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智能生物反应器装备制造进展
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作者 刘可意 汪俊卿 +3 位作者 傅凯 李峰 王瑞明 李丕武 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第15期409-416,共8页
生物反应器是生物医药和生物技术产业的核心装备,全球生物反应器市场规模逐年增长,将成为装备制造领域重要的增长点。随着合成生物学和人工智能技术的迅猛发展,高通量、微型化生物反应器已开始应用于工艺开发和优化,大型生物反应器则朝... 生物反应器是生物医药和生物技术产业的核心装备,全球生物反应器市场规模逐年增长,将成为装备制造领域重要的增长点。随着合成生物学和人工智能技术的迅猛发展,高通量、微型化生物反应器已开始应用于工艺开发和优化,大型生物反应器则朝着低能耗、智能化方向发展。生物反应器流场结构的复杂性是导致生物过程放大困难的关键问题之一,需要对反应器内的混合、传质、剪切等要素进行综合研究。为了提高生物反应器效率,需要采用人工智能和机器学习等技术进行数据采集和优化。未来结合生物技术、信息技术和控制技术的高集成度智能生物反应器将在多个领域有更广阔的发展空间。 展开更多
关键词 生物反应器 计算流体力学 传感器 智能化 机器学习
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浓香型白酒酿造区域空气微生物群落结构研究
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作者 王秀秀 汪俊卿 +6 位作者 吕志远 刘玉涛 张梦梦 商海林 任广花 张晨曦 章成真 《中国酿造》 CAS 北大核心 2024年第3期33-39,共7页
为探究浓香型白酒厂不同区域空气微生物的群落结构特征,利用Illumina Miseq高通量测序技术对趵突泉浓香型酒厂厂区内、酿酒车间外、酿酒车间内空气微生物的群落结构及分布情况进行研究。结果表明,厂区内空气样品微生物菌群最丰富,多样... 为探究浓香型白酒厂不同区域空气微生物的群落结构特征,利用Illumina Miseq高通量测序技术对趵突泉浓香型酒厂厂区内、酿酒车间外、酿酒车间内空气微生物的群落结构及分布情况进行研究。结果表明,厂区内空气样品微生物菌群最丰富,多样性最高,酿酒车间内多样性较低,表明在长期酿造过程中,经过不断地筛选,淘汰不适应酿酒环境的微生物,适宜的微生物富集形成了与环境相适应且相对稳定的微生物区系。从所有空气样品中共检测出748个细菌操作分类单元(OTUs),340个真菌操作分类单元;共注释到20个细菌门、289个细菌属和7个真菌门、149个真菌属。酒厂不同区域空气样品细菌菌群差异较大,真菌菌群相似度较高,与厂区内空气样品微生物相比,酿酒车间内、外微生物群落更接近。此外,在酿酒车间内还发现了机械化浓香型白酒酿造特有的副球菌属(Paracococcus)等微生物菌群。 展开更多
关键词 浓香型白酒 酿造区域 空气微生物 细菌 真菌 群落结构
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高产PSA的基因工程菌株构建
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作者 常化难 甄庚尧 +8 位作者 王崇川 李宁 周焕霞 曹建帮 高学秀 徐艳秋 李昊 朱德强 刘新利 《生物过程》 2024年第3期132-141,共10页
聚唾液酸(PSA)是一种具有重要生物功能的高分子多糖,广泛存在于自然界和人体中。由于其低免疫原性和良好的生物降解性,PSA被认为是一种理想的药物控释材料。本研究以大肠杆菌K87为出发菌株,通过过表达Neu5AC合成路径中的关键基因neuD,... 聚唾液酸(PSA)是一种具有重要生物功能的高分子多糖,广泛存在于自然界和人体中。由于其低免疫原性和良好的生物降解性,PSA被认为是一种理想的药物控释材料。本研究以大肠杆菌K87为出发菌株,通过过表达Neu5AC合成路径中的关键基因neuD,构建了高效合成PSA的基因工程菌株。通过摇瓶发酵和发酵罐发酵实验,验证了不同拷贝数neuD基因对PSA产量的影响。结果表明,高拷贝数表达载体能显著提高PSA的产量,其中E. coli K87-6菌株在5 L发酵罐中PSA产量达8.4 g/L,比出发菌株提高27%。本研究构建的高效合成PSA的基因工程菌株在工业生产中具有广泛的应用前景。