消化道异物并穿孔的危险因素分析及治疗策略

目的探讨消化道异物的临床和内镜下特点,分析异物引起穿孔的相关危险因素,总结异物引起消化道穿孔的治疗策略。方法回顾性分析陆军军医大学第二附属医院2014年1月至2021年1月因消化道异物就诊患者的临床资料,总结其临床及内镜下特点。采用单因素和Logistic多因素分析引起异物穿孔的相关危险因素。结果共有422例患者纳入分析。异物常见嵌顿部位由高到低分别为食管(75.8%,320/422)、肠(9.0%,38/422)、胃(7.8%,33/422)、咽部(7.3%,31/422)。异物嵌顿时间<6 h、6~23 h、24~72 h和>72 h的患者分别占10.7%(45/422)、13.0%(55/422)、39.3%(166/422)和37.0%(156/422)。异物穿孔发生率为24.2%(102/422),以食管异物穿孔(22.9%,97/422)最为常见,咽部和胃各2例穿孔,肠异物穿孔1例。Logistic多因素分析结果显示,年龄≥60岁[P<0.001,OR(95%CI):2.840(1.531~5.423)]、异物嵌顿时间>72 h[P=0.001,OR(95%CI):81.288(10.194~648.189)]、异物边缘锐利[P<0.001,OR(95%CI):122.686(14.054~1071.015)]等因素与异物穿孔相关。穿孔患者在内镜下取出异物后,通过内科保守治疗97.06%(99/102)治愈出院,2例合并出血致死亡,1例穿孔严重,异物取出困难,转外科手术治疗。结论患者年龄≥60岁、异物形状尖锐、嵌顿时间>72 h及嵌顿部位为食管上段是消化道异物并穿孔的危险因素;异物引起的消化道穿孔在排除大血管损伤的前提下内科保守治疗效果好。

自组装多肽凝胶的构建及其在肝实质创伤性出血中的止血应用研究

目的制备FLIVIGSII多肽(FI肽),探究其物理化学性质及其体外凝血和体内止血效应。方法将FI肽与水混合,制备样品,直接观察FI肽水凝胶的状态,通过扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)、透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)观察其微观纤维结构,并通过动态光散射(dynamic light scattering,DLS)分析其纤维尺寸。将FI肽与3.8%柠檬酸钠抗凝处理后的健康人血液混合,直接观察FI肽的凝血效应,并通过SEM观察其血凝块的微观结构。溶血实验和CCK-8细胞毒性实验用于验证其生物相容性。最后,构建大鼠肝脏实质穿孔出血模型,将15只体质量为150 g的6~8周龄雌性SD大鼠按随机数字表法分为3组:对照组、FI肽组和纤维蛋白胶组,通过各组治疗后观察分析FI肽对肝脏实质创伤性出血的止血效应及其预后,并探讨其止血机理。结果成功制备FI肽。FI肽与血液接触后快速成胶,使血液凝固形成血凝块。SEM结果显示FI肽与水混合后自组装形成纤维网状水凝胶。TEM结果验证FI肽在水中成胶后形成直径为(13.70±2.31)nm的纳米纤维,DLS结果验证其在水中形成多分散多尺寸(148.2~208.0 nm或575.0~807.0 nm)的纳米纤维。FI肽与血液混合后形成的纤维网状水凝胶包裹住红细胞,从而形成物理性止血屏障以在数秒内实现凝血。同时,FI肽水凝胶对正常肝细胞(L-O2)无细胞毒性,且不会造成红细胞溶血。在SD大鼠体内肝脏止血实验中,FI肽与血液接触时,迅速形成纳米纤维水凝胶,从而形成物理性止血屏障以在数秒内实现体内止血(止血时间<5 s)。结论FI肽具有快速、高效的止血效应,在肝脏实质创伤性出血的止血治疗中具有较好的临床应用前景。

