AG490抑制甲状腺髓样癌TT细胞增殖并提高其放射敏感性

目的研究AG490对体外培养甲状腺髓样癌TT细胞增殖、凋亡及放射敏感性的影响。方法采用(0、25、50、100)μmol/L AG490处理甲状腺髓样癌TT细胞,MTT法和流式细胞术进行细胞增殖和凋亡检测,克隆形成实验检测其放射敏感性、Western blot法检测各组细胞Janus激酶2(JAK2)、磷酸化的信号转导子与转录激活子3(p-STAT3)、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与对照组相比,(25、50、100)μmol/L AG490组的抑制作用增强,呈浓度和时间依赖性;随着AG490药物浓度的增加凋亡率逐渐增加;与对照组相比,50μmol/L组细胞存活率显著降低,放射生物学参数:射线为2Gy时的存活分数(SF2)、平均致死剂量(D0)、准阈剂量(Dq)和外推数(N)降低;D0时放射增敏比(SER D0)、Dq时放射增敏比(SERDq)则增加。Western blot结果显示JAK2、p-STAT3和Bcl-2的蛋白表达量随着药物浓度的升高而逐渐降低,Bax蛋白表达量随着药物浓度的升高而逐渐增加。结论 AG490可抑制甲状腺髓样癌TT细胞增殖、增加细胞凋亡、提高放射敏感性。

三氧化二砷对人肺癌细胞株A2放射增敏的实验研究

目的:本文探讨三氧化二砷(Arsenictrioxide,As2O3)对人肺癌细胞株A2放射敏感性的影响。方法:设立空白对照组、单纯照射组(直线加速器X射线照射,2 Gy)、As2O3组(1.0μmol/LAs2O3)、As2O3+照射组(1.0μmol/LAs2O3+X射线照射,2 Gy)。用流式细胞仪检测As2O3作用后肿瘤细胞周期的变化,MTT法及平板克隆形成试验测定各实验组人肺癌细胞株A2细胞存活分数和集落形成率,用流式细胞仪观察Bcl-2蛋白的表达。结果:As2O3作用后使A2细胞出现明显G2/M期阻滞。As2O3+照射组细胞存活分数和集落形成率较As2O3组及单纯照射组明显下降,与As2O3组或单纯照射组比较差异具有显著性(P<0.01)。As2O3+照射组细胞Bcl-2蛋白的表达明显下调,与As2O3组或单纯照射组比较差异具有显著性(P<0.01)。结论:As2O3对人肺癌细胞A2具有放射增敏作用,其增敏机制可能与As2O3增加照射前G2/M期细胞比例及照射后肿瘤细胞的凋亡率有关。

HIF-1α对小鼠宫颈癌皮下移植瘤放射敏感性影响的实验研究

目的:探讨低氧诱导因子1α(HIF-1α)对小鼠宫颈癌皮下移植瘤放射敏感性的影响及其可能的机制。方法:建立宫颈癌皮下移植瘤模型,随机分为对照组、单次γ射线大剂量照射组、小剂量分次照射组、大剂量照射联合高压氧组、小剂量分次照射联合高压氧组,采用不同的方案进行体外放射治疗。免疫组化法测定放射治疗后移植瘤内的HIF-1α、Bcl-2的表达水平,观察各γ射线处理组照射后移植瘤的抑瘤率,并对HIF-1α与Bcl-2的表达及抑瘤率进行相关性分析。结果:HIF-1α的表达与移植瘤抑瘤率呈负相关(r=-0.514,P<0.05);与Bcl-2表达无明显相关关系。结论:抑制HIF-1α的表达可提高肿瘤对放射治疗的敏感性,该效应可能与Bcl-2表达无关。

