miRNA-1对胃癌细胞体外EGFR-TKI敏感性影响的实验研究

目的探讨上调或沉默miRNA-1(miR-1)表达对胃癌细胞体外表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)敏感性影响的研究。方法选择人胃癌细胞系MKN-45作为受试对象,慢病毒转染miR-1或miR-1 shRNA,分别作为miR-1组和miR-1 shRNA组,并采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测GES-1和MKN-45细胞中miR-1表达。另外设置空白对照组和阴性对照组。采用MTT法检测MKN-45细胞对不同浓度AZD9291(奥西替尼)的敏感性;流式细胞术检测1μmol/L AZD9291作用48 h后MKN-45细胞凋亡活力和细胞周期。采用Western blotting法检测各组细胞中PI3K/AKT通路相关蛋白的表达。结果qPCR证实miR-1在MKN-45细胞系中低表达。MTT法检测结果显示,与空白对照组比较,miR-1组细胞对AZD9291敏感性明显增加,而miR-1 shRNA组细胞对AZD9291敏感性明显降低。Annexin V/PI双染法和BrdU法检测,miR-1组细胞凋亡率为(44.65±5.18)%,高于空白对照组的(15.40±2.13)%和阴性对照组的(17.92±3.14)%,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-1 shRNA组细胞凋亡率为(11.20±2.48)%,低于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组和阴性对照组比较,miR-1组细胞IGF-1R、p-IGF-1R、p-AKT、p-p70S6K蛋白表达量明显降低,miR-1 shRNA组细胞IGF-1R、p-IGF-1R、p-AKT、p-p70S6K蛋白表达量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论上调miR-1表达可增加MKN-45胃癌细胞系对AZD9291的敏感性,其作用机制可能与抑制IGF-1R/PI3K/AKT信号通路的激活有关。

探讨恒温扩增法在下呼吸道感染病原体检测的价值

探究运用恒温扩增法(Loop—mediated isothermal amplification,LAMP)在感染人群病原体诊断方面的价值。收集2022年1-8月255名下呼吸道感染患者的痰液或肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BALF),运用LAMP法和痰培养法同时对其进行检测,分析病原体检出情况、恒温扩增芯片法与痰培养法符合率。运用LAMP法检出阳性标本200例,总阳性率为78.43%,共检出呼吸道病原体10种;运用痰培养法检测出阳性标本80例,总阳性率为31.37%,共检出呼吸道病原体8种。两种方法检出的铜绿假单胞菌的阳性率具有高度一致性(Kappa=0.516),鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌的阳性率具有中等一致性(0.4<Kappa<0.6)。恒温扩增法的病原体检出率显著高于传统痰培养法;相较于金标准痰培养法,其对苛养菌的检测具有较好的一致性。但LAMP法检测时间更短、总阳性率更高,更有助于临床医生快速精准地识别所感染的病原体。

EGFR罕见突变非小细胞肺癌患者的临床疗效分析

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)罕见突变非小细胞肺癌(NSCLC)患者的临床疗效。方法对连云港市第一人民医院2015年9月至2021年12月所有行EGFR基因检测的NSCLC患者的病历资料进行回顾性分析。分析罕见突变临床病理特征,不同治疗方法及不同突变类型对患者治疗的影响。结果共有2113例NSCLC患者行EGFR检测,排除重复项及T790M耐药突变后,共纳入1790例患者,其中突变患者771例,罕见突变81例。在突变患者中,罕见突变的发生与吸烟相关(P<0.01)。与性别、年龄分段、分期、病理相关性分析差异无统计学意义(P>0.05)。总的罕见突变患者中,接受一线化疗与靶向治疗的客观缓解率(ORR),疾病控制率(DCR),中位无进展生存期(mPFS)差异无统计学意义(P>0.05)。单一罕见突变患者中,接受一线化疗与靶向治疗的ORR、DCR差异无统计学意义(P>0.05),mPFS差异有统计学意义(P<0.05)。单一罕见突变和复合突变接受一线靶向治疗后ORR、DCR差异无统计学意义(P>0.05),mPFS差异有统计学意义(P<0.05)。结论在EGFR突变患者中罕见突变的发生可能与吸烟有关,单一罕见突变患者中对比一线化疗与靶向治疗,化疗可获得更长的mPFS。复合突变患者和单一罕见突变患者分别接受一线靶向治疗后,复合突变可获得更长的mPFS。