微课在血细胞分析仪检验教学中的应用

血细胞分析仪是临床最常用的分析仪器之一,在疾病的筛查、诊断、治疗和预后评估中有重要作用,也是《临床基础检验学》这一门课程的重点内容之一。血细胞分析仪设备价格昂贵,其教学涉及较深的理论原理和临床应用实践,导致课堂理论教学与临床实践教学严重分离,学生课堂学习热情不高,教学效果欠佳。微课的教育资源简短、简洁、生动、泛娱乐,学生可利用碎片化时间反复学习,教师也可以第一时间收到学生的反馈,既能巩固课堂教学的学习内容,也能有效提高血细胞分析仪的理论教学效果。在血细胞分析仪理论教学中使用微课,教师通过微课进行直观逆向教学,详细讲解教学中的重点难点,让学生通过微课完成人性化的碎片学习培训,加深了学生对血细胞分析仪原理和应用的理解,提高了教学效果。

新医科背景下贵州医科大学医学检验技术应用型人才培养的改革与探索

为探索"新医科"背景下地方高校医学检验人才培养改革路径,分析医学检验技术人才培养现状,贵州医科大学实际,在教学模式、教学平台和实践教学等方面进行探索与改革,构建形成了"区域一体化"育人体系及"三化驱动、四面融通"人才培养模式,提升了人才培养质量并向贵州基层输送了大量医学检验人才。贵州医科大学的改革实践可为地方高校培养应用型医学检验人才提供参考。

临床医学检验专业实践教学模式的问题与探讨

探讨临床医学检验专业实践教学培养模式存在的问题,现阶段我国临床医学检验专业实践教学还存在严重的滞后现象,基础理论教学与临床实践严重脱节,导致培养出来的毕业生在临床实践中能力匮乏。目前临床医学检验专业实践教学模式正处在创新阶段,教学模块还很简单,但在不久将来学校可开设更多的模块,将理论专业知识分类、归纳,方便学生学习,制定详细的评价体系,使教学更加适应临床需要。为此我们大胆推测,随着信息化时代的迅猛发展,在这个互联网+大数据的时代,运用大数据与思维导图相结合进行实践教学,这种方式传播新知识会越来越受到重视,也会受到更多人的关注。

关于普通高校医学检验技术专业本科教学改革的思考

随着科技进步和社会需求的不断变化与发展,在高等教育领域人们也需要不断总结和探索。本文针对目前医学检验技术专业本科教育存在的问题,结合贵州医科大学医学检验技术专业本科教学工作现状及教学改革经验,提出一些可供实践的改革思路,包括推进信息化教学技术的应用、促进教学模式向以“学”为中心的转变、课程设置改革、开放性实验及虚拟仿真实验的运用等。

PDCA联合PBL教学法在骨髓检验实习教学中的应用

目的探讨戴明环(plan-do-check-action,PDCA)循环联合以问题为导向的教学法(problem-based learning,PBL)在医学检验骨髓细胞学临床实习中的教学效果。方法选取2020年1月—2022年1月贵州医科大学附属医院医学检验专业的60名本科实习生,随机分为观察组(PDCA循环联合PBL教学法)和对照组(传统教学),各30名,比较两组实习生的理论知识和临床实践操作技能考核成绩及综合能力。结果观察组的理论部分考核成绩、临床实践部分操作技能考核成绩、临床病例分析考核成绩分别为(93.77±0.51)分、(92.90±2.72)分(、93.10±2.73)分,高于对照组的(83.57±0.56)分、(84.03±3.19)分、(85.90±3.61)分,差异有统计学意义(P<0.05);调查问卷结果显示与对照组相比,观察组认为教学方法重难点突出、明确学习目的,提升学习积极性,提升细胞形态辨认能力,提升临床沟通能力,提升语言表达能力,提升动手能力、分析能力,提升团队合作能力,减轻骨髓细胞学习压力的人数更多,差异有统计学意义(P<0.05)。结论医学检验专业骨髓细胞学检查在临床实习教学中采用PDCA联合PBL教学法,不仅能提高学生在临床实习的教学质量,也能提高学生的理论知识、临床实践能力及综合素质。