抑制mdr1基因对宫颈癌放射增敏的体内实验研究

目的:探讨用反义技术抑制mdr1基因对放射治疗宫颈癌移植瘤的影响。方法:研究分脂质体组、正义寡核苷酸组和反义寡核苷酸组;用RT-PCR检测宫颈癌移植瘤组织放射治疗前后mdr1表达水平的变化。测定各组肿瘤瘤重,计算抑瘤率。用RT-PCR和免疫组织化学法测定VEGF和Ku70的表达。结果:mdr1反义寡核苷酸能有效地抑制mdr1基因表达,经脂质体介导的mdr1反义寡核苷酸作用的宫颈癌移植瘤经射线照射后其抑瘤率较正义寡核苷酸组及单纯照射组明显增加,VEGF蛋白和Ku70表达显著下调,与各对照组有显著差异(P<0.05)。结论:mdr1反义寡核苷酸通过抑制mdr1基因降低宫颈癌移植瘤的放射抗性。其辐射增敏作用可能与下调照射后肿瘤组织VEGF和Ku70表达有关。

COX-2抑制剂对乳腺癌放射增敏作用的实验研究

目的:探讨环氧化酶2抑制剂尼美舒利对乳腺癌细胞株MCF-7的放射增敏作用并初步探讨其机制。方法:克隆形成实验检测尼美舒利对MCF-7的放射增敏作用;电镜观察肿瘤细胞形态学改变;流式细胞仪(FCM)检测肿瘤细胞调亡率及Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果:不同浓度的尼美舒利对乳腺癌细胞MCF-7均有放射增敏作用,且呈剂量依赖性关系;尼美舒利与射线照射联用能够上调Bax的蛋白表达,同时抑制Bcl-2蛋白表达,明显增加细胞凋亡率。结论:COX-2抑制剂尼美舒利对人乳腺癌MCF-7细胞株具有明显的放疗增敏作用。

反义mdr1对鼻咽癌细胞放射敏感性的影响

目的:探讨用反义技术抑制多药耐药基因1(Multidrug resistance gene 1,mdr1基因)对鼻咽癌细胞CNE放射敏感性的影响。方法:设立空白组、脂质体组(仅加入等量的脂质体)和mdr1正义寡核苷酸组作对照,用RT-PCR检测鼻咽癌细胞转染反义mdr1前后mdr1表达水平的变化。用集落形成试验检测各实验组照射后人鼻咽癌CNE细胞株的集落形成率,免疫组织化学法测定甲基鸟嘌呤甲基转移酶(Methylguanine-methyltransferase,MGMT)的表达。结果:mdr1反义寡核苷酸能有效抑制mdr1基因的表达。mdr1反义寡核苷酸+60Coγ射线照射组,其集落形成率较正义寡核苷酸组及单纯照射组明显下降,MGMT蛋白的表达也显著下调,与各对照组比较有显著差异(P<0.05)。结论:mdr1反义寡核苷酸通过抑制mdr1基因降低了人鼻咽癌CNE细胞放射抗性。其辐射增敏作用可能与mdr1反义寡核苷酸下调照射后鼻咽癌细胞MGMT蛋白表达有关。

沉默CD133基因对CD133^+肝癌干细胞放射敏感性的影响

目的研究沉默CD133基因对人肝癌CD133+-HepG2干细胞放射敏感性的影响。方法免疫磁珠分选HepG2细胞;流式细胞术检测分选前后CD133表达率;NOD/SCID小鼠成瘤实验验证其干性;靶向沉默CD133基因并分组(空白组、阴性感染组、阳性感染组);RT-PCR和Western blot检测各组CD133基因mRNA和蛋白表达;克隆形成实验检测各组细胞经不同剂量照射后的克隆形成率及存活率,绘制存活曲线并计算各组细胞放射生物学参数D0、Dq、N及放射增敏比(SER);流式细胞术检测各组细胞周期及凋亡情况。结果流式细胞术检测结果显示,分选前后CD133表达率分别为(1.36±0.20)%和(87.62±1.92)%。CD133+细胞在细胞数为1×103/ml时即可形成皮下移植瘤。RT-PCR和Westernblot检测结果显示,阳性感染组CD133 mRNA和蛋白表达均受到明显抑制。流式细胞术检测结果显示:阳性感染组G1、S期减少G2期增加,细胞凋亡率明显增加。克隆形成实验显示阳性感染组D0、Dq、N值与SF2均减小,放射敏感性明显增强,其SER为(1.37±0.02),差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 CD133作为肝癌干细胞的表面标志物之一,可能成为肝癌干细胞放射治疗增敏的靶点。