维得利珠单抗与英夫利昔单抗在中重度溃疡性结肠炎患者中的真实世界研究

目的通过多中心回顾性队列研究比较维得利珠(vedolizumab,VDZ)和英夫利昔单抗(infliximab,IFX)在中重度溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者中的疗效和安全性。方法收集2021年1月至2023年1月于西南地区三家医院就诊的中重度UC患者,所有患者均为生物制剂初始治疗且接受IFX或VDZ治疗至少14周。比较两组患者的14周及52周无激素缓解率、临床缓解率、内镜缓解率,并记录治疗期间的不良事件。分别以治疗14周和52周能否达到黏膜愈合为因变量,首先通过单因素分析探索影响14周和52周黏膜愈合的危险因素,再进行多因素logistic回归分析进一步明确影响14周和52周实现黏膜愈合的危险因素。结果共纳入151例中重度UC患者,在进行1∶1倾向性评分匹配(propensity score matching,PSM)后,每组各纳入57例患者进行分析比较。两组患者在14周及52周无激素缓解率、临床缓解率无明显差异(P>0.05);14周内镜缓解率,VDZ组40.4%(23/57)明显高于IFX组22.8%(13/57)(P=0.044),而52周内镜缓解率则无明显差异[64.5%(20/31)vs 59.5%(22/37),P=0.669]。多因素Logistic回归分析结果显示,病变范围为左半结肠炎(E2)[vs全结肠炎(E3)](OR:0.46,95%CI:0.21~0.98,P=0.045)是影响14周实现黏膜愈合的独立危险因素;病程≥36个月(OR:0.25,95%CI:0.09~0.66,P=0.005)是影响52周实现黏膜愈合的独立危险因素。两组不良事件发生率无统计学差异(1.8%vs 7.0%,P=0.360)。结论VDZ和IFX具有相似的疗效和安全性,均可作为中重度UC患者的一线选择。

两种不同时间口服聚乙二醇对小肠胶囊内镜肠道准备效果影响的多中心随机对照研究

目的比较小肠胶囊内镜(small bowel capsule endoscopy,SBCE)检查前4 h和6 h开始口服2 L聚乙二醇溶液(polyethylene glycol,PEG)的肠道准备效果,探索SBCE肠道准备的合理时间。方法基于3家医院开展多中心随机对照试验,通过计算机随机数字表法按1∶1比例进行中心内随机分组(4 h组、6 h组),按纳入及排除标准,从2016年1月至2018年6月共纳入160例患者,4 h组、6 h组分别于SBCE检查前4、6 h开始口服2 L PEG清肠。主要评价指标为小肠图像质量优秀率,次要指标包括小肠病变诊断率、全小肠完成率、胃通过时间、小肠通过时间。结果 4 h组的小肠图像质量优秀率高于6 h组[(65. 8±17. 4)%vs (59. 3±17. 3)%,P=0. 034]; 4 h组的小肠通过时间短于6 h组[(269. 1±115. 3) vs (313. 9±104. 7) min,P=0. 019]; 4 h组小肠病变诊断率、全小肠完成率、胃通过时间分别为70. 1%(54/77)、86. 7%(66/77)、38. 0(19. 0,89. 5) min,6 h组分别为68. 4%(54/79)、89. 9%(71/79)、28. 5(11. 7,50. 5) min,组间差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论两种肠道准备时间方案对诊断率、全小肠完成率、胃通过时间无明显影响,但4 h方案具有更佳的小肠图像质量。

胆汁淤积性肝病患者肠道菌群特征及其临床相关性研究

目的分析胆汁淤积性肝病的肠道菌群多样性和结构组成及其与临床参数间的相关性。方法收集胆汁淤积性肝病患者(n=16)和健康人群对照者(n=19)的新鲜粪便,采用16S rRNA分析受试者肠道菌群的多样性和结构特征,运用Pearson法分析差异菌属与临床参数间的相关性。结果基线资料显示研究对象的性别、年龄、BMI无统计学差异(P>0.05),血清学指标有统计学差异(P<0.01)。α多样性表明,胆汁淤积性肝病组的Chao1和Shannon指数明显减少,但无统计学差异,β多样性有统计学差异(P<0.01);菌群结构分析发现Bacteroides(拟杆菌属)、Lachnoclostridium、Veillonella(韦荣氏球菌属)、Roseburia(罗斯氏菌属)、Escherichia_shigella(大肠埃希菌-志贺氏菌属)在胆汁淤积性肝病组中明显富集(P<0.05),而Blautia(布劳特氏菌属)明显减少(P<0.05)。Pearson法分析表明,Lachnoclostridium与ALP(P<0.01)、GGT(P<0.05)强相关,Veillonella(韦荣氏菌属)与GGT强相关(P<0.05)。结论胆汁淤积性肝病患者与健康人群对照者相比,肠道菌群存在特征性改变,Veillonella(韦荣氏球菌属)相对高丰度表达与胆汁淤积性肝病强相关。

