大鼠血浆中芍药内酯苷、咖啡酸及绿原酸类浓度的UPLC-MS法同时测定及其药动学研究

目的建立UPLC—MS法同时测定大鼠静脉注射辛芍提取物后血浆中芍药内酯苷、咖啡酸、绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸5种成分的分析方法，并计算5种成分在大鼠体内的药动学参数。方法色谱采用WatersBEHC18（2．1mm×50mm，1．7μm）柱，流动相为0．1％甲酸乙腈-0．1％甲酸水梯度洗脱，质谱采用电喷雾电离源（ESI），扫描方式为选择性离子监测（SIR）。结果5种成分在大鼠血浆中线性关系良好，提取回收率在95．1％～98．5％之间，日内、日间精密度、准确度和稳定性良好。各检测成分的曲线下面积[AUC（0-140 min）]，表观分布容积（V1），分布半衰期（t1/2α），消除半衰期（t1/2β）分别为53．71～867．55（mg／L·min），3．27—103．62L／kg，15．15—24．08rain和23．79—35．96min，结果表明辛芍提取物在体内吸收较为良好、分布较为广泛，且分布消除均较迅速。结论该方法可特异、快速、准确、灵敏地同时测定芍药内酯苷等5种成分在大鼠体内的经时血药浓度。

羊耳菊中咖啡酰基奎宁酸类化学成分研究

采用正相硅胶色谱柱、Sephadex LH-20以及制备HPLC等色谱方法对羊耳菊进行分离纯化,并通过理化常数和波谱数据鉴定其化学结构。深入研究羊耳菊干燥全草的咖啡酰基奎宁酸类化学成分。从羊耳菊中分离得到8个咖啡酰基奎宁酸类化合物,分别为1,5-O-二咖啡酰基奎宁酸（1）、1,3,5-O-三咖啡酰基奎宁酸（2）、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸甲酯（3）、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸甲酯（4）、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸乙酯（5）、4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸乙酯（6）、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸（7）、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸（8）。化合物1-3为从该植物中首次分离得到,4-6从该属植物中首次分离得到。

头花蓼水提取物对CYP450酶诱导和抑制作用研究

目的 考察头花蓼水提取物对人肝微粒体CYP4505种亚型酶的体外抑制作用和对小鼠的体内诱导作用,从而预测发生药物相互作用的可能性,为临床合理用药提供科学依据。方法 以探针底物代谢物生成法,考察头花蓼水提取物体外对人肝微粒体主要I相代谢酶CYP1A2、CYP2E1、CYP2C9、CYP2C19和CYP3A4活性的影响;采用微粒体体外孵育法,考察小鼠经高、低剂量（1.16、0.58g·kg-1）头花蓼水提取物分别连续灌胃7d和14d后,小鼠肝微粒体中主要I相代谢酶活性的变化,以评价头花蓼水提取物对小鼠肝微粒体主要CYP450酶是否有诱导作用。结果 头花蓼水提取物对人肝微粒体中主要的CYP450I相代谢酶的抑制作用均不强,IC50值在849.6~2287mg·L-1;与空白对照组比较,1.16g·kg-17d组小鼠CYP2C9和CYP3A4活性分别增加了49.9%和21.1%（P〈0.01和P〈0.05）,0.58g·kg-114d组小鼠CYP2C9和CYP3A4活性分别增加了27.6%和15.5%（P〈0.01和P〈0.05）,1.16g·kg-114d组小鼠CYP2C9和CYP3A4活性分别增加了67.5%和32.1%（P〈0.01）,头花蓼提取物对其余CYP亚型活性未见明显影响。结论 在临床剂量下,头花蓼水提取物对人肝微粒体CYP1A2、CYP2E1、CYP2C9、CYP2C19和CYP3A4无明显抑制作用,对小鼠肝微粒体CYP2C9和CYP3A4显示诱导作用。

UPLC-MS／MS法同时检测血浆中氧化芍药苷、芍药内酯苷和苯甲酰芍药苷

目的建立UPLC-MS／MS同时测定大鼠静脉注射赤芍水提取物后血浆中氧化芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷的分析方法，研究3种指标成分在大鼠体内的药动特征。方法色谱采用WatersBEHC18（2．1mm×50mm，1．7μm）柱，体积流量0．35mlMmin，流动相0．1％甲酸乙腈一0．1％甲酸水梯度洗脱，质谱采用电喷雾电离源，扫描方式为多反应离子监测。结果氧化芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷峰面积和质量浓度之间呈良好线性关系（R〉0．99），提取回收率在92，2％～104．4％之间，精密度、准确度、基质效应和稳定性均良好。分布半衰期为5．5—23．6min，消除半衰期为20．2～44．3min。结论表明3个指标成分在大鼠体内具有分布消除迅速的特点。

