拐枣汁加工工艺及二氢杨梅素含量测定方法研究

[目的]研究拐枣汁的加工工艺及果汁中二氢杨梅素的含量测定方法。[方法]采用单因素试验筛选拐枣汁的加工工艺,对比煎煮法及浸提法,考察粉碎粒度、加水量、浸泡时间,建立果汁中二氢杨梅素的含量测定方法并进行方法学考察。[结果]浸提法所得果汁口感好,拐枣粉粒度为过8目筛,加水量为1.3~1.5倍,浸泡时间为18 h。二氢杨梅素含量测定方法:色谱柱为Ajilent HC-C 18色谱柱,流动相为0.1%磷酸水-乙腈=18∶82,流速1 mL/min,检测波长290 nm,柱温30℃,进样量10μL。[结论]果汁加工工艺简单易行,口感较好,易于实现工业化生产。建立的二氢杨梅素含量测定方法准确度、精密度高,专属性好,为拐枣汁质量标准的制定提供了依据。

太白七药葫芦七化学成分与药理作用研究进展

“葫芦七”为陕西“太白七药”的一种,是菊科橐吾属植物肾叶橐吾的干燥根及根茎。现代研究表明,该植物具有抗氧化及清除自由基、抗炎和增强免疫等广泛的药理活性。对近几年国内外有关葫芦七原植物肾叶橐吾的文献资料进行系统整理,对其化学成分和药理活性进行总结,为这一陕西特色药用植物的深入研究开发利用提供参考依据。

短柄五加植物学特征与生物学特性研究

[目的]为开发短柄五加的种苗繁育技术,研究其植物学特征和生物学特性。[方法]在短柄五加主要分布区域内通过调查走访、现地调查,同时结合对2个居群的定点观测,研究其植物的形态特征、营养生长特性、生殖生物学特性等。[结果]短柄五加仅分布于陕甘宁交界处的狭小区域内;营养生长缓慢,生物量有限;结实率低,种子质量差,后熟时间长,有性繁殖困难,为促使其种子顺利萌发必须培育优质种子并对种子进行变温处理;其资源量极为有限,是我国面临濒危的特产植物。[结论]该研究可为保护这一珍贵药用植物资源、野生抚育和规范化栽培等提供理论依据。

倒卵叶五加药材的基原鉴定研究

[目的]应用DNA条形码鉴定技术对短柄五加等五加属植物进行研究,以弄清倒卵叶五加和短柄五加的物种关系。[方法]通过对馆藏标本与现地植物形态进行观测,采用通用引物ITS2和psbA-trnH对采自陕甘宁地区的短柄五加等50个样本进行扩增后双向测序,并从GenBank数据库下载了五加属等相关植物的序列,分别通过ITS2 database或其序列注释,获得ITS2和psbA-trnH序列,随后进行BLAST比对鉴定分析;用MEGA 6.06软件对所得序列进行比对,分析变异位点,计算GC含量、种内和种间遗传距离,构建NJ系统发育树。[结果]ITS2和psbA-trnH序列的PCR扩增和测序成功率均为100%;倒卵叶五加和短柄五加的植物形态、ITS2序列和psbA-trnH序列完全相同。ITS2序列:短柄五加和糙叶五加仅有一个碱基的差异,蜀五加与藤五加序列相同;psbA-trnH序列:短柄五加与糙叶五加的差异显著,短柄五加与蜀五加序列相同。[结论]同时使用ITS2、psbA-trnH这2个标记的DNA条形码可以准确鉴别短柄五加等五加属植物;短柄五加与倒卵叶五加为同一种植物。

短柄五加嫩枝扦插育苗技术研究

[目的]短柄五加有性繁殖育苗相对较为困难,为解决种苗来源问题,积极探索短柄五加无性繁育种苗的方法。[方法]使用植物生长调节剂ABT 1生根粉与吲哚丁酸钾(IBAK)原粉对短柄五加年幼枝条进行处理,考察不同浓度生根粉溶液与不同扦插时间扦插繁育的成苗情况。[结果]短柄五加嫩枝扦插的最佳时间应在每年的7月1-15日,ABT_(1)生根粉溶液与吲哚丁酸钾原粉溶液对短柄五加年幼枝条成苗率分别较对照处理提高了23.62%和21.89%,达到80%以上。[结论]该研究对短柄五加无性繁殖育苗具有一定的技术指导意义。