蛋白精氨酸N-甲基转移酶4上调八聚体结合转录因子4表达促进胃癌细胞的干性

目的探讨蛋白精氨酸N-甲基转移酶(protein arginine N-methyltransferase,PRMTs)调控八聚体结合转录因子4(octamer-binding transcription factor4,Oct4)的表达及其对胃癌细胞"干性"的影响。方法以pc DNA3.1载体构建PRMT4过表达质粒,转染至人胃腺癌MKN45细胞;倒置相差显微镜下观察肿瘤细胞成球能力的变化;qRT-PCR和Western blot检测胃癌干细胞标志物CD44、Lgr5及"干性"维持分子Nanog、Oct4的改变;继而构建含Oct4基因启动子荧光素酶报告载体,分析PRMT4对Oct4启动子活性的影响;最后采用染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation,Ch IP)实验证实PRMT4与Oct4基因启动子结合情况。结果 MKN45细胞转染蛋白精氨酸N-甲基转移酶-4基因过表达载体后,形成肿瘤干细胞球的能力显著增强;随后qRT-PCR及Western blot检测结果显示胃癌干细胞标志物CD44、Lgr5的mRNA及蛋白水平上调;此外,过表达PRMT4可明显增加"干性"维持分子Oct4的mRNA及蛋白水平,而对Nanog则无明显影响;双荧光素酶实验结果显示,与对照组相比,PRMT4过表达组Oct4的启动子活性明显增强(P<0.05);染色质免疫共沉淀实验结果证实,PRMT4可与Oct4启动子结合。结论 PRMT4可结合至Oct4基因启动子上,通过增加启动子活性,从而促进Oct4转录及表达,进而增强胃癌细胞的干性。

通过下调FOXM1的新型小分子抑制剂1-3-51抗胃癌细胞的作用

目的研究新型小分子抑制剂1-3-51在胃癌中调控FOXM1(Forkhead box protein M1)表达及其抗癌的作用。方法CCK-8实验检测1-3-51处理后的BGC823和MKN45细胞IC_(50);Western blot检测胃癌细胞FOXM1表达;qRT-PCR检测胃癌细胞FOXM1及其下游分子Cyclin D1和MMP9 mRNA表达;流式细胞术测定细胞周期情况;Transwell实验检测胃癌细胞迁移和侵袭能力;裸鼠皮下移植瘤模型检测1-3-51抗胃癌增殖效果;在胃癌细胞BGC823中转染FOXM1过表达质粒及其空载质粒,CCK-8实验、Transwell实验分别检测1-3-51对胃癌细胞活性、迁移及侵袭等的影响。结果新型小分子抑制剂1-3-51在BGC823和MKN45细胞作用48 h后的IC_(50)分别为(5.429±0.225)μmol/L、(5.169±0.239)μmol/L,并可以显著抑制FOXM1的表达及其下游分子Cyclin D1和MMP9 mRNA表达。1-3-51显著抑制胃癌细胞的增殖、侵袭及迁移。过表达FOXM1后,可部分逆转其抑制细胞增殖、侵袭及迁移能力。结论小分子抑制剂1-3-51在胃癌细胞中可通过抑制FOXM1及其下游分子Cyclin D1和MMP9等的表达,进而降低胃癌细胞增殖、迁移、侵袭能力。

