放射性肺纤维化大鼠动物模型的建立及其病变规律

用 60 Coγ射线对二级雌性 Wistar大鼠 (体重 ( 2 2 0± 2 0 ) g) 2 2 3只进行 30 Gy全胸单次照射 ,其中照射野为 4 .5cm× 4 .0 cm,照距为 3m,剂量率为 2 .7Gy/ min。分别于照后 3、7、1 4、2 1、2 8、4 2、56、70、90、1 80、2 70、36 5d共 1 2个时间点进行了取材观察。结果表明 ,肺脏病变初期呈急性变化 ,以后转为亚急性或慢性进行性发展过程 ,可大致分为 2个阶段 4个期。早期即急性炎症期或渗出期 ,中期为增生期 ,这 2期合为疾病的第 1阶段 ,称为放射性肺炎。后期即纤维化期 ,晚期即胶原化期 ,这 2期共同构成本病的第 2个阶段 。

新城疫病毒F基因在新型杆状病毒表达系统中的表达及重组病毒的免疫原性

将新城疫病毒 (四平株 ) F基因插入到 p Fast Bac 质粒中 ,构建了重组质粒 p FF。 p FF转化大肠杆菌 DH10 Bac后 ,F基因在助手质粒 (helper plasmid)提供转座酶的情况下 ,通过转座进入 Bacmid,构建了重组 Bacmid(re- Bacmid)。在含有 X- gal/ IPTG、庆大霉素、卡那霉素和四环素的琼脂平板上 ,筛选白色菌落后 ,提取 re- Bacm id转染 Sf- 9昆虫细胞。在昆虫细胞内 ,re- Bacm id经复制、表达、装配 ,形成重组杆状病毒 ,并表达 F蛋白。经 SDS- PAGE和 Western- blot分析 ,表达的 F蛋白的分子大小为 6 30 0 0 ,并证明在昆虫细胞内表达的蛋白能部分糖基化。表达的 F蛋白约占细胞总蛋白的 10 %。动物试验证明 。

微小隐孢子虫CP15/60-DNA滴鼻免疫小鼠诱导的粘膜与系统免疫反应

为了观察微小隐孢子虫表面蛋白基因的重组质粒 pc DNA3- 15 /6 0诱导机体产生的免疫应答情况 ,用重组质粒经鼻粘膜接种 BAL B/c小鼠 ,采用淋巴细胞转化实验、流式细胞仪、EL ISA和免疫组化染色法检测了其诱导的系统和粘膜免疫反应 ,并在免疫后经口接种微小隐孢子虫卵囊。结果为免疫小鼠淋巴细胞增殖反应二免后 SI均大于 2 (P<0 .0 1) ;免疫后 ,CD+ 4 T细胞增加了 (32 .4 2± 2 .19) % (P>0 .5 ) ,CD+ 8T细胞增加了(2 6 .73± 3.33) % (P<0 .5 ) ;小肠粘膜 Ig A分泌型浆细胞数增加了 94 .3± 6 .3;血清中 Ig G和小肠液中 Ig A滴度分别提高了 0 .6 8± 0 .0 6和 0 .77± 0 .0 5 (P<0 .0 1) ;实验组小鼠排出卵囊减少了 2 .2倍 ,排卵时间缩短了4 .5 d(P<0 .5 )。研究表明重组质粒诱导机体产生多种免疫反应 。

DNA指纹图与生化标记分析对近交系小鼠遗传检测的比较

采用 JL- 0 2多位点探针对来自北京和西安地区的 5个 BAL B/ c群、2个 BAL B/ c- nu/ nu群、4个 C57群、1个CBA/ N群和 1个 DBA/ 2群近交系小鼠进行了 DNA指纹图分析 ,并与常规生化标记分析法进行了比较。结果显示 ,DNA指纹图的图带数均为 17～ 2 2条 ,具有良好的多态性。生化标记分析中 Hbb位点显示异常的 BAL B/ c及 BAL B/c- nu/ nu小鼠与其同群体正常小鼠的 DNA指纹图有较大差异 ,2个体之间的相似系数 (F)及共有带率 (X)均在 0 .8以下 ,完全相同 DNA指纹图的概率 (P)均在 1.3× 10 - 2以下 ;生化标记分析未见异常的群体内 ,DNA指纹图基本一致 ,P>2 .2× 10 - 1 。 DNA指纹图显示 ,不同单位的同一品系间存在一定差异 ,其 F及 X均在 0 .8以下 ,P<1.1× 10 - 3 。不同品系间 DNA指纹图的 F及 X相差较大 ,均在 0 .4以下 ,P=2 .7× 10 - 1 0。BAL B/ c群与 BAL B/ c- nu/ nu群间 DNA指纹图的 F和 X在 0 .6 5以下 ,P=3.8× 10 - 6。同一动物的基因组 DNA,经不同次实验所得出的 DNA指纹图基本一致。2种方法比较表明 ,DNA指纹图在动物遗传检测中比生化标记分析有较大的优势 ,它不但能确切地反映生化标记分析显示的异常动物的遗传变化 ,而且还检出了生化标记分析未能检出的动物遗传变异 ,因此更加灵敏。