抑制mdr1基因对肝癌移植瘤放射疗效的影响

[目的]探讨用反义技术抑制mdr1基因对肝癌移植瘤放射疗效的影响。[方法]设立mdr1正义寡核苷酸组和脂质体组(仅加入等量的脂质体)作对照,用RT-PCR检测肝癌移植瘤组织处理前后mdr1表达水平的变化。测定各组肿瘤瘤重,计算抑瘤率。用免疫组织化学法测定Bcl-2和MGMT蛋白的表达。[结果]mdr1反义寡核苷酸能有效抑制mdr1基因的表达,经脂质体介导的mdr1反义寡核苷酸作用的肝癌移植瘤经射线照射后其抑瘤率较正义寡核苷酸组及单纯照射组明显增加,Bcl-2蛋白和MGMT蛋白的表达也显著下调,与对照各组比较有统计学差异(P﹤0.05)。[结论]mdr1反义寡核苷酸通过抑制mdr1基因降低肝癌移植瘤的放射抗性。其辐射增敏作用可能与mdr1反义寡核苷酸下调照射后肿瘤组织Bcl-2和MGMT蛋白表达有关。

抑制mdr1基因对人宫颈癌细胞放射敏感性影响的实验研究

目的:探讨用反义技术抑制癌基因mdr1对宫颈癌细胞(HeLa)放射敏感性的影响。方法:设空白组、mdr1正义寡核苷酸组和脂质体组(仅加入等量的脂质体)为对照组以及mdr1反义寡核苷酸组,用RT-PCR检测宫颈癌细胞处理前后mdr1表达水平的变化。用集落形成试验检测各实验组照射后人宫颈癌HeLa细胞株集落形成率,AO/EB荧光染色法检测细胞凋亡率的变化,流式细胞仪测定Bcl-2蛋白的表达。结果:mdr1反义寡核苷酸能有效地抑制mdr1癌基因的表达,经脂质体介导的mdr1反义寡核苷酸作用的宫颈癌细胞经60Coγ射线照射后其集落形成率较正义寡核苷酸组及单纯照射组明显下降,而凋亡率明显增加,Bcl-2蛋白表达显著下调,与对照各组比较有显著差异(P<0.05)。结论:mdr1反义寡核苷酸通过抑制mdr1基因降低人宫颈癌HeLa细胞放射抗性。其辐射增敏作用可能与mdr1反义寡核苷酸增加照射后肿瘤细胞的凋亡率有关。

环氧化酶2抑制剂尼美舒利对乳腺癌细胞株放射敏感性的影响

[目的]探讨环氧化酶2抑制剂尼美舒利对乳腺癌细胞株MCF-7的放射增敏作用并初步探讨其机制。[方法]克隆形成实验检测尼美舒利对MCF-7的放射增敏作用;电镜观察肿瘤细胞形态学改变;流式细胞仪(FCM)检测肿瘤细胞调亡率及Bcl-2、Bax蛋白的表达。[结果]不同浓度的尼美舒利对乳腺癌细胞MCF-7均有放射增敏作用,且呈剂量依赖性关系;尼美舒利与射线照射联用能够上调Bax的蛋白表达,同时抑制Bcl-2蛋白表达,明显增加细胞凋亡率。[结论]COX2抑制剂尼美舒利对人乳腺癌MCF-7细胞株具有明显的放疗增敏作用。

