贵州泡核桃育种目标及策略探讨

针对贵州泡核桃的性状、种质资源和育种现状,分析了贵州泡核桃的育种目标。认为抗性强、相对晚开花,早结,顶枝和侧枝都能结果的品种是贵州泡核桃当前育种目标。主要的育种策略是引进早实种质及加强丰产优质种质资源的利用。

硅钙肥对百香果品质及细胞壁代谢的影响

为探明适合贵州低热河谷地区栽培百香果的硅钙肥配比,本研究以钦蜜9号百香果为试材,试验设置为花前每株土施硅肥50 g,花后10 d左右喷施钙肥,间隔15 d喷1次,连续喷3次,钙肥浓度为500倍、1000倍、1500倍,以不施肥为对照。通过对百香果土施硅肥、花果期喷施钙肥,探究不同中微肥及其用量对百香果品质及细胞壁代谢的影响,并筛选最佳硅钙肥配方,旨在为提高百香果果实品质提供一定的理论依据和实践指导。结果表明:与对照相比,土施硅肥+喷施钙肥1000倍配施能提高百香果的单果重、果实硬度、果实纵横径,增加果实的可溶性固形物(TSS)及Vc含量,减少可滴定酸(TA)含量;提高可溶性糖(SS)、可溶性蛋白质含量(SP);促进过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性;增加果皮中原果胶和纤维素含量,使水溶性果胶(WSP)含量、纤维素酶(CX)、多聚半乳糖醛酸酶(PG)及果胶甲酯酶(PME)活性下降,且各指标与对照均存在显著差异。进而说明土施硅肥+喷施钙肥1000倍配施能显著提高百香果果实品质及果皮机械强度、韧性及稳定性,与对照相比,果实单果重、果实硬度、纵径、横径分别增长11.15%、27.18%、6.23%、3.29%,TSS、Vc、SS、SP含量分别提高16.95%、16.12%、20.57%、24.55%,TA含量降低36.03%,POD、SOD、CAT活性分别提升13.16%、19.67%、21.65%,果皮中原果胶和纤维素含量分别增加19.29%和17.19%,WSP含量降低10.63%,CX、PG及PME活性分别下降8.58%、22.98%、7.52%。

贵州地方水稻品种的SSR遗传多样性分析

利用21对SSR引物对74份贵州＂禾＂水稻品种及6份国际上常用的典型籼稻和粳稻品种进行遗传多样性研究。共检测到92个等位基因,每个位点的等位基因数变幅为2～9个,平均4.381个;平均Shannon信息指数为0.935,变幅为0.2793～1.8732;期望杂合度为0.5145,范围在0.0988～0.8313;品种间遗传相似系数为0.64～0.98。UPGMA聚类分析表明,在相似系数为0.682处可将＂禾＂品种分为4大类,大部分材料被聚类到典型粳稻的附近,品种间的亲缘关系与地理来源关系不大;主坐标分析结果与UPGMA聚类结果基本吻合。SSR检测结果表明,贵州省水稻地方品种——＂禾＂的多样性程度较低,且大多数属于粳稻。

贵州地方水稻品种“禾”的SSR指纹图谱构建

利用SSR标记对24份“禾”品种进行遗传多样性分析，初步建立了其DNA指纹图谱。从145对SSR引物中筛选出21对多态性引物组合，对所有供试材料进行分析，共检测出73个等位基因，平均为3．4762；平均PIC指数为0．4084，范围在0．1175（RM147）-0．6810（RM336）。应用6对引物（RM20A、RM161、RM253、RM280、RM336和RM495）的组合获得了每个品种的SSR特征带，可以将所有供试材料区分开来，从而建立24份“禾”品种的SSR指纹图谱。UPGMA聚类分析表明，在相似系数为0．652处，可将所有材料分为5类，聚类结果表明品种间的亲缘关系与地理来源关系不大。

贵州白香猪γ干扰素基因的克隆与序列分析

为获得贵州白香猪γ干扰素基因,以提取的经刀豆蛋白A诱导培养的贵州白香猪外周血淋巴细胞总RNA为模板,扩增全长猪γ干扰素基因,并克隆至pMD18-T Simple载体后测序分析。结果表明,pIFN-γ基因全长501bp,可编码166个氨基酸,其中前23位氨基酸为信号肽序列;pIFN-γ含有2个潜在N-糖基化位点;贵州白香猪与国内地方猪种之间pIFN-γ基因差异不大,具有很近的亲缘关系,其中与藏猪、成华猪、枫径猪、梅山猪的同源性达100%,而与内江猪的亲缘关系相对较远,与荣昌猪(DQ902588)亲缘最远。