吉林省动物病原性大肠杆菌的耐药性监测试验

从吉林省 5个地区分离出动物病原性大肠杆菌 132株 ,采用药敏纸片法对 2 2种抗生素进行了耐药性监测试验。结果表明 :受检菌株全部对 1种或多种抗生素耐药 ,无一全部敏感株。对 13～ 15种抗生素耐药的菌株数较多。其中对氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、氯霉素、庆大霉素、卡那霉素、呋喃妥因同时耐药的菌株已达半数。采用平皿二倍稀释法测定随机挑选的 4 0株大肠杆菌对 6种抗生素最低抑菌浓度的结果为耐药水平很高。因而 ,采取有效的方法抑制大肠杆菌对多种抗生素的耐药已是当务之急。

火鸡隐孢子虫18S核糖体DNA部分序列测定与系统发育分析

从长春地区鸭的粪便中分离纯化了火鸡隐孢子虫 (Cryptosporidiummeleagridis )卵囊 ,根据隐孢子虫 18SrDNA基因序列设计合成引物 ,用PCR扩增了卵囊基因组DNA大小 5 86bp的片段 ,PCR产物经电泳鉴定后用试剂盒回收纯化 ,纯化后PCR产物直接测序。将测得的序列用Dnastar软件分析并与国外已发表的相应序列进行了同源性比较 ,并绘制了系统发育进化树。结果初步建立了火鸡隐孢子虫的PCR检测方法 ,序列分析显示长春鸭源火鸡隐孢子虫与国外 9株隐孢子虫相应序列同源性在 82 7%～ 99.8%之间 ,其中与国外火鸡源火鸡隐孢子虫相应序列同源性为 85 .3% ;与C .felis同源性最低 ,与C .muris同源性最高。

大肠杆菌质粒与喹诺酮耐药性关系的研究

为研究大肠杆菌质粒与喹诺酮耐药性的关系 ,临床分离 32株耐喹诺酮药物的致病性大肠杆菌 ,经质粒消除剂溴化乙淀 (EB)、硫酸黄连素 (BS)分别处理 2 4h和 48h ,其中 4株对喹诺酮的耐药水平明显降低。经消除剂作用的菌株提取质粒进行电泳检测 ,结果只有大肠杆菌CE0 1[其中氧氟沙星 (OFL)的最小抑菌浓度(MIC) >5 0 μg/mL]的质粒带发生变化 ,且该质粒的转移与喹诺酮抗性有关。经消除剂BS作用 2 4h ,在含OFL 2 0 μg/mL的琼脂不能生长的CE0 1XC1菌株其质粒带浓度显著降低 ;作用 48h后 ,在含OFL 2 0 μg/mL琼脂不能生长的CE0 1XC2菌株其质粒带被消除 ;BS作用 48h后在含OFL 2 0 μg/mL琼脂仍然生长的CE0 1XC3菌株其质粒带几乎未改变。另外 3株耐药水平降低的菌株质粒带无变化。结果表明 :大肠杆菌CE0 1含有与喹诺酮药物抗性有关的质粒 ,这一质粒被消除剂消除后 ,CE0 1菌株的耐药性显著下降 ,对OFL的MIC由大于 5 0 μg/mL变为小于 2 0 μg/mL。其它 3株经质粒消除剂作用耐药水平降低的菌株可能是细胞膜通透性改变导致耐药。

聚合酶链反应检测4种猪源细胞系中的内源性反转录病毒(英文)

为了建立检测猪内源性反转录病毒 (porcine endogenous retrovirus,PERV)的特异性方法 ,根据已发表的 PERV的序列 ,设计并合成了针对 PERV核心蛋白 (gag)、多聚酶 (pol)、囊膜蛋白 (env)基因的 3对引物 ,预期扩增片段分别为 36 1、15 0、2 6 5 bp。应用 PCR技术检测了 PERV在 4株猪源细胞中的整合情况。结果表明 ,在所有被检细胞的基因组中均存在有 PERV的前病毒序列 ;应用 RT- PCR检测上述 4株猪源细胞中 PERV特异性 m RNA的表达 ,结果均为阳性。试验还对建立的上述 2种方法的特异性进行了探讨 ,结果表明试验建立的 PERV检测法具有较高的特异性。该方法的建立为进一步研究 PERV奠定了基础 ,还可对异种移植动物模型及异种移植受体进行病原安全性监测。

哺乳动物精原干细胞研究进展

自Ｂｒｉｎｓｔｅｒ等人异体（种）移植小鼠和大鼠精原 干细胞取得成功以来，精原干细胞 已成为干细胞领域内的一个新的研究热点。由于它在人类医学、畜牧业、濒危动物保护及转 基因动物生产等方面的潜在用途，精原干细胞很可能成为一种极为有用的生物工具。本文就 其生物学特性、分离、鉴定及应用前景等综述如下。