跑步对抑郁大鼠内侧前额叶皮质兴奋性突触的影响

目的:精确定量研究跑步锻炼对慢性束缚应激(chronic restraint stress,CRS)诱导的抑郁模型大鼠内侧前额叶皮质(medial prefrontal cortex,mPFC)内Sp^(+)兴奋性突触数量的影响。方法:选取雄性SD大鼠(54只),经过适应性喂养和糖水基线调整,在CRS模型建立成功后随机分为对照组、抑郁模型组和模型跑步组,其中模型跑步组大鼠在束缚的第5周开始进行为期4周的跑步锻炼干预。最后,对各组大鼠进行行为学测试,并运用免疫组织化学技术结合现代体视学方法对各组大鼠mPFC内Sp^(+)兴奋性突触变化进行精确定量研究。结果:与对照组[(97.14±2.64)%]相比,抑郁模型组和模型跑步组大鼠糖精偏好百分比[(89.62±6.05)%]减少(P=0.002),体质量的增长减缓,强迫游泳实验中大鼠的不动时间和新环境进食抑制实验的进食潜伏期增加。4周的跑步锻炼可以有效减缓抑郁模型组大鼠糖精偏好百分比的下降[(89.30±5.06)%vs.(97.30±2.08)%,P=0.018],降低强迫游泳实验中抑郁大鼠的不动时间,并在新环境进食抑制实验中缩短抑郁大鼠的进食潜伏期。体视学精确定量分析结果显示,抑郁模型组大鼠mPFC内的Sp^(+)兴奋性突触总量[(9.98±0.35)×10^(8)个]低于对照组[(11.50±1.27)×10^(8)个,P=0.013]。而跑步锻炼则可以逆转抑郁大鼠mPFC内的Sp^(+)兴奋性突触总数的减少[模型跑步组(11.30±1.21)×10^(8)个,P=0.003]。结论:跑步锻炼干预后CRS抑郁模型大鼠mPFC的Sp^(+)兴奋性突触数量的改变可能是跑步锻炼发挥抗抑郁作用的神经生物学基础之一。

低氧诱导因子1α对小鼠宫颈癌放射敏感性的影响

目的:探讨低氧诱导因子1α(HIF-1α)对小鼠宫颈癌皮下移植瘤放射敏感性的影响,探讨其可能的机制。方法:建立宫颈癌皮下移植瘤模型,随机分为对照组、单次γ射线大剂量照射组、小剂量分次照射组、大剂量照射联合高压氧组、小剂量分次照射联合高压氧组,采用不同的方案进行体外放射治疗。免疫组化法测定放射治疗后移植瘤内的HIF-1α、bcl-2的表达水平,观察各γ射线处理组照射后移植瘤的抑瘤率,并对HIF-1α与bcl-2的表达及抑瘤率进行相关性分析。结果:HIF-1α的表达与移植瘤抑瘤率呈负相关(r=-0.514,P<0.05);与Bcl-2表达无明显相关关系。结论:抑制HIF-1α的表达可提高肿瘤对放射治疗的敏感性,该效应可能与Bcl-2表达无关。

