全外显子组测序在河南地区遗传性疾病临床诊断中的应用

目的:探讨全外显子组测序在河南地区遗传病诊断中的应用价值。方法:选取2019年10月—2022年4月送检至郑州金域临床检验中心的全外显子组测序基因检测的365例患者为研究对象。患者需提供相关临床资料包含主诉、初步诊断及相关检测结果。采集患者及其父母外周血进行全外显子组测序,结合患者的临床表现寻找相关的致病基因,完善遗传学病因诊断。结果:检出率为40.55%(单碱基变异检出率为28.22%,拷贝数变异检出率为12.33%)。鉴别12例Duchenne/Becker型肌营养不良、7例甲基丙二酸血症、48例发育迟缓谱系疾病、28例癫痫。结论:全外显子组测序可以对遗传性特异性或非特异性异常疾病表现的患者提供有效分子诊断依据,其通过外显子预测的拷贝数变异可以显著提高检出率。

犀角地黄汤联合来氟米特对系统性红斑狼疮的改善作用

目的观察犀角地黄汤联合来氟米特对系统性红斑狼疮(systemic lupus erythema,SLE)的改善及对Th1/Th2失衡的影响。方法选取123例急性活动期热毒炽盛证SLE患者,用随机数字表法分为对照组(n=61)和试验组(n=62)。对照组采用醋酸泼尼松片联合来氟米特治疗,试验组在对照组治疗的基础上用犀角地黄汤治疗。比较治疗前、治疗后1个月和治疗后3个月2组疾病活动度评分、中医证候评分、补体C3水平和Th1/Th2值;比较2组抗ds-DNA抗体阳性率、临床疗效和不良反应。结果治疗前2组SLE疾病活动度评分(SLE disease activity score,SLEDAI)、中医证候评分、补体C3水平和Th1/Th2值比较,差异无统计学意义;治疗后1、3个月试验组SLEDAI评分、中医证候评分、Th1/Th2值和抗ds-DNA抗体阳性率均明显低于对照组,补体C3水平和临床总有效率均明显高于对照组(P<0.05);试验组不良反应发生率明显低于对照组(P<0.05)。结论犀角地黄汤可改善急性活动期热毒炽盛证SLE患者疾病活动度及中医证候、实验室指标,提升临床疗效,减少糖皮质激素及免疫抑制剂所致的不良反应。

液相色谱串联质谱法和化学发光微粒子免疫法测定人血清中卡马西平血药浓度的一致性评价

目的比较液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)与化学发光微粒子免疫法(CMIA)两种方法检测人血清中卡马西平浓度的一致性。方法收集118例临床血清样本,分别用LC-MS/MS和CMIA两种方法检测卡马西平。采用Passing-Boblok回归分析两种方法之间的相关性,采用Bland-Altman及Mountain plot评估两种方法的一致性,使用Kappa分析判断两种方法检测卡马西平浓度是否在有效范围的符合率。结果LCMS/MS与CMIA法检测卡马西平结果分别为(5.68±2.36)μg/mL和(6.45±2.69)μg/mL,Passing-Bablok回归分析显示两种方法检测卡马西平浓度的回归方程为yCMIA=-0.04885+1.1538xLC-MS/MS,斜率为1.1538(95%CI:1.0887~1.2244)不包含1,截距为-0.04885(95%CI:-0.4559~0.2792)包含0,P>0.1,线性度无明显偏差。Bland-Altman图显示两种方法差值的均值为-0.77,界外点数(比率)为5.08%;山形图的山顶值为-0.74μg/mL,偏离0较小,表明两种方法测量的结果一致性较好。两种方法判断卡马西平治疗浓度水平Kappa系数为0.693,诊断符合率为89.93%。结论CMIA与LC-MS/MS两个检测系统检测结果一致性较好。

