素(IL)-6、IL-1β水平。分析冠心病患者血清Sestrin2水平与Gensini评分及血清MMP-2、MMP-9、IL-6、IL-1β水平的相关性。结果 ACS组、CIS组患者血清Sestrin2、MMP-2、MMP-9、IL-6、IL-1β水平高于对照组,且ACS组患者上述指标水平高于CIS组(均P<0.05)。单支组、双支组、多支组,以及轻度组、中度组、重度组患者的血清Sestrin2、MMP-2、MMP-9、IL-6、IL-1β水平依次升高(均P<0.05)。冠心病患者血清Sestrin2水平与Gensini评分及血清MMP-2、MMP-9、IL-6、IL-1β水平呈正相关(均P<0.05)。结论冠心病患者血清Sestrin2水平升高,并与冠状动脉病变程度密切相关;Sestrin2可能通过调控血清MMP-2、MMP-9、IL-6、IL-1β水平参与冠状动脉病变过程。

白藜芦醇通过调节沉默信息调节因子1通路改善大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用机制

目的:研究白藜芦醇(Res)对心肌缺血再灌注(MI/R)大鼠的改善作用,并初步探讨其通过调控沉默信息调节因子1(Sirt1)信号通路的作用机制。方法:将60只大鼠按照随机数字表法随机分为假手术组、心肌缺血再灌注模型组(MI/R组)、白藜芦醇组(Res组)和Sirt1抑制剂EX527组(EX527组),每组15只。检测各组大鼠心功能指标,酶联免疫吸附试验法检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平,采用比色法检测髓过氧化物酶(MPO)活力;蛋白质印迹法检测Sirt1和核因子κB蛋白表达水平。大鼠心肌细胞H9c2分为5组:对照组、缺氧/复氧组、Res组(缺氧/复氧+20 mmol/L Res处理)和EX527组(缺氧/复氧+1μmol/L EX527处理)。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组细胞活力,Rhod-2 AM标记法检测线粒体钙离子浓度,钙黄绿素AM标记法检测线粒体通透性转换孔开放程度。结果:与MI/R组比较,Res组大鼠的左心室舒张末期压(LVEDP)、心肌损伤标志物、心肌梗死面积、炎症反应、核因子κB水平、MPO活力均明显降低(P<0.05),左心室收缩压(LVSP)、+dp/dtmm、-dp/dtmm和Sirt1水平均明显升高(P<0.05),而Sirt1抑制剂EX527可逆转Res对MI/R大鼠的改善作用(P<0.05)。与缺氧/复氧组比较,Res组的细胞活力和钙黄绿素相对荧光强度明显升高,而Rhod-2相对荧光强度明显下降(P<0.05)。与Res组比较,EX527组的细胞活力和钙黄绿素相对荧光强度明显下降,而Rhod-2相对荧光强度明显升高(P<0.05)。结论:白藜芦醇可明显改善大鼠心肌缺血再灌注损伤,并抑制缺氧/复氧诱导的心肌细胞线粒体钙超载和线粒体通透性转换孔过度开放。其机制可能与调控Sirt1信号通路有关。

