阻断PI3K/AKT/mTOR信号对白血病HL-60细胞的影响

目的探讨阻断PI3K/AKT/mTOR信号对白血病细胞的影响。方法选取急性粒细胞白血病细胞HL-60,随机分为空白对照组、低浓度组、中浓度组和高浓度组,其中空白对照组给予生理盐水,低、中、高浓度组分别给予10、25和50 mol/L浓度的PI3K/AKT/mTOR信号阻断剂GDC-0349处理,采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,蛋白质印迹检测PI3K/AKT/mTOR信号、凋亡相关蛋白表达。结果高浓度组细胞培养24、48和72 h时吸光度值(A)明显低于低浓度组和中浓度组(P<0.05);低浓度组、中浓度组和高浓度组细胞凋亡率明显高于空白对照组(P<0.05),其中高浓度组细胞凋亡率明显低于低浓度组和中浓度组(P<0.05);高浓度组P110、AKT和mTOR蛋白相对表达量明显低于空白对照组、低浓度组和中浓度组(P<0.05);低浓度组、中浓度组和高浓度组Bcl2和Caspase3蛋白相对表达量明显低于空白对照组(P<0.05),高浓度组Bcl2和Caspase3蛋白相对表达量明显低于空白对照组、低浓度组和中浓度组(P<0.05)。结论阻断PI3K/AKT/mTOR信号可抑制白血病HL-60细胞增殖,促进细胞凋亡。

基于蛋白序列比对方法获得灵敏度抗体的诺如病毒免疫层析试剂条的临床应用价值

目的探讨基于蛋白序列比对方法获得灵敏度抗体的诺如病毒免疫层析试剂条的临床应用价值。方法选取150例疑似诺如病毒感染患者作为研究对象,回顾性分析所有患者的临床资料。所有患者均接受常规检查和优化检测试纸的诺如病毒抗原检测。利用患者临床数据对检出结果进行验证,从检出率、重复率、符合率、抗干扰能力和交叉反应等方面对该检测优化方法的检测性能进行评估。结果优化后的抗原检测试剂条的检测准确率高于常规抗原快速检测试剂,差异有统计学意义(P<0.05)。通过评估分析发现,诺如病毒抗原检测中的一些关键因素,如样本采集时间、采集方式、保存方式等对检测结果的影响较大。通过对上述因素进行控制和管理,可以提高诺如病毒抗原检测的准确性和可靠性。结论基于蛋白序列比对方法获得灵敏度抗体的诺如病毒试剂条的临床应用价值较高,可以优化检测方法,提高检测准确性和可靠性,减少漏诊和误诊。

医院感染肺炎克雷伯菌的临床分析

目的调查医院感染肺炎克雷伯菌的临床状况,探讨其发生原因及预防措施。方法对326例医院感染肺炎克雷伯菌的各类临床感染病例进行分析。结果危重、老年和意外抢救患者是肺炎克雷伯菌的易感人群;住院周期长、侵入性操作术和细菌多重耐药是感染的主要因素;老年病房、呼吸病房、神经外科是高发科室;感染部位以呼吸道为主。结论通过医院感染的相关因素分析,了解医院感染的高危人群、感染主要因素和重点科室的分布,为有效控制医院感染的发生提供了可靠的依据。

妊娠期高血压疾病孕早期风险因素的主成分、聚类及预测价值分析

目的 评估孕早期孕妇临床特征、血流动力学和循环血管生成蛋白指标对妊娠期高血压疾病(HDCP)的预测价值。方法 选取2022年1-6月于华中科技大学同济医学院武汉市中心医院行产前检查、孕12~13周、血压正常的单胎孕妇共252例为研究对象,剔除失访病例,根据在妊娠期间新发高血压的风险将其分为观察组(136例,新发高血压风险较高)和对照组(103例,新发高血压风险较低)。收集两组孕早期基础信息[体重指数(BMI)、心率(HR)、平均动脉压(MAP)]、血流动力学指标[每搏输出量(SV)、子宫动脉搏动指数(PI)、心输出量(CO)、总外周阻力(TPR)]和循环血管生成蛋白[胎盘生长因子(PLGF)、可溶性fms样酪氨酸激酶-1(sFlt-1)、可溶性内皮糖蛋白(s-Eng)、髓过氧化物酶(MPO)和内皮素(ET)]等,评估上述指标对HDCP的预测价值。结果 观察组BMI、MAP、HR、TPR、PI和s-Eng均高于对照组(P<0.05),观察组SV、CO、PLGF均低于对照组(P<0.05)。主成分分析表明,3个主成分占队列变异性的61%,第一主成分主要受TPR(22%)、s-Eng(16%)和CO(12%)的影响,第二主成分主要受BMI(33%)和MAP(19%)的影响,而MPO(18%)则主要影响第三主成分。对队列进行聚类分析识别出3个组:低风险组(127例)、中风险组(81例)和高风险组(31例)。预测HDCP效果较高的4个变量依次是TPR[曲线下面积(AUC)=0.96]、s-Eng(AUC=0.84)、MAP(AUC=0.92)和PLGF(AUC=0.89)。结论 TPR、s-Eng、MAP和PLGF对孕期发生HDCP有较高的预测价值,确定HDCP发生的风险因素对开发针对性的预防和抗高血压治疗方案具有重要意义。

