METTL3介导的CCNE1 m^(6)A修饰调控乳腺癌细胞对哌柏西利敏感性的研究

目的:探讨RNA甲基转移酶METTL3介导的m^(6)A修饰对乳腺癌细胞哌柏西利敏感性的影响及作用机制。方法:将乳腺癌细胞MCF-7随机分为:si-NC组,si-METTL3组,si-CCNE1组,si-METTL3+OE-NC组和si-METTL3+OE-CCNE1组;qPCR和Western blot检测METTL3和CCNE1的mRNA和蛋白表达水平;CCK-8检测哌柏西利敏感性;RIP实验检测METTL3和CCNE1 mRNA的相互作用;MeRIP-qPCR检测CCNE1的m^(6)A修饰水平;加入放线菌素D检测CCNE1 mRNA稳定性。结果:在MCF-7细胞中,METTL3和CCNE1的mRNA水平显著升高(P<0.05);抑制METTL3或抑制CCNE1的表达显著提高MCF-7细胞对哌柏西利的敏感性(P<0.05),且抑制METTL3显著降低CCNE1的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05);RIP实验证实METTL3和CCNE1 mRNA具有相互作用,且CCNE1发生了m^(6)A修饰;与si-NC组相比,si-METTL3组中CCNE1的m^(6)A修饰水平显著减少,CCNE1 mRNA稳定性显著降低;进一步实验表明,与si-METTL3+OE-NC组相比,si-METTL3+OE-CCNE1组中哌柏西利敏感性显著降低(P<0.05)。结论:在MCF-7细胞中,METTL3和CCNE1表达均上调;抑制METTL3能够提高MCF-7细胞对哌柏西利的敏感性,这与METTL3介导的m^(6)A修饰调控CCNE1 mRNA稳定性有关。

彩色多普勒血流成像联合超声弹性成像在乳腺癌临床诊断、新辅助化疗疗效评估中的应用价值

目的探讨彩色多普勒血流成像(CDFI)联合超声弹性成像(UE)技术在乳腺癌临床诊断、新辅助化疗疗效评估中的应用价值。方法选取124例乳腺肿块患者,所有患者均接受CDFI、UE及病理检查,其中乳腺癌患者接受新辅助化疗。以病理检查结果为金标准,分析CDFI、UE对乳腺癌的诊断价值及对乳腺癌新辅助化疗疗效的评估价值。结果病理检查结果显示,124例患者中,乳腺癌患者66例(乳腺癌病灶76个),乳腺良性肿块患者58例(良性肿块60个)。CDFI检查结果显示,良性肿块78个,恶性肿块58个;UE检查结果显示,良性肿块68个,恶性肿块68个。CDFI、UE联合检查诊断乳腺癌的灵敏度、特异度、准确度分别为92.11%、93.33%、92.65%,均高于CDFI、UE单独检查,CDFI、UE单独及联合检查诊断乳腺癌与病理检查结果的Kappa值分别为0.43、0.56、0.92。66例乳腺癌患者新辅助化疗有效54例,无效12例。CDFI、UE联合检查评估乳腺癌新辅助化疗疗效的灵敏度、特异度、准确度分别为92.59%、91.67%、92.42%,均高于CDFI、UE单独检查,CDFI、UE单独及联合检查评估乳腺癌新辅助化疗疗效与病理检查结果的Kappa值分别为0.49、0.51、0.87。结论CDFI、UE联合检查对乳腺癌的诊断效能优于单一检查,两者联合评估乳腺癌新辅助化疗疗效具有一定的可行性,值得推广。