Polysialic acid (PSA) is a high-molecular-weight polysaccharide with significant biological functions, widely found in nature and the human body. Due to its low immunogenicity and good biodegradability, PSA is considered an ideal material for drug delivery systems. In this study, Escherichia coli K87 was used as the starting strain to construct genetically engineered strains for efficient PSA production by overexpressing the key gene neuD in the Neu5AC synthesis pathway. The effects of different copy numbers of the neuD gene on PSA yield were verified through shake flask and fermenter experiments. The results showed that high-copy-number expression vectors significantly increased PSA yield, with the E. coli K87-6 strain achieving a PSA yield of 8.4 g/L in a 5 L fermenter, which is 27% higher than the starting strain. The genetically engineered strains constructed in this study have broad application prospects in industrial production. 展开更多
关键词 聚唾液酸 基因工程大肠杆菌 neuD 发酵
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ARTP法改良变色栓菌ATCC20869发酵漆酶
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作者 闫忠杰 王俊明 +2 位作者 刘新利 张弛 李秀芳 《齐鲁工业大学学报》 CAS 2024年第5期47-57,共11页
变色栓菌漆酶是一种含铜的多酚氧化酶,可氧化多种酚类和芳香族化合物,主产物为水且几乎不产生有毒副产物,具有较好的应用前景,但变色栓菌漆酶较低的产量限制了其进一步应用。本研究利用ARTP技术成功地从变色栓菌ATCC20869中突变出新的... 变色栓菌漆酶是一种含铜的多酚氧化酶,可氧化多种酚类和芳香族化合物,主产物为水且几乎不产生有毒副产物,具有较好的应用前景,但变色栓菌漆酶较低的产量限制了其进一步应用。本研究利用ARTP技术成功地从变色栓菌ATCC20869中突变出新的突变菌株TA-03。为了进一步提高漆酶产量,利用单因素摇瓶发酵实验和响应面分析法,优化了漆酶发酵条件。结果表明:在法尼醇添加量为4.48 mmol/L、硫酸铜添加量为1.90 mmol/L,pH为4.00的条件下,突变株漆酶产量达到了(283.77±8.91)U/mL。为深入探究突变菌株TA-03漆酶酶活性提高的原因,对其进行重测序和转录组分析。研究结果显示,漆酶活性区域氨基酸的突变以及新陈代谢等方面的富集导致了漆酶活性的提升。这为变色栓菌漆酶的实际应用进行了有意义的探索,提升了漆酶在发酵工业上的应用。 展开更多
关键词 变色栓菌 漆酶 ARTP 响应面 转录组分析
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橡木木质素热裂解产物香气成分分析
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作者 郑昊 沃晓妍 +4 位作者 陈淑君 姚彬彬 赵先炎 胡文效 邱磊 《中外葡萄与葡萄酒》 北大核心 2024年第6期90-97,共8页