巨噬细胞钙敏感受体通过TRPC6/Ca^(2+)信号促进炎症反应

目的观察钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)对RAW264.7细胞炎症反应的影响,并探讨其分子机制。方法采用Fura-2荧光探针对RAW264.7细胞质中Ca^(2+)进行荧光染色,使用单细胞荧光钙离子检测仪检测CaSR对巨噬细胞内Ca^(2+)信号的影响;采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导细胞炎症模型;采用q-PCR检测IL-1β和IL-18 mRNA表达;ELISA检测IL-1β蛋白含量。结果CaSR激动剂CaCl_(2)显著增加RAW264.7胞内钙荧光强度,而CaSR拮抗剂Calhex231可抑制此作用。CaCl_(2)及cinacalcet(CaSR特异性激动剂)都能引起胞内Ca^(2+)信号增加,此作用可被Calhex231及瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(transient receptor potential cation channel 6,TRPC6)抑制剂SAR7334所抑制(P<0.05)。q-PCR检测结果显示:LPS组IL-1β和IL-18 mRNA表达显著高于对照组,cinacalcet进一步增加其表达,而Calhex231及SAR7334可显著抑制此作用(P<0.05)。ELISA结果显示:与LPS比较,cinacalcet增加IL-1β蛋白分泌(P<0.05),而此作用可被Calhex231及SAR7334抑制(P<0.05)。结论在巨噬细胞中,激活CaSR通过TRPC6引起胞内Ca^(2+)浓度增加,进而促进IL-1β及IL-18的分泌,最终促进了可能的炎症反应。

胶囊内镜临床综合应用评价指标体系的构建及对比分析

目的构建胶囊内镜临床综合应用评价指标体系及确定各指标权重,并对国产与进口胶囊内镜进行评价,为胶囊内镜在临床综合应用包括技术、临床及市场性能的评价研究中提供科学依据。方法通过文献分析法及专家咨询法初步拟定评价指标体系框架,应用德尔菲(Delphi)法及层次分析法(analytic hierarchy process,AHP)确定胶囊内镜评价的一、二、三级指标及权重。采用因素分析法对国产与进口胶囊内镜进行评价指标的实证应用对比分析。结果两轮问卷的回收率分别为93.3%(28/30)、96.4%(27/28),专家平均权威系数分别为0.867、0.858,两轮咨询的一、二、三级指标肯德尔(Kendall)协调系数分别为0.324、0.189、0.140及0.280、0.192、0.124,经卡方检验均具有统计学意义(P<0.01),协调性一致。最终确定了胶囊内镜评价的一级指标3项、二级指标10项、三级指标41项以及各指标的权重,其中一级指标技术、临床及市场性能的权重分别为0.3490、0.4374、0.2136。实证对比分析,技术性能指标国产胶囊内镜的尺寸显著小于进口胶囊内镜(P<0.01),胶囊质量显著大于进口胶囊内镜(P<0.01),分辨率显著低于进口胶囊内镜(P<0.05);临床性能指标国产胶囊内镜的图片处理时间显著长于进口胶囊内镜(P<0.01),图片清晰度显著低于进口胶囊内镜(P<0.01),记录仪携带的便携性及穿戴的舒适性显著优于进口胶囊内镜(P<0.01);市场性能指标国产胶囊内镜的价格显著低于进口胶囊内镜(P<0.01)。结论各级指标专家意见集中,协调程度好,结果可信度高,构建的胶囊内镜评价指标体系科学、合理、实用,为胶囊内镜的临床综合应用评价提供了客观、可量化的依据。