乳腺癌彩色多普勒血流成像与雌激素受体、人表皮生长因子受体2、p53和Ki-67的相关性分析

目的分析乳腺癌彩色多普勒血流成像(CDFI)特征与雌激素受体(ER)、人表皮生长因子受体2(HER2)、p53及Ki-67的相关性。方法分析76例乳腺癌患者的CDFI特征(肿瘤直径、边缘毛刺征、微钙化、血流分级、淋巴结转移、后方回声衰减),并采用Spearman法分析乳腺癌CDFI特征与ER、HER2、p53及Ki-67的相关性。结果乳腺癌患者乳腺癌组织中ER、HER2、p53及Ki-67阳性表达率分别为73.68%(56/76)、60.53%(46/76)、48.68%(37/76)、40.79%(31/76),其中ER阳性表达率最高,Ki-67阳性表达率最低。有边缘毛刺征、血流分级为0~1级、有淋巴结转移的乳腺癌患者乳腺癌组织中ER阳性表达率均高于无边缘毛刺征、血流分级为2~3级、无淋巴结转移者(P﹤0.05)。有微钙化、血流分级为2~3级、有淋巴结转移的乳腺癌患者乳腺癌组织中HER2阳性表达率均高于无微钙化、血流分级为0~1级、无淋巴结转移者(P﹤0.05)。血流分级为2~3级、有淋巴结转移的乳腺癌患者乳腺癌组织中p53及Ki-67阳性表达率均高于血流分级为0~1级、无淋巴结转移者(P﹤0.05)。乳腺癌患者乳腺癌组织中ER阳性表达率与肿瘤边缘毛刺征、淋巴结转移均呈正相关(P﹤0.05),与血流分级呈负相关(P﹤0.05),而与肿瘤直径、微钙化、后方回声衰减均无相关性(P﹥0.05)。乳腺癌患者乳腺癌组织中HER2阳性表达率与肿瘤微钙化、血流分级、淋巴结转移均呈正相关(P﹤0.05),而与肿瘤直径、边缘毛刺征、后方回声衰减均无相关性(P﹥0.05)。乳腺癌患者乳腺癌组织中p53、Ki-67阳性表达率与血流分级、淋巴结转移均呈正相关(P﹤0.05),而与肿瘤直径边缘毛刺征、微钙化、后方回声衰减均无相关性(P﹥0.05)。结论乳腺癌患者CDFI特征与ER、HER2、p53及Ki-67阳性表达存在一定的相关性,在预测乳腺癌生物学特性中具有一定的指导价值。

microRNA-93靶向作用WASF3对乳腺癌转移抑制的机制

目的:探讨微小RNA(miR-93)靶向作用WASF3对乳腺癌转移抑制作用及可能的作用机制。方法:培养SHZ-88乳腺癌细胞株,划痕愈合实验、Transwell小室检测miR-93对SHZ-88细胞转移、侵袭能力的影响;荧光报告基因实验及Western blot技术检测miR-93对WASF3表达的影响。结果:乳腺癌组织中miR-93的表达低于癌旁组织,WASF3的表达高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,miR-93上调组、WASF3下调组SHZ-88细胞穿过小室微孔膜的细胞数、细胞划痕间愈合距离均显著减小,miR-93下调组、WASF3上调组SHZ-88细胞穿过小室微孔膜的细胞数、细胞划痕间愈合距离均显著增大,差异均有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶活性测定结果显示,野生型组miR-93-3′-UTR的荧光活性低于阳性对照组(P<0.05)。与阳性对照组比较,模拟物组WASF3表达明显降低,抑制物组WASF3表达明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:上调miR-93可抑制SHZ-88细胞增殖、转移能力;该作用机制可能与直接靶向调节介导WASF3的表达有关。