通过气相色谱-质谱联用法(GC-MS)对法国橡木、美国橡木、蒙古栎中的木质素进行香气成分分析,检测出酚类、酚醛类、酯类及其它类共4类组分53种香气成分。其中,美国橡木木质素香气含量最高(8270.90μg·kg^(-1)),蒙古栎木质素次之(822... 通过气相色谱-质谱联用法(GC-MS)对法国橡木、美国橡木、蒙古栎中的木质素进行香气成分分析,检测出酚类、酚醛类、酯类及其它类共4类组分53种香气成分。其中,美国橡木木质素香气含量最高(8270.90μg·kg^(-1)),蒙古栎木质素次之(8224.70μg·kg^(-1)),法国橡木木质素最低(6608.70μg·kg^(-1))。香韵特征分析和热图分析结果显示,3种橡木木质素的香气成分存在显著区别,美国橡木木质素能提供更多的挥发性酚类物质,带有明显的木香、甜香味道。法国橡木木质素则是具有更多的丁香酸、4-甲基愈创木酚和糠醛,提供相对柔和的木香、甜香味道。蒙古栎木质素有最多的酚醛类物质能带来浓郁的花香、果香味道,但在木香、甜香味道上有所不足。 展开更多
关键词 木质素 香气成分 橡木 热裂解
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大豆乳清蛋白作为氮源和天然浮选剂用于培养及采收小球藻的工艺研究
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作者 梁烽 黄迪 +3 位作者 高双飞 王腾飞 张川川 李沙 《齐鲁工业大学学报》 CAS 2024年第3期56-63,共8页
微藻作为第三代生物质原料,生产能力高、产油脂量高,可以用于制备生物柴油。为了有效的提高微藻生产及分离效率,泡沫浮选法被用于解决微藻采收及脱水困难的问题。蛋白质作为天然氮源及天然表面活性剂,在设计小球藻的连续培养-分离工艺... 微藻作为第三代生物质原料,生产能力高、产油脂量高,可以用于制备生物柴油。为了有效的提高微藻生产及分离效率,泡沫浮选法被用于解决微藻采收及脱水困难的问题。蛋白质作为天然氮源及天然表面活性剂,在设计小球藻的连续培养-分离工艺中起到的关键桥梁的作用。从大豆生产企业排放的大豆乳清废水中提纯出大豆乳清蛋白加以利用,很好的降低了有机氮源的成本。以大豆乳清蛋白作为小球藻培养的有机氮源被证明有显著的促生长作用。同时大豆乳清蛋白作为捕获剂和起泡剂,在最佳补入质量浓度为0.163 g/L,pH 7.0条件下得到小球藻的回收率为96.4%,富集比为18.7。 展开更多
关键词 泡沫浮选 大豆乳清蛋白 小球藻 天然浮选剂 微藻采收
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枯草芽孢杆菌生产乙偶姻工艺优化及在斑马鱼引诱中的应用
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作者 高银浩 王铂昊轩 +6 位作者 张恩豪 陈奕杰 颜廷瑞 毛林静 张娜 楚杰 孟武 《齐鲁工业大学学报》 CAS 2024年第2期48-56,共9页
以枯草芽孢杆菌168为代谢研究菌株,优化发酵工艺,包括培养基配方和发酵条件,最终得到在葡萄糖80.0 g/L,酵母提取物10.0 g/L,玉米浆干粉10.0 g/L,尿素5.0 g/L,K 2HPO_(4)10.0 g/L,MgSO_(4)1.0 g/L,MnSO_(4)0.08 g/L,发酵温度37℃,初始pH ... 以枯草芽孢杆菌168为代谢研究菌株,优化发酵工艺,包括培养基配方和发酵条件,最终得到在葡萄糖80.0 g/L,酵母提取物10.0 g/L,玉米浆干粉10.0 g/L,尿素5.0 g/L,K 2HPO_(4)10.0 g/L,MgSO_(4)1.0 g/L,MnSO_(4)0.08 g/L,发酵温度37℃,初始pH 6.5,接种密度3%,液体体积40%的发酵条件下,得到质量浓度最高为32.58 g/L的乙偶姻。将乙偶姻添加到斑马鱼饲料中,研究其对斑马鱼的引诱作用。结果表明,在斑马鱼饲料中添加质量分数0.6%的乙偶姻,可以使饲料的吸引指数从2.11±0.09提高到3.13±0.08,吸引指数提高了48.34%,并且添加适当浓度的乙偶姻可以提高斑马鱼肝脏的抗氧化能力和肠道消化道的活性。综上所述,采用枯草芽孢杆菌168发酵工艺生产乙偶姻安全可靠、回收率高,作为斑马鱼诱食剂的效果显著,应用价值高。 展开更多
关键词 乙偶姻 引诱剂 斑马鱼 枯草芽孢杆菌168 发酵优化
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来源于Pseudomonas多巴脱羧酶的异源表达、纯化及酶学性质研究
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作者 周耀林 孙登岳 +1 位作者 曾志雄 李霞 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期14-19,共6页