赤芍与辛芍组方中没食子酸、芍药内酯苷在大鼠体内的药动学比较

目的建立UPLC-MS法,进行辛芍组方与单味赤芍提取物没食子酸、芍药内酯苷大鼠药动学研究,探讨中药复方对药效成分体内过程的影响。方法色谱采用Waters BEH C18柱,0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,质谱采用电喷雾电离源(ESI),扫描方式为选择性离子监测(SIR)。实验大鼠分别灌胃辛芍组方、赤芍提取物,测定不同时间点大鼠血浆没食子酸和芍药内酯苷浓度,采用DAS2.0药动学软件对参数进行拟合。结果没食子酸和芍药内酯苷线性关系、精密度、准确度和稳定性良好。没食子酸、芍药内酯苷在大鼠体内符合二室药动学模型,赤芍和辛芍组方两组没食子酸T max和T1/2z差异无显著性,芍药内酯苷的各药动学参数均具有一定差异。结论中药组方与单味药材体内药动学之间存在差异,其产生的原因可能与复方间的相互配伍以及复方组成有关。

蜘蛛香化学成分的研究

研究蜘蛛香Valerianajatamansi的化学成分，为选择控制其质量的化学成分提供依据。应用色谱技术分离纯化得到9个化合物，根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定其分别为橙皮苷（1），5-O-咖啡酰基奎宁酸（2），3，4-O-二咖啡酰基奎宁酸（3），4，5-O-二咖啡酰基奎宁酸（4），3-O-咖啡酰基奎宁酸甲酯（5），3-O-咖啡酰基奎宁酸（6），原儿茶酸（7），咖啡酸（8），松脂素（9）。其中化合物2，7为首次从该种植物中分离得到，化合物3—5为首次从该属植物中分离得到。

齐墩果酸生物黏附胶囊的制备及其释药特征

目的制备齐墩果酸生物黏附胶囊并研究其释药特征。方法采用单因素正交设计法,确定羟丙甲基纤维素K4M、卡波姆971PNF、乳糖的用量及配比与制剂体外释放度及黏附力的关系。以齐墩果酸生物黏附胶囊在大鼠胃黏膜滞留率考察其生物利用度,并对其释药过程进行动力学方程拟合以判断释药机制。结果实验表明羟丙甲基纤维素与卡波姆均能阻滞药物的释放和对胃肠组织有较大的黏附力。生物黏附胶囊释药以Higuchi方程拟合最佳,与Peppas方程也有较好的相关性。结论该处方设计及制备工艺合理。其释药特征说明扩散和溶蚀均起作用,但扩散机制所占的比例相对较大。

UPLC-MS法同时测定大鼠血浆中氧化芍药苷、没食子酸及咖啡酰基奎宁酸类成分

目的建立UPLC-MS法同时测定大鼠静脉注射辛芍（灯盏细辛和赤芍）提取物后血浆中氧化芍药苷、没食子酸、1,3-二咖啡酰基奎宁酸、3,4-二咖啡酰基奎宁酸、4,5-二咖啡酰基奎宁酸5种成分的分析方法。方法血浆样品酸化后经乙腈沉淀除去蛋白,UPLC分析采用Waters Acquity BEH C18色谱柱,流动相为0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,采用电喷雾电离源,扫描方式为选择性离子监测模式。结果 5种成分在血浆中线性关系良好,提取回收率91.95%～109.09%,日内、日间精密度和准确度良好,被测成分在大鼠体内消除较快。结论本分析方法特异、快速、准确灵敏,可用于氧化芍药苷、没食子酸、1,3-二咖啡酰基奎宁酸、3,4-二咖啡酰基奎宁酸、4,5-二咖啡酰基奎宁酸的药代动力学研究。

金莲花中5种主要成分含量的高效液相色谱法同时测定

目的建立HPLC法同时测定金莲花中色氨酸、对羟基苯甲苹果酸、荭草素-2”-O-β—L-半乳糖苷、荭草素、牡荆素的含量。方法以Phenomenex GeminiC。8色谱柱（4．6mm×250mm，5Ixm），乙腈-0．1％磷酸水溶液梯度洗脱，流速1ml·min^-1，柱温35℃C，检测波长230Bin。结果5种成分均达到基线分离，线性关系良好（r≥0．9987），平均加样回收率为95．05％-103．5％，RSD〈3％。结论该方法灵敏、准确、可靠、重复性好，可用于金莲花药材的质量评价。