犬瘟热病毒贵州株CDV-GZ1的分离与鉴定

为丰富我国犬瘟热病(CD)的流行病学资料,同时为CDV贵州分离株主要抗原基因及结构研究奠定基础,对贵阳市某宠物医院犬瘟热病毒金标卡检测呈阳性病死犬的肝脏、肺脏、淋巴结等组织,取适量经混合研磨过滤后,同步接种于Vero传代细胞上进行病毒分离培养,并对该分离毒株进行理化特性、电镜形态、血清学和核酸检测等系列鉴定。结果表明:在Vero细胞上盲传至第6代时稳定出现特征性的CPE,该毒株为RNA囊膜病毒,电镜下可见胞浆包涵体、病毒粒子呈晶格状排列,病毒可被犬瘟热阳性血清中和,分离病毒为犬瘟热病毒并被命名为CDV-GZ1株。

猪圆环病毒1型贵州分离株全基因组的克隆与序列分析

为了解猪圆环病毒（PCV）在贵州的分子流行病学和遗传变异情况，同时为其深入研究提供参考，应用PCR方法对采自贵阳、都匀和遵义地区疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征的病料进行 PCV1全基因组的扩增、克隆和测序分析。结果表明：扩增克隆的4株PCV1基因组全长均为1759 bp，4株PCV1间的核苷酸序列相似性在99．1％-99．7％，与国内外其他PCV1参考毒株的核苷酸序列相似性均在98．1％以上，与参考毒株PCV2的核苷酸序列相似性在77％左右；4株PCV1与国内其他PCV1毒株位于同一进化分支， PCV1国外毒株则位于另一进化分支。4株PCV1和参考毒株 PCV2的 ORF1、ORF2推导氨基酸序列相似性分别为86．2％-87．8％和64．0％-68．2％，4株PCV1与PCV2的ORF1在复制起始区和其他功能区高度保守，可为构建嵌合病毒PCV1-2提供骨架。

猪流行性腹泻病毒贵州株的分离及M基因序列分析

为了解猪流行性腹泻病毒(PEDV)在贵州地区的分子流行病学、遗传变异及其防治提供参考,从贵州省某猪场腹泻仔猪的粪便中分离出1株PEDV(GZ-ZY株),同时对M基因进行了扩增、克隆及序列分析。结果表明:分离毒株在Vero细胞上盲传至第5代时出现以合胞体为特征的细胞病变;M基因大小为681bp,可编码226个氨基酸,核苷酸序列与疫苗株CV777的相似性为98.1%,氨基酸相似性为98.2%,推导的氨基酸位点在第13位由谷氨酸(Glu)变为谷氨酰胺(Gln),第42位由缬氨酸(Val)变为丙氨酸(Ala),第214位由丙氨酸(Ala)变为丝氨酸(Ser)。PEDV的M基因高度保守,是PEDV遗传演化的重要候选基因。

贵州地方特色稻种高坡红米主要特征特性观察

采用随机区组设计,对高坡乡收集的21份红米材料的分蘖、主茎叶片数、生育期、株高、穗数、穗长、总粒数、结实率、千粒重、单株产量等性状特征特性进行了观测。高坡红米具有种质资源多样性,且在分蘖能力、穗长、单株总粒数、千粒重以及单株产量方面较杂交水稻有相当大差距,并提出应对其进行深入研究,让高坡红米能真正走上餐桌,满足人们的生活需要。

贵州省特殊水稻资源禾的研究进展

禾是原产于贵州省黔东南自治州的一类特殊稻类生态型,具有极强的抗逆性。为了发掘和利用禾的潜能,满足作物育种的需要,禾的研究一直受到广泛关注。从禾的生态环境、分类、广亲和性等方面对禾的研究现状进行了综述,并探讨了禾的发展前景。

猪圆环病毒2型贵州毒株的分离与鉴定

为分离和鉴定出猪圆环病毒2型(PCV2)贵州株,对送检的3份感染病料进行了分离,并将其分离毒株分别同步接种于PK-15细胞,再特异性扩增和克隆所分离毒株的全基因序列。结果表明:成功分离出3株PCV2贵州株,命名为GZ-QZ1株(1 767bp)、GZ-RH1株(1 767bp)和GZ-CS1株(1 768bp);3株PCV2贵州株全基因组之间的核苷酸相似性为94.6%～99.9%,其中ORF2核苷酸相似性为90.2%～99.9%;ORF2氨基酸一致性GZ-QZ1和GZ-RH1为100%,二者与GZ-CS1的氨基酸一致性均为88.1%。3株PCV2贵州株之间同源,但GZ-CS1存在一定变异。