基于雨课堂的混合式教学在临床血液学检验技术实习教学中的实践探讨

目的:为了研究基于雨课堂的混合式教学在临床血液学检验技术骨髓细胞形态学实习教学中的教学效果。方法:选择在我科实习的2016、2017级医学检验技术专业两个年级本科学生为研究对象,试验组利用雨课堂教学平台采用混合式教学法,对照组采用传统教学法,通过发放调查问卷、理论考试、技能考试、病例分析考试比较两组学生的学习效果。结果:试验组出科考核成绩明显高于对照组。调查问卷显示试验组学生普遍喜爱雨课堂教学平台采用混合式教学法进行教学,能提高学习自主性,激发学习兴趣,充分体现以学生为主体,活跃学习氛围。结论:基于雨课堂的混合式教学能激发学生的学习兴趣,进一步提高学生对骨髓细胞形态的识别能力,从而调动学生学习的积极性和主观能动性,加强了学生理论联系临床实践的技能,提高教学效率与质量。

两种评估肾小球滤过率公式在IgA肾病患者中的一致性检验

目的 探讨IgA肾病患者两种评估肾小球滤过率公式的一致性。方法 回顾性分析在本院肾内科治疗的IgA肾病患者293例资料,分别使用2009 CKD-EPI-Cr公式以及2021 CKD-EPI Cr-Cys-C公式来计算eGFR值。通过偏差、精度、准确度及协方差相关系数(CCC指数)及克拉克误差网格分析对两者的一致性进行评估。分层分析探究不同肾功能组患者的两种eGFR一致性变化。结果 在总人群及肾功能异常人群中,这两种公式的偏差中位数较小且处于临床可接受范围,精度和准确度亦处于较好水平,而CCC指数也表明两者一致性较好。但在肾功能正常或轻度异常的患者中,这两种公式的偏差较大,精度和准确度较低,CCC指数提示其一致性较差。误差网格分析结果表明,在总人群中,有72%的患者这两种方法可进行替换,68.3%的肾功能不全患者两种方法一致性较好,对于肾功能正常或轻度异常的患者,这两种方法的一致性比例分别为78.26%和100%。结论 对于肾功能异常的IgA患者,新的2021 CKD-EPI Cr-Cys-C公式与原公式一致性较好。

面向未来的检验医学教育教学改革与发展的探讨

检验医学在我国发展有一段时间,随着科学技术发展速度越来越快,人民的生活水平也不断提高,对自己的身体健康有更多的需求,检验医学带着这样的需求高速发展,不同医学检测技术和医学高素质人才涌现出来,检验医学成为了目前医学教育中重要学科,检验医学是临床医学和实践医学技术的综合产物,同时是多技术综合性强的医学学科,检验医学的发展带动了医学教育的深度改革,要想培养出检验医学教育人才成为高校需要不断探索的新课题。

重症医学科耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的基因型和同源性分析

目的了解贵州省从江县人民医院重症医学科下呼吸道感染患者耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)的基因型,并对部分菌株作同源性分析。方法回顾性分析2018年1月至2021年12月贵州省从江县人民医院重症医学科下呼吸道感染患者CRAB占比情况,以分离获得的40株CRAB为研究对象。采用VITEK2-compact全自动细菌鉴定药敏系统作细菌鉴定及药敏。运用PCR技术检测7种常见碳青霉烯酶基因(SHV、TEM、IMP、VIM、ADC、OXA-23、OXA-58)。应用多位点序列分型(MLST)法分析40株试验菌的同源性。结果2018—2021年贵州省从江县人民医院重症医学科下呼吸道感染患者CRAB的检出率逐年增加。40株CRAB对多黏菌素敏感率为97.50%,阿米卡星敏感率为80.00%。耐药基因检测发现TEM、ADC、OXA-23基因携带率分别为47.5%、22.5%、22.5%,以及存在多种基因型共同表达的情况。MLST分型结果显示共分为5个序列型,其中以ST195型为主,占62.5%,其次为ST208型,占20.0%。结论重症医学科下呼吸道感染患者检出CRAB逐年增加,可选择的抗生素有限。携带TEM、ADC和OXA-23基因是鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药的主要原因。MLST结果表明ICU病房存在克隆菌株。

