酸性微环境对巨噬细胞中周期生物钟1的表达及M2型极化的影响

目的探讨酸性微环境对巨噬细胞中周期生物钟1(PER1)的表达及替代途径激活的巨噬细胞(M2型)极化的影响。方法20只6~8周龄C57/6J雌性小鼠,腹腔注射含5%淀粉的生理盐水,连续3 d,麻醉处死,对小鼠腹腔灌流并回收灌流液,接种至6孔板培养2 h,贴壁细胞即为小鼠腹腔巨噬细胞,分别加pH7.3培养基(pH7.3组)、pH6.5培养基(pH6.5组)及0.02 mol/L乳酸培养基(0.02 mol/L乳酸组),培养24 h;采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测3组小鼠腹腔巨噬细胞中白细胞介素1β(IL-1β)、血管内皮因子(VEGF)、精氨酸酶-1(ARG-1)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及PER1信使RNA(mRNA)的表达,采用酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)检测3组小鼠腹腔巨噬细胞中IL-10、IL-12、VEGF、肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白的水平;溴化三甲基-2,3-二油酰氧基丙基铵(DOTAP)、二油酰基磷酰基乙醇胺(DOPE)、胆固醇、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇(2000)-琥珀酰胺(DSPE-PEG2000-NHS)按摩尔比为7∶7∶5∶1溶解于氯仿溶液,使用旋转蒸发仪旋蒸形成脂质体薄膜,加无核酸酶双蒸水采用超声水浴仪和小型挤压器制备单层脂质体,使用无酶水溶解PER1小干扰RNA(siRNA)并与脂质体溶液按照1∶10的质量比于室温下震荡混匀,按照1∶1000体积比加别藻蓝蛋白-甘露糖受体(APC-CD206)抗体得脂质体-PER1复合体(Lipo-PER1)阳离子脂质体,采用透射电子显微镜电镜观察Lipo-PER1复合体形态与结构;B16-F10黑色素瘤细胞和RAW264.7巨噬细胞按1∶1比例共培养,共聚焦显微镜观察B16-F10黑色素瘤细胞和RAW264.7巨噬细胞对Lipo-PER1的摄取;对数期生长的RAW264.7巨噬细胞分别加Lipo-PER1、脂质体-阴性对照(Lipo-NC)复合体,培养6 h,采用RT-PCR和ELISA法检测2组RAW264.7巨噬细胞中IL-1β、抗原分化簇86(CD86)、ARG-1、L-10 mRNA及TNF-α、转化生长因子-β(TGF-β)蛋白的表达。结果与pH7.3组对比,pH6.5组和0.02 mol/L乳酸组小鼠腹腔巨噬细胞IL-1βmRNA表达下调(P<0.05),ARG-1、VEGF、HIF-1α及PER1mRNA表达上调(P<0.05),IL-12、TNF-α蛋白水平减少(P<0.0001),IL-10、VEGF蛋白水平增加(P<0.01);透射电镜与共聚焦显微镜观测结果表明,Lipo-PER1构建成功并能成功被巨噬细胞摄取;与Lipo-NC组比较,Lipo-PER1组RAW264.7巨噬细胞中I L-1β、CD86 mRNA表达上调(P<0.05或P<0.001),ARG-1、IL-10 mRNA表达下调(P<0.01或P<0.05),TGF-β蛋白表达增加(P<0.0001),TNF-α蛋白表达减少(P<0.05)。结论酸性微环境能上调巨噬细胞中PER1的表达,进而促进巨噬细胞M2型极化。

医学院校生物医学工程专业开放性实验教学的建立

针对模拟电子技术和数字电子技术课程实践教学存在的诸多不足,以贵州医科大学生物医学工程专业为例,进行了开放性实验的教学。通过开放性实验,提高学生的动手能力和解决实际问题的能力。