知觉压力对重症监护室护士焦虑、抑郁情绪的影响:正念和心理弹性的链式中介作用

目的研究正念和心理弹性在重症监护室(intensive care unit,ICU)护士知觉压力与焦虑、抑郁情绪的中介作用。方法采用便利抽样法,使用一般资料调查表、知觉压力量表(Chinese Perceived Stress Scale,CPSS)、心理弹性量表(Connor-Davidson Resilience Scale,CD-RISC)、焦虑自评量表(Self-rating Anxiety Scale,SAS)、抑郁自评量表(Self-rating Depression Scale,SDS)、正念注意觉知量表(Mindful Attention Awareness Scale,MAAS)对2021年4-7月重庆市15所医院的563名ICU护士进行问卷调查。结果ICU护士焦虑自评量表得分(45.99±10.10)分,抑郁自评量表得分(48.62±11.41)分;单因素分析显示性别和收入是ICU护士焦虑情绪的影响因素(P<0.05),性别、职称、收入和现患疾病是ICU护士抑郁情绪的影响因素(P<0.05);Pearson相关性分析显示焦虑与知觉压力呈正相关(r=0.578,P<0.01),与心理弹性和正念呈负相关(r=-0.487、-0.525,P<0.01),抑郁与知觉压力呈正相关(r=0.591,P<0.01),与心理弹性和正念呈负相关(r=-0.569、-0.552,P<0.01);中介效应分析提示正念和心理弹性在ICU护士知觉压力与焦虑、抑郁情绪中起链式中介作用(P<0.01)。结论ICU护士存在较高的焦虑、抑郁情绪,正念和心理弹性在ICU护士知觉压力与焦虑、抑郁情绪中起链式中介作用。

内镜黏膜下剥离术治疗食管早癌及癌前病变384例临床分析

目的观察内镜黏膜下剥离术(endoscopic submucosal dissection,ESD)对食管早癌及癌前病变的临床疗效,探讨ESD在食管早癌及癌前病变治疗中的应用价值。方法以2011年8月至2016年12月在本院消化内镜中心接受ESD治疗的384例食管早癌及癌前病变患者为研究对象,回顾性综合评价其临床治疗效果。结果完成ESD治疗的食管早癌及癌前病变患者384例,中位随访时间26(6~68)个月,平均切除面积12.0(7.4~20.0)cm^2,平均手术时间40.0(30.0~63.8)min,整块切除率、完全切除率、治愈性切除率分别为:98.96%(380/384)、96.35%(370/384)、92.45%(355/384);出血、穿孔、狭窄发生率分别为1.56%(6/384)、0.26%(1/384)、13.80%(53/384);Logistic回归分析结果显示,病变环周比例≥2/3[OR=63.370(14.579~275.448),P<0.01]是食管狭窄发生的独立危险因素。3年整体生存率、肿瘤特异性生存率分别为96.30%、100%,病变复发率2.86%(11/384)。结论 ESD治疗食管早癌及癌前病变安全、有效。

经颈静脉肝内门体分流术对肝硬化合并严重门静脉血栓患者生存的影响

目的分析经颈静脉肝内门体分流术(transjugular intrahepatic portosystemic shunt,TIPS)用于治疗肝硬化合并严重门静脉血栓患者(portal vein thrombosis,PVT)的数据,了解其对生存的影响。方法回顾性分析2013年1月至2017年10月肝硬化合并门静脉系统严重非肿瘤性血栓行TIPS治疗的患者共44例,观察短期疗效(6个月)和长期疗效(1~3年),同时通过经验总结及统计学分析得出生存预测因子和生存影响结局。结果44例患者TIPS治疗成功37例,手术成功率84%,术中无严重并发症,44例患者随访时间长达36个月,中位随访时间24个月。TIPS治疗成功组,大部分PVT再通,支架功能障碍3例,短期内(6个月)肝功有好转,2例死于肝癌,2例死于肝功能衰竭。TIPS失败组7例,门静脉血栓均无明显缓解,4例复发出血,其中2例死亡。统计分析得出:血管再通是生存的唯一预测因子,同时TIPS成功组生存率较失败组高。结论TIPS用于肝硬化合并严重门静脉血栓患者,使血管再通后能显著提高其生存率。

随机对照研究分阶段口服低浓度复方聚乙二醇电解质溶液的结肠肠道准备效果

目的采用随机对照试验评价3 L低浓度分阶段口服复方聚乙二醇电解质溶液(polyethylene glycol electrolyte,PEG)在结肠镜检查前的肠道准备的效果和不良反应。方法以2017年2月1日至2017年5月31日在本院消化科拟行结肠镜检查的全部患者300例作为研究对象,采用计算机随机数字表将其分为A组(3 L低浓度分阶段组)和B组(2 L传统浓度组),结肠镜检查医师和护士盲法采用Boston肠道准备量表(boston bowel preparation scale,BBPS)进行评分和询问记录不良反应发生情况。结果两组患者的平均年龄、性别比例、身高、体质量和文化程度等一般特征差异无统计学意义(P>0.05)。A组肠道准备有效率(BBPS≥5分)和优良率(BBPS≥8分)分别为94.7%(142/150)、62.7%(94/150),均显著高于B组的79.3%(119/150)和38.0%(57/150)(P<0.01);A组总体不良反应发生发生率为14.0%(21/150)显著低于B组的32.0%(P<0.01)。结论 3 L低浓度PEG分阶段口服方案具有较好的肠道清洁效果且副作用发生率相对较低。