空腹血清C肽水平与2型糖尿病肾病相关性分析

目的探讨2型糖尿病(DM)患者空腹血清C肽(FCP)水平与糖尿病肾病(DN)患者发病因素相关分析。方法回顾性分析本院2006年6月至2008年12月258例DM患者,其中DM组187例,DN组71例。通过分析患者FCP水平、肾小球滤过率(GFR)、血脂、肾功能、糖化血红蛋白(HbA1c)、尿微量清蛋白(mA1b)等指标,进行相关性分析。结果 1)DN的分期随FCP水平的降低而逐渐升高(x^2=43.7,P<0.001)。2)DM与DN组间年龄、体质量指数(BMI)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)差异均无统计学意义(P>0.05)。DN组病程、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、HbA1c、mA1b均显著高于DM组(P<0.01),而DN组GFR和FCP均显著低于DM组(P<0.01)。3)FCP水平与病程呈负相关(r=-0.317,P<0.01),与HDL-C及mA1b呈负相关(r=-0.201、-0.285,P<0.05);与TG和GFR呈正相关(r=0.275、0.507,P<0.01),但与年龄、空腹血糖及HbA1c无相关性(P>0.05)。结论 FCP水平与2型DN分期密切相关,2型DM患者保持生理性的C肽水平可能会延缓DN的发展。

血清及尿中微量元素铬的水平与2型糖尿病肾病的相关性分析

目的探讨血清微量元素铬(Cr)的水平与糖尿病肾病(DN)的相关性。方法采用磁性纳米材料(Fe3O4@ZrO2)磁固相萃取-火焰原子吸收光谱法测定30例2型糖尿病(T2DM)患者(T2DM组)、30例DN患者(DN组)及30名健康体检者(正常对照组)血清、尿液三价铬离子(Cr3+)及六价铬离子(Cr6+)水平。采用放射免疫法检测血清胰岛素(INS)和C肽,同时检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)、微量白蛋白(mAlb)等生化指标。采用简化肾脏病膳食改善(MDRD)公式计算肾小球滤过率(eGFR)。结果 DN组血清Cr3+明显低于T2DM组和正常对照组(P<0.01),而尿Cr3+明显高于T2DM组和正常对照组(P<0.01);DN组血清Cr6+明显高于正常对照组(P<0.01),但与T2DM组比较差异无统计学意义(P>0.05);T2DM组血清Cr3+水平明显低于正常对照组(P<0.01),而尿Cr3+和血清Cr6+水平高于正常对照组(P<0.01)。T2DM组和DN组血清Cr3+与eGFR呈正相关(r=0.088,P<0.05;r=0.146,P<0.01),与HbA1c、FBG、Cys C、SCr、mAlb呈负相关(T2DM组:r值分别为-0.098、-0.103、-0.154、-0.127、-0.355,P均<0.05;DN组:r值分别为-0.106、-0.107、-0.195、-0.150、-0.447,P均<0.05),与TC、TG、BUN不相关(T2DM组:r值分别为0.010、0.011、0.044,P均>0.05;DN组:r值分别为0.010、0.010、0.049,P均>0.05)。结论 DN患者血清铬存在不同程度的降低,尿铬离子升高。微量元素铬的水平与T2DM患者肾功能损伤的发生有一定关系。