ALK阳性的间变性大细胞性淋巴瘤少见形态的临床病理特征

ALK阳性的间变性大细胞性淋巴瘤(anaplastic large cell lymphoma,ALK-positive)占成人非霍奇金淋巴瘤约3%及儿童淋巴瘤的10%-20%,好发年龄多<30岁,男女比例约为1.5:l。镜下多见“Hallmark细胞”:即偏位、马蹄样或肾型的多形性的细胞核伴核周丰富嗜酸性胞质。

19例淋巴浆细胞淋巴瘤/华氏巨球蛋白血症的临床病理观察

目的探讨淋巴浆细胞淋巴瘤/华氏巨球蛋白血症的临床病理特征、免疫表型、诊断及鉴别诊断。方法对19例淋巴浆细胞淋巴瘤/华氏巨球蛋白血症进行骨髓活检、免疫组化染色、流式细胞免疫表型及MYD88 L265P及CXCR4 WHIM基因突变检查并复习相关文献。结果男11例,女8例。肿瘤性淋巴细胞增生模式以弥漫型为主,其周围及淋巴细胞间常见浆细胞增生,背景常见肥大细胞。免疫表型为:CD5、CD43、Bcl-6、CD103阴性;FMC7、IgM及泛B抗原阳性;3例(3/12)表达CD11c,2例(2/14)表达CD13,2例(2/19)表达CD10。9例行MYD88 L265P基因测序均检测到突变,6例行CXCR4 WHIM基因测序有3例检测到移码突变。结论淋巴浆细胞淋巴瘤/华氏巨球蛋白血症是一种较少见的病种,诊断需结合临床表现、病理组织学特点、免疫组化和/或相关基因检测诊断。

经典型霍奇金淋巴瘤累及骨髓的临床病理分析

目的探讨经典型霍奇金淋巴瘤累及骨髓的临床病理特征、免疫表型、诊断及鉴别诊断。方法对4例(3例初诊,1例为治疗后复发)经典型霍奇金淋巴瘤患者进行骨髓活检、免疫组化染色并复习相关文献。结果肿瘤区域呈"块状"分布,即"大结节状"分布,其与正常造血组织边界清晰,表现为正常造血组织区域和肿瘤区域"共存"状态或者完全挤占造血组织;在组织细胞、浆细胞、嗜酸性粒细胞、T淋巴细胞背景中可见散在的大细胞,为HRS细胞,典型的诊断性的RS细胞少见;4例均伴网状纤维增生,MF-1级2例,MF-2级1例,MF-3级1例,但无骨硬化;2例有骨髓坏死,分别为I级、III级。免疫组化:CD30、CD15、Fascin、MuM-1、EBV、p53、Ki-67(+),PAX-5弱(+),ALK、CD3、CD20、TIA、EMA(-)。结论经典型霍奇金淋巴瘤累及骨髓临床较少见,诊断需结合病理组织学特点和免疫组化。

二代测序和荧光原位杂交在骨髓增生异常综合征中的临床价值

目的探究二代测序(NGS)和荧光原位杂交(FISH)技术在骨髓增生异常综合征(MDS)诊断与治疗中的应用价值。方法收集郑州金域临床检验中心2019年5月至2020年3月同时进行NGS MDS检测套餐和FISH MDS四项检测的MDS患者共137例。统计并分析不同检验方法的实际发单周期、阳性检出率。结果137例MDS受检标本中,检测到NGS阳性93例(67.88%),FISH检测阳性30例(21.90%),其中FISH检测到5q-10例,包括8例合并有NGS TP53基因突变者。41~70岁者中2种检测方法均具有较高的阳性检出率。FISH的发单周期为3~4 d,NGS的发单周期为9 d。结论FISH的阳性检出率较低,需同时送检NGS提高阳性检出率,且FISH检测到5q-时,发生TP53突变的频率较高,需综合考虑TP53基因突变情况再制定临床诊疗方案。