灯盏乙素苷元在大鼠肝微粒体中酶促反应动力学和对CYP3A的影响

灯盏细辛是菊科飞蓬属柑物短葶飞莲[Erigeron breviscapus （ Vant. ） hand-Mazz.]的干燥全草，具有活血化瘀、通经活络等功效，为贵州少数民族常用药物。灯盏乙素是其主要活性成分，而灯盏乙素苷元为灯盏乙素的主要活性代谢产物。

齐墩果酸生物黏附型缓释胶囊的质量控制评价

目的建立齐墩果酸生物黏附型缓释胶囊的质量控制标准。方法采用薄层色谱法对齐墩果酸进行定性鉴别，并用超快速液相色谱法（UFLC）进行定量分析研究。结果薄层色谱特征明显，在对照品色谱相应位置显相同斑点且阴性无干扰；UFLC测定线性范围为0．01～0．3mg·mL-1，平均加样回收率99．26％，RSD：1．36％。结论该方法简单、快速，专属性强，重现性好，可作为齐墩果酸生物黏附型缓释胶囊质量控制的标准。

正交试验法优选宫炎平胶囊的提取工艺

目的优选宫炎平胶囊的提取工艺。方法采用正交试验法,以总固体物收率以及没食子酸转移率为考察指标,对加水量、煎煮时间、煎煮次数、醇沉浓度等因素进行研究,对提取工艺进行优化。结果最佳水提取工艺为加10倍药材量的水煎煮2次,每次2 h,最佳醇沉工艺为浓缩药液至相对密度为1.25,醇沉体积分数为50%,放置48h。结论该提取工艺合理,为宫炎平胶囊的制备提供了科学依据。

取代非环核苷混膦酸酯类衍生物的合成及生物活性

为寻找抗乙肝病毒(HBV)取代非环核苷混膦酸酯有效的结构优化策略。以阿德福韦单L-氨基酸酯和单非甾体药物羧酸酯为先导化合物,结合核苷类似物阿巴卡韦与阿拉莫韦的结构特征,采用亚结构拼合原理设计并合成了6-取代嘌呤非环核苷膦酸单L-氨基酸酯、单非甾体药物羧酸酯前药(9a^9l),其结构经1H NMR,ESI-MS,ESI-HRMS确证。采用HepG2 2.2.15细胞株、HK-2细胞株进行了目标化合物抗HBV活性以及肾细胞毒性评价。结果表明,化合物9a具有较强的抗病毒活性与作用选择性(EC500.48μmol/L,SI 763.72),具有较低的肾细胞毒性以及较高的化学与酶学稳定性,值得进一步深入研究。

黔产红禾麻中鞣质类成分的含量测定

目的建立黔产红禾麻中总鞣质及缩合鞣质含量测定的方法。方法以没食子酸为对照品,采用磷钼钨酸-干酪素法测定总鞣质含量;以儿茶素为对照品,采用香草醛硫酸法测定缩合鞣质含量。结果红禾麻中总鞣质与缩合鞣质平均含量分别为(118.04±17.80)mg/g和(97.80±17.67)mg/g,红禾麻中鞣质以缩合鞣质为主要类型。结论该方法简便、准确、重复性好,可用于测定红禾麻中总鞣质及缩合鞣质含量。

UPLC同时测定白及药材中9种指标成分的含量

采用超高液相色谱（UPLC）的方法，以Acquity BEH C18色谱柱（2.1 mm×150 mm，1.7 μm），流动相为乙腈-水，梯度洗脱，流速为0.3 mL·min^-1，柱温45℃，检测波长280 nm的色谱条件同时测定白及药材中的4-羟基苯基-葡萄糖苷、4-（葡糖糖氧基）-肉桂酸葡萄糖氧基苄酯、1，4-二 [4-（葡萄糖氧）苄基]-2-异丁基苹果酸酯-2-葡萄糖苷、1，4-二[4-（葡萄糖氧）苄基]-2-异丁基苹果酸酯、二氢菲5和1，4-二[4-（葡萄糖氧）苄基]-2-异丁基苹果酸酯-2-[4-O-肉桂酰基]葡萄糖苷、二氢菲1、苄基氢菲3和1，4-二[4-（葡萄糖氧）苄基]-2-异丁基苹果酸酯-2-[4-O-肉桂酰基-6-O-乙酰基]葡萄糖苷9个指标成分。各指标成分之间分离度良好，在选定的浓度范围内线性关系良好（r≥0.999 3），平均加样回收率（n=6）为98.15%～102.2%，RSD为2.1%～3.6%，表明所建立的方法重复性、耐用性良好，结果准确，经对野生和人工种植白及药材分析，野生白及所测定的9种成分含量高于人工栽培白及药材，为白及药材的质量评价和控制提供科学依据。