Cystatin C评价肾小球滤过功能的临床应用进展

Cystatin C是一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂,其相对分子质量小,自由通过肾小球滤过膜,并在近端肾小管重吸收并被完全降解,不再回到血循环中去。血中浓度不受性别、年龄、体重、营养状况、炎症感染、肌肉量等因素的影响,被认为是较为理想的评价肾小球滤过功能内源性标志物。

胸腹液铁蛋白及其与血清铁蛋白比值在胸腹液渗、漏性质鉴别中的实验诊断价值

研究铁蛋白 (ferritin ,Ft)检测在胸腹液渗、漏性质鉴别中的实验诊断价值。用常规法和Light标准作出胸腹液的初步渗、漏性质鉴别 ,并测定胸腹液Ft(PFt)及血清Ft(SFt) ,计算其比值 (PFt/SFt) ;根据临床资料将标本按病例分为 4组 ,比较各组Ft含量及PFt/SFt值 ;用常规法和Light标准的鉴别结果比较PFt及PFt/SFt值在胸腹液渗、漏性质鉴别上的敏感性和特异性。结果表明 ,结核性胸膜炎组、非结核性良性胸腹液组与恶性肿瘤组胸腹液中Ft浓度均大于 10 0 μg·L-1,PFt/SFt>0 .5 ;心衰与肝硬化组胸腹液中Ft浓度均小于 10 0 μg·L-1,PFt/SFt<0 .5 ;渗出液Ft明显高于漏出液 (P <0 .0 1) ;血清Ft无明显差异 (P >0 .0 5 )。界定值是 :胸腹液Ft 浓度为 10 0 μg·L-1及PFt/SFt为 0 .5。诊断的敏感性为 94 .2 % ,特异性为 87.0 %。渗出性胸腹液中Ft浓度大于 10 0 μg·L-1,PFt/SFt>0 .5 ,而漏出性胸腹液中Ft浓度小于 10 0 μg·L-1,PFt/SFt<0 .5。胸腹液Ft及其与血清Ft的比值在胸腹液渗、漏性质的鉴别中敏感性高和特异性强 ,具有实验诊断价值。

胶束电动毛细管电泳分离尿液清蛋白的方法学评价

微量清蛋白尿是糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）早期诊断的重要指标，同时也是糖尿病（diabetes mellitus，DM）、冠心病的独立预测因子和危险因素。每年有30％～40％的糖尿病患者由于并发症而形成DN。因此，早期检测糖尿病患者尿微量蛋白对其预后极其重要，清蛋白（albumin，Alb）是尿液微量蛋白中重要成分。

不同检测系统测定纤维蛋白原结果的可比性分析

目前，大多数中型以上医院临床实验室拥有两台或多台血凝分析系统，用于检测纤维蛋白原（fibrinogon，Fib）。不同型号的血凝分析仪使用不同的试剂、定标血浆和质控血浆，各自成为一个独立的检测系统。如何实现对Fib在不同检测系统测定结果的可比性是质量控制的最终目的。现对ACL-8000和Sysmex CA-50血凝分析仪所测Fib的结果进行对比分析，报道如下。

利培酮和氯氮平对精神分裂症患者血脂代谢的影响

目的探讨利培酮和氯氮平对精神分裂症患者糖脂代谢的影响。方法选择2016年1月至2017年6月本院精神心理科精神分裂症患者100例,随机分为利培酮治疗组(试验组)与氯氮平治疗组(对照组),各50例。分别于治疗前、后测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和空腹血糖(FBG)水平。结果治疗前,两组各项指标比较无显著性差异(P>0.05)。治疗后,与治疗前比较,两组HDL-C水平无统计学意义(P>0.05);TC、TG、LDL-C、FBG水平、BMI均显著高于治疗前(P<0.01)。治疗后,试验组TC、TG、LDL-C水平及BMI均低于对照组(P<0.01)。结论两种药物均可导致精神分裂症患者产生脂代谢异常,利培酮对脂代谢的影响小于氯氮平。

半自动酶标板洗涤器的制作与使用

ELISA检测技术中,洗板是实验操作的重要步骤。传统的手工洗板方法费时费力,且易造成孔间交叉污染及工作环境的污染。为解决上述问题,我们利用聚乙烯酶标反应板、有机玻璃板、注射针头、微量移液小咀等设计制成洗涤器,再配以可调定量加液器、电动吸引器连接成一种简便的具有半自动功能的酶标板洗涤器。通过专家验收鉴定,认为该洗涤器设计合理,实用性强,操作简单,省时省力,洗涤效果好,解决了污染问题,并且易于制作,造价低廉。