人源性多肽、可溶性E-钙黏蛋白在乳腺癌中的表达及对患者预后的预测价值

目的探讨人源性多肽(DCD)、可溶性E-钙黏蛋白(sE-cadherin)在乳腺癌中的表达及对患者预后的预测价值。方法取298例乳腺癌患者的乳腺癌组织和相应癌旁组织,免疫组化法检测DCD、sE-cadherin的表达情况。随访半年,评估不同预后情况乳腺癌患者乳腺癌组织中DCD、sE-cadherin的表达情况,乳腺癌患者预后的影响因素采用多因素Logistic回归分析。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评估DCD、sE-cadherin单独及联合检测对乳腺癌患者预后的预测价值。结果乳腺癌组织中DCD的阳性表达率明显高于癌旁组织,sE-cadherin的阳性表达率明显低于癌旁组织(P﹤0.01)。随访半年,298例乳腺癌患者,预后良好209例,预后不良89例。预后不良乳腺癌患者乳腺癌组织中DCD的阳性表达率明显高于预后良好患者,sE-cadherin的阳性表达率明显低于预后良好患者(P﹤0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,淋巴结转移、肿瘤直径≥5 cm、TNM分期为Ⅱ~Ⅲ期、DCD阳性表达、sE-cadherin阴性表达均为乳腺癌患者预后不良的独立危险因素(P﹤0.05)。DCD、sE-cadherin、DCD+sE-cadherin预测乳腺癌患者预后的AUC分别为0.795、0.711、0.887,DCD+sE-cadherin联合预测的AUC最大,此时的灵敏度、特异度分别为0.576、0.619。结论乳腺癌组织中DCD的阳性表达率较高,sE-cadherin的阳性表达率较低,二者联合检测对乳腺癌患者预后的预测价值较高。

通乳散结汤联合芒硝外敷、梳乳通乳治疗急性乳腺炎的临床效果

目的探讨通乳散结汤联合芒硝外敷、梳乳通乳治疗急性乳腺炎的临床效果。方法选取120例急性乳腺炎患者,随机将其分成对照组和试验组,各60例。对照组单用抗生素治疗,试验组在应用抗生素治疗的同时给予中医口服通乳散结汤、芒硝外敷、梳乳通乳治疗措施。比较两组的治疗效果。结果试验组的治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。试验组的体温恢复正常时间、乳房红肿好转时间、乳房肿块消散时间、排乳恢复正常时间、住院时间均短于对照组(P<0.05)。试验组的疾病复发率及并发症总发生率低于对照组(P<0.05)。结论中西医结合治疗急性乳腺炎的临床效果显著,可缩短症状改善时间和住院时间,降低疾病复发率和并发症发生率。

乳管镜引导下手术切除治疗自发性溢液乳腺疾病效果分析

目的:评估乳管镜引导下手术切除治疗自发性溢液乳腺疾病(SND)的疗效。方法:SND患者223例,其中乳镜管引导下手术117例为实验组,常规治疗106例为对照组,比较两组疗效,分析临床诊断结果与病理特征的相关性。结果:实验组和对照组患者的年龄,溢液特征以及病灶区域不存在统计学差异,但两组患者手术时间(P=0.002),手术切除标本质量(P=0.028)以及出血量(P=0.035)存在统计学差异,临床诊断结果与病理特征分析相关性较高(P<0.001)。乳腺非增殖性病变为22例,乳头状瘤的发生率为59.1%(OR=21.4,95%CI=0.3~2.6,P=0.015)。乳腺增生患12例,乳头状瘤的发生率为83.3%(OR=6.8,95%CI=4.1~8.8,P=0.002)。乳腺癌患者为8例,乳头状瘤7例,发生率为87.5%(OR=7.4,95%CI=6.2~9.1,P=0.001)。住院时间实验组长于对照组(P<0.001)。对患者术后一年的满意度实验组高于对照组(P=0.001)。结论:乳管镜引导下手术治疗能够明确病灶部位,具有操作简单精确,使用方便,创伤小等优势,可应用于自发性溢液乳腺疾病的治疗。