2016-2021年贵州省某三甲医院临床穿刺液标本中细菌的分布特征及耐药性

目的探讨2016—2021年贵州省某三级甲等医院临床穿刺液标本中细菌的分布特征及其耐药(R)性。方法收集2016—2021年贵州省某三级甲等医院临床穿刺液标本中分离出的非重复细菌3539株,采用全自动细菌鉴定药敏仪和基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪(VITEK-MS)检测标本中的细菌种类,采用自动化仪器检测法、纸片扩散法及Etest法检测标本中细菌的药物敏感(S)性,并根据临床实验室标准化协会(CLSI)2021年标准判断细菌的S及R情况。结果3539株非重复细菌中革兰阴性菌2244株(63.41%)和革兰阳性菌1295株(36.59%),85.7%来自于住院病人、且以重症监护室分离最多,门急诊病人占14.3%;检出率最高的细菌依次为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、屎肠球菌及鲍曼不动杆菌,耐碳青霉烯类的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及阴沟肠杆菌检出率为1.1%、40.2%及13.6%,耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌检出率为92%和46%,替加环素对鲍曼不动杆菌仍保持较高抗菌活性(S率为93.6%);葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的检出率分别为24.37%和72.33%,未检出万古霉素R的菌株,利奈唑胺和奎奴普丁/达福普汀对葡萄球菌具着较高的抗菌活性;屎肠球菌对大部分抗菌药物R率高于粪肠球菌,未检出万古霉素、利奈唑胺R的屎肠球菌。结论2016—2021年贵州省某三甲医院临床穿刺液标本中细菌感染以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、屎肠球菌及鲍曼不动杆菌为主,分离细菌对部分常见抗菌药物的R率呈增长趋势,尤其是耐碳青霉烯类药物的肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌。

近平滑念珠菌临床分离菌株毒力因子差异表达研究

目的比较近平滑念珠菌临床分离株毒力相关因子天冬氨酸蛋白酶和生物膜形成及其基因表达的差异。方法采用基因测序及微卫星分型方法,对临床真菌感染患者分离的近平滑念珠菌进行鉴定,检测各菌株产生分泌型天冬氨酸蛋白酶及生物膜形成的能力,比较各菌株生物膜形成相关基因BCR1、EFG1、HWP1及天冬氨酸蛋白酶毒力基因SAPP1、SAPP2、SAPP3表达的差异。结果共收集8株临床分离的近平滑念珠菌,经基因鉴定均为基因Ⅰ型。微卫星分型结果显示,8株临床菌株分为4个微卫星型别,G1、G2、G3菌株为不同型别,分别分离自甲患者的尿、经外周静脉置入中心静脉导管(PICC)和血;J1、J2、J3、J4、J5菌株为同一型别,分离自乙患者不同时期血标本。8株临床菌株均能形成生物膜,生物膜形成能力均高于近平滑念珠菌标准菌株ATCC 22019,其中G1、G3和J5菌株生物膜形成能力强,J1、J2、J3、J4菌株生物膜形成能力中等,G2菌株生物膜形成能力弱。8株临床分离菌株均分泌天冬氨酸蛋白酶,酶体外表达水平均高于近平滑念珠菌标准菌株ATCC 22019,G3、G1、G2菌株分别为低表达、中表达、高表达,酶体外表达水平比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);J1、J5菌株为中表达,J2、J3、J4菌株为高表达,中表达菌株与高表达菌株比较,差异有统计学意义(P<0.05)。甲、乙患者分离的各菌株生物膜形成基因BCR1、EFG1、HWP1表达水平均增加,其中甲患者G1菌株EFG1基因表达水平高于G2菌株(P<0.05),乙患者分离的菌株BCR1、EFG1、HWP1基因表达水平差异无统计学意义。甲、乙患者分离的各菌株天冬氨酸蛋白基因SAPP1、SAPP2、SAPP3表达水平均增加,其中G1菌株的SAPP1和SAPP2表达水平高于G2、G3(均P<0.05),乙患者SAPP1、SAPP2、SAPP3基因表达水平差异无统计学意义。结论近平滑念珠菌临床分离株生物膜形成和天冬氨酸蛋白酶产生能力均高于标准菌株,分离自不同标本的菌株毒力因子表达具有差异性,不同时期分离的菌株毒力因子表达差异不明显。患者可能存在同一时期多部位感染不同MT型别近平滑念珠菌的情况。