凝聚胺法筛选鉴定Rh血型的应用

目的探讨凝聚胺法对临床患者Rh血型筛选鉴定的应用价值。方法对6953例住院患者先用珠海贝索公司的Rh试剂初筛Rh血型，再采用凝聚胺法和抗人球蛋白试验进行筛选鉴定，同时比较两种试验结果。结果Rh血型初筛阴性者为18例，其中凝聚胺法和抗人球蛋白试验两种方法筛选鉴定Rh阴性血型者17例，Rh阳性血型1例。Rh血型初筛试验假阳性率为5．56％。凝聚胺法和抗人球蛋白试验检测Rh血型无显著性差异。结论Rh血型初筛为阴性结果的一定要筛选鉴定，可替代传统经典的抗人球蛋白试验。

胶束电动毛细管电泳检测尿液转铁蛋白和白蛋白

目的建立一种胶束电动毛细管电泳(Micellar Electrokinetic Chromatography, MEKC)快速检测尿液转铁蛋白(Transferrin,TRF)、白蛋白(Albumin,Alb)的方法。方法详细考察并优化MEKC分离这两种蛋白质的影响因素,如缓冲溶液种类及浓度、pH、表面活性剂种类及浓度、分离电压、进样时间等。结果当缓冲溶液为50 mmol/L三羟甲基氨基甲烷(Hydroxymethyl,Tris) (pH 8.1)、10 mmol/L十二烷基硫酸钠(Sodium dodecyl sulfate,SDS)、分离电压为15 kV时,两种蛋白质在12 min内完成了很好的基线分离。在优化的条件下,检测TRF和Alb的线性范围为10～1 000 mg/L、检出限分别为1.22、1.05 mg/L,迁移时间重现性小于2.5%,面积的重现性小于5.4%。与放射免疫方法对比具有很好的相关性(TRF:r=0.995;Alb:r=0.992)。结论MEKC检测尿液TRF和Alb是一种快速、灵敏度高、试剂和样品用量少的方法。

吡嗪酰胺化疗过程中尿酸排泄的监测

目的评价吡嗪酰胺化疗过程中尿酸排泄监测的意义。方法监测肺结核患者吡嗪酰胺化疗前、化疗后每周(部分患者加服促尿酸排泄药物)的血清尿酸(Sua)、24 h尿尿酸(24 h Uua)、尿酸排泄分数,观察这些指标的变化趋势。结果93例吡嗪酰胺化疗患者Sua、24 h Uua、尿酸排泄分数化疗前与化疗1周后、化疗2周后比较,Sua显著升高(P<0.01),24 h Uua、尿酸排泄分数显著降低(P<0.01);21例化疗过程中血清尿酸升高至480μmol/L以上的患者24 h Uua、尿酸排泄分数在化疗后1周下降,分别为(39.7±5.6)%、(48.4±6.2)%,而其他72例化疗过程中血清尿酸未升高至480μmol/L以上的患者24 h Uua、尿酸排泄分数在化疗后1周下降,分别为(6.2±2.6)%、(7.5±3.1)%;21例化疗过程中血清尿酸升高至480μmol/L以上的患者加服促尿酸排泄药2周后Sua降至化疗前水平。结论24 h Uua、尿酸排泄分数测定在肺结核吡嗪酰胺化疗过程中能及时地反映尿酸排泄的降低,指导临床医师及时采取措施,减少高尿酸血症的发生,保证吡嗪酰胺化疗方案顺利地执行。

两套生化分析系统间血清电解质检测的偏倚评估

目的对雅培Architect C8000全自动生化分析仪、恒星HX-7185电解质分析仪2套生化分析系统间血清电解质(钾、钠、氯)检测进行方法比对和偏倚评估,评价检测结果的一致性。方法依据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9-A2文件的要求,每天选取9份血清标本,分别用2套系统测定钾、钠、氯各2次,连续5d,对仪器间的预期偏倚进行评估。结果血清钠预期偏倚的可信区间包含了允许误差,血清钾和氯允许误差大于预期偏倚可信区间的上限,待评方法的预期偏倚小于允许误差的概率很高(>97.5%)。结论 2套生化分析系统间血清电解质(钾、钠、氯)检测在总蛋白及脂类基本正常的标本中有较好的一致性,但总蛋白及脂类过高或过低的标本在两系统的检测差异仍需观察和引起重视。