跑步对CUS抑郁模型小鼠内侧前额叶皮质内PV+中间神经元的影响

目的 探讨跑步对慢性不可预知性(chronic unpredictable stress, CUS)抑郁症模型小鼠抑郁样行为的影响和内侧前额叶皮质(medial prefrontal cortex, mPFC)内GABA能中间神经元、PV+中间神经元和GAD67+/PV+细胞比例的影响。方法 选取4~6周龄的雄性C57BL/6小鼠,CUS建模成功后,利用糖水偏好实验结果将其以分层随机法分为对照组、CUS模型对照组和CUS模型+跑步组。运用糖水偏好实验、强迫游泳实验和悬尾实验评估各组小鼠的行为学水平。采用qRT-PCR检测小鼠mPFC中GAD1、GAD2、PV和CCK的mRNA表达水平。采用免疫组织化学和现代体视学相结合的方法对小鼠mPFC内GABA能中间神经元和PV+中间神经元数量进行精确三维定量,并分析PV+/GAD67+细胞比例。结果 与CUS模型对照组小鼠相比,CUS模型+跑步组小鼠和对照组的糖水偏好百分比显著增加(P<0.05),强迫游泳不动时间显著降低(P<0.05),悬尾不动时间显著降低(P<0.05);对照组、CUS模型对照组和CUS模型+跑步组小鼠mPFC内GAD1、GAD2和CCK的mRNA表达水平以及GABA能中间神经元数量差异无统计学意义(P> 0.05);CUS模型对照组小鼠mPFC中PV的mRNA表达水平、PV+中间神经元数量和PV+/GAD67+细胞比例均显著低于CUS模型+跑步组和对照组(P<0.05)。结论 跑步可能通过调节PV+中间神经元的数量和基因表达从而发挥抗抑郁效应。

利用文献解读进行基础医学专业《实验核医学》教学实践

为提高学生兴趣,培养学生科学素养,尝试将专业文献解读教学与《实验核医学》教材内容进行有机结合。通过学生对文献进行部分精读、整体汇报和教师点评总结完成文献解读,提高了学生对理论知识的理解,加深了学生对实验核医学技术的认识,拓展了学生的科学视野,培养了学生的科学素养。

IL-6对食管癌细胞侵袭迁移及上皮间质转化的影响

目的研究白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)对食管癌Eca-109细胞增殖、侵袭迁移及上皮间质转化的影响,探讨其作用机制。方法用不同浓度(0、25、50和100 ng/mL)的IL-6处理Eca-109细胞,采用MTT法检测细胞增殖,细胞划痕实验、Transwell小室实验检测细胞迁移侵袭能力,荧光定量PCR检测E-cadherin、N-cadherin、Vimentin和Twist1mRNA的表达,Western blot检测Stat3、p-Stat3、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin和Twist1蛋白表达。结果与对照组(0 ng/mL)比较,IL-6处理组(25、50、100 ng/mL)在IL-6作用后第1～5天Eca-109细胞增殖增加,呈量效-时效关系(P<0.05,P<0.01)。IL-6各浓度(0、25、50 ng/mL)组24 h细胞迁移距离分别为(18.20±0.89)、(23.77±0.40)和(25.27±0.93)mm,与对照组(0 ng/mL)比较,IL-6处理组(25、50 ng/mL)Eca-109细胞体外迁移距离明显增加(P<0.05,P<0.05)。IL-6各浓度(0、25、50 ng/mL)组穿过Matrigel胶的细胞分别为(70.33±2.36)、(103.00±3.51)、(118.00±4.00)个/视野,与对照组(0 ng/mL)比较,IL-6处理组(25、50 ng/mL)Eca-109细胞体外穿过Matrigel胶的细胞数量明显增加(P<0.05,P<0.05)。荧光定量PCR结果显示,与对照组(0 ng/mL)相比,IL-6处理(25、50 ng/mL)组N-cadherin、Vimentin和Twist1 mRNA达增加(P<0.05,P<0.05),E-cadherin mRNA表达降低(P<0.05)。Western blot结果显示,与对照组(0 ng/mL)相比,IL-6各处理(25、50 ng/mL)组p-Stat3、N-cadherin、Vimentin和Twist1蛋白表达增加,E-cadherin蛋白表达降低,Stat3蛋白表达没有明显改变。结论 IL-6可提高食管癌Eca-109细胞体外增殖、侵袭、迁移能力,促进上皮间质转化过程,其机制可能通过活化Stat3蛋白,上调Twist1的表达,进一步调控EMT蛋白(E-cadherin、N-cadherin和Vimentin)的表达。