黄曲霉毒素B1对鼠源树突状细胞生物力学特性、迁移能力和免疫功能的影响

目的黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)是目前已知的最强化学致癌物之一,具有很强的免疫抑制作用,探究其对机体内功能最强大的抗原提呈细胞——树突状细胞(dendritic cells,DCs)生物力学特性(膜流动性、渗透脆性、黏附能力等)、DCs迁移能力和免疫功能的变化,为进一步解析AFB1引起的免疫毒性机制奠定基础。方法体外分离、诱导培养C57BL/6小鼠骨髓来源的DCs,在加入LPS诱导成熟过程中同时加入不同浓度的AFB1,分析DCs的膜流动性和渗透脆性的变化,检测DCs黏附能力及黏着斑的变化,并分析DCs的迁移能力、细胞骨架结构变化及刺激T细胞增殖分化的能力。结果AFB1处理后,DCs膜流动性增大、抗低渗环境的能力减弱;黏着斑数量明显增加,黏附分子的表达显著上调,细胞黏附能力增强;细胞迁移能力受到损伤,细胞骨架及其结合蛋白的表达水平发生不同程度的改变;DCs的免疫表型发生改变,刺激T细胞增殖的能力减弱,诱导初始T细胞向Th17细胞分化。结论AFB1能够显著影响DCs的分化成熟、生物力学特性和细胞骨架结构,进而调控其迁移能力和免疫学功能,这可能是AFB1发挥免疫抑制作用的机制之一。

基于情景教学法的生物医学光子学课程思政案例研究及其思政育人效果评估

本研究旨在探讨情景教学法在生物医学光子学课程思政教学中的应用及其育人效果评估。在高等教育改 革深入的形势下,课程思政已成为提升学生综合素质、培养德才兼备人才的重要途径。生物医学光子学作为一门前沿交 叉学科,其教学内容不仅涉及复杂的专业知识,还蕴含着丰富的思政元素。本研究在此背景下,通过引入情景教学法,旨 在创新生物医学光子学课程的思政教学模式,实现专业知识传授与思想道德教育的有机融合。本研究采用问卷调查、课 堂观察、学生访谈等方式,结合生物医学光子学的学科特点,设计了一系列融入思政元素的教学情景案例。研究发现,情 景教学法在生物医学光子学课程思政教学中展现出显著优势,能够促进学生深入理解专业知识,增强学生社会责任感、 职业道德观念和创新意识。

马铃薯套种苦荞对土壤养分、酶活性和微生物的影响

为分析马铃薯套种苦荞下不同时期土壤中的养分、土壤酶活性和微生物生态在苦荞不同生长时期的变化。结果表明,与马铃薯净作区相比,马铃薯套种苦荞区的土壤pH值在苦荞各个生长时期整体均显著上升。在马铃薯净作区,与2020年相比,2021年不同生长时期各土壤营养指标、土壤酶活性具有显著差异,但是对于马铃薯套作苦荞区,不同生长时期的土壤营养指标和土壤酶活性无显著差异,表明套作苦荞可显著缓解马铃薯连作对土壤的影响。在2020年,与净作区相比,马铃薯套作苦荞区在幼苗期的土壤全碳、速效磷含量显著下降,有机质含量显著上升。在苦荞开花期,土壤全碳、全氮、全磷、碱解氮磷含量显著降低,全钾和有机质含量则显著上升;在苦荞成熟期,土壤全碳、全氮、全磷、碱解氮含量显著下降,全钾、速效钾、速效磷含量则无显著变化,有机质含量显著上升;在苦荞幼苗期、开花期与成熟期,土壤脱氢酶活性均显著上升,其他土壤酶活性的变化均不显著;2021年各指标的变化趋势与2020年一致。由结果可知,幼苗期的苦荞需要从土壤中吸收部分碳肥、磷肥,开花期的苦荞需要从土壤中吸收部分碳肥、氮肥、磷肥,成熟期的苦荞需要从土壤中吸收部分碳肥、氮肥。但在上述3个时期,土壤脱氢酶活性的提升可以促进有机质代谢,从而提升有机质含量。另一方面,马铃薯套作苦荞可以降低真菌总数、提升细菌总数,尤其是部分具有生防作用的放线菌总数。综上,苦荞套作模式可稳定土壤pH值,促进苦荞合理利用土壤中的营养成分,并提升有机质、钾肥含量,同时改善土壤微生物生态系统,降低病害发生率,以缓解马铃薯连作对土壤的影响,因而对马铃薯、苦荞而言均是有益的选择。

