新型全自动接种仪的临床应用

目的评价一种新型全自动接种仪的生物安全性和临床应用效果。方法收集2021年1—4月郑州市第七人民医院门诊、住院患者痰样本和清洁中段尿样本各200份,制备大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌菌悬液。先验证该接种仪是否存在交叉污染和生物安全风险,然后交替接种大肠埃希菌菌悬液、金黄色葡萄球菌菌悬液和无菌氯化钠溶液。采用仪器法(全自动接种仪)和手工法同步接种同一份大肠埃希菌菌悬液、金黄色葡萄球菌菌悬液和痰样本、中段尿样本,35~37℃培养18~24 h,比较2种接种方式的接种效果。结果全自动接种仪未发生交叉污染,无生物安全风险。仪器法接种的大肠埃希菌菌悬液和金黄色葡萄球菌菌悬液、痰样本和中段尿样本中分离出的单个菌落数均多于手工法(P<0.001);接种的痰样本中分离出的菌种数较手工法多,但差异无统计学意义(P>0.05)。采用仪器法在哥伦比亚血琼脂平板(CBA)上接种清洁中段尿样本,分离出的菌种数多于手工法(P<0.05);在麦康凯琼脂平板(MAC)上接种,分离出的菌种数与手工法接种差异无统计学意义(P>0.05)。结论全自动接种仪生物安全性良好,可实现痰样本的全自动化处理。与手工法接种相比,具有更好的单菌落分离性能,能满足临床微生物检验需求。

PCT、IL-6与D-Dimer、TAT联合检测评估患者细菌感染程度和发生血栓风险的研究

探讨PCT、IL-6与D-Dimer、TAT联合检测在评估患者细菌感染程度和发生血栓风险的临床应用价值。方法 收集和选用无血栓背景的肺部细菌感染患者样本55例、脓毒血症患者样本66例、无细菌感染的样本10例,总样本量共131例。采用化学发光法(CLIA)检测患者血浆中PCT、IL-6与D-Dimer、TAT的表达水平,比较4中血浆标志物的表达差异。结果 PCT和IL-6联合检测在细菌感染的诊断价值高于PCT和IL-6单项指标的检测价值。D-Dimer和TAT联合检测在血栓形成风险的诊断价值高于D-Dimer和TAT单项指标的检测价值。结论 细菌感染的严重程度与血栓形成的风险呈正相关;采用PCT、IL-6与 D-Dimer、TAT四项联合检测,能同时评估患者细菌感染程度和发生血栓的风险,避免患者因细菌感染而发生血栓,对机体造成更大的伤害,起到早期预警、早期干预、早期治疗的作用。

不同采血管对血清胃泌素17样本保存时间的影响研究

目的探讨不同采血管对血清胃泌素17样本保存时间的影响。方法使用不同厂家的采血管采集样本,在不同时间点检测胃泌素17的含量,与首次检测结果比较,降幅在10%以内作为样本保存时间的判定标准,分析不同厂家采血管采集的样本保存时间。结果普通管样本,不同厂家的保存时间均小于4 h;促凝管和分离胶促凝管样本,河南驼人、广州阳普、武汉致远的保存时间可长达5 d;浏阳三力、江苏康健、积水医疗的保存时间均小于1 d。结论临床在检测胃泌素17时,推荐优选促凝管和分离胶促凝管进行样本采集。临床实验室使用前,建议先对所选的促凝管和分离胶促凝管进行胃泌素17稳定性验证。

自身免疫性肝病的诊断及治疗进展

自身免疫性肝病是机体免疫系统对自身组织的抗原丧失免疫耐受,从而导致了以肝脏为相对特异性免疫病理损伤器官的一类自身免疫性疾病,其病因及发病机制尚不完全清楚,可能与遗传易患性和环境因素有关。近年来,随着对自身免疫性肝病认识水平的提高以及自身抗体检测方法的不断改进,一些学者在自身免疫性肝病的诊治方面提出了一些见解,目前该疾病的诊断主要依赖于血清中自身抗体的检测和临床表现,对于治疗目前自身免疫性肝炎采用免疫抑制剂和皮质激素治疗,原发性胆汁性肝硬化和原发性硬化性胆管炎采用熊去氧胆酸和皮质激素治疗,对于终末期建议采用肝移植治疗。

血清HBeAg定量检测技术新进展

近年来,乙型肝炎e抗原(hepatitis B e Antigen,HBeAg)定量检测技术不断创新发展,由定性、半定量,发展至目前真正意义上的定量检测,并在临床上逐步推广应用。血清HBeAg定量水平与病毒复制、肝组织损伤以及谷氨酸-丙酮酸转氨酶(ALT)升高等指标密切相关。基线HBeAg定量水平可预测聚乙二醇化干扰素(PEG-IFN)、核苷(酸)类似物(NAs)的疗效;治疗过程中实时监测HBeAg降低水平及幅度,可更加精准预测抗病毒药物的疗效,有助于指导临床医师针对不同患者制定个体化治疗方案。本文就目前HBeAg定量检测技术及其在临床应用方面的最新进展做一综述,旨在为临床医师判断患者病情变化,制定优化治疗方案等方面提供理论依据。

哺乳动物细胞瞬时转染技术研究进展

目前全球越来越多的重组抗原及重组抗体用于医疗,尤其针对肿瘤、自身免疫病等难治病症,以及体外诊断试剂。越来越多的高校和企业开始重视重组蛋白新药的开发,这就要求能够快速生产足够候选蛋白用于临床前研究,因此能够快速生产毫克到克级别的重组蛋白瞬时表达体系开始得到广泛应用[1]。