新冠肺炎患者肝肾功能损害的临床特征及其与重症及死亡的相关性分析

目的描述新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者肝肾功能损害的临床特征及其对重症化和病死率的影响。方法以2020年2月4日至2020年4月16日在火神山医院、金银潭医院、泰康同济医院确诊,且无肝肾基础疾病的3548例COVID-19患者为分析对象,通过病历提取患者一般资料、临床特征、实验室结果及死亡等信息,采用SPSS 23.0进行数据描述和分析。结果3548例COVID-19患者纳入研究,重症及以上病例875例(24.7%),死亡91例(2.6%);丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和肌酐(Cr)升高比例分别为14.6%(513/3548)、3.4%(119/3548)、2.8%(101/3548);与ALT、AST、Cr正常的COVID-19患者相比,ALT升高的患者发生重症化和死亡的风险均未显著增加,AST、Cr升高的患者发生重症和死亡的风险均显著升高(P<0.05);肝或肾功能损伤者和肝肾功能均损伤者发生重症的风险分别是肝肾功能正常者的2.32倍(95%CI:1.73-3.10)和11.40倍(95%CI:2.36-54.98),发生死亡的风险分别是肝肾功能正常者的5.21倍(95%CI:3.10-8.75)和13.53倍(95%CI:2.76-66.32);采用Logistic回归筛选出重症及死亡的独立相关因素作为校正因素后发现,肝或肾功能损伤的人群重症及死亡发生的风险分别是肝肾功能正常人群的1.612倍(95%CI:1.168-2.224)、2.907倍(95%CI:1.612-5.242)。结论COVID-19患者若出现肝功能损害和肾功能损害,其重症化倾向和死亡风险明显升高,应进行早期干预。

住院期间ICU重症急性胰腺炎患者家属迁移应激水平变化及相关因素研究

目的 了解住院期间加强护理病房(intensive car unit, ICU)重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis, SAP)患者家属迁移应激发生及其相关因素,为改善患者家属的迁移应激提供循证医学证据。方法 以2018年7月至2020年3月陆军军医大学第二附属医院消化内科ICU收治的SAP患者的主要陪伴家属110例作为前瞻性队列研究对象,由专业护理小组采用中文版ICU转出患者家属应激压力量表(Family Relocation Stress Scale, FRSS)分别在患者转入ICU前1天、转入后第1天、转入后第3天、ICU转出当天(接到转出通知当天)和出院前1天对患者家属进行迁移应激水平评估,同时收集患者及其家属相关情况。结果 110名SAP患者家属在患者住院期间的不同时间点的迁移应激水平存在明显波动(P<0.001)。患者转入后第1天家属迁移应激水平最高[得分为(51.27±7.98)],ICU转入后第3天降到较低水平[得分为(59.26±6.35)],但在ICU转出当天再次出现上升[得分为(55.32±8.31)],患者家属迁移应激水平在出院前1天降到住院期间的最低水平[得分为(63.32±6.05)]。而线性回归分析结果显示年龄、文化程度和家庭月收入是影响患者家属出院前1天迁移应激得分的相关因素(P<0.05)。结论 SAP患者家属在患者住院期间的迁移应激水平存在明显波动,年龄、文化程度和家庭月收入为出院前迁移应激水平得分的影响因素。有必要建立专科团队,在不同时间点开展综合性和个体化的医疗护理,包含心理辅导,以减少该类患者迁移应激的发生。

