机能实验学改革——药理学探索性（设计性）实验初探

1．教学改革的必要性 药理学是一门医学与药学、基础与临床的桥梁科学，是运用医学领域中的各种方法研究药物作用，为临床提供理论基础的桥梁科学。传统的实验课教学，学生按实习指导操作，一般可以得到预期结果，这对培养学生基本技能、实验技术和分析问题的能力是有好处的。然而，实验课的重点至今仍然停留在演示现象、验证课堂理论、加深书本理解的水平上。缺乏学科间互相渗透，学生未能主动参与，难以开发学生的创新精神和智力潜能。特别是7年制学生，只是在原有基础上增加了几个实验。因此，药理实验在坚持原有“三基”的原则下，增加探索性试验内容，以弥补传统实验之不足，是非常必要的。

山茱萸提取物对脑梗死大鼠大脑皮层一氧化氮与核转录因子-κΒ表达的影响

目的:观察光化学法诱导脑梗死大鼠大脑皮层一氧化氮(NO)与核转录因子-κΒ(NFκ-Β)含量的变化,以及中药山茱萸提取物(主要成分为环烯醚萜苷)对其的影响。方法:大鼠预先灌胃给药7 d后,制作光化学致脑梗死模型,采用分光光度法检测脑组织中NO和一氧化氮合酶(NOS)的变化,免疫组织化学方法检测NF-κΒ阳性细胞数量的变化。结果:模型组与对照组相比,出现了明显的梗死灶,脑皮层NO含量与NOS活性增加,NF-κΒ阳性细胞数量增多。与模型组相比,山茱萸提取物能明显减小脑梗死面积,降低脑皮层NO含量和NOS活性,并显著减少NFκ-Β阳性细胞数量。结论:山茱萸环烯醚萜苷可通过影响脑内NO,NFκ-Β的水平发挥对脑梗死的治疗作用。

冬虫夏草和中国拟青霉对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的 研究冬虫夏草 (CS)和中国拟青霉 (CN80 2 )对小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法 小鼠分别尾静脉注射BCG +LPS造模 ,当日ig给予CS ,CN80 2 ,每天 1次 ,连续 10d。 10d后 ,检测其血清ALT和AST活性及肝脾重量指数 ,并用硫代巴比妥酸法测定血清与肝组织中LPO含量 ,用L92 9细胞为靶细胞检测血清中TNFα的活性。结果 CS ,CN80 2 (1.0g·kg-1·d-1,10d)抑制小鼠血清ALT ,AST活性 ,降低其血清与肝组织中LPO含量 ,并减轻其增大的肝、脾重量指数 ,降低血清中的TNF水平。结论 CS ,CN80 2预防性给药对BCG

葛根素对β-淀粉样肽所致痴呆模型小鼠学习记忆的影响

目的 :研究葛根素对 β 淀粉样肽所致痴呆模型小鼠学习记忆障碍的影响。方法 :以 β 淀粉样肽3μl(1mmol·L-1)icv制备小鼠学习记忆障碍模型 ,用Morris水迷宫法检测小鼠学习记忆能力。同时检测脑中及血中超氧化歧化酶 (SOD)、丙二酰醛(MDA)含量。结果 :葛根素 2 5和 5 0mg·kg-1均能改善模型小鼠的学习记忆 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。生化指标测定显示葛根素能使模型小鼠脑及血中的SOD增多、MDA减少 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。结论 :葛根素可对抗 β 淀粉样肽的神经毒性 。

银杏内酯A和银杏内酯B在健康人体内的药动学的实验研究

目的 用本实验室建立的测定血液中内酯浓度的方法 ,对银杏内酯A(ginkgolideA ,GA)和银杏内酯B(ginkgolideB ,GB)在 10例健康受试者体内的药动学进行了研究。方法 10例健康受试者 ,静脉滴注银杏叶提取物注射液 (舒血宁注射液 ) ,于给药后不同的时间取血 ,用气相 质谱联用法测定血药浓度 ,并计算GA和GB的药动学参数。结果 健康受试者静脉点滴GA和GB后的代谢均符合二房室模型 ,t1/ 2 分别为 3.73,4.2 5h。AUC值分别为 6 830 5 .10 ,19714.6 9ng·min·mL-1。结论 GC