缺氧诱导因子-1α在慢性肾脏病中的研究进展

慢性肾脏病(CKD)起病隐匿,随着患病率的逐年上升,部分患者就诊时已进展为终末期肾脏病,是世界重要公共卫生问题。早期、及时的诊疗有助于延缓疾病进展,改善患者生活质量及提高预后。目前研究表明,直接或间接引起的缺氧是CKD发生发展的重要病理机制,缺氧诱导因子(HIF)-1α是机体对缺氧反应的主要核转录因子之一,在能量代谢、血管生成、细胞凋亡、组织炎症和纤维化过程中对肾脏疾病的发生发展起重要调控作用。故该文将对HIF-1α在CKD中的研究进展进行综述,为CKD的防治提供更多有效策略。

金属纳米颗粒治疗白念珠菌感染研究进展

念珠菌病在全球范围内有很高的发病率及死亡率,其主要病原体是白念珠菌。目前,由于抗真菌药物存在毒性、耐药性、给药途径单一、价格昂贵等缺陷,使得念珠菌病治疗效果不理想。为了克服这一现状,具有抗真菌活性和运载抗真菌药物潜力的金属纳米颗粒被广泛研究。该文综述了金、银、铜、铁纳米颗粒的抗白念珠菌的作用机制及应用进展。与传统抗真菌药物比较,金属纳米颗粒通过多靶点机制发挥抗真菌作用,可最大限度地减少抗真菌耐药性的出现。虽然细胞毒性限制了金属纳米颗粒的应用,但绿色合成可降低金属纳米颗粒的细胞毒性并提高其抗菌性能等。

类风湿关节炎患者外周血单个核细胞System Xc-/GSH/GPX4铁死亡通路的表达及其对炎症因子分泌的影响

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)胱氨酸/谷氨酸逆转运体(System Xc-)/谷胱甘肽(GSH)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)铁死亡通路中相关基因与蛋白的表达及其对炎症因子分泌的影响。方法纳入RA患者及同期健康体检者各30例,采用Ficoll-hypaque密度梯度离心法分离PBMC,将细胞分为健康对照、RA、铁死亡抑制剂、铁死亡诱导剂组。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞活力,流式细胞术FerroOrange荧光探针检测细胞内Fe 2+相对荧光强度、DHE荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)阳性细胞比例,蛋白免疫印迹及实时荧光定量PCR(qPCR)检测核转录因子红系2相关因子(Nrf2)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、GPX4蛋白与mRNA的表达,流式细胞术检测细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1、IL-6的含量。结果与健康对照组比较,RA组PBMC内Fe 2+浓度和ROS水平升高,Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白和mRNA的表达降低,PBMC上清液中TNF-α、IL-1、IL-6的含量升高,差异均有统计学意义。与RA组比较,铁死亡抑制剂组PBMC内Fe 2+浓度和ROS水平降低,SLC7A11、GPX4蛋白和mRNA的表达升高,Nrf2蛋白的表达升高,PBMC上清液中IL-6的含量降低、TNF-α的含量升高,差异均有统计学意义。与RA组比较,铁死亡诱导剂组PBMC内ROS水平升高,SLC7A11蛋白和mRNA的表达降低,Nrf2蛋白的表达降低、GPX4蛋白的表达升高,PBMC上清液中TNF-α、IL-1的含量升高,差异有统计学意义。与铁死亡诱导剂组比较,RA患者PBMC细胞活力降低,差异有统计学意义(P<0.0001)。结论RA患者PBMC中存在铁死亡,抑制或诱导RA患者PBMC铁死亡,将抑制或促进炎性因子分泌。抑制RA患者PBMC铁死亡可能有助于治疗RA。