犬瘟热病毒贵州株融合蛋白基因原核表达质粒的构建

为了研究犬瘟热病毒贵州株(CDV-GZ1)完整融合蛋白(F),试验采用PCR方法以pMD18-F质粒为模板,利用特异性引物扩增获得大小为1 989 bp的目的 DNA,并将其克隆至pET32a(+)原核表达载体中,获得重组质粒pET32a(+)-F。结果表明:目的基因插入位置和阅读框均正确,说明F基因原核表达质粒构建成功;质粒pET32a(+)-F在BL21(DE3)中经诱导表达未获目的蛋白,说明CDV融合蛋白可能不适合在该表达系统中进行完整蛋白的表达。

贵州白香猪的白细胞介素2基因的克隆及其序列分析

为获得贵州白香猪白细胞介素2基因,以提取的经刀豆蛋白A诱导培养的贵州白香猪外周血淋巴细胞总RNA为模板,扩增全长猪白细胞介素2(IL-2)基因,并克隆至pMD18-T Simple载体后测序。结果表明:贵州白香猪IL-2基因ORF长为465bp,可编码154个氨基酸,其中前20个氨基酸为信号肽,后134个氨基酸为成熟肽,具有一个潜在的N-糖基化位点;贵州白香猪除与FJ543109(99.4%)、Neijiang(98.7%)、JN851821(98.7%)、AB194099(98.5%)氨基酸一致性相对较低外,与其他猪源IL-2的一致性均为100%,而与其他种属动物的IL-2基因氨基酸一致性则较低,为11.9%～75%。

巨玫瑰葡萄在贵州贵阳的表现及大棚栽培技术

以巨玫瑰葡萄为试材,在贵州省贵阳地区经过3年的试栽观察,结果表明,大棚栽培的巨玫瑰葡萄具有粒大、色艳、味香甜、结果早、丰产、抗病等优良特性,是综合性状表现优良的中熟葡萄品种。

贵州樱桃属植物种质资源及其利用评价

调查了贵州省樱桃属果树种质资源。发现共有16个种,其中典型樱桃亚属12个种和矮生樱桃亚属4个种,地樱桃为贵州特有种;樱桃在全省均有分布,垂直分布为400～2 500 m,其生境类型可分为暖湿疏林型、冷凉疏林型和寒冷灌丛型;这些种质资源可在砧木、育种和观赏栽培等方面予以利用,特别是矮生樱桃亚属有望用作矮化砧;利用短低温中国樱桃优株与欧洲甜樱桃开展远缘杂交,有望培育适宜南方地区栽培的大粒樱桃品种。

贵州省核桃品种资源与种植区划

在资源调查的基础上结合相关文献,对贵州核桃的品种资源进行了类型划分,对其分布及适应性进行了评价,并提出了贵州核桃的种植区划。

贵州省核桃种质资源及其利用评价

在资源调查的基础上,明确了贵州核桃资源共有4属11种,全省均有分布,以铁核桃为主,占资源总量的80%以上。对贵州省核桃种质资源的特性和主要经济性状进行了描述。指出贵州核桃资源在优株选育、砧木利用等方面的利用情况,并对贵州核桃资源的开发利用提出了建议。

贵州省玉米生产现状、发展潜力与可持续发展对策

分析了贵州省玉米生产现状和发展潜力,提出贵州省玉米生产可持续发展的对策。

贵州白香猪γ-干扰素真核表达质粒的构建

为了构建贵州白香猪γ-干扰素真核表达载体,试验以已构建的含有γ-干扰素基因的pMD-GZ-IFN-γ质粒为模版,利用特异性引物进行PCR扩增,得到大小为501 bp的γ-干扰素基因的开放阅读框,将所得IFN-γ基因克隆至经相同双酶切处理后的pcDNA3.1(+)真核表达载体中,构建重组质粒pcDNA3.1(+)-IFN-γ。测序结果表明:克隆至pcDNA3.1(+)的基因序列为γ-干扰素序列,说明γ-干扰素基因真核表达载体构建成功。