槲皮素对TNF_α诱导的内皮细胞与中性粒细胞粘附的抑制作用

目的：研究槲皮素对ＴＮＦα诱导的内皮细胞与中性粒细胞粘附的抑制作用及作用机制。方法：用髓过氧化酶法测定中性粒细胞与内皮细胞的粘附，ＥＬＩＳＡ法测定内皮细胞粘附分子的表达。结果：ＴＮＦα通过增加／诱导内皮细胞ＩＣＡＭ１，ＶＣＡＭ１及Ｅｓｅｌｅｃｔｉｎ的表达而剂量、时间依赖性地增加内皮细胞与中性粒细胞的粘附。槲皮素可剂量依赖性地抑制上述粘附，其作用机制为抑制ＴＮＦα诱导内皮细胞上述３种粘附分子的表达。结论：槲皮素通过抑制ＩＣＡＭ１，ＶＣＡＭ１及Ｅｓｅｌｅｃｔｉｎ的表达而降低ＴＮＦα诱导的内皮细胞与中性粒细胞的粘附。

稀土离子对大鼠肝细胞核脂质过氧化的影响

用光度法测定丙二醛 (MDA)研究不同浓度La3 +,Ce3 +,Pr3 +,Nd3 +,Eu3 +对大鼠肝细胞核脂质过氧化的影响。结果表明 :稀土离子在 1×10 - 4 ～ 1× 10 - 6mol·L- 1 浓度范围内能抑制振荡温育或H2 O2 引起的脂质过氧化 ,且与浓度正相关。但是对大鼠肝细胞核用稀土离子处理一定时间 ,稀土离子Eu3 +对脂质过氧化的抑制作用明显减弱 。

冬虫夏草和中国拟青霉对细胞免疫功能的影响

本文采用正常、环磷酰胺（Ｃｙ）诱导增强和降低的ＤＮＦＢ性迟发型超敏反应（ＤＴＨ）模型以及丝裂原ＣｏｎＡ、ＬＰＳ诱导的淋巴细胞转化的方法，比较研究了冬虫夏草（ＣＳ）和中国拟青霉（ＰＳ）对机体细胞免疫功能的影响。结果表明：ＣＳ（０．５、１．０ｇ／ｋｇ·ｄ×７ｄ）和ＰＳ（１．０、２．０、４．０ｇ／ｋｇ·ｄ×７ｄ）对正常小鼠ＤＴＨ反应无明显影响，但ＣＳ（２．０ｇ／ｋｇ·ｄ×７ｄ）和ＰＳ（４．０ｇ／ｋｇ·ｄ×７ｄ）均可使增高或降低的ＤＴＨ恢复到正常水平（Ｐ＜０．０１）。在体外，ＣＳ（０．２４４～７．８ｍｇ／ｍｌ）和ＰＳ（０．４８８～３．９ｍｇ／ｍｌ）均可明显提高ＣｏｎＡ活化的淋巴细胞转化反应（Ｐ＜０．０１），并均在０．９７５ｍｇ／ｍｌ时作用达到高峰：ＣＳ（０．２４４～７．８ｍｇ／ｍｌ）和ＰＳ（０．１２２～７．８ｍｇ／ｍｌ）均可显著增强ＬＰＳ诱导的淋巴细胞转化反应（Ｐ＜０．０１），并呈剂量依赖性，在１．９５ｍｇ／ｍｌ时作用达到高峰。由此可见。

银杏内酯A,B在家兔体内的药代动力学研究

目的 建立测定血液中内酯浓度的方法 ,并对银杏内酯A ,B在大白兔体内的药物代谢动力学进行了研究。方法 6只大耳白兔 ,于耳缘静脉按 4mg·kg- 1 给银杏内酯生理盐水溶液 ,于给药后不同的时间放血 ,用气相 质谱联用法 (GC MS)测定血药浓度 ,计算药代动力学参数。结果 大耳白兔静脉注射银杏内酯A ,B后的代谢符合二房室模型 ,t1 2 分别为 1.5 ,0 .96h。AUC值分别为 36 1.5 5 ,97.70 μg·ml·min- 1 。结论 用GC MS法测定银杏内酯的血药浓度 ,从色谱图可以看出 ,银杏内酶A ,B的分离效果良好 ,血浆杂质峰不干扰测定 ,专一性强 ,平均回收率高 ,稳定性好 ,灵敏度较高 。