Ph阴性经典MPN患者JAK2 MPL及CALR驱动基因检测在临床鉴别诊断中的价值

目的探讨费城染色体阴性经典骨髓增值性肿瘤患者JAK2、MPL及CALR驱动基因检测在临床鉴别诊断中的价值。方法将1279例骨髓增值性肿瘤患者按照诊断标准分型,对392例真性红细胞增多症、548例原发性血小板增多症以及221例原发性骨髓纤维化患者的驱动基因突变情况进行分析。结果JAK2 V617F在真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、原发性骨髓纤维化患者中检出率分别为92.86%、68.25%、71.95%;JAK2 V617F基因突变频率在真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、原发性骨髓纤维化患者中的突变频率均值分别为73.01%、41.60%、67.15%;JAK2第12和第13外显子在真性红细胞增多症、原发性血小板增多症中均检测到突变,检出率分别为2.30%、0.39%;CALR在真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、原发性骨髓纤维化患者中检出率分别为0、20.79%、19.12%;MPL在真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、原发性骨髓纤维化患者中检出率分别为0、3.05%、3.43%。双驱动基因共突变较为罕见,JAK2伴CALR共突变12例,检出率为1.10%;JAK2伴MPL共突变3例,检出率0.28%;驱动基因在真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、原发性骨髓纤维化患者中按性别分组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论不同亚型Ph阴性经典骨髓增值性肿瘤患者驱动基因检出率为临床医生在骨髓增值性肿瘤亚型的分类诊断上提供了有力的依据,可以协助医生快速诊断,降低漏诊误诊的概率。

液相色谱串联质谱法和电化学发光免疫分析法检测25-羟维生素D的一致性评价

目的比较液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)与电化学发光免疫分析法(ECLIA)检测血清中25-羟基维生素D(25(OH)D)结果的相关性和一致性,以期指导临床选择合适的检验方法。方法收集该实验室临床血清标本94例,分别用LC-MS/MS和ECLIA这两种方法检测25(OH)D。采用Passing-Boblok回归分析两种方法的相关性,采用Bland-Altman及Mountain plot评估两种方法的一致性。以血清25(OH)D<20.0 ng/mL为维生素D缺乏,20.0~<30.0 ng/mL为维生素D不足,使用Kappa分析判断两种方法的诊断维生素D营养状况的符合率。结果LC-MS/MS与ECLIA检测25(OH)D结果分别为(26.67±4.79)ng/mL和(39.33±4.09)ng/mL,Passing-Bablok回归分析显示两种方法检测25(OH)D浓度的回归方程为Y ECLIA=-4.5581+1.7198 X LC-MS/MS,斜率为1.7198(95%CI 1.5863~1.8284),不包含1,截距为-4.5581(95%CI-7.6922~-2.1221),不包含0,提示两种方法存在系统差异或比例差异。Bland-Altman图显示两种方法差值的均值为-12.7,界外点数(比率)为3.19%。山形图的山顶值为-9.17 ng/mL,偏离0较多,表明两种方法检测的结果一致性较差。两种方法判断维生素D缺乏的Kappa系数为0.875,诊断符合率为94.68%;两种方法判断维生素D不足的Kappa系数为0.538,诊断符合率为75.53%。结论ECLIA与LC-MS/MS检测结果一致性较差,但依据营养状况诊断维生素D缺乏与不足的符合率较高。

骨髓增生异常综合征22种基因突变结果分析

目的 探究骨髓增生异常综合征(MDS)中相关基因突变的规律。方法 收集郑州金域临床检验中心2019年8月至2020年9月接受二代测序(NGS)方法检测MDS相关基因突变的533例患者的数据,每例样本检测22个基因突变。分析MDS疾病相关基因突变的类型并绘制突变谱。结合患者年龄、性别及核型分析结果。结果 533例受检标本中,检出347例(65.1%)阳性结果。绘制基因突变谱,结合其他资料,发现部分基因突变与年龄、性别相关。另TP53基因突变常伴5号染色体缺失的现象。SETBP1基因突变偶尔伴有7号染色体缺失。ASXL1基因在MDS中主要伴随U2AF1、SETBP1、EZH2、RUNX1基因共突变。结论 MDS相关22种基因突变的阳性检出率和突变类型不同,部分基因突变与患者的年龄、性别和核型结果相关。

