目的探讨移植基质细胞衍生因子1(SDF-1)预处理的骨髓间充质干细胞(BMSC)对大鼠颈动脉狭窄的作用。方法携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的质粒转染BMSC后经静脉注入大鼠。分为颈动脉损伤模型对照组、BMSC移植组、SDF-1预处理的BMSC移植组...目的探讨移植基质细胞衍生因子1(SDF-1)预处理的骨髓间充质干细胞(BMSC)对大鼠颈动脉狭窄的作用。方法携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的质粒转染BMSC后经静脉注入大鼠。分为颈动脉损伤模型对照组、BMSC移植组、SDF-1预处理的BMSC移植组。细胞移植术后2周,取损伤处血管组织采用免疫荧光技术检测EGFP表达明确BMSC归巢情况;移植术后4周, Evans蓝染色观察损伤内膜内皮化程度,免疫荧光技术检测损伤血管CD31的表达情况;HE染色检测损伤颈动脉新生内膜增生程度,免疫组织化学染色法检测损伤血管增殖细胞核抗原(PCNA)的表达, Western blot法检测血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白水平。结果移植SDF-1预处理的BMSC能有效促进干细胞向损伤血管的归巢,并促进损伤血管再内皮化程度。BMSC移植后新生内膜面积、新生内膜面积/中膜面积均低于对照组, SDF-1预处理的BMSC移植组差异更为显著。移植SDF-1预处理的BMSC可显著提高损伤内膜CD31以及VEGF的水平,并抑制PCNA的表达。结论SDF-1预处理BMSC移植可通过促进BMSC归巢至损伤处并诱导细胞分化,抑制中膜平滑肌细胞增殖来减轻血管狭窄程度。展开更多
胆总管结石(common bile duct stones,CBDS)是常见的胆道疾病之一,占胆石症病人的10%~15%[1]。胆总管结石的并发症包括梗阻性黄疸、胆管炎、肝脓肿、胰腺炎和继发性胆汁性肝硬化等[2]。胆总管结石的治疗主要以手术取出结石解除胆管梗阻...胆总管结石(common bile duct stones,CBDS)是常见的胆道疾病之一,占胆石症病人的10%~15%[1]。胆总管结石的并发症包括梗阻性黄疸、胆管炎、肝脓肿、胰腺炎和继发性胆汁性肝硬化等[2]。胆总管结石的治疗主要以手术取出结石解除胆管梗阻为主,部分胆总管结石因结石直径较大在腹腔镜或内镜下取石均较为困难,目前,多数文献报道此类胆总管结石直径≥10 mm[3]。展开更多
文摘目的探讨移植基质细胞衍生因子1(SDF-1)预处理的骨髓间充质干细胞(BMSC)对大鼠颈动脉狭窄的作用。方法携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的质粒转染BMSC后经静脉注入大鼠。分为颈动脉损伤模型对照组、BMSC移植组、SDF-1预处理的BMSC移植组。细胞移植术后2周,取损伤处血管组织采用免疫荧光技术检测EGFP表达明确BMSC归巢情况;移植术后4周, Evans蓝染色观察损伤内膜内皮化程度,免疫荧光技术检测损伤血管CD31的表达情况;HE染色检测损伤颈动脉新生内膜增生程度,免疫组织化学染色法检测损伤血管增殖细胞核抗原(PCNA)的表达, Western blot法检测血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白水平。结果移植SDF-1预处理的BMSC能有效促进干细胞向损伤血管的归巢,并促进损伤血管再内皮化程度。BMSC移植后新生内膜面积、新生内膜面积/中膜面积均低于对照组, SDF-1预处理的BMSC移植组差异更为显著。移植SDF-1预处理的BMSC可显著提高损伤内膜CD31以及VEGF的水平,并抑制PCNA的表达。结论SDF-1预处理BMSC移植可通过促进BMSC归巢至损伤处并诱导细胞分化,抑制中膜平滑肌细胞增殖来减轻血管狭窄程度。
文摘目的探讨DNA 依赖蛋白激酶亚基(DNA-PKcs)基因沉默对肝癌耐药细胞 BEL7402/5-Fu细胞凋亡的影响。方法实验分为空白对照组,siRNA-NC组,脂质体对照组和siRNA-DNA-PKcs实验组;Hoechst33342染色法观察细胞形态学变化;Western blot检测DNA-PKcs,B细胞淋巴瘤-2相关x蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax),凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF),天冬氨酸蛋白水解酶3(cysteine aspartic acid specific protease-3,caspase-3)蛋白水平;免疫荧光检测细胞色素C(Cytochrome c,Cyt-c)释放情况。结果 Hoechst 33342染色检测结果显示siRNA-DNA-PKcs组细胞体积缩小,细胞核边集,呈亮蓝色;Western blot检测结果显示siRNA-DNA-PKcs实验组DNA-PKcs蛋白下调( P <0.05),Bax、caspase-3和AIF蛋白上调( P <0.05);免疫荧光结果显示siRNA-DNA-PKcs实验组细胞色素C呈弥散分布于细胞质中,细胞色素C、线粒体平均光密度减少,与对照组比较,差异有统计学意义( P <0.01)。结论沉默DNA-PKcs表达后可能通过线粒体凋亡途径促进肝癌耐药细胞BEL7402/5-Fu凋亡。
文摘胆总管结石(common bile duct stones,CBDS)是常见的胆道疾病之一,占胆石症病人的10%~15%[1]。胆总管结石的并发症包括梗阻性黄疸、胆管炎、肝脓肿、胰腺炎和继发性胆汁性肝硬化等[2]。胆总管结石的治疗主要以手术取出结石解除胆管梗阻为主,部分胆总管结石因结石直径较大在腹腔镜或内镜下取石均较为困难,目前,多数文献报道此类胆总管结石直径≥10 mm[3]。