四季抗病毒合剂及其主成分抗肠道病毒71型的作用及机制研究

目的探讨四季抗病毒合剂(Siji Kangbingdu Mixture,SJM)及其主成分(principal component,PC:连翘酯苷A、连翘酯苷B、连翘苷、甘草苷、甘草酸、木犀草苷、绿原酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸)抗肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)增殖和感染的作用及其作用机制。方法MTS法检测SJM、PC对非洲绿猴肾细胞(Vero)的毒性;基于EV71感染细胞模型检测SJM、PC抗损伤的效果;基于EV71感染乳鼠模型观察SJM、PC对其存活率、存活时间、临床症状评分的改善情况;检测乳鼠模型肌肉与血清中白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)水平。结果(1)EV71对Vero细胞的半数组织培养感染剂量(TCID 50)为10-5.68·mL^(-1);(2)SJM、PC对Vero细胞的半数抑制质量浓度分别为11.83 mg·mL^(-1)(按生药量计)、20.67μg·mL-1(按连翘酯苷A计);(3)单次和连续给予SJM与PC对ICR乳鼠无明显致毒作用;(4)SJM与PC可显著抑制EV71的增殖,以提高被感染细胞的存活率;(5)SJM与PC可显著改善被感染乳鼠的存活率、临床症状等指标;(6)SJM与PC均可显著调节肌肉与血清中IL-6、TNF-α、MCP-1的水平。结论SJM与PC可显著抑制EV71的增殖,调节免疫炎症因子,PC可在一定程度上替代SJM,发挥治疗手足口病的重要作用。

芪天扶正胶囊的HPLC指纹图谱研究

目的 建立芪天扶正胶囊的高效液相色谱(high performance liquid chromatography, HPLC)指纹图谱,为其质量控制提供依据。方法 用Shimadzu C18柱(250 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱,以乙腈-1 mL·L^(-1)甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速为0.8 mL·min^(-1),柱温为25℃,检测波长为258 nm。结果 10批芪天扶正胶囊的HPLC指纹图谱有35个共有指纹峰,相似度均大于0.9,通过与混合对照品比对,指认出19种化学成分:腺苷、没食子酸、5-羟甲基糠醛、红景天苷、酪醇、莫诺苷、马钱苷、当药苷、毛蕊异黄酮苷、芦丁、木犀草苷、特女贞苷、芹菜苷、橙皮苷、橄榄苦苷、芒柄花苷、女贞苷G13、毛蕊异黄酮、木犀草素。结论 所建立的HPLC指纹图谱能够表达芪天扶正胶囊中多组分的整体特征,可用于其质量控制。

肉桂油对异丙肾上腺素造模糖尿病心肌病模型大鼠保护作用研究

目的:探讨肉桂油对Ⅱ型糖尿病心肌病模型大鼠心肌的保护作用。方法:SD大鼠168只,分为正常对照组(20只)和实验组(148只)。正常对照组不做任何处理,实验组建立高脂高糖联合链脲佐菌素(STZ)糖尿病模型,剔除未达糖尿病标准的大鼠,将剩余实验组大鼠随机分为模型对照组(N-ISO组、ISO组)、肉桂油小、中、大剂量组、胰岛素组,除正常对照组、N-ISO组外,各组再给予异丙肾上腺素(ISO),5 mg/kg,1 time/d,连续注射5天,各组同一时间开始给予相应药物,正常对照组给予等量蒸馏水,末次注射ISO 4周后进行指标检测。检测指标包括:大鼠心功能测定、大鼠心重指数测定、病理学检查。结果:与模型对照组(N-ISO组、ISO组)相比,肉桂油中、大剂量组左心室内压最大下降速率-dP/dtmax有所提高(P≤0.05);肉桂油中剂量、大剂量组与ISO组比较,其心重指数减小(P≤0.05);病理学显示,肉桂油大剂量组HE染色纤维化改变较ISO组程度轻,Masson胶原染色面积较ISO组明显较小(P≤0.05)。结论:肉桂油对糖尿病心肌损伤大鼠心功能改善具有一定的作用,能对抗糖尿病心肌病所引起的左心室肥大,并减少心肌胶原形成。

葫芦七总黄酮超声辅助提取工艺优化

目的 优化葫芦七总黄酮超声辅助提取工艺。方法 在单因素试验基础上,以乙醇体积分数、液料比、超声时间为影响因素,总黄酮含量为评价指标,Box-Behnken响应面法优化提取工艺。结果 最佳条件为乙醇体积分数76%,液料比265∶1,超声时间71 min,总黄酮含量为26.20 mg/g。结论 该方法合理可行,操作简便,可用于超声辅助提取葫芦七总黄酮。