医学院校生物技术专业生物信息学教学探索

生物信息学是生物学与计算机科学交叉的前沿学科,由于专业性质及对学生培养要求的不同,生物信息学课程的教学内容也不尽相同。本文探讨了医学院校生物技术专业生物信息学课程建设和教学过程中的一些体会,重点讨论了如何做到理论与实践相结合,并将生物信息学的教学与其他专业课程和教师的科研联系起来,提高学生的实践能力。

树突状细胞的生物力学与力学生物学研究进展

树突状细胞(dendritic cells,DCs)是目前已知机体内功能最为强大的抗原提呈细胞,具有高效的抗原摄取、加工和处理能力,能够在二级淋巴组织向幼稚T细胞提呈抗原,从而诱导免疫应答或耐受,在启动和放大先天性及适应性免疫中发挥关键作用。DCs在发挥其生理学功能的过程中经历复杂的化学和力学微环境变化,并表现出不同力学表型和免疫表型,深入理解调控DCs力学表型和免疫表型的化学和力学因素是利用其治疗免疫相关疾病的先决条件。本文主要介绍DCs生物力学与力学生物学研究的进展,并探讨其在免疫相关疾病治疗中的潜在应用和未来发展方向。

医科院校生物技术专业《生物防治》课程体系教学改革探索

文章简述了我院生物技术专业本科生《生物防治》课程体系进行教学改革的一系列措施。通过调查比较该课程教改前后学生的学习效果、学习兴趣等方面的变化,分析此次教改的效果,以及今后努力的方向,为做好医科院校生物技术专业学生《生物防治》课程的教学工作积累了经验,提供了参考。

信息技术时代下“微生物工程”课程教学改革

文章首先阐述了信息技术时代下专业课程教学常用路径,然后论述了信息技术时代下“微生物工程”课程教学改革的流程和成效,最后对信息技术时代下“微生物工程”课程教学改革进行了反思。

贵州省某高校大学生领悟社会支持与情绪健康的关系

目的:考察大学生领悟社会支持与情绪健康的关系以及在人口统计学变量上的差异。方法:采用《公共事件心理健康量表》与《领悟社会支持量表》对500名大学生进行调查。结果:在面临外界环境压力下大学生群体中男生的心理问题显著高于女生;大四年级显著高于其他年级;领悟社会支持与情绪健康的各个维度有显著负相关,且能负向预测情绪反应。结论:领悟社会支持是缓冲心理问题的重要途径之一。

医学院校生物无机化学课程建设的几点思考

生物无机化学是化学生物学专业课程体系的一门核心课程,文章针对教学过程中出现的问题,结合最新的一些教学理念,强调以医学院校特色为出发点,从教学内容、教学方式和考核方法等方面进行探索总结,以进一步提高教学质量和学生综合能力。

黄曲霉毒素B1对肝癌细胞HepG2生物物理学特性及细胞骨架结构的影响

目的研究黄曲霉毒素B1(AFB1)对人肝癌细胞(HCCs)生物物理学特性及细胞骨架结构的影响。方法利用0、0.01、0.1、1、5、10μmol/L AFB1分别处理HepG2细胞24 h和48 h,采用CCK-8试剂盒检测细胞活力。在此基础上,分析10μmol/L AFB1对细胞渗透脆性、膜流动性、细胞电泳率和F-actin骨架结构的影响。随后,提取细胞总RNA,通过实时荧光定量PCR检测12种主要细胞骨架结合蛋白的转录水平变化。结果AFB1处理48 h时HepG2细胞的活力呈剂量依赖性增强。10μmol/L AFB1处理能够增强HepG2细胞抗低渗能力及细胞电泳率,细胞骨架F-actin含量明显增加,主要细胞骨架结合蛋白的mRNA表达发生改变。结论AFB1能够影响HepG2细胞的生物物理学特性、细胞骨架结构及其结合蛋白,这可能与其毒性作用直接相关。