超顺磁性氧化铁纳米粒子的制备及性能检测

目的:制备超顺磁性磁共振对比剂四氧化三铁纳米颗粒,并检测其物理和磁学性质,以探讨作为反义基因载体的可能性。方法:共沉淀一步法制备葡聚糖包被的四氧化三铁纳米颗粒,采用X射线粉末衍射法分析其结构,用透射电镜及原子力显微镜测量其大小及分布,用振动样品磁强计检测磁化率等参数。结果:所得样品核心为四氧化三铁晶体,核心粒径为5nm左右,包被葡聚糖后整体颗粒直径为20～35nm,驰豫率为0.155×106(/mol.s),质量饱和磁场强度为69.42162emu/g Fe。结论:制备的样品具有粒径小,分散性好,超顺磁性等优点,符合作为磁共振对比剂的要求,可以作为磁共振成像反义基因载体。

EGF偶联牛血清白蛋白纳米载体的构建

目的:制备表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)偶联牛血清白蛋白纳米载体,作为多种高表达表皮生长因子受体(Epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)的肿瘤细胞主动靶向给药的新途径。方法:采用二次超声乳化和溶剂挥发技术制备白蛋白纳米载体,通过化学交联试剂将EGF与白蛋白纳米载体偶联,制得EGF偶联白蛋白纳米载体并进行核素标记,通过葡聚糖凝胶柱及聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)验证偶联效果和EGF偶联的程度。结果:成功制备得到平均粒径为34nm的牛血清白蛋白纳米载体,而且EGF与白蛋白纳米载体偶联率较高,所得的EGF-BSA纳米载体室温稳定性和血清稳定性均较好。结论:成功制备得到体积较小的牛血清白蛋白纳米载体和EGF偶联牛血清白蛋白纳米载体,为进一步探讨其体外肿瘤细胞靶向性及体内分布规律奠定了实验基础。

纳米级超顺磁性氧化铁的制备及其对小鼠急性毒性作用的观察

目的：自制纳米级超顺磁性氧化铁（superparamagnetic iron oxide,SPIO）,观察其对小鼠的急性毒性作用,为进一步研究其长期毒性及将其作为载体应用于磁共振（magnetic resonance,MR）基因成像奠定基础。方法：采用共沉淀法制备纳米级SPIO,应用透射电镜、原子力显微镜及1.5 T超导型MR仪等测定其相关理化指标。90只小鼠按纳米级SPIO给药方式和剂量随机分为口服灌胃、静脉注射、腹腔注射组（n=30）,分别按总剂量2 104.8 mg/kg、给药容积40 ml/kg口服灌胃;总剂量438.5 mg/kg、给药容积25 ml/kg静脉注射;以及总剂量1 578.6 mg/kg,给药容积30 ml/kg腹腔注射;各组另设10只小鼠按相应方式给予等量生理盐水作为对照（n=10）。给药后饲养14 d,观察饲养期间小鼠的一般情况,检测小鼠血清主要生化指标;观察主要脏器的病理学改变。结果：成功制备纳米级SPIO,其核心颗粒为Fe3O4晶体,颗粒大小20-35 nm,T2弛豫率0.155×10^6mol-1·s^-1,比饱和磁化强度68.395 68 emu/g,剩磁21.463 74 Gs。观察期间各组小鼠均未见死亡;各组小鼠血清生化指标无显著差异;H-E染色及Wright骨髓染色见各组小鼠肝、脾、肾、心、肺和骨髓细胞均无水肿、变性、坏死等改变;普鲁士蓝染色见给药组小鼠肝、脾内分布少许铁蓝色颗粒,而对照组未见。结论：自制的纳米级SPIO符合作为MR成像对比剂的要求,对小鼠无明显急性毒性,值得进一步研究以用于磁共振基因成像。

