桃叶珊瑚苷调节RhoA/ROCK信号通路对胶质母细胞瘤细胞活力和上皮间质转化的影响

[目的]研究桃叶珊瑚苷(AU)对胶质母细胞瘤(GBM)细胞活力和上皮间质转化(EMT)的影响,并对其作用机制进行探讨。[方法]将U87细胞随机分为对照组、AU低浓度组、AU中浓度组、AU高浓度组、Y-27632组、AU高浓度+Y-27632组。细胞计数器试剂盒(CCK-8)法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、波形蛋白(Vimentin)、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、Ras同源基因家族成员A(RhoA)、Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)1、ROCK2表达。构建GBM裸鼠模型,随机分为裸鼠对照组、AU组、Y-27632组、AU+Y-27632组,测量肿瘤质量与体积,免疫组化法检测移植瘤组织RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达。[结果]GBM细胞活力随着AU浓度的升高而逐渐降低(P<0.05),选择U87作为后续实验细胞,选择10、25、50μmol/L浓度作为AU后续实验浓度。与对照组比较,AU低、中、高浓度组和Y-27632组细胞活力、迁移和侵袭细胞数、MMP2、MMP9、N-cadherin、Vimentin、RhoA、ROCK1、ROCK2表达显著下降,凋亡率、E-cadherin表达显著升高(P<0.05),其中高浓度AU和Y-27632组共同处理的细胞变化更显著(P<0.05)。AU和Y-27632均能抑制移植瘤质量和体积,降低RhoA/ROCK信号通路蛋白表达(P<0.05)。[结论]AU能抑制GBM细胞活力、迁移侵袭和EMT,促进细胞凋亡,其作用机制可能与抑制RhoA/ROCK信号通路有关。

沉默RPARP-AS1对GBM U251细胞增殖、迁移和凋亡的影响

目的探究沉默长链非编码RNA RPARP-AS1对胶质母细胞瘤(GBM)U251细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法选取80例GBM组织与癌旁组织。将GBM细胞株U251细胞随机分为Control组、小干扰RNA阴性对照(si-NC)组、si-RPARP-AS1组、si-RPARP-AS1+抑制剂(inhibitor)NC组、si-RPARP-AS1+miR-339-5p inhibitor组。qRT-PCR检测组织和细胞RPARP-AS1、miR-339-5p和鼠双微体基因2(MDM2)mRNA的表达。CCK-8检测各组细胞增殖能力。Transwell检测各组U251细胞迁移和侵袭能力。流式细胞术检测细胞凋亡率。Western blotting检测B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和MDM2蛋白的表达。双荧光素酶报告基因实验分别验证RPARP-AS1和miR-339-5p、miR-339-5p和MDM2的关系。结果与癌旁组织相比,GBM组织RPARP-AS1、MDM2 mRNA高表达,miR-339-5p低表达(P<0.05)。与Control组、si-NC组相比,si-RPARP-AS1组U251细胞RPARP-AS1、MDM2 mRNA和Bcl-2、N-cadherin、MDM2蛋白表达以及细胞增殖、迁移、侵袭能力显著降低(P<0.05),miR-339-5p、Bax、E-cadherin蛋白表达以及细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。与si-RPARP-AS1组、si-RPARP-AS1+inhibitor NC组比较,si-RPARP-AS1+miR-339-5p inhibitor组细胞MDM2 mRNA和Bcl-2、N-cadherin、MDM2蛋白表达以及细胞增殖、迁移、侵袭能力显著升高(P<0.05),miR-339-5p、Bax、E-cadherin蛋白表达以及细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。RPARP-AS1靶向负调控miR-339-5p表达,miR-339-5p靶向负调控MDM2表达。结论沉默RPARP-AS1对GBM U251细胞增殖、迁移和侵袭具有抑制作用,对细胞凋亡具有促进作用,可能与通过上调miR-339-5p,抑制MDM2表达有关。