化学生物学课程思政元素挖掘与运用

在化学生物学课程的教学过程中,将该课程作为专业学生课程思政课的重要平台,确立该课程思政元素选取的五个原则,即所选用的思政元素要有利于讲好中国故事、有利于传承中华文明、有利于厚植红色基因、有利于体现专业特色和有利于弘扬科学精神。根据这些原则为化学生物学课程内容中每一章精心选取1~2个思政元素案例运用于教学,在教学中实现知识传授、能力培养和价值塑造。

浅谈课程思政融入高校“生物有机化学”课程教学

“生物有机化学”是生物化学与有机化学交叉的一门新学科,是化学生物学专业的重要基础课程,主要研究如何应用有机化学理论与方法来研究和解释生命现象的本质。传统的“灌输式”教学方法,难以满足将各类课程与思想政治理论课同向同行,形成协同效应的要求,寻求教学理念的改变势在必行。因此,在课程教学中将通过结合专业课程适时适当融入思想政治元素,培养具有较高的专业素养、道德修养、家国情怀和使命担当的全方位人才。

二阶非线性抛物方程的B样条有限元法

首先,用二次B样条有限元法求解Fisher-Kolmogorov(FK)方程,证明半离散格式与全离散格式解的稳定性与收敛性;其次,用Crank-Nicolson方法离散时间变量,得到近似解的收敛阶为O((Δt)^(2)+h^(3));最后,用数值算例验证了理论分析结果及B样条有限元法的有效性.

超声辅助低共熔溶剂提取车前草总黄酮的工艺研究

为探究车前草总黄酮的最佳提取工艺,以总黄酮提取率为评价指标,在提取温度、反应时间、低共熔溶剂含水量、摩尔比等单因素试验基础上进行响应面优化。结果表明,车前草总黄酮的最佳提取工艺为提取温度34℃,反应时间41 min,低共熔溶剂含水量47%,摩尔比2.2:1。在此条件下,总黄酮的提取率可达6.28%。研究为车前草的开发及综合利用提供理论支撑。

医学研究生生活方式和健康素养的现状及关系

目的了解医学研究生生活方式和健康素养的现状及关系。方法采用分层整群随机抽样法选取贵州省全日制医学硕士研究生1562人为调查对象,自行设计调查问卷收集研究生的一般情况(包括性别、民族、年龄、身高、体质量、年级、学位类型、专业、生源地、父母亲文化水平及自评健康状况等),采用大学生健康生活方式量表和全国居民健康素养监测问卷测评研究生的生活方式和健康素养,采用Pearson相关分析和多元线性回归模型分析健康素养与生活方式的关联性。结果医学研究生生活方式总得分为(121.23±18.04)分,健康素养得分为(60.34±6.09)分,健康素养水平为75.99%;Pearson相关分析显示,除运动锻炼行为外,医学研究生的生活方式及各维度得分均与健康素养得分呈正相关(P<0.001);多元线性回归分析显示,在控制年龄、民族、年级、生源地、父母亲文化水平、家庭月收入及自评健康状况等变量后,医学研究生健康素养水平可正向预测生活方式得分(β=0.160,P<0.001)。结论贵州省医学研究生的生活方式与健康素养水平亟需改善,其健康素养水平可正向预测生活方式得分。