Kv1.1及Kv1.3通道亚型对小鼠肠系膜微细动脉的调节作用

目的研究Kv1.1及Kv1.3通道亚型对小鼠肠系膜微细血管的调节作用。方法以健康6~8周C57BL/6雄性小鼠肠系膜微细动脉作为研究对象,应用丹麦DMT520A离体微血管张力测定系统记录血管张力变化。应用广谱电压依赖性钾通道(Kv)阻断剂4-AP,Kv1.3通道选择性阻断剂PAP-1,Kv1.1通道选择性阻断剂TEA分别作用于静息状态,KCl及NE预收缩动脉,记录血管张力变化情况。应用Kv通道阻断剂4-AP,Kv1.3通道选择性阻断剂PAP-1作用于血管,观察Kv及Kv1.3通道在0 mmol/L Ca^(2+)及2 mmol/L Ca^(2+)K-H液中对NE收缩曲线的作用。结果 Kv通道阻断剂4-AP可引起静息状态的血管收缩,并进一步收缩KCl预收缩的血管,但浓度依赖性舒张NE预收缩的动脉,并且与对照组相比,4-AP能明显抑制NE在0 mmol/L Ca^(2+)液中所致的血管收缩[(3.45±0.24)m N vs(0.11±0.02)m N,P<0.01]。Kv1.3通道选择性阻断剂PAP-1未能收缩静息状态的血管,但可使KCl预收缩的血管发生轻微舒张反应,却明显舒张NE预收缩的动脉,而且PAP-1既可抑制NE在0 mmol/L Ca^(2+)K-H液中所致的血管收缩[对照组vs PAP-1组:(4.28±0.53)m N vs(2.75±0.49)m N,P<0.05],又可抑制在2 mmol/L Ca^(2+)液中的收缩张力[对照组vs PAP-1组:(7.08±0.58)m N vs(5.90±0.80)m N,P<0.05]。Kv1.1通道选择性阻断剂TEA可引起静息状态的血管收缩,但在0 mmol/L Ca^(2+)液中该作用消失,同时对KCl或NE预收缩的动脉均无明显作用。结论 Kv通道可调节小鼠肠系膜动脉的舒缩反应。其中Kv1.1通道主要发挥血管收缩调节作用,可能与促进血管平滑肌细胞外钙内流有关,而Kv1.3通道主要发挥血管舒张调节作用,可能同时抑制平滑肌细胞内钙释放和细胞外钙内流。

内镜下覆膜金属支架置入引流治疗胰腺坏死感染和假性囊肿13例及文献分析

目的探讨内镜下覆膜金属支架置入引流治疗胰腺坏死感染(infected pancreatic necrosis,IPN)和胰腺假性囊肿(pancreatic pseudocyst,PPC)的有效性、可行性和安全性。方法选取2012-2017年我科收治的IPN、PPC并进行覆膜金属支架置入引流治疗的13例患者。计算机检索同期中国知网、万方数据库、维普网、Cochrane Library、PubMed、Web of Science等数据库收录的公开发表的内镜下覆膜金属支架置入引流治疗IPN和PPC患者文献数据,最终选取12篇文献,纳入IPN 193例,PPC138例,对覆膜金属支架置入引流治疗IPN和PPC的疗效进行分析。结果我科13例患者(IPN 12例,PPC 1例)支架置入成功率100%(13/13),救治成功率92.3%(12/13),1例(7.7%)患者因感染严重及脓腔出血死亡;未发生支架移位、脓(囊)腔破裂穿孔、堵管,术后并发肺部感染者6例(46.2%),平均住院时间为44.8(9～153) d。12篇文献共纳入331例患者(193例IPN、138例PPC),救治成功率98.5%(326/331),死亡率1.5%(5/331)。本研究和文献报道共计344例(206例IPN,138例PPC)患者,手术成功率100%(344/344),救治成功率98.3%(338/344),死亡率1.7%(6/344);发生支架移位13例(3.8%),术后出血11例(3.2%),堵管3例(0.9%),穿孔1例(0.3%),伴肺部感染及泌尿系感染19例(5.5%)。结论内镜下覆膜金属支架置入引流治疗IPN和PPC手术成功率较高,临床疗效较好,并发症少,死亡率低。