甲状腺癌中央区淋巴结清扫术后并发乳糜漏临床诊治分析

目的:探讨甲状腺癌行中央区淋巴结清扫术后出现乳糜漏的原因、临床特点以及诊治方法。方法:回顾分析2015年8月至2019年8月西京医院甲乳血管外科行甲状腺癌中央区淋巴结清扫术后发生乳糜漏的9例患者的临床资料。结果:乳糜漏发生率为0.37%,出现在术后的第1~2天,中位时间1.2天;发生乳糜漏之前的引流量峰值为30~100 mL,中位数为85 mL;乳糜漏发生后,最大值为30~300 mL,中位数为75 mL。乳糜漏病人淋巴结清扫区域:左侧中央区清扫1例(11.1%);右侧中央区清扫2例(22.2%);双侧中央区清扫6例(66.7%)。淋巴结清扫数目8~27枚。发生乳糜漏后,6例经低脂或禁饮食、应用生长抑素或奥曲肽、持续低负压引流痊愈,3例经禁食、应用生长抑素、持续低负压引流效果不佳,经高负压引流、阶段退管等治疗后痊愈。乳糜漏基本治愈时间为3~15 d,中位时间5 d。结论:甲状腺癌中央区淋巴结清扫术后乳糜漏发生率较低,一般为轻中度,及时采取调整饮食或辅以持续低负压吸引可在短期内治愈,若低负压引流效果不佳,可采用高负压引流。

扶元复衡汤联合培美曲塞化学治疗晚期肺癌对患者体力状态、肿瘤标志物及无进展生存期的影响

目的:分析扶元复衡汤联合培美曲塞化学治疗晚期肺癌对患者体力状态、肿瘤标志物及无进展生存期(PFS)的影响。方法:本研究为回顾性随机对照研究,选取2021年1月至2023年12月陕西中医药大学第二附属医院肿瘤乳腺外科收治的100例晚期肺癌患者,男58例,女42例,年龄(59.61±7.08)岁,年龄范围为25~79岁。用随机数表法将患者随机分为培美曲塞组与扶元复衡汤组,每组50例。比较两组患者的治疗效果、体力情况[卡诺夫斯凯计分(KPS)],肿瘤标志物[糖类抗原125(CA125)、癌胚抗原]及不良反应发生情况;对患者进行为期1年的随访,比较两组患者PFS。结果:扶元复衡汤组疾病控制率[94.0%(47/50)]高于培美曲塞组[78.0%(39/50)],差异有统计学意义( P<0.05)。治疗后,扶元复衡汤组KPS[(71.38±4.12)分]高于培美曲塞组[(67.35±4.38)分],CA125[(42.17±4.59)U/ml]、癌胚抗原[(20.53±2.14)U/ml]低于培美曲塞组[(50.66±5.02)U/ml、(29.30±3.04)U/ml],差异有统计学意义( P<0.05)。扶元复衡汤组患者不良反应发生率[10.0%(5/50)]低于培美曲塞组[26.0%(13/50)],PFS[(7.85±1.23)个月]优于培美曲塞组[(6.07±0.95)个月],差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:在晚期肺癌培美曲塞化学治疗中增加扶元复衡汤治疗,对患者症状、体力状态、肿瘤标志物水平均有改善,同时可减少不良反应并延长患者PFS。

四氧化三铁–阿霉素纳米复合物对小鼠乳腺癌的靶向治疗效果

该文探究了四氧化三铁搭载的阿霉素纳米复合物对小鼠乳腺癌的靶向性和治疗效果。采用共沉淀法制备羧甲基壳聚糖修饰的纳米四氧化三铁,通过羧甲基壳聚糖的羧基和阿霉素的氨基的静电作用,组成纳米复合物。利用透射电镜、傅里叶红外光谱、超导量子干涉磁强计等对制备的纳米四氧化三铁和羧甲基壳聚糖修饰的四氧化三铁进行表征,观察其形貌特征。小鼠活体成像观察所制备的纳米复合物对荷瘤小鼠的靶向作用。荷瘤小鼠肿瘤生长抑制实验考察纳米复合物对肿瘤的治疗作用。结果显示,制备的羧甲基壳聚糖修饰的四氧化三铁粒径约为10 nm,搭载阿霉素后仍保留纳米四氧化三铁的超顺磁性。小鼠活体成像显示,纳米复合物能在肿瘤区域富集。小鼠肿瘤生长抑制实验显示,具有较单独使用阿霉素更好的抑癌效果。结果表明,所制备的四氧化三铁–阿霉素纳米复合物对肿瘤组织具有靶向性和更好的抑癌效果。