河南省10648例0~14岁儿童血清25-羟基维生素D检测结果分析

目的调查河南省0~14岁儿童血清25-羟基维生素D水平(25OHD),为儿童合理补充维生素D及防治维生素D缺乏提供依据。方法选取10648例0~14岁河南省儿童为研究对象,采用液相色谱串联质谱法检测血清样本中25OHD。根据性别、年龄及季节进行分组,比较不同状况下其维生素D的缺乏率、不足率、充足率及过量率情况。结果10648例河南省0~14岁儿童血清25OHD水平为(25.56±12.06)ng/mL,其中缺乏者2063例(19.37%),不足者1823例(17.12%),充足者6753例(63.42%),过量者9例(0.08%)。按性别分组,维生素D缺乏率男童(18.33%)低于女童(20.93%),组间差异有统计学意义(χ^(2)=11.685,P<0.05)。按年龄分组,随着年龄的增长维生素D缺乏率升高,组间差异有统计学意义(χ^(2)=2638.87,P<0.05)。按季节分组,夏季维生素D营养状况相对最好,维生素D缺乏率最低(5.87%),冬季缺乏率最高(37.18%),组间差异具有统计学意义(χ^(2)=1151.30,P<0.05)。结论河南地区0~14岁儿童随着年龄增加维生素D缺乏率增高,女童缺乏率高于男童,在冬季维生素D缺乏率最高,因此,有必要依年龄、季节适时补充维生素D,并加强户外活动。

支气管肺泡灌洗液CEA、SCC及HE4检测在非小细胞肺癌中的诊断价值

目的探讨检测支气管肺泡灌洗液CEA、SCC及HE4对非小细胞肺癌的诊断价值。方法选择非小细胞肺癌患者68例作为非小细胞肺癌组,同时,收集58例肺部良性疾病作为肺部良性疾病组。对患者进行纤维支气管镜检查,收集支气管肺泡灌洗液,应用电化学发光法检测CEA、SCC及HE4表达水平,比较CEA、SCC及HE4在肺癌组和肺部良性疾病组的水平差异;分析CEA、SCC及HE4在不同临床分期肺癌中表达水平及与肺癌病情严重程度的关系;分析CEA、SCC及HE4水平诊断肺癌的敏感度和特异度。结果非小细胞肺癌组患者支气管肺泡灌洗液中CEA、SCC及HE4水平明显高于肺部良性疾病组,且具有统计学意义(P<0.05);CEA、SCC及HE4与水平肺癌临床分期呈正相关,Ⅱ期、Ⅲ期及Ⅳ期肺癌患者此3项指标明显高于Ⅰ期患者;单独检测CEA、SCC及HE4对于诊断肺癌的灵敏度和特异度偏低,而联合检测此3项指标诊断肺癌的灵敏度及特异度达到了86.76%及89.70%。结论检测CEA、SCC及HE4对早期诊断非小细胞肺癌和病情判断有一定价值,而联合检测CEA、SCC及HE4能明显提高肺癌的诊断准确率。

PDCA提升分子诊断自动审核通过率的效果研究

目的探讨PDCA提升分子诊断自动审核通过率的效果。方法基于PDCA思路,使用系统导出的自动审核效能数据作为现状调查数据,以此确定目标、分析原因并确定主因,然后在此基础上制订措施并实施,再次使用自动审核效能数据进行效果分析,不达标者再次进行原因分析,进入PDCA循环,目标达到者固化措施,总结并制订下一步计划。结果分子诊断自动审核通过率由31.2%提升至66.2%,报告单审核效率提升了60.0%,检测项目标本周转时间(TAT)缩短2.2 h。结论使用PDCA循环结合实验室预警效能分析能够有效推进自动审核工作,该方法亦可推广用于实验室其他方面的改进。