高效液相色谱法检测慢性肾功能不全患者羟苯磺酸钙稳态血药浓度与eGFR及肌酐干扰值相关性分析

目的采用高效液相色谱法(HPLC)检测患者羟苯磺酸钙常规剂量用药后的稳态血药浓度,分析该浓度与患者肾小球滤过率(eGFR)及药物所致肌酐干扰的相关性,为肾功能不全患者调整羟苯磺酸钙用药剂量提供依据。方法①选择并优化检测血清羟苯磺酸钙浓度的HPLC方法,并进行方法学评价;②选择2016年5~10月间黄石市第二医院收治20例肾功能不全和10例非肾功能不全羟苯磺酸钙(剂量为1.5 g/d,Tid)用药患者,采集羟苯磺酸钙服药5天后清晨空腹静脉血,HPLC法检测血清羟苯磺酸钙浓度;③比较肾功能不全组、非肾功能不全组稳态血清羟苯磺酸钙浓度差异,分析肾功能不全组稳态血清羟苯磺酸钙浓度与eGFR及肌氨酸氧化酶法肌酐干扰值相关性。结果①HPLC方法学评价结果:方法专属性色谱图表明羟苯磺酸钙、对氨基苯甲酸内标保留时间分别为:6.9和8.0 min,血清内源性物质不干扰羟苯磺酸钙测定;羟苯磺酸钙及对氨基苯甲酸内标平均萃取回收率分别为:75.5%和94.5%,线性范围:1.90~189.60 mg/L(r^2=0.999 1,P<0.01),检测低限:0.452 mg/L,平均加标回收率98.9%(95.6%~103.6%),18.96,94.80和189.60 mg/L三种浓度测试样品日内CV分别为4.8%,4.5%和4.1%,日间CV分别为6.3%,6.1%和5.4%。②稳态血清羟苯磺酸钙检测结果:肾功能不全组高于非肾功能不全组(146.10±91.86 vs 16.81±2.48 mg/L),差异有统计学意义(Z=-4.400,P<0.05)。③肾功能不全组稳态血清羟苯磺酸钙浓度与eGFR呈负相关(r=-0.790,P=0.000),回归方程为Y=6 080.61X^(-1.692)(r^2=0.975 3,F=710.882,P=0.001);肾功能不全组肌氨酸氧化酶法肌酐干扰值与稳态血清羟苯磺酸钙浓度呈正相关(r=0.816,P=0.000),回归方程为Y=0.002 7X 2+0.343 5X+22.935(r^2=0.987 5,F=671.064,P=0.000)。结论肾功能不全患者常规剂量服用羟苯磺酸钙后出现与eGFR呈负相关的药物蓄积,建议肾功能不全患者使用羟苯磺酸钙应依据eGFR降低用药剂量。

常用抗结核药物对常规生化检测的干扰

目的评价异烟肼、利福平、吡嗪酰胺、链霉素四种常用抗结核药物对肝肾功能、血脂、心肌酶等常规生化检测的干扰，为分析前质量控制提供依据。方法参照CLSIEP7-A2及相关文献，采用体外干扰试验的方法测试药物对常规生化检测的干扰。结果异烟肼对血清铁有正干扰，利福平对总胆红素、直接胆红素有正干扰，对肌酐、尿酸有负干扰，且干扰值与干扰药物浓度呈正相关。结论异烟肼、利福平对部分常规生化检测有干扰，在服药前或服药5h后采集标本可避免药物的干扰。

酶标仪自检方法的建立和应用评价

目的 建立酶标仪的自检方法,检定酶标仪的各项性能指标.方法 参照〈中华人民共和国国家计量检定规程-酶标分析仪〉并利用分光光度计,对Multiskan MK3酶标仪各项性能指标进行检定.结果 Multiskan MK3酶标仪示值稳定性（0.001A）、波长示值误差（-1.0 nm）、波长重复性（0 nm）、吸光度示值误差（0.006 A）、吸光度重复性（0.17%）、灵敏度（0.018 L/mg）、通道差异（0.005A）及线性（1.88%）均检定合格.结论 具有性能优良分光光度计的临床实验室可进行酶标仪的自检.