乳腺癌改良根治术后胸前和腋下置管时间危险因素研究

目的探讨乳腺癌改良根治术后胸前和腋下置管时间的影响因素。方法选取2018年9月至2019年12月间陕西中医药大学第二附属医院收治的136例行乳腺癌改良根治术的患者,采用单因素和多因素分析临床病理资料对患者术后胸前和腋下置管时间的影响。结果术后,患者胸前置管时间为2~19(7.5±2.9)天,中位7天;腋下置管时间为4~22(10.4±3.3)天,中位10天。术后并发症发生情况:皮下积液18例,皮瓣坏死1例,出血1例,伤口感染4例。单因素分析结果显示,患者年龄、体质量指数(BMI)、高血压、冠心病、糖尿病、TNM分期、腋窝淋巴结手术、淋巴结清扫数目、术后并发症和负压引流方式均会影术后胸前置管时间,差异均有统计学意义(均P<0.05);BMI、高血压、冠心病、糖尿病、TNM分期、腋窝淋巴结手术、淋巴结清扫数目、术后并发症和负压引流方式均会影响患者术后腋下置管时间,差异均有统计学意义(均P<0.05)。患者高血压、糖尿病、术后并发症和负压引流方式是患者术后胸前置管时间的独立影响因素,差异均有统计学意义(均P<0.05)。患者BMI、高血压、术后并发症和负压引流方式是患者术后腋下置管时间的独立影响因素,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论高血压、术后并发症及负压引流方式是乳腺癌改良根治术患者术后胸前和腋下置管时间的影响因素,临床应对高血压和术后发生并发症的患者加强围术期管理,选择合适的负压引流方式。

婆罗双树样基因4对乳腺癌细胞阿霉素耐药的影响及其机制探究

目的探讨婆罗双树样基因4(Spalt-like transcription factor 4,SALL4)对乳腺癌细胞阿霉素(adriamycin,ADR)耐药的影响及其调控机制。方法采用定量反转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcriptase-mediated polymerase chain reaction,qRT-PCR)法及免疫印迹法(western blot,WB)分别检测乳腺癌细胞系中SALL4表达;构建沉默SALL4的乳腺癌耐药细胞系短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)-SALL4巨噬细胞趋化因子(macrophage chemotactic factor,MCF)-7/ADR,采用细胞增殖实验及流式细胞仪检测SALL4对细胞增殖活性、半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC_(50))及细胞凋亡率的影响;分别检测SALL4对人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphate and tension homology deleted on chromsome ten,PTEN)表达,PTEN/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)通路关键基因及细胞耐药基因表达的影响。结果乳腺癌细胞系中SALL4信使RNA(messenger RNA,mRNA)和蛋白水平较正常乳腺细胞系明显升高(P<0.05)。shRNA-SALL4 MCF-7/ADR组细胞IC_(50)值显著降低,细胞增殖活性下降,细胞凋亡率显著升高;细胞耐药基因ABCB1、C-myc和ABCG2表达显著降低(P<0.05)。shRNA-SALL4 MCF-7/ADR组细胞PTEN表达量显著上升磷酸化PKB(phosphorylated PKB,p-PKB)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mTOR,p-mTOR)表达量显著下降(P<0.05)。在阿霉素处理细胞后加入PTEN抑制剂,shRNA-SALL4 MCF-7/ADR组细胞凋亡率及细胞耐药基因表达量无显著变化。结论SALL4可能通过PTEN/PKB/mTOR通路增强乳腺癌细胞增殖,抑制细胞死亡,一定程度上逆转了阿霉素耐药进程。