Cocktail探针药物法评价灯盏乙素及其苷元对大鼠细胞色素P450酶的影响

通过cocktail探针药物法考察灯盏乙素及其苷元体外对大鼠细胞色素P450 （CYP450）酶的影响.采用UPLC-MS/MS法定量测定孵育体系中的灯盏乙素和灯盏乙素苷元;加入不同的辅助因子,考察灯盏乙素的代谢机制;以非那西丁、奥美拉唑、双氯芬酸、睾酮和右美沙芬为探针药,UPLC-MS/MS法测定混合探针药物的浓度,研究灯盏乙素及其苷元在体外孵育体系中对CYP1A2、CYP2C 19、CYP2C9、CYP3A4和CYP2D6酶活性的影响.灯盏乙素在体外肝微粒体中主要代谢为灯盏乙素苷元;NADPH和NADH对灯盏乙素的代谢基本无影响;灯盏乙素对5种主要亚型酶IC50值均大于50μmol/L,灯盏乙素苷元对CYP1A2、CYP2C 19、CYP2C9和CYP2D6酶的IC50值均为10～50 μmol/L.表明灯盏乙素苷元对这4种酶有弱抑制作用,在与经由上述酶代谢的药物合用时,可能会产生药物相互作用.

免疫亲和柱净化UPLC-MS-MS测定天麻药材中黄曲霉毒素的含量

目的:研究建立了免疫亲和柱净化UPLC-MS-MS测定天麻药材中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2的含量测定方法。方法:采用甲醇溶液超声提取、玻璃纤维滤纸滤过、黄曲霉毒素亲和免疫柱净化的方法对天麻药材样品进行处理,以超高液相色谱-三重四级杆串联质谱仪(UPLC-MS-MS)对黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2含量进行研究并测定。结果:被测定的4种黄曲霉毒素分别在选定的范围内线性关系良好,精密度、重复性、准确度均良好,利用标准参考物质对本方法的验证结果良好,采用所建立的方法对30批不同产地天麻药材中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2含量进行了测定,结果均未检出。结论:该方法科学、可行、方便、快速,适用于对天麻药材中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2进行含量测定。

菊黄上清含片体外抗病毒及免疫作用研究

目的:研究菊黄上清含片体外抗病毒作用及其对免疫功能的影响。方法:采用细胞培养技术及鸡胚培养法检测菊黄上清含片对病毒的抑制作用;通过观察对小鼠免疫器官质量、网状内皮系统及体液免疫功能的调节作用。结果:对各种病毒致细胞病变均有不同的抑制作用;能增加小鼠免疫器官的质量,提高小鼠网状内皮系统的吞噬指数和吞噬系数,增加小鼠溶血素抗体的生成。结论:菊黄上清含片对呼吸道合胞病毒、副流感病毒Ⅰ型、腺病毒-7所致细胞病变均有不同的抑制作用,对流感病毒甲型京科86-1和流感病毒B/黔防/252/2001感染有较明显的预防和治疗作用,并具有一定调节机体免疫功能的作用。

局部注射用右旋酮洛芬氨丁三醇温敏凝胶的制备及其体外释药的考察

目的:制备右旋酮洛芬氨丁三醇温敏凝胶,并研究其体外释药行为特性。方法:采用正交设计法,以药物水溶液浓度、壳聚糖(CS)用量、β-甘油磷酸钠(β-GP)/壳聚糖(CS)溶液配比为三因素,将优化后的处方利用药物释放模型方程进行评价。结果:右旋酮洛芬氨丁三醇温敏凝胶的最佳处方为:药物水溶液浓度0.002 5 g·mL、CS用量0.04 g、β-GP/CS配比1∶2,在体外释药持续12 d以上,释放特性符合Ritger-Peppas方程的药物扩散动力学特点。结论:本凝胶制备简单,胶凝温度适宜具有温敏特性及明显的缓释作用。

灯盏乙素苷元4'-N-取代氨甲基苯甲酸酯-7-取代烟酸酯衍生物的合成与体外抗氧化活性研究

本研究以灯盏乙素苷元,N-取代氨甲基苯甲酸以及6-取代烟酸为原料,在偶联剂DCC/DMAP的作用下经4步反应制备了灯盏乙素苷元4'-N-取代氨甲基苯甲酸酯-7-取代烟酸酯衍生物1a^1f,并经1H NMR,ESI-MS以及HRMS确证结构。对化合物1a^1f进行了神经细胞氧化损伤保护活性与理化性质研究,结果显示,烟酸酯结构的引入能够提高化合物抗氧化活性以及水溶性,其中化合物1d具有较高的水溶性、体外稳定性及抗氧化活性,值得进一步研究。