体感音乐疗法联合膳食干预对脑梗死患者负性情绪及独立生活能力的影响

目的:研究分析体感音乐疗法(VAT)联合膳食干预对脑梗死患者负性情绪及独立生活能力的影响。方法:选取2018年6月至2020年6月某院收治的脑梗死患者100例作为研究对象,其中2018年6月至2019年6月的50例作为观察组,2019年6月至2020年6月的50例作为对照组。对照组患者予以常规照护治疗,观察组在对照组基础上予以体感音乐疗法联合膳食干预。两组患者均干预2周,分别采用焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)、正性负性情绪量表(PANAS)、心理弹性量表(CD-RISC)、Fugl-Meyer肢体评分、Barthel指数、生活质量量表(SF-36)在干预前后评估两组患者的负性情绪、心理弹性、肢体运动能力及独立生活能力、生活质量,并进行对比分析。结果:干预后观察组PANAS评分中PA评分明显高于对照组(t=2.201,P<0.05),SAS、SDS及PANAS评分中NA评分均明显低于对照组(t=-3.255,-2622,-2.518;P<0.01);干预后观察组CD-RISC坚韧、自强、乐观各维度及总评分均明显高于对照组(t=4.192,3.538,5622,5.644;P<0.01);干预后观察组Fugl-Meyer肢体评分及Barthel指数明显高于对照组(t=8.106,7.805;P<0.001);干预后观察组SF-36社会功能、情感职能、生理机能、躯体疼痛、活力、精神健康、生理职能、总体健康各维度评分均明显高于对照组(t=3.310,5.380,2.430,3.823,3.459,5.933,4.23,4.071;P<0.05)。结论:VAT联合膳食干预可有效改善脑梗死患者焦虑抑郁等负性情绪,加强其心理弹性,提高其独立生活能力,进而提高患者生活质量。

开发LIS功能实现新型冠状病毒核酸及抗体检测结果自动审核和综合报告

目的通过开发实验室信息管理系统(LIS)功能,实现新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸及抗体检测结果自动审核和综合报告。方法根据SARS-CoV-2检测流程的风险控制需求、检测结果报告要求,使用金域医学自行开发的自动审核系统设置20条规则,包括3条审核类规则和17条解释类规则。LIS对SARS-CoV-2核酸和抗体检测结果自动审核并综合至1张报告单,实现自动报告。结果LIS成功进行结果审核和综合,2020年3月15日至22日,结果解释类规则使用率为99.68%,结果审核类规则使用率为0.32%。自动审核使标本周转时间缩短了2.7 h;截至2021年1月13日,尚未发现任何LIS执行缺陷。结论通过自动审核和综合报告可以控制内部风险,提供结果解释,提升报告处理效率和临床服务质量,为检验与临床的良性互动提供保障。

基因多态性与妊娠期高血压疾病的相关性研究

目的探讨13个基因18个单核苷酸多态性(SNP)位点基因多态性与妊娠期高血压疾病的相关性。方法采用病例对照研究,选取2020年6-12月46例妊娠期高血压孕产妇为研究组,选取同期住院的50例健康孕产妇为对照组。利用基质辅助激光解吸飞行时间质谱技术检测18个SNP位点的基因型分布,比较各SNP位点在2组间的分布差异。结果2组EPHX1基因rs1051740位点和NOS3基因rs2070744位点基因型和等位基因比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。等位基因C在妊娠期高血压人群中发病风险度(95%可信区间)分别为1.82(0.99~3.34)和2.24(0.90~5.57)。结论EPHX1基因rs1051740位点和NOS3基因rs2070744位点与妊娠期高血压疾病相关,其等位基因C可能是妊娠期高血压疾病的易感基因。