紫檀芪灌胃对大鼠心肌肥厚的改善作用及其分子机制

目的观察紫檀芪(PTE)灌胃对大鼠心肌肥厚的改善作用并探讨其分子机制。方法将40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、PTE组、PTE+3-TYP组各10只,除假手术组外均采用腹主动脉缩窄术建立大鼠心肌肥厚模型。PTE组及PTE+3-TYP组大鼠术后均给予PTE灌胃处理,PTE+3-TYP组大鼠在给予PTE的同时经腹腔注射SIRT3特异性阻断剂3-TYP,假手术组及模型组大鼠给予相同体积生理盐水灌胃。8周后对大鼠进行心功能检查,包括左心室舒张末期压力(LVEDP)、左心室收缩末期压力(LVESP)、等容收缩期左心室内压力上升的最大速率(+dp/dt)和等容舒张期左心室压力下降的最大速率(-dp/dt)及血清B型利钠肽(BNP)水平。检测大鼠心肌肥厚指标,包括心体比(HM/BM)、心胫比(HM/TL)及心肌细胞横截面积。超氧化物阴离子荧光探针染色法检测心肌组活性氧(ROS)生成量,Western blotting法检测心肌组织中去乙酰化修饰酶SIRT3、FOXO3a去乙酰化后产物Ac-FOXO3a、抗氧化蛋白NOX2及氧化应激标志蛋白gp91^(phox)的蛋白表达情况。结果各组大鼠心功能指标LVEDP、LVESP、血清BNP水平比较,模型组、PTE+3-TYP组>PTE组>假手术组;+dp/dt、-dp/dt比较,模型组、PTE+3-TYP组<PTE组<假手术组(P均<0.05);模型组与PTE+3-TYP组各心功能指标比较差异均无统计学意义。各组大鼠心肌肥厚指标(HM/TL、HM/BM、心肌细胞横截面积)及心肌ROS生成量比较,模型组、PTE+3-TYP组>PTE组>假手术组(P均<0.05),模型组与PTE+3-TYP组各指标比较差异均无统计学意义。各组大鼠心肌组织SIRT3、NOX2蛋白表达比较,模型组、PTE+3-TYP组<PTE组<假手术组;Ac-FOXO3a、gp91^(phox)蛋白表达比较,模型组、PTE+3-TYP组>PTE组>假手术组(P均<0.05),模型组与PTE+3-TYP组各蛋白表达比较差异均无统计学意义。结论PET可以通过减轻心肌组织氧化应激损伤改善大鼠腹主动脉缩窄所致的心肌肥厚,这种作用可能是通过激活SIRT3/FOXO3a信号通路实现的。

四氢姜黄素对脓毒血症小鼠心肌损伤的保护作用及其机制

目的研究四氢姜黄素(tetrahydrocurcumin,THC)对脓毒血症小鼠心肌损伤的保护作用及其分子机制。方法将40只C57BL/6J小鼠随机分为4组:对照组、LPS组、LPS+THC组和EX527+LPS+THC组,每组10只。采用腹腔注射脂多糖(LPS,10 mg/kg)的方法构建小鼠脓毒血症心肌损伤模型。对照组和LPS组小鼠每日给予等量生理盐水灌胃处理一次;在LPS腹腔注射前7 d,LPS+THC组和EX527+LPS+THC组小鼠每日给予THC[100 mg/(kg·d)]灌胃处理一次;且EX527+LPS+THC组小鼠在药物灌胃处理的同时给予5 mg/kg的EX527(SIRT1信号特异性阻断剂)腹腔注射处理一次。待LPS注射6 h后,用小动物超声仪检测各组小鼠左心室射血分数(LVEF)和左心室短轴缩短率(LVFS);用酶标仪测定血清中CK、CK-MB和TnI的活性;用ELISA法检测心肌组织IL-1β和TNF-α表达水平;用免疫组化染色法检测心肌组织中性粒细胞浸润程度;用试剂盒检测心肌组织MDA含量和SOD活性;用TUNEL试剂盒检测心肌细胞凋亡水平;用DHE荧光探针检测心肌组织内活性氧簇产量;用Western blot检测SIRT1、Ac-foxo1和gp91^(phox)蛋白表达情况。结果与对照组相比,LPS组小鼠血清CK、CK-MB和TnI活性均显著升高,LVEF和LVFS均显著降低,心肌组织氧化应激水平显著升高,炎症反应明显增强,心肌细胞凋亡率显著增加,SIRT1蛋白表达明显下调,foxo1的乙酰化水平明显上调(均P<0.05)。与LPS组相比,LPS+THC组小鼠经THC预处理后可明显改善LPS引起的上述改变(P<0.05)。然而,THC的保护效果均可被EX527显著逆转(P<0.05)。结论四氢姜黄素可通过激活SIRT1信号通路发挥抗氧化应激与抗炎作用,进而减轻了脓毒血症小鼠的心肌损伤。