锌参与动物骨代谢机理的研究进展

本文就锌参与动物骨细胞核酸和蛋白质的代谢 ,调节生长因子的活性 ,参与骨折愈合 ,锌与骨质疏松的关系及锌对成骨和破骨细胞的影响等进行了综述 。

促性腺激素释放激素对兔雌性生殖系统发育的影响

将 2 1只处于间情期的雌兔 ,随机分成试验组和对照组 ,试验组每只肌注 1 m L( 1 5μg)促性腺激素释放激素 ,然后分 7个阶段取材观察卵巢和子宫的形态学变化。结果表明 ,注射促性腺激素释放激素可促进兔卵泡发育、成熟及排卵 ,加速黄体形成 。

近交系大鼠STR复合扩增DNA多态性的分析

实验从已筛选出的近交系大鼠的 2 0个基因座位点中 6个位点 ,合成 6对引物 ,利用聚合酶链反应 (PCR)扩增技术对国内已知的SHR、SHRSP、L EW、RCS、WKY和 F3 44等 6个近交系大鼠各 4只进行了 DNA多态性的分析。结果表明同一品系不同个体之间没有多态性 ;不同品系个体之间具有显著多态性 ;利用这6个特异性的位点对国内 6种常用近交系大鼠可有效地进行遗传背景的鉴别。该方法能有效地对近交系与杂交系、品系与品系、品系与亚系加以区分 ,并大大地提高了其监测效率。因此 ,本实验为实验动物遗传背景的监测提供一个高效快捷。

近交系大鼠DNA指纹图稳定性的研究

为建立ＤＮＡ指纹技术在近交系大鼠遗传监测中的方法，采用ＤＮＡ指纹图对国内已知的７个品系近交系大鼠群体进行了分析，并对相同ＤＮＡ进行了多次ＤＮＡ指纹图重复实验，其结果表明：不同品系之间ＤＮＡ指纹图差异较大，其平均图带数为（１６．３６０±２．１７８），共有带率为（０．０６１±０．００８），相似系数为（０．０６２±０．００８），相同ＤＮＡ指纹图概率为３．６９１×１０－２３。相同ＤＮＡ不同次制作的ＤＮＡ指纹图谱基本一致（Ｐ＞０．０５）。同一个体不同组织的ＤＮＡ指纹图也基本相同，从而证实了该方法具有高度的稳定性和可重复性。

促生长激素轴与铜促生长的关系

日粮中添加适量的铜可显著促进动物的生长 ,但其确切作用机理不明确。动物的生长受生长激素 ( GH)和胰岛素样生长因子( IGF)轴的调控 ,GH和 IGF水平因铜的添加而显著升高 ,并与铜促生长发生密切相关。其机理可能是铜能调控促生长调节肽的合成和释放。

B细胞亚群与牛白血病发生的关系

对 8头流行性白血病病牛 ,用 8种单克隆抗体 ( Mc Ab) ,经过免疫组织化学 ABC法和免疫荧光流式细胞检测法 ,观察了其免疫病理组织学变化和外周血及肿瘤组织的 B细胞亚群变化。结果 7例病牛的Bo CD5、Bo CD1 1 b和 s Ig M为阳性反应 ,表明肿瘤细胞来源于 B1 a细胞 ;1例病牛的 Bo CD1 1 b和 s Ig M呈阳性反应 ,而 Bo CD5则呈阴性反应 ,说明该肿瘤细胞来源于 B1 b细胞。另外 ,在免疫组织化学染色的肿瘤组织切片上在浸润的淋巴细胞中不仅见有较多的 CD3和 CD5阳性细胞 ,而且也见有较多的 CD3和 CD5阳性肿瘤细胞。表明流行性牛白血病的肿瘤细胞主要来源于 B1 a细胞 。

吉林省动物源性金黄色葡萄球菌和链球菌的耐药性监测

金黄色葡萄球菌和链球菌是临床上常见的病原菌,它们的共同点是都可引起各种化脓创和败血症,及各内脏器官的严重感染。这两类细菌感染性疾病常用青霉素类、喹诺酮类等药物治疗。随着药物的广泛使用,耐药菌株逐渐发展起来。我们对临床分离的47株金黄色葡萄球菌和24株链球菌进行了20种常用药物的耐药性监测。

动物病理学的过去、现在和未来

本文在分析动物病理学的发展史及现状的基础上 ,提出了可将现代动物病理学概括为横向联系 ,未来动物病理学则为纵向深入的新观点。这一观点将有利于推动动物病理学向更深层发展。现代动物病理学的横向联系 ,建立了许多病理学分支 ,如病理生理学、卫生病理学、化学病理学、遗传病理学、分子病理学、实验病理学、比较病理学和临床病理学等。未来动物病理学的纵向深入 ,将使人们把原位 PCR技术、流式细胞术、激发荧光细胞分类技术、显微分光光度计和生物图像技术等高新技术充分运用于病理学的研究 ,使形态结构的病理损伤与分子和基因的变化紧紧联系起来 ,进一步提高动物病理学的诊断水平。

转基因动物生物反应器

概述了转基因动物生物反应器的原理、方法及研究进展 。