HER-2阳性乳腺癌新辅助治疗的热点问题与研究进展

目前,人表皮生长因子2(HER-2)阳性乳腺癌因其独特的靶点以及其治疗药物已经成为研究乳腺癌治疗的重点和热点。针对已经发病的乳腺癌,早期治疗方面显得尤为重要,乳腺癌的治疗主要分为两大类:一类是局部治疗,包括早期的保乳手术、前哨淋巴结、区域淋巴结的放疗,第二类则为全身治疗,包括新辅助治疗和辅助治疗在内,虽然目前乳腺癌的主要治疗是手术治疗,但是有些患者在手术治疗前需要进行新辅助治疗,新辅助治疗的人群大都是乳腺癌Ⅲ期或者部分ⅡA、ⅡB期患者,这就突出了新辅助治疗的重要性,针对上述两点,HER-2阳性乳腺癌的新辅助治疗需要重点关注,现如今其中的4个热点问题仍需进一步探索:⑴乳腺癌在蒽环类药物的治疗,因其在乳腺癌新辅助治疗的基石地位和其对患者心脏毒性的副作用,不免使得研究者们引起争议,对于有基础疾病,尤其是心脏方面的患者,是否会加重病情,影响手术标准;⑵新辅助靶向治疗周期的选择,治疗周期的选择也同样重要,治疗时间短达不到患者手术的标准,但是治疗时间长容易使患者错过最佳手术时机,耽误患者病情,并且治疗时间延长,患者是否可以耐受,以及患者的心态问题,都影响手术的成功;⑶以曲妥珠单抗为基础的最佳配偶靶向药物的选择,单靶治疗在HER-2阳性乳腺癌研究的初期被专家们极力推荐,但随着更多药物在中国获批,双靶药物治疗HER-2阳性乳腺癌成为热点中的热点;⑷HER-2阳性乳腺癌新辅助治疗后双靶治疗的选择,新辅助治疗后如何选择双靶治疗,需要根据新辅助治疗时患者对于药物的敏感性以及是否达到患者所需要的病理学完全缓解(pCR)率,下面就这4个热点问题分别进行展开讨论,以为临床工作提供新的思路。

血清外泌体circ PVT1与circ 0014606在三阴性乳腺癌中的表达及临床意义

目的检测乳腺癌患者血清外泌体circ PVT1与circ 0014606的表达水平,分析两者表达水平与三阴性乳腺癌(TNBC)患者临床病理及预后的关系。方法回顾性分析2018年1月至2018年12月行手术治疗的84例乳腺癌患者资料,其中TNBC 46例,非三阴性乳腺癌(NTNBC)38例。另选同时期于我院进行健康体检的80例健康人群作为对照组。提取所有患者的血清外泌体,采用透射电镜和免疫印迹实验(Western blot)进行鉴定;采用qRT-PCR法分别检测TNBC、NTNBC及对照组患者外泌体中circ PVT1和circ 0014606表达水平。应用SPSS22.0分析数据,circ PVT1和circ 0014606表达水平与TNBC患者临床病理参数的关系,采用χ^(2)或Fisher精确检验;绘制Kaplan-Meier生存曲线分析circ PVT1和circ 0014606表达与患者预后的关系。以P<0.05为差异有统计学意义。结果透射电镜观察到,血清外泌体呈椭圆形双层膜囊泡结构;Western blot结果显示,外泌体特征蛋白CD9,CD63和CD81蛋白在外泌体中表达较上清液中明显升高。qRT-PCR结果显示,与对照组相比,TNBC组和NTNBC组患者血清外泌体circ PVT1和circ 0014606表达均显著上升,且TNBC患者的表达更为显著(P<0.05)。circ PVT1表达水平与TNBC患者肿瘤大小、组织学分级、TNM分期、病理类型及淋巴结转移有关(P<0.05);circ 0014606表达水平与TNBC患者组织学分级、TNM分期、病理类型及淋巴结转移有关(P<0.05)。Kaplan-Meier分析显示,circ PVT1高表达TNBC患者3年无病生存率为46.3%,显著低于circ PVT1低表达组的71.2%(P<0.05);circ 0014606高表达组TNBC患者3年无病生存率为40.8%,显著低于circ 0014606低表达组的68.0%(P<0.05)。结论血清外泌体circ PVT1与circ 0014606在乳腺癌中高表达,TNBC中表达更为显著,且与TNBC患者临床病理及预后关系密切,有望成为判断TNBC恶性程度及预后不良的特异性指标。