贵州省某三甲医院ICU患者铜绿假单胞菌感染的耐药性分析

铜绿假单胞菌（pseudomonas aeruginosa）是非发酵革兰阴性杆菌,广泛分布于自然界、土壤、空气、水,人体皮肤、呼吸道、肠道。近年来,随着广谱抗生素、免疫抑制剂、糖皮质激素等广泛应用和侵入性医疗操作的广泛开展,铜绿假单胞菌已成为院内感染重要机会性病原菌,并且对常用抗生素的耐药率呈逐年增加趋势。

安顺地区受检妇女中高危型人乳头瘤状病毒的检出及单核苷酸多态性特征

目的 探讨安顺地区受检妇女中高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)的检出及单核苷酸基因多态性(SNP)特征。方法 采集10 774例行HPV分型检测妇女的宫颈脱落细胞为细胞标本来源,选取其中HR-HPV阳性且有组织病理学活检指征的298例受检者的宫颈组织为组织标本来源,采用聚合酶链式反应(PCR)体外扩增和反向点杂交相结合检测宫颈脱落细胞的HPV基因分型,进一步采用SnapGene、MEGA11分析HPV52、HPV58型的SNP,采用苏木精-伊红(HE)染色判定宫颈组织的宫颈病变级别。结果 受检妇女中HR-HPV以单一感染为主、阳性率为20.36%,HR-HPV感染亚型主要为HPV52、HPV16、HPV58、HPV53及HPV51;宫颈病变中HR-HPV优势型别为HPV16、HPV52、HPV58、HPV18及HPV33;SNP和进化树分析发现,HPV52型E6和E7区SNP点分别有7个(其中A125T、A294G是新的突变位点,G350T、A379G突变率最高)和3个(其中T666C是新的突变位点,C751T、A801G突变率最高)、且HPV 52型均分布于B谱系,HPV58型E6、E7区SNP点分别有3个和8个、突变位点最高的是T744G、且HPV58型均分布于A谱系。结论 安顺地区受检妇女主要HPV阳性型别为HPV52、HPV16及HPV58型,宫颈病变中主要优势型别为HPV16、HPV52及HPV58型,且HPV52、HPV58有其特定的SNP。

安顺地区结核分枝杆菌基因分型及耐药性分析

目的研究贵州省安顺地区结核分枝杆菌(MTB)主要基因分型及耐药性。方法采用RD105基因缺失法和双重PCR法对安顺地区152株MTB临床分离株进行基因分型、药物敏感试验分析耐药性,采用基因测序技术对北京型MTB利福平耐药基因RNA聚合酶β亚基(rpoB)进行测序。结果152株MTB中,122株(80.26%)为北京型、30株(19.74%)为非北京型;108株MTB对抗结核药物敏感,44株对16种抗结核药物耐药,总耐药率为28.95%;44株MTB耐药菌株中31例对利福平耐药,占70.45%,北京型MTB对利福平耐药率显著高于非北京型(χ^(2)=6.896,P=0.009),非利福平耐药结核菌株共13株、占耐药结核菌株的29.55%;北京型MTB利福平耐药rpoB基因测序结果表明,相关位点突变共15株,其中最显著的突变位点是rpoB450、为Ser450Leu,共7株(7/15,46.67%)。结论贵州省安顺地区MTB主要为北京型,主要对利福平耐药,耐药基因rpoB的突变位点为Ser450Leu。