HPLC法测定葫芦七不同部位中7种倍半萜的含量

[目的]建立HPLC法测定葫芦七不同部位(根、茎、叶)中7种倍半萜类化合物的含量。[方法]采用Kromasil C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(40∶60);柱温35℃;检测波长240 nm;进样体积10μL。[结果]7种被测成分在测定质量浓度范围内线性关系良好(R^(2)≥0.9990);平均回收率在95.18%~97.61%,RSD在0.41%~1.60%;被检测的7种倍半萜类成分在葫芦七根、茎、叶不同部位中的含量差异明显,根中所含化合物的种类相对较多,含量相对较高。[结论]该方法快速、简便、准确,可用于葫芦七药材的质量控制。

不同月份短柄五加叶中总黄酮含量测定

目的:测定不同月份短柄五加叶中总黄酮的含量,研究短柄五加叶中总黄酮含量随季节的变化规律。方法:单因素试验筛选供试品的制备方法,以紫外分光光度法测定总黄酮含量。结果:短柄五加叶中总黄酮在0.1592~0.9554mg范围内与吸光度呈良好的线性关系,y=0.4723x-0.0146,R2=0.9997,平均回收率为97.43%。4~10月份采收的短柄五加叶中总黄酮分别为:48.03 mg·g^(-1)、58.20 mg·g^(-1)、53.35 mg·g^(-1)、47.61 mg·g^(-1)、42.12 mg·g^(-1)、35.63 mg·g^(-1)、22.09 mg·g^(-1)。结论:5~6月份采集的短柄五加叶中总黄酮含量最高,9月份以后总黄酮含量急剧下降,短柄五加叶的最佳采收季节为5-6月份。

HPLC法测定短柄五加根和茎中刺五加苷E含量

[目的]建立测定不同产地短柄五加根、茎中刺五加苷E含量的HPLC方法。[方法]采用Agilent TC-C_(18)(2)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以乙腈-0.1%磷酸(16∶84)为流动相;流速1 mL/min;检测波长220 nm,进样体积为10μL,柱温30℃。[结果]刺五加苷E在8.0~160.6μg/mL与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9996),平均加样回收率为98.62%,RSD为0.50%。[结论]该方法操作简便、稳定可靠,适用于短柄五加根、茎中刺五加苷E含量的测定,可作为倒卵叶五加药材的质量控制指标。

HPLC法测定不同产地倒卵叶五加中绿原酸的含量

目的:建立短柄五加根、茎中绿原酸的含量测定方法,比较不同产地短柄五加中绿原酸的含量。方法:采用Agilent TC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长348 nm;进样体积10μL。结果:绿原酸在5.81~290.25μg/mL范围内呈良好的线性关系,R2=0.9992,短柄五加根、茎中绿原酸平均回收率为98.75%,98.05%。短柄五加根、茎中绿原酸含量分别为陕西宜君县(1.914 mg·g^(-1)、2.322 mg·g^(-1)),甘肃正宁县(2.363 mg·g^(-1)、2.442 mg·g^(-1)),陕西黄龙县(3.769 mg·g^(-1)、2.642 mg·g^(-1)),陕西旬邑县(1.903mg·g^(-1)、2.723mg·g^(-1))。结论:该方法快速、准确,测定结果显示黄龙县短柄五加根中绿原酸含量最高,整体比较根、茎中绿原酸含量无显著差异,基本都在2.5 mg·g^(-1)左右。

香莲祛痛霜皮肤刺激性及致敏性试验研究

[目的]香莲祛痛霜对家兔皮肤刺激和豚鼠皮肤致敏反应的安全性评价.[方法]通过对家兔左右两侧对比实验,单次和多次给药对家兔完整和破损皮肤刺激性的研究,观察并记录给药后及停药后皮肤刺激性症状;进行豚鼠皮肤致敏试验,观察致敏性.[结果]香莲祛痛霜对家兔完整及破损皮肤单次给药均无明显刺激;在多次给药时,完整皮肤尚未见明显刺激,有轻度刺激破损皮肤的现象.在给药期间及停药后,动物均无全身异常反应.致敏试验,豚鼠给药部位的皮肤仅呈轻度致敏性,无全身过敏反应情况发生.[结论]香莲祛痛霜对家兔完整皮肤无刺激性,多次给药对破损皮肤有轻度刺激,停药可恢复;对豚鼠皮肤呈轻度致敏性,不引起全身过敏反应.因此,本品是比较安全的.