O-6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶在顺铂激活的胃癌细胞自噬中的作用

目的探讨DNA修复酶O-6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O-6-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)在顺铂(cisplatin)激活的胃癌SGC-7901细胞自噬中的作用。方法 Western blot法检测自噬底物蛋白p62水平、自噬标志分子Ⅱ型和Ⅰ型微管相关蛋白轻链3(mircotuble-associated protein light chain 3,LC3)的比值变化、MGMT蛋白水平;GFP-LC3表达质粒转染胃癌SGC-7901细胞后用激光共聚焦显微镜观察顺铂对细胞自噬小体形成的影响。qRT-PCR法检测MGMT基因mRNA表达水平。结果顺铂剂量依赖性激活胃癌SGC-7901细胞自噬水平,显著增加SGC-7901细胞中自噬小体数量;MGMT mRNA及蛋白水平随顺铂浓度的增加而降低(P<0.05);过表达MGMT抑制胃癌SGC-7901细胞的基础自噬水平;过表达MGMT抑制顺铂激活的胃癌SGC-7901细胞自噬。结论 DNA修复酶O-6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶抑制顺铂激活的胃癌SGC-7901细胞自噬。

HPSE2在胃腺癌组织中的表达及对胃癌细胞侵袭迁移的影响

目的探讨HPSE2在胃癌组织中的表达及其对胃癌生存预后及胃癌细胞侵袭迁移的影响。方法将胃腺癌组织芯片进行HPSE2的免疫组化染色,检测其在癌及癌旁组织中的表达,分析其表达水平与胃癌临床特征、生存预后及预后影响因素的关系。构建HPSE2过表达载体,转染胃癌细胞建立HPSE2过表达细胞,Transwell实验检测HPSE2过表达对胃腺癌细胞迁移和侵袭的影响。结果HPSE2在胃腺癌组织的平均病理评分为4.56,癌旁组织为7.18,HPSE2在胃腺癌组织中的表达显著低于癌旁组织(P<0.05)。HPSE2的表达水平与肿瘤大小、淋巴结转移及临床分期相关,并且HPSE2蛋白高表达患者的中位生存时间和累积生存率均显著高于低表达患者(P<0.05)。Cox比例风险模型结果显示,临床分期、肿瘤大小和HPSE2蛋白表达是影响胃腺癌患者预后的风险因素(P<0.05)。胃癌细胞过表达HPSE2可明显抑制胃癌细胞的侵袭和迁移。结论HPSE2蛋白在胃腺癌组织低表达,与肿瘤大小、临床分期及患者的生存预后相关,HPSE2过表达可明显抑制胃癌细胞的侵袭迁移能力。

胆汁淤积性肝病患者肠道真菌多样性及构成改变

目的分析胆汁淤积性肝病患者和健康对照人群的肠道真菌菌群多样性及构成改变。方法收集胆汁淤积性肝病患者(n=20)和健康人群对照者(n=22)的新鲜粪便,采用ITS2 DNA测序测定肠道真菌,运用生物信息学方法分析两组间真菌菌群多样性、结构、功能特征之间的差异,以及肠道真菌与临床参数间的相关性。结果两组年龄、性别构成、吸烟等均无统计学差异(P>0.05)。胆汁淤积性肝病患者组与健康人群对照组相比血清学指标均显著升高(P<0.05);两组间肠道真菌Alpha多样性无显著差异(P>0.05);Beta多样性有显著差异(P<0.01);胆汁淤积性肝病患者组Myceliophthora相对丰度增加(P<0.01),Diutina相对丰度降低(P<0.01);LEfSe分析结果表明胆汁淤积性肝病患者组中Myceliophthora显著富集,且腐生-共生(Saprotroph-Symbiotroph)菌的丰度显著低于健康人群对照组(P<0.05);Spearman相关系数分析结果显示Myceliophthora与ALT(P<0.05)、AST、ALP、GGT、TBIL、DBIL(P<0.01)均呈正相关。结论胆汁淤积性肝病患者与健康人群相比肠道真菌菌群构成有特征性改变,Myceliophthora与胆汁淤积性肝病患者疾病严重程度密切相关。