小檗胺对糖尿病心肌病心肌损伤的保护作用及其机制

目的观察小檗胺(BBM)对糖尿病心肌病心肌损伤的保护作用并初步探讨其保护机制。方法将60只雄性C57BL/6小鼠(8周龄)随机分为4组:正常对照组(control组),单纯药物处理组(Con+BBM组),糖尿病心肌病组(DCM组)和糖尿病心肌病+药物处理组(DCM+BBM组),每组15只。DCM组和DCM+BBM组小鼠采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)联合高热量饮食法建立糖尿病心肌病模型,control组和DCM组灌胃生理盐水12周,Con+BBM组灌胃BBM(100 mg/kg)12周,DCM+BBM组小鼠在STZ注射2周后,每天通过灌胃补充小檗胺处理(100 mg/kg)共12周。待实验结束后,用小动物超声仪检测小鼠心脏收缩功能;HE染色法观察小鼠左心室心肌细胞横截面积;计算各组小鼠全心质量指数(HMI)和左心室质量指数(LVMI);Masson染色法观察心肌组织纤维化程度;免疫组化染色法检测心肌组织Collagen-1表达程度;分光光度法检测心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)的含量;RT-PCR法检测心肌肥厚相关基因α-MHC和β-MHC的表达水平;Western blot法检测SIRT3、Ac-FOXO3a和gp91 phox的蛋白表达水平。结果与control组相比,DCM组小鼠心脏收缩功能显著降低,HMI和LVMI值明显升高,心肌肥厚相关基因的表达水平显著上升,心肌组织纤维化程度和氧化应激水平显著升高,且心肌SIRT3/FOXO3a信号通路被显著抑制(均P<0.05)。与DCM组比较,DCM+BBM组小鼠心脏收缩功能障碍及心肌肥厚情况得到显著改善,心肌组织纤维化程度明显缓解,氧化应激损伤显著减轻,并且心肌SIRT3/FOXO3a信号通路也显著上调(均P<0.05)。而Con+BBM组小鼠与control组相比,在心功能、心肌肥厚情况、心肌纤维化程度、氧化应激损伤和心肌SIRT3通路表达上的差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论小檗胺通过减轻心肌组织氧化应激损伤发挥抗糖尿病心肌病心肌损伤的作用,其分子机制可能与激活心肌SIRT3/FOXO3a信号有关。

和厚朴酚对缺氧心肌细胞的保护作用及机制研究

目的:探究和厚朴酚(HK)对缺氧心肌细胞的保护作用及机制。方法:对大鼠新生鼠原代心肌细胞进行提取并培养。在HK对缺氧心肌细胞保护作用的实验中,原代心肌细胞分为常氧组(Nor+DMSO组)、对照+HK组(Nor+HK组)、缺氧组(Hypo+DMSO组)、缺氧+HK组(Hypo+HK组)。在验证去乙酰化酶沉默信息调节因子3(SIRT3)是HK保护缺氧心肌细胞关键信号分子的实验中,原代心肌细胞分为缺氧+对照病毒组(Hypo+Scramble+DMSO组)、缺氧+对照病毒+HK组(Hypo+Scramble+HK组)、缺氧+SIRT3干扰慢病毒组(Hypo+ShRNA+DMSO组)、缺氧+SIRT3干扰慢病毒+HK组(Hypo+ShRNA+HK组)。原代心肌细胞置于无糖无氧培养基中建立缺氧模型。采用CCK-8实验检测心肌细胞活力。采用TUNEL染色检测心肌细胞凋亡率。采用蛋白免疫印记检测关键分子及凋亡相关分子的表达。结果:给予HK后,缺氧原代心肌细胞的细胞活力升高,乳酸脱氢酶(LDH)释放增加,凋亡率下降,半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性下降,Bcl-2/Bax比值上升(均P<0.01)。进一步实验表明,HK降低了锰超氧化物歧化酶(SOD2)乙酰化水平,提高了SIRT3表达水平(均P<0.05)。慢病毒干扰SIRT3表达以后,再给予HK与未给予HK相比,在细胞活力、LDH释放、凋亡率、Caspase-3活性、Bcl-2/Bax比值及SOD2乙酰化水平等方面比较差异均无统计学意义(均P<0.05)。结论:HK通过SIRT3对缺氧心肌细胞发挥保护作用。

胰岛素对急性心梗大鼠氧化应激损伤的作用及机制研究

目的:探讨胰岛素减轻急性心肌梗死模型大鼠氧化应激损伤的作用及机制。方法:选取24只雄性健康SD大鼠,随机分为假手术组(Sham组)、急性心梗组(AMI组)和胰岛素处理组(Ins组),每组各8只。在建立冠脉结扎致急性心肌梗死模型6 h后,超声心动图测量大鼠左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD);检测血浆肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO)水平及心肌组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;实时定量PCR检测大鼠心肌组织中蛋白激酶B(Akt)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA表达。结果:与AMI组比较,胰岛素处理可明显改善大鼠血流动力学指标,降低LVEDD、LVESD,上调心肌组织中Akt、eNOS的mRNA表达水平,降低MDA水平,升高SOD活性(P<0.05)。结论:胰岛素可保护急性心肌梗死大鼠心肌,其作用可能与激活Akt/eNOS信号通路和抑制氧化应激相关。