将来源于Pseudomonas的多巴脱羧酶(DOPA decarboxylase,DODC)基因序列经过PCR扩增,双酶切,连接到载体CV6-pGEX-6P-1上,经验证、测序成功构建表达载体CV6-pGEX-6P-1-DODC。转入大肠杆菌BL21(DE3)重组表达,表达条件为OD值达到0.6~0.8,异... 将来源于Pseudomonas的多巴脱羧酶(DOPA decarboxylase,DODC)基因序列经过PCR扩增,双酶切,连接到载体CV6-pGEX-6P-1上,经验证、测序成功构建表达载体CV6-pGEX-6P-1-DODC。转入大肠杆菌BL21(DE3)重组表达,表达条件为OD值达到0.6~0.8,异丙基β-D-1-硫代半乳糖苷(IPTG)终浓度为0.1 mmol/L,16℃过夜培养12~16 h。结果表明:在BL21(DE3)大肠杆菌中经诱导表达得到较高表达量的DODC融合蛋白;经过GST-亲和层析、3C蛋白酶切、离子交换层析得到纯度95%以上的DODC纯化蛋白;对DODC的酶学性质进行研究,该酶的最适反应温度为40℃,对温度的影响比较敏感,在20~30℃酶活在80%以上,超过30℃酶活大幅度降低,最适缓冲液为PBS缓冲液,最适反应pH值为7.5,最适底物为左旋多巴(L-DOPA),金属阳离子Ca^(2+)对酶活力有促进作用。序列同源性分析表明,来源于Pseudomonas的DODC属于AAT-Ι超家族,并且预测出该酶的保守催化活性位点为Thr 241。 展开更多
关键词 多巴脱羧酶(DODC) 异源表达 蛋白纯化 酶学性质 底物特异性
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蓝色刺孢霉QY229产天然蓝色素液态发酵条件的优化
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作者 黄露文 朱丽萍 颜世敢 《齐鲁工业大学学报》 CAS 2023年第6期43-50,共8页
蓝色是三原色之一,现已被广泛应用于食品、医药、化妆品等多个领域。目前用于食品加工的蓝色素多为合成蓝色素,天然蓝色素在商业应用中极其罕见。研究发现蓝色刺孢霉QY229在液态摇瓶培养条件下能够代谢产生胞外水溶性蓝色素,并对其发酵... 蓝色是三原色之一,现已被广泛应用于食品、医药、化妆品等多个领域。目前用于食品加工的蓝色素多为合成蓝色素,天然蓝色素在商业应用中极其罕见。研究发现蓝色刺孢霉QY229在液态摇瓶培养条件下能够代谢产生胞外水溶性蓝色素,并对其发酵条件进行响应面优化。结果表明,当蛋白胨质量浓度为34.61 g/L,温度为31.67℃,装瓶量为72.33 mL/250 mL时,蓝色素发酵液色价可达348.2 U/mL,是优化前发酵液色价的2.1倍。因此,蓝色刺孢霉QY229液态发酵生产蓝色素作为稀有天然蓝色素的又一新来源,具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 蓝色刺孢霉 天然蓝色素 发酵优化 响应面 色价
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纳米金用于SPR传感器检测小分子的研究进展
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作者 王浩 郑欣欣 +4 位作者 孙宇航 陈子雷 颜朦朦 杨亲正 杨焕新 《齐鲁工业大学学报》 CAS 2023年第3期37-44,共8页
近年来,表面等离子体共振(Surface Plasmon Resonance,SPR)技术因具有可实时、动态监测SPR芯片上分子间相互作用的优点,而广泛应用于小分子传感检测领域。信号放大是小分子SPR传感器的重要研究内容,它决定小分子能否被检出及传感器灵敏... 近年来,表面等离子体共振(Surface Plasmon Resonance,SPR)技术因具有可实时、动态监测SPR芯片上分子间相互作用的优点,而广泛应用于小分子传感检测领域。信号放大是小分子SPR传感器的重要研究内容,它决定小分子能否被检出及传感器灵敏度,因此信号放大技术对其发展非常重要。纳米金因其高电子密度、介电特性及易修饰等特性而用于多种传感器的信号放大。重点介绍近5年来纳米金在小分子SPR传感器方面的应用情况,旨在为小分子SPR传感器的进一步发展提供参考依据。 展开更多
关键词 表面等离子体共振(SPR)传感器 小分子 纳米金