贵州汉族老年人群载脂蛋白A5基因多态性与2型糖尿病的相关性

目的探讨载脂蛋白A5(Apo A5)基因-1131T>C及56C>G基因多态性与贵州汉族老年人群2型糖尿病(T2DM)及体内血脂水平的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)结合琼脂糖凝胶电泳技术检测100例健康人及142例T2DM患者Apo A5-1131T>C、56C>G基因型,并统计等位基因频率分布情况,同时测定所有对象的血脂、血糖水平。结果 1T2DM组和对照组的Apo A5-1131T>C位点基因型频率比较差异显著(P=0.006),等位基因频率比较无差异(P=0.349);2对照组和T2DM组的Apo A5-1131C等位基因(TC+CC)携带者的甘油三酯(TG)均明显高于非C等位基因携带者(TT)(P<0.05);3未发现Apo A5基因56C>G基因多态性。结论 Apo A5-1131T>C基因多态性与贵州汉族老年人群T2DM的发病风险有关,携带C等位基因的人群发病风险更高,且C等位基因与TG水平增高有关;未检测出Apo A5基因56C>G基因多态性。

钙结合蛋白S100A4抑制剂Niclosamide调节支气管上皮细胞炎症反应

目的:研究钙结合蛋白S100A4抑制剂Niclosamide对支气管上皮细胞炎症反应的潜在调控机制。方法:体外培养人支气管上皮细胞BEAS-2B,给予LPS刺激或Niclosamide预处理,RT-qPCR、Western blot检测相关细胞因子和信号分子表达,荧光探针检测细胞内ROS水平。结果:LPS刺激和Niclosamide预处理导致细胞ROS水平较对照组升高(P<0.05)。与对照组相比,LPS刺激导致支气管上皮细胞S100A4 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05),相关信号通路分子TLR4/STAT3、MAPK1/3/SIRT1、NF-κB/IKKβ/p65 mRNA表达升高(P<0.05),炎症因子IL-1β和IL-6、紧密连接蛋白Occludin和ZO-1 mRNA表达升高(P<0.05)。S100A4抑制剂Niclosamide预处理后,以上基因表达较LPS组呈不同程度下降(P<0.05),但TLR4/MAPK1、NF-κB/IKKβ/p65无明显变化(P>0.05)。Western blot结果显示:LPS组S100A4、STAT3、MAPK3/SIRT1、IL-1β和TNF-α蛋白表达较对照组明显升高(P<0.05),而Occludin表达较对照组降低(P<0.05)。Niclosamide预处理后S100A4、STAT3、MAPK3/SIRT1、IL-1β和TNF-α表达较LPS组降低(P<0.05),而Occludin表达较LPS组升高(P<0.05)。结论:钙结合蛋白S100A4抑制剂Niclosamide可抑制支气管上皮细胞S100A4表达并抑制其炎症反应,可能与STAT3、MAPK3/SIRT1信号相关。

基于细胞焦亡与免疫相关基因构建及验证肝细胞癌预后风险模型

目的:利用生物信息学方法构建并验证细胞焦亡与免疫相关基因的肝细胞癌预后风险模型,根据其风险评分探索免疫相关性特征,以指导个性化免疫治疗。方法:从TCGA、GEO官网分别下载TCGA-LIHC和GSE14520基因表达谱,从INNATEDB和IMMPORT官网下载免疫相关基因。以TCGA为训练组,GEO为测试组,对训练组细胞焦亡基因表达谱采用Cox回归分析,筛选预后相关基因进行共识聚类分组,提取分组间差异基因与免疫相关基因的交集基因,对交集基因应用单因素Cox和Lasso回归分析,得到预后相关风险评分模型。根据训练组风险中位值划分高低风险组,利用测试组验证模型可行性,最后探索训练组富集分析(GO、KEGG、GSEA)、免疫相关性分析及模型基因蛋白表达情况。结果:共筛选出9个可靠的风险模型基因(ICAM1、S100P、FABP3、CCL20、HRG、IGHM、SPP1、C4BPA、C6)。GO富集分析显示风险差异基因主要参与各种代谢过程。KEGG富集分析显示风险差异基因主要参与补体和凝血级联信号通路。GSEA富集分析显示高风险组与致癌途径的激活密切相关。在免疫浸润、免疫相关通路及免疫检查点中发现高低风险组具有显著差异。HPA数据库证明ICAM1、S100P、SPP1模型基因免疫组化表达存在明显差异。结论:9个基因组成的风险模型可能成为肝细胞癌发生、发展及预后相关的潜在生物标志物,并为优化肝细胞癌的诊治提供新线索。