脑外伤行早期脑室-腹腔分流术和颅骨修补术治疗的效果对照观察

观察脑外伤患者接受早期脑室-腹腔分流术+颅骨修补术的效果。方法:选择我院2018年7月1日~2021年10月1日研究期间接受脑外伤手术的80例患者进行研究,采用回顾分析进行研究,甲组为接受后期脑室-腹腔分流术+颅骨修补术脑外伤手术患者(40例),乙组为早期脑室-腹腔分流术+颅骨修补术脑外伤手术患者(40例),研究指标为患者神经功能、生活质量、手术效果、并发症发生率、残疾发生情况、生活能力等多项指标。结果:手术后,乙组脑外伤手术患者神经功能好于甲组脑外伤手术患者,P<0.05;手术后,乙组脑外伤手术患者并发症发生率低于甲组脑外伤手术患者,P<0.05;手术后,乙组脑外伤手术患者残疾发生率低于甲组脑外伤手术患者,P<0.05;手术后,乙组脑外伤手术患者手术效果高于甲组脑外伤手术患者,P<0.05;手术后,乙组脑外伤手术患者生活能力评分高于甲组脑外伤手术患者,P<0.05;手术后,乙组脑外伤手术患者生活质量高于甲组脑外伤手术患者,P<0.05。结论:对脑外伤手术患者实施早期脑室-腹腔分流术+颅骨修补术手术方案能够更好地改善其脑部功能,减轻外伤对患者的神经损伤,手术安全性高、效果好,能够降低残疾发生率,提高脑外伤手术患者的生活质量与生活能力。

早期颅骨修补术对脑外伤患者神经功能及日常生活能力的改善分析

探讨早期颅骨修补术对脑外伤患者神经功能及日常生活能力的改善。方法 选取遂宁市中心医院2020年2月-2022年6月期间收治的107例脑外伤患者的一般资料进行回顾性研究,根据其行颅骨修补术时间将其分为对照组53例,观察组54例。在脑外伤术后3-6个月内行颅骨修补术的患者为对照组,在脑外伤术后3个月内行颅骨修补术的为观察组,比较两组日常生活能力、炎症指标、运动及神经功能。结果 术后3个月,观察组美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分较对照组低,简式Fugl-Meyer量表(FMA)及改良Barthel指数(MBI)评分较对照组高(P<0.05)。术后3个月,观察组C反应蛋白( CRP)、白细胞计数(WBC)及降钙素原(PCT)较对照组低(P<0.05)。结论 早期颅骨修补术可改善脑外伤患者神经及运动功能,提高其日常生活能力,降低术后炎症水平,利于患者术后恢复。

松果菊苷调控miR-485-5p/TRIM7信号通路对胶质母细胞瘤细胞增殖、凋亡和迁移的影响机制研究

目的探讨松果菊苷(ECH)调控miR-485-5p/三重基序蛋白7(TRIM7)信号通路对胶质母细胞瘤(GBM)细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法qRT-PCR检测GBM细胞中miR-485-5p表达水平;筛选最佳干预细胞系(U251细胞),以不同浓度ECH(0、1、5、10、20μmol·L-1)干预,MTT法检测各GBM细胞增殖情况;将U251细胞分为对照组(正常培养)、ECH组(10μmol·L-1)、inhibitor-NC组(转染inhibitor-NC)、miR-485-5p inhibitor组(转染miR-485-5p inhibitor),检测细胞中miR-485-5p的表达水平;Edu染色、Transwell小室和流式细胞仪分别检测细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡;Western blot法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、TRIM7、E-cadherin、vimentin表达;双荧光素酶报告基因实验验证miR-485-5p和TRIM7的靶向关系。小鼠体内肿瘤形成实验验证ECH对GBM肿瘤生长及miR-485-5p/TRIM7的影响。结果miR-485-5p在GBM细胞中表达水平降低(P<0.05);ECH显著抑制U251细胞增殖、迁移和侵袭,促进凋亡;降低U251细胞中PCNA、MMP-2、TRIM7、vimentin蛋白水平,升高E-cadherin蛋白水平(均P<0.05);抑制miR-485-5p表达可逆转ECH对U251细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用以及对凋亡的促进作用(均P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-485-5p靶向调控TRIM7的表达(P<0.05);体内实验显示ECH可降低移植瘤质量和体积及TRIM7、Ki-67蛋白表达水平,增高移植瘤中miR-485-5p水平(P<0.05)。结论ECH可抑制GBM细胞增殖、迁移和侵袭,促进凋亡,可能与调控miR-485-5p/TRIM7信号通路有关。