常见骨髓增殖性肿瘤粒系CD33阳性指数的变化

目的探讨骨髓增殖性肿瘤(MPN)流式细胞免疫表型粒系CD33阳性指数的变化。方法采用流式细胞免疫表型分析,对95例MPN患者[慢性髓系白血病(CML)42例、原发性血小板增多症(ET)29例、真性红细胞增多症(PV)13例、原发性骨髓纤维化(PMF)11例]粒系CD33阳性指数的表达进行分析。另选取30例单纯性缺铁性贫血患者作为对照组。结果CML组、ET组、PV组、PMF组的CD33阳性指数分别为26.35±13.40、5.44±3.72、5.44±2.83、1.54±1.25,与对照组(9.62±5.07)相比差异均有统计学意义(P<0.01)。结论粒系CD33阳性指数在CML、ET+PV、PMF中依次降低,可作为MPN诊断的一个新型流式细胞免疫表型分析指标。

多西他赛治疗非小细胞肺癌对患者T淋巴细胞亚群的影响

目的研究多西他赛治疗非小细胞肺癌前后患者T淋巴细胞亚群的变化。方法对40例非小细胞肺癌患者的临床资料进行回顾性分析。结果肺癌组患者化疗前、化疗后的CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+、NK cells均显著低于对照组(P<0.05),但2组人员的CD3+CD8+之间的差异不显著(P>0.05);肺癌组患者化疗后的CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+、NK cells均显著高于化疗前(P<0.05)。肺癌组疾病控制患者的CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+、NK cells均显著高于高于疾病进展组(P<0.05),疾病进展患者的CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+、NK cells均显著低于对照组(P<0.05),但疾病控制患者与对照组人员的CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+、NK cells之间的差异均不显著(P>0.05),2组人员的CD3+CD8+之间的差异不显著(P>0.05)。结论多西他赛治疗非小细胞肺癌前后患者T淋巴细胞亚群的变化能够对其疗效进行有效评估。

河南省心脑血管疾病患者CYP2C19基因多态性分析

目的研究河南省心脑血管疾病患者CYP2C19基因多态性,为氯吡格雷个体化用药提供参考。方法以河南省1182例心脑血管疾病患者为研究对象,利用单碱基延伸法检测CYP2C19基因型,比较不同性别、年龄患者CYP2C19代谢表型分布,结合既往文献比较河南省与其他几个省份患者CYP2C19代谢表型分布。结果共检出10种基因型,分别为*17/*17、*1/*17、*1/*1、*1/*2、*1/*3、*2/*17、*3/*17、*2/*2、*2/*3、*3/*3,其中*1/*1基因型出现频率最高(40.69%),国内很少出现的*17/*17基因型在本研究中检出1例(0.08%)。10种基因型共可分为4种代谢表型,即超快代谢型(1.95%)、快代谢型(40.69%)、中间代谢型(43.74%)和慢代谢型(13.62%)。不同性别和不同年龄的患者CYP2C19代谢表型分布差异无统计学意义(P>0.05)。河南省CYP2C19代谢表型分布与重庆、福建省和湖北省CYP2C19代谢表型分布情况相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论河南省心脑血管疾病患者CYP2C19基因多态性具有一定的地域特点,超过50%的患者为中间代谢型和慢代谢型。因此,建议对服用或拟服用氯吡格雷的患者进行CYP2C19基因检测,根据检测结果制定用药方案,及时调整氯吡格雷剂量或更换药物,以减少心脑血管不良事件的发生。

伴中性粒细胞植入巨核细胞的骨髓增生异常综合征1例

患者男性,55岁。面黄、乏力、心慌、胸闷1月余,加重伴发热9天入院。血常规:白细胞1.11×109/L,血红蛋白99 g/L,血小板180×109/L。彩超示脾肿大,肋下30 mm;右心房增大,三尖瓣轻-中度返流。胃镜示食管炎,糜烂性胃炎。丙肝-RNA4.96×105 IU/ml。病理检查镜检:①骨髓细胞学:骨髓有核细胞增生活跃;粒系增生明显,可见较多分叶过多核(5~14个)(图1)、细胞质中颗粒增多增粗粒细胞;红系细胞少见,成熟红细胞形态未见明显异常;淋巴细胞、浆细胞形态未见明显异常;巨核细胞易见,部分可见中性粒细胞植入现象(图2),未见小巨核及单圆核巨核细胞,血小板易见。