下调锌指棕榈酰基转移酶9表达抑制乳腺癌进展

目的探讨锌指棕榈酰基转移酶9(ZDHHC9)的表达对乳腺癌增殖、迁移侵袭和凋亡的影响以及其作用机制。方法利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析乳腺癌中ZDHHC9的表达情况及与预后的关系。用慢病毒感染方式在HCC1937细胞、MCF7细胞、SKBR3细胞中敲低ZDHHC9,每种细胞分别设置一个对照组(shNC)和两个敲低实验组(sh1、sh2),通过细胞计数试剂盒(CCK-8)检测、细胞增殖检测(EdU)、平板克隆形成实验检测ZDHHC9对乳腺癌细胞增殖影响,通过划痕实验和小室细胞侵袭实验(Transwell)验证ZDHHC9对迁移和侵袭能力的影响,细胞流式分析检测ZDHHC9对细胞凋亡的影响。蛋白质免疫印迹法(Western blot)实验观察下调ZDHHC9对磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B通路(PI3K/Akt)和细胞外调节蛋白激酶信号通路(ras/raf/MEK/Erk)的影响。采用t检验方法进行组间比较。结果TCGA数据库数据分析ZDHHC9在乳腺癌中高表达,且与不良预后相关。CCK-8实验表明下调ZDHHC9后乳腺癌细胞增殖被抑制(HCC1937-shNC比HCC1937-sh1:2.577±0.012比1.887±0.077,t=15.319,P<0.01;MCF7-shNC比MCF7-sh1:0.905±0.016比0.398±0.053,t=16.034,P<0.01;SKBR3-shNC比SKBR3-sh1:2.322±0.090比1.786±0.022,t=10.067,P<0.01);平板克隆形成实验提示敲低ZDHHC9后集落形成数量减少[HCC1937-shNC比HCC1937-sh1:(472.333±48.211)个比(362.667±43.108)个,t=7.637,P<0.01;MCF7-shNC比MCF7-sh1:(176.667±37.448)个比(79.667±27.227)个,t=3.639,P<0.01;SKBR3-shNC比SKBR3-sh1:(296.333±19.553)个比(210.667±11.676)个,t=6.515,P<0.01];划痕实验提示敲低ZDHHC9抑制乳腺癌细胞的迁移(HCC1937-shNC比HCC1937-sh1:0.536±0.046比0.235±0.010,t=10.969,P<0.01;SKBR3-shNC比SKBR3-sh1:0.429±0.021比0.231±0.060,t=5.381,P<0.01);Transwell侵袭实验表明下调ZDHHC9后乳腺癌细胞侵袭能力下降[HCC1937-shNC比HCC1937-sh1:(211.333±11.930)个比(73.667±5.508)个,t=18.146,P<0.01;SKBR3-shNC比SKBR3-sh1:(159.333±11.590)个比(45.333±7.024)个,t=14.570,P<0.01];流式细胞分析提示下调ZDHHC9导致细胞凋亡增加(HCC1937-shNC比HCC1937-sh1:0.121±0.007比0.157±0.004,t=6.634,P<0.01;SKBR3-shNC比SKBR3-sh1:0.124±0.0050.142±0.005,t=6.218,P<0.01);免疫印迹实验结果显示,敲低ZDHHC9抑制PI3K/Akt通路和ras/raf/MEK/Erk通路的激活被抑制[磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)相对表达量:MCF7-shNC比MCF7-sh1:0.931±0.005比0.707±0.002,t=24.193,P<0.01;磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)相对表达量:MCF7-shNC比MCF7-sh1:1.418±0.010比1.206±0.053,t=6.748,P<0.01]。结论敲低ZDHHC9抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,促进细胞凋亡。