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新型青枯雷尔氏菌来源双核含铜酪氨酸氧化酶的异源表达及生化性质鉴定 被引量:1
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作者 崔鹏鹏 单瑞达 +3 位作者 王怡淑 李霞 孙登岳 曾志雄 《齐鲁工业大学学报》 CAS 2023年第5期41-50,共10页
左旋多巴(Levodopa,L-DOPA)能有效治疗帕金森病(Parkinson’s Disease,PD),寻找能够专一性催化酪氨酸合成L-DOPA的新型酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)具有重要意义。研究将来源于青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)的酪氨酸氧化酶(RsTYR)... 左旋多巴(Levodopa,L-DOPA)能有效治疗帕金森病(Parkinson’s Disease,PD),寻找能够专一性催化酪氨酸合成L-DOPA的新型酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)具有重要意义。研究将来源于青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)的酪氨酸氧化酶(RsTYR)基因构建到重组质粒中化转至大肠杆菌中进行异源表达并对表达条件进行了优化。结果表明,在BL21(DE3)大肠杆菌中,当诱导温度达到25℃,诱导剂异丙基β-D-1-硫代半乳糖苷(IPTG)的浓度为0.5 mmol/L,诱导时间设置为12 h时,RsTYR蛋白能够获得较高表达量(0.4 mg/mL)。随后,通过Ni树脂亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析等方法对RsTYR蛋白进行纯化,获得高纯度的重组蛋白。随后利用精制的RsTYR蛋白,对其进行了产物鉴定和酶学性质表征研究,结果表明RsTYR能特异性的将L-酪氨酸合成L-DOPA。该酶的最适反应温度为45℃,最适反应pH为6.5。在pH为7.0时RsTYR催化性质最稳定,最适缓冲液为PBS缓冲液,在pH 6.0~7.5间,酶分子仍具有50%以上的残余活性,且K^(+)能够提高RsTYR的活性。同时测定了RsTYR的酶动力学参数,其K_(m)和k_(cat)值分别为0.63μmol/L和9.61 s^(-1)。同源序列分析结果表明RsTYR属于Tyrosinase Superfamily,并且通过同源建模及序列对比分析预测了该酶的保守催化活性位点His81、His93、His102、His227、His231、His253。本研究为生物合成L-DOPA提供了一种新酶选择,为L-DOPA的生物催化合成提供了一定的理论基础。 展开更多
关键词 新型酪氨酸氧化酶 异源表达 蛋白纯化 酶学性质 催化活性位点
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酒花增味西打酒的酿造工艺优化
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作者 秦晓旭 唐思敏 +3 位作者 李凤 王家英 周天舒 董小雷 《食品科技》 CAS 北大核心 2024年第4期108-115,共8页
该试验以苹果汁、果酒酵母和酒花为原料酿造一款酒花增味西打(Cider)酒,以苦味值、感官评分和酒精度为评价指标,考察酒花干投时间、酒花添加量和酵母添加量对酒花增味西打酒酿造工艺的影响。通过单因素和正交试验对酒花增味西打酒酿造... 该试验以苹果汁、果酒酵母和酒花为原料酿造一款酒花增味西打(Cider)酒,以苦味值、感官评分和酒精度为评价指标,考察酒花干投时间、酒花添加量和酵母添加量对酒花增味西打酒酿造工艺的影响。通过单因素和正交试验对酒花增味西打酒酿造工艺条件进行优化,并进行理化指标、微生物检测和气相色谱串联质谱法分析。结果表明,最佳酿造工艺条件为酒花干投时间60 h、酒花添加量5.0 g/L、酵母添加量为0.6 g/L。在此条件下,酒花增味西打酒苦味值为15.75 BU,感官评分为90.83分,酒精度为2.57%Vol。酒体协调,味道先苦后甜,具有酒花热带水果香气和花香的同时且带有苹果汁的香甜,口感极佳。 展开更多
关键词 酒花 酒花增味西打酒 西打酒 酿造工艺
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