姜黄素对直肠癌CD133^+肿瘤干细胞样细胞群放疗敏感性的影响

目的探讨姜黄素对直肠癌CD133+肿瘤干细胞样细胞群放疗敏感性的影响。方法应用免疫磁珠分选器、阳性分离柱分选出直肠癌CD133+肿瘤干细胞,随机分成姜黄素组、姜黄素联合放疗组、放疗组,应用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法检测24、48、72 h各组细胞生长抑制情况;膜联蛋白V-异硫氨基荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)双染色检测细胞凋亡率。结果姜黄素组随着时间变化肿瘤细胞抑制率变化不大(P>0.05);放疗组和姜黄素联合放疗组24、48、72 h细胞生长抑制率逐渐升高(P<0.05);同期三组细胞生长抑制率均有统计学意义(P<0.05),两两比较24 h细胞生长抑制率,姜黄素组与姜黄素联合放疗组和放疗组之间差异有统计学意义(P<0.05),姜黄素联合放疗组与放疗组之间差异无统计学意义(P>0.05);48、72 h抑制率两两之间差异均有统计学意义(P<0.05);姜黄素组48 h与72 h之间细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05),姜黄素联合放疗组和放疗组48 h与72 h之间细胞凋亡率之间差异具有统计学意义(P<0.05)。同期内不同组细胞凋亡率之间的差异有统计学意义(P<0.05),两两比较细胞凋亡率之间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论姜黄素可以增加直肠癌CD133+肿瘤干细胞样细胞群放疗敏感性,抑制肿瘤细胞生长促进细胞凋亡。

分离、鉴定CD133^+人肝癌干细胞以及^(131)I-CD133mAb对其生物学效应的影响

目的分离、鉴定CD133+人肝癌干细胞以及131I-CD133mAb对其生物学效应的影响。方法为选择最适的细胞系,流式细胞仪检测Huh-7和HepG2细胞中CD133表达率;磁珠分选Huh-7细胞,流式细胞仪检测分选后CD133表达率;体外成球、克隆形成实验及体内成瘤实验验证干细胞特性;氯胺T法制备131I标记CD133单克隆抗体(131ICD133mAb)并鉴定;取分选后的CD133+-Huh-7细胞、Huh-7细胞和HepG2细胞进行实验,将每种细胞分成4组(131ICD133mAb组、131I组、CD133mAb组、131I+CD133mAb组);MTT法检测各组对CD133+-Huh-7细胞生长抑制的最适剂量和各组在最适剂量作用后24、48、72 h对3组细胞生长抑制率;流式细胞仪检测131I-CD133mAb作用3组细胞72 h时细胞凋亡和细胞周期的变化。结果 Huh-7和HepG2细胞系CD133表达率分别为18.8%和5.2%,故选用Huh-7细胞进行分选;磁珠分选后CD133+-Huh-7细胞CD133的表达率为99.28%,与分选前比较差异有统计学意义(P<0.01)。CD133+-Huh-7细胞相对于CD133--Huh-7细胞具有更强的体外成球能力、克隆形成能力和体内成瘤能力。131I-CD133mAb标记率为87.92%,放射化学纯度为97.54%,具有较好的稳定性和免疫活性。当131I 4.8 MBq/100μL、CD133mAb 4.8μg/100μL时对CD133+-Huh-7细胞抑制率最高(P<0.05),取此放射性浓度进行实验。24、48、72 h时各组对CD133+-Huh-7细胞的抑制作用明显高于Huh-7和HepG2细胞组,131I-CD133mAb组对3种细胞生长抑制率明显高于其余各组,抑制率随时间的增加而升高(P<0.01)。131I-CD133mAb作用CD133+-Huh-7细胞72 h后凋亡率为31.21%,明显高于其余2组(P<0.05)。细胞周期检测结果显示CD133+-Huh-7细胞G0/G1期减少54.77%,明显高于其余2组(P<0.05)。结论 CD133+细胞具有肿瘤干细胞特性,131I-CD133mAb能特异性结合CD133+-Huh-7细胞,调控细胞周期和诱导细胞凋亡。