改良Miccoli术式与完全腔镜术式治疗甲状腺微小乳头状癌的临床效果对比研究

目的比较改良Miccoli术式与完全腔镜术式治疗甲状腺微小乳头状癌(PTMC)的临床效果。方法选择2016年7月至2019年8月140例PTMC手术治疗患者,经伦理委员会批准通过,按照患者意愿分为改良组(n=70)和腔镜组(n=70)。腔镜组患者给与完全腔镜术治疗方案,改良组患者给与改良Miccoli术治疗方案。数据采用SPSS23.0进行统计分析,术前和术后血钙、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)和甲状旁腺素(PTH)水平用(x±s)表示,独立t检验;术后并发症采用χ^(2)检验,P<0.05表示差异有统计学意义。结果改良组住院时间、手术时间、术中出血量以及术后引流量均明显低于腔镜组,差异有统计学意义(P<0.05);两组术后清扫淋巴结数和转移淋巴结数差异无统计学意义(P>0.05)。术后3 d,改良组血钙、PTH水平显著高于腔镜组(P<0.05),TgAb水平两组差异无统计学意义(P>0.05)。改良组术后并发症发生率(5.7%)显著低于腔镜组(24.3%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论改良Miccoli术治疗PTMC患者效果优于完全腔镜术,可明显改善患者PTH水平,降低并发症的发生。

生物信息学分析前折叠蛋白家族在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的采用生物信息学方法分析前折叠蛋白(PFDs)家族在肝细胞癌(肝癌)中的表达及预后价值。方法利用GEPIA2数据库获取PFDs家族成员的mRNA在肝癌中的表达数据及其与临床分期的相关性数据。通过UALCAN数据库分析PFDs家族成员的表达与肿瘤分级之间的相关性。利用HPA数据库获取PFDs家族成员在肝癌组织和正常肝组织的免疫组化图像并进行对比分析。利用Kaplan-Meier plotter数据库分析PFDs家族成员表达对肝癌患者生存的影响,同时从TCGA下载肝癌患者相关临床数据,对PFDs家族成员和其他相关病理参数进行多因素Cox回归分析。利用DAVID 6.8生物信息学工具对PFDs家族蛋白进行富集分析。通过TIMER 2.0数据库分析PFDs家族成员的表达与肝癌免疫浸润的关系。结果PFDN1、PFDN2、PFDN3、PFDN4的mRNA和蛋白在肝癌组织中表达水平明显高于正常肝组织(P<0.05),并与肝癌患者肿瘤分级和临床分期成正相关(P<0.05)。PFDN1、PFDN2、PFDN3、PFDN4基因过表达肝癌患者的生存时间更短(HR=1.47,1.45,1.61,1.66;P<0.05)。PFDN1、PFDN2、PFDN4为肝癌患者预后的独立影响因素(HR=1.58,1.64,2.04;P<0.05)。基因本体(GO)和KEGG通路分析表明,PFDs家族分子主要发挥着RNA和mRNA的剪切和分解功能,并参与RNA运输、mRNA监控途径和真核生物的核糖体合成等相关信号通路。PFDs家族成员的表达还与肝癌中辅助T细胞(Th)2、CD56+NK细胞和浆细胞样树突状细胞的表达成正相关,而与Th17、中性粒细胞和中央记忆T细胞的表达成负相关。结论PFDs家族在肝癌组织中高表达,与患者不良预后有关。PFDs生物学功能与剪接体及免疫细胞浸润密不可分。