NF-κBp65/IκBα在非小细胞肺癌组织中的表达

目的从蛋白和RNA水平研究NF-κBp65、IκBα在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达特点,探讨其在肺癌发生中的作用。方法免疫组化、Western blot方法检测NSCLC和癌旁肺组织中NF-κBp65和IκBα蛋白的表达,实时定量-PCR方法检测NF-κBp65和IκBα基因表达。结果共检测NSCLC组织62例(腺癌33例,鳞癌29例),癌旁肺组织27例。免疫组化显示NSCLC组织中NF-κBp65阳性表达率分别为58.6%和60.9%,显著高于癌旁肺组织(P均<0.0001),而IκBα阳性表达率分别为12.3%和1.4%,显著低于癌旁肺组织(P均<0.0001)。Western blot进一步证实:NF-κBp65蛋白在NSCLC组织中表达升高,IκBα蛋白表达降低。实时定量-PCR结果显示,NSCLC组织中NF-κBp65基因表达分别是癌旁肺组织的2.73±0.33倍和2.58±0.27倍(P=0.0046),而IκBα基因表达分别是癌旁肺组织的0.63±0.086倍和0.87±0.075倍(P=0.0208)。结论 NF-κBp65高表达和IκBα低表达可能在NSCLC发生过程中发挥重要作用。

华法林相关维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1及细胞色素P450 2C9基因型快速检测的方法研究

目的建立一种快速、准确、简便、经济的检测维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1（VKORC1）和细胞色素P450 2C9（CYP2C9）基因型的方法。方法提取220例肺栓塞患者外周血的DNA，针对2个基因的SNP位点设计特异性引物，并进行荧光聚合酶链反应（PCR），根据荧光PCR的熔解曲线分析样本的基因型。同时对样本进行传统的限制性酶切片段长度多态性（PCR—RFLP）基因分型，从时间、通量、费用、准确性等方面对2种方法进行比较。结果VKORC1 1693G〉A和CYP2C91 075A〉C两个SNP位点的不同基因型具有不同的熔解曲线峰型。220例样本中，VKORC1基因AA型184例，AG型34例，GG型2例，各占83．6％、15．5％、0．9％；CYP2C9基因＊1／＊1型加1例，＊1／＊3型19例，各占91．4，％、8．6％，无＊3／＊3型纯合子。PCR-RFLP检测结果与上述结果基本相同。2种方法相比，前者较后者操作步骤少，用时少，费用相当，结果更准确。结论利用荧光PCR检测VKORC1及CYP2C9的SNP分型操作简便、快速、经济、准确，适用于临床实验室开展基因分型。

卡泊芬净治疗重症监护病房侵袭性真菌感染13例临床分析

目的探讨卡泊芬净治疗ICU侵袭性真菌感染（IFI）的疗效与安全性。方法回顾分析我院呼吸、急诊和外科ICU接受过卡泊芬净治疗的IFI患者临床资料。结果2005年5月—2006年11月共有13例接受了卡泊芬净治疗。13例中确诊IFI6例,包括念珠菌菌血症4例（白念珠菌2例,光滑念珠菌和近平滑念珠各1例）、肺IFI2例（光滑念珠菌和曲霉各1例）;拟诊肺IFI3例（白念珠菌1例,曲霉2例）;疑似肺IFI4例,病原真菌不明。基础疾病为心血管外科术后8例,骨科与普外科术后各1例,肺癌术后复发化疗、间质性肺疾病和成人Still′s病各1例。卡泊芬净中位疗程14（1~55d）d。1例于用药当天死于心脏骤停疗效无法判断,12例可评估患者中,痊愈4例（4/12,33.3%）,显效4例（4/12,33.3%）,总有效率（8/12,66.7%）,进步和无效各2例。死亡6例（6/13,病死率46.2%）。治疗过程中未发现与卡泊芬净有关的不良反应。结论卡泊芬净是治疗IFI有效、安全的药物,值得进一步临床验证。

维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1与细胞色素P450酶2C9基因型肺血栓栓塞患者华法林剂量预测算法的随机对照研究

目的 评价根据不同基因型对肺血栓栓塞症患者的华法林剂量预测算法的临床应用价值.方法 2010年10月至2012年8月收集北京安贞医院呼吸科住院或门诊符合入选标准的肺血栓栓塞症患者220例,其中男86例,女134例,平均年龄（61±14）岁.所有患者采集临床资料和血样,采用荧光PCR基因分型方法对维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1（VKORC1）和细胞色素P450酶2C9（CYP2C9）进行基因分型,根据随机数字表法分为试验组和对照组,试验组计算预测剂量并指导前3次用药,对照组常规给药,采用单盲研究,根据INR值调整至稳定剂量,随访50 d.结果 随访结束时,两组调整至稳定剂量的比例分别为82％ （78/95）和66％（64/97）.试验组和对照组调整至稳定剂量分别需要的时间分别为（16.8±1.5）d和（25.6±1.8）d,中位时间分别为（11.0 ±1.0）d和（20.0±2.0）d,两组患者获得稳定剂量的时间差异有统计学意义（x2=18.175,P＜0.001）.试验组不良反应发生率低于对照组,且发生时间滞后于对照组.达到稳定剂量的142例患者的平均预测剂量为（3.6±0.9） mg/d,平均实际剂量为（3.7±1.3） mg/d,平均相差（0.1±1.2） mg/d,两者配对t检验差异没有统计学意义（t=-1.202,P=0.231）.结论 结合患者基因分型采用华法林稳定剂量预测算法可显著缩短华法林稳定剂量的调整时间,降低不良反应发生率,具有临床可行性.