槲皮素对急性心肌梗死大鼠模型白细胞黏附分子表达的影响

目的研究槲皮素对急性心肌梗死(AMI)大鼠白细胞黏附分子CD11b/CD18表达的影响。方法采用大鼠急性心肌梗死模型,用流式细胞仪测定白细胞表面黏附分子CD11b的表达。同时测定肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)。结果大鼠急性心肌梗死后白细胞表面黏附分子CD11b平均荧光强度增高,血液中CK、LDH、MDA升高,SOD降低(P<005),槲皮素05、10mg/kg使CD11b平均荧光强度降低,降低CK、LDH、MDA,提高SOD含量(P<001)。结论槲皮素通过抑制细胞间黏附分子表达对AMI后的心肌损伤具有保护作用。

棕褐沙林蚁水提物对小鼠迟发型超敏反应的影响

目的：研究棕褐沙林蚁水提物对小鼠迟发型超敏反应的影响。方法：测定小鼠左、右耳廓重量之差值，表示迟发型超敏反应的程度。结果：棕褐沙林蚁水提取物１００，４００，１８００，７２００ｍｇ／（ｋｇ·ｄ），连续ｉｇ５ｄ后，抑制正常小鼠的迟发型超敏反应。４００ｍｇ／ｋｇ，连续ｉｇ５ｄ后，既抑制环磷酰胺（Ｃｙｃ）诱导的小鼠过高的ＤＴＨ，又提高Ｃｙｃ诱导的小鼠低下的ＤＴＨ。结论：实验结果表明，在本实验剂量时棕褐沙林蚁水提物既可明显抑制正常小鼠及过高小鼠的ＤＴＨ，又可提高低下小鼠的ＤＴＨ。提示棕褐沙林蚁水提物具有调节机体细胞免疫功能的作用，这将为其治疗免疫失调性疾病提供细胞免疫学的药理学基础。

川芎提取物对小鼠学习记忆的影响

用跳台法观察了川芎的甲醇和己烷两种提取物对药物造成的小鼠学习记忆障碍的影响。结果表明：两者能改善或部分改善东莨菪碱造成的记忆获得障碍，但对亚硝酸钠造成的记忆巩固障碍和４０％乙醇造成的记忆再现障碍无明显影响。

大鼠学习记忆功能随增龄变化的实验研究

目的通过观察自幼年至老年阶段不同月龄SD大鼠的行为学实验变化,评价增龄与学习、记忆功能之间的关系。方法雄性SD大鼠84只,分别为1月龄16只、3月龄16只、6月龄20只、18月龄19只和24月龄13只,分别进行Morris水迷宫和通道式水迷宫实验两种行为学实验。结果1月龄至6月龄大鼠的水迷宫实验成绩逐步提高,6月龄大鼠的逃避潜伏期和游泳距离最短,后3d的逃避潜伏期分别为(23.22±16.62)s、(11.59±8.51)s、(9.66±5.63)s,游泳距离分别为(596.83±443.18)cm、(254.39±218.75)cm、(229.80±128.00)cm;进入盲端的错误反应次数最少,与其他各组相比,均差异有显著性;而6月龄以后大鼠的水迷宫实验成绩缓慢下降,至24月龄时成绩与1月龄相似。结论大鼠的学习、记忆能力在6月龄之前呈现逐渐增强趋势,6月龄时达到最高点,以后缓慢下降,至24月龄时降至1月龄水平。

阿司匹林对内皮细胞与中性粒细胞及单核细胞粘附的影响

目的 研究阿司匹林对TNFα 诱导的内皮细胞与中性粒细胞及单核细胞粘附的抑制作用及作用机制。方法 用髓过氧化酶法测定白细胞与内皮细胞的粘附 ,ELISA法测定内皮细胞粘附分子的表达。结果 阿司匹林(6 0 0～ 90 0mg·L-1)可抑制中性粒细胞及单核细胞与TNFα激活 6h的内皮细胞粘附 ;而TNFα 激活内皮细胞后 2 4h ,阿司匹林对单核细胞与其粘附的抑制作用增强但却不抑制中性粒细胞与其粘附。结论 阿司匹林通过抑制E selectin的表达而降低TNFα诱导的内皮细胞与中性粒细胞的粘附 ,并通过抑制VCAM 1的表达降低TNFα诱导的内皮细胞与单核细胞的粘附。