不同增强剂对荧光PCR中尿素、血红素和胆酸盐抑制作用消除效果研究

目的探讨不同聚合酶链反应(PCR)增强剂对胆酸盐、尿素和血红素抑制作用的消除效果。方法将13种不同浓度的PCR增强剂[亚精胺、甲酰胺、PEG6000、NP40、Tween-20、甜菜碱、海藻糖、牛血清白蛋白(BSA)、明胶、硫酸铵、四甲基氯化铵(TMAC)、甘油、Triton X-100]加入含胆酸盐、尿素和血红素的扩增体系中,采用荧光PCR检测,根据循环阈值(Ct)分析不同PCR增强剂的抗抑制效果。结果6.5 mmol/L亚精胺、20%甘油可消除6.98 mmol/L胆酸盐对PCR的抑制作用,6.5 mmol/L亚精胺、100 mmol/L硫酸铵、0.2 mol/L甜菜碱可消除0.99 mol/L尿素对PCR的抑制作用。300 mmol/L BSA、6.5 mmol/L亚精胺、20%PEG6000、50%甘油可消除6.98 mmol/L血红素对PCR的抑制作用。40%甲酰胺、10%NP40、40%Tween-20、1.5 mol/L海藻糖、2%明胶、200 mmol/L TMAC和20%Triton X-100均无法降低6.98 mmol/L胆酸盐、0.99 mol/L尿素和6.98 mmol/L血红素对PCR的抑制作用。结论添加不同类型的PCR增强剂可有效提高荧光PCR的检测灵敏度和准确性。

3种B群链球菌显色培养基性能比较研究

目的通过比较3种B群链球菌显色培养基的性能,了解国内外B群链球菌显色培养基的技术现状。方法用8株菌株和212例临床白带标本分别接种国内外3种B群链球菌显色平板或培养基制作的平板,比较目的菌生长和显色差异、杂菌被抑制和显色的差异以及临床标本的检出情况。结果 3种B群链球菌显色培养基灵敏度一致,均为92.30%(12/13),国产M1公司、进口M2公司以及进口M3公司B群链球菌显色培养基的特异性分别是98.99%(197/199)、98.49%(196/199)和96.98%(193/199),但阳性预期值差异较大,分别是85.71%(12/14)、80.00%(12/15)和66.67%(12/18),M1公司产品与M2公司产品结果差异不显著(P>0.05),但M3公司产品与二者均差异显著(P<0.05)。结论国产B群链球菌显色培养基的整体性能明显优于进口产品,有较大的临床应用价值。

2016生殖支原体感染欧洲指南解读

2016年10月,《欧洲皮肤病与性病学会杂志》在线发表了《2016生殖支原体感染欧洲指南》,该指南对生殖支原体(MG)的临床特征、流行病学、耐药性及治疗进行了报道,为MG感染的治疗提供了重要的指导。本文主要从MG感染的诊断、筛查、治疗和适应证及用药指南等方面进行解读,目的在于使临床医生了解MG诊疗的前沿,以及对MG感染尤其是耐药性的重视。

论乙肝核心抗体IgM检测的重要性

乙型肝炎是一种发病率高、危害性很强的传染性疾病,可通过血液、母婴等途径进行传播。在我国,目前有超过1亿的乙肝病毒携带者,具备极强的危害。目前虽然从出生即进行乙肝疫苗的注射,但人群中乙肝患者及携带者扔具有较高的比例,消灭乙肝病毒仍是一项艰巨的任务。因此及时诊断是否感染乙肝病毒具有非常重要的意义。乙型肝炎病毒核心IgM(抗-HBc IgM)抗体是机体感染乙肝病毒后最先产生的抗体,在窗口期及时确诊乙肝病毒感染对预防他人感染及后期的治疗起到非常重要的作用。但是在国内,无论是体检还是临床诊断,对于抗-HBc IgM抗体的检测普及率不高;在国外,检测抗-HBc IgM抗体已经是血筛指标之一。希望我国能够加强抗-HBc IgM抗体的检测,以便于乙型肝炎病毒感染的及时诊断及治疗。

基于CLSI标准的国产生殖道支原体检测试剂盒性能评估

目的评估以CLSI M43-A支原体药敏指南为基础研发的国产支原体鉴定计数药敏试剂盒性能。方法以微量肉汤稀释法测试解脲支原体(ATCC33175)和人型支原体(ATCC23114)对抗生素的MICs,并与MYCOFAST?revolutioN和国产IST-Ⅲ测定的敏感性进行比较,同时以A8平板培养为金标准检测120例性病门诊患者标本,评估国产试剂盒的检测性能。结果质控菌株的MICs均在指南规定的范围内,2种试剂测定的质控菌株敏感性一致并与MICs符合,国产试剂灵敏度和特异性分别为96.49%(55/57)和92.06%(58/63),进口试剂的灵敏度和特异性分别为96.49%(53/57)和92.06%(56/63),2种试剂之间及与金标准之间差异无统计学意义(P>0.05),而鉴定结果一致标本的药敏符合率为94.81%(251/265)。结论国产支原体试剂与进口试剂性能相当,结果可靠,符合CLSI规范要求,能够满足临床对支原体检测的需要。

肽聚糖的生理功能及其在疾病诊断中的作用进展

肽聚糖(peptidoglycan,PGN)是细菌细胞壁的主要结构,与体内多种受体信号分子如核苷酸结合寡聚化结构域蛋白1/2(nucleotide-binding oligomerization domain protein 1/2,NOD1/2)、Toll样受体2(toll like receptor 2,TLR2)和PGN识别蛋白(peptidoglycan recognition proteins,PGRP)等结合后,参与人体如发烧、睡眠和骨生成等生理功能。研究发现,PGN作为病原微生物细菌的结构成分,在临床血流感染和自身免疫疾病诊断中也发挥着重要作用。现就PGN在人体内的代谢、功能及疾病诊断应用价值作一概述。