脂滴聚集促进三阴性乳腺癌进展的分子机制研究

目的三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)是乳腺癌中恶性程度最高的亚型,其远处转移是致死的主要原因。脂质代谢重编程是TNBC远处定植的重要能量来源,本文拟探索脂质代谢重编程在TNBC进展中的作用及潜在分子机制。方法TCGA数据库结合临床样本和细胞模型分析SDC1在TNBC中蛋白表达;构建沉默和过表SDC1、NAT1的TNBC稳转细胞株,通过Transwell、油红O染色、原子力显微镜和ATP分别检测细胞远处转移、脂滴聚集、弹性模量和细胞能量改变,WB检测SDC1、NAT1、TIP47、FABP5表达;免疫共沉淀、回复实验和R语言分子互作分析SDC1-NAT1互作关系。构建沉默SDC1小鼠模型,分析成瘤大小、远处转移和脂滴聚集。结果SDC1在TNBC组织和细胞中高表达,沉默SDC1显著降低NAT1表达;同时沉默SDC1、NAT1显著减低脂滴形成、细胞迁移和侵袭能力、ATP降低,但增加了细胞的弹性模量,并伴随TI P47、FABP5蛋白表达降低;过表达SDC1和NAT1结果相反。Co IP、回复实验和R语言分析揭示SDC1-NAT1互作介导脂滴聚集促进TNBC远处转移机制。沉默SDC1抑制小鼠瘤体的体积、远处转移和脂滴聚集。结论SDC1通过NAT1/FABP5信号轴介导脂滴聚集是促进TNBC远处转移的重要机制,以SDC1为靶点的策略有望促进TNBC的治疗。

AGR2和ANO6在乳腺癌中的作用及其机制研究

开发新的个体化免疫治疗标记物对改善乳腺癌免疫治疗效果来说具有重要意义,AGR2和ANO6作为潜在的力调控基因,能否作为乳腺癌个体化免疫治疗的生物标记物仍然不清楚。因此,本研究通过生物信息学分析方法和细胞实验分别探讨了AGR2和ANO6在乳腺癌肿瘤微环境中的作用及其潜在机制。本研究发现,AGR2在泛癌中的表达与多种癌症的预后密切相关。在乳腺癌中AGR2启动子甲基化水平随其表达的增加而降低。AGR2低表达患者表现出免疫“热”和免疫抑制表型,其特征是肿瘤免疫细胞浸润丰度高,TGF-β和EMT途径富集评分增加,而AGR2高表达患者表现出相反的免疫特征,缺乏免疫细胞浸润,提示免疫“冷”表型。单细胞分析进一步揭示了AGR2在恶性细胞中通过协调细胞趋化因子信号和免疫浸润改变细胞与细胞间的相互作用。在两个免疫治疗队列中,AGR2和AGR2共表达基因的表达可以作为乳腺癌患者生存的预后指标。ANO6高表达与乳腺癌患者较差的预后密切相关。ANO6可促进乳腺癌中巨噬细胞的浸润。通过细胞实验研究发现他们的沉默可抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭、抗凋亡能力以及体内成瘤能力。此外,AGR2可通过激活Akt和ERK通路促进乳腺癌进程。总之,本研究为基于AGR2及ANO6开发个体化免疫治疗策略提供了一定理论基础和实验依据。

STAT3抑制剂stattic对小鼠结肠癌CT26细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨信号转导和转录激活因子3(STAT3)抑制剂盐酸萘替芬(stattic)对小鼠结肠癌CT26细胞增殖和凋亡的影响和作用机制。方法采用0μmol/L、1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L stattic溶液处理小鼠结肠癌CT26细胞,通过CCK-8实验、细胞克隆形成实验、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验以及流式细胞术检测细胞活力、增殖、迁移、侵袭、周期和凋亡情况;利用Western blot法检测stattic对小鼠结肠癌细胞磷酸化STAT3(p-STAT3)表达的影响;通过实时荧光定量多聚核苷酶链式反应(RT-qPCR)检测stattic作用后CT26细胞B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和人跨膜受体蛋白Notch-1(Notch-1)的表达。结果与0μmol/L组相比,stattic溶液组CT26细胞的活力及增殖能力降低(P<0.001)、迁移率和侵袭率降低(P<0.001),细胞凋亡率随浓度增加而增加(P<0.0001);stattic能将CT26细胞周期阻断于G1期,进而阻止CT26细胞的增殖;Western blot结果显示stattic抑制CT26细胞p-STAT3的表达(P<0.05);RT-qPCR检测结果表明stattic下调CT26细胞Bcl-2和Notch1的表达(P<0.05)。结论stattic通过阻断STAT3信号,抑制p-STAT3蛋白的表达,下调下游抗凋亡分子Bcl-2和Notch1信号分子的表达从而抑制CT26细胞增殖促进细胞凋亡。