干扰素治疗宫颈糜烂的研究进展

干扰素治疗宫颈糜烂的研究进展张传开慢性宫颈炎是女性生殖系统最为常见的炎症性疾患，据调查表明：在已婚妇女或有性生活的女性中，慢性宫颈炎的发病率在５０％以上，而慢性宫颈炎又是宫颈癌的高危因素，因此，严重威胁着广大妇女的身心健康。因而，慢性宫颈炎（宫颈糜烂...

氧自由基与阿苯达唑对旋毛虫幼虫作用关系初探

目的 探讨氧自由基与阿苯达唑对旋毛虫幼虫作用的关系。方法 应用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法分别测定用药组及未用药组旋毛虫幼虫和病鼠肝组织、血清中超氧化物歧化酶 (SOD)和丙二醛 (MDA)含量的变化。结果 用药组病鼠体内旋毛虫幼虫中SOD和MDA的含量均有明显升高 ,与未用药组相比有显著性差异。病鼠用药后肝组织和血清中SOD和MDA含量略有升高 ,没有显著性差异。结论 阿苯达唑增强氧化损伤作用 ,有助于杀伤旋毛虫幼虫 。

姜黄对肝细胞色素P4501A2的影响

目的 研究姜黄对肝细胞色素P4501A2的影响。方法 以咖啡因为工具药,HPLC法检测其药代动力学变化。结果 咖啡因因体内代谢减慢,半衰期延长。结论 姜黄可以抑制肝药酶,减慢咖啡因的代谢。

黄芩甙对大鼠心肌收缩性能的影响

麻醉大鼠实验，黄芩甙５０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇｉｖ可显著降低ＨＲ、ＬＶＳＰ、＋ｄｐ／ｄｔｍａｘ、－ｄｐ／ｄｔｍａｘ、Ｖｍａｘ以及反映心肌耗能量与耗氧量的ＲＰＰ，而使ＬＶＥＤＰ显著升高。提示黄芩甙对大鼠心肌收缩性能有明显抑制作用，从而使心肌耗氧量减少。

海兰地嗪对大鼠主动脉条收缩的影响

海兰地嗪和维拉帕米使高Ｋ＋及ＮＥ所致的大鼠离体主动脉条收缩张力下降，对高Ｋ＋引起收缩的抑制作用强于对ＮＥ的抑制作用。两药明显抑制ＮＥ依赖内Ｃａ２＋性收缩与外Ｃａ２＋性收缩，使ＮＥ及ＫＣ互所致大鼠主动脉条收缩的量－效曲线右移，最大效应降低。提示海兰地嗪阻滞钙离子通道与维拉帕米相似。

嗅球成鞘细胞移植对成年大鼠皮质脊髓束损伤的修复

目的研究嗅球成鞘细胞(OECs)对成年大鼠皮质脊髓束损伤(CSI)的作用。方法采用电解损毁大鼠C1-C2脊髓节段的皮质脊髓束(CST)的方法制备脊髓损伤(SCI)模型。原代培养OECs后移植到SCI大鼠。分别进行斜板实验和皮层运动诱发电位(MEP-C)的记录,测定斜板角度以及潜伏时、阈刺激强度、波幅等电生理指标的改变。结果与对照组比较,损伤组的斜板角度下降,MEP-C潜伏期延长,阈刺激强度增加,所记录三个峰值均减小,且各项指标均与对照组有显著性差异。这反映出大鼠CST的受损。与损伤组比较,损伤+移植组动物显示出斜板角度增大,MEP-C各项指标中,潜伏期缩短,阈刺激强度减小,所记录三个峰值均增大,且各项指标与损伤组比较有显著性差异。这提示CST的功能恢复。结论OECs可能有促进CST修复的作用。