JiTT模式在医学化学实验教学中的应用初探——以唾液淀粉酶最适pH的测定为例

文章介绍了JiTT(适时教学)模式在我校不同专业的医学化学实验教学中的应用,并将网络环境下的学习任务和学生为主体的课堂教学有机结合,以设计性实验案例——"唾液淀粉酶最适p H值的测定"实验目的、原理、方法、步骤、实验中可能出现的问题及注意事项等诠释该教学模式,有助于增强学生学习主动性和培养学生创新与探究的能力。

关于提高生化理论教学中“基因重组与基因工程”教学效果的探讨

“基因重组与基因工程”是生物化学教学中比较重要的内容，但在我校97级本科的生化考试中，有关这部分内容的成绩却很不理想。这次考试卷面80分，其中有关“基因重组与基因工程”一章内容为10分，占总分的12．5％，参加考试的学生总数为435人，得分情况如下。

“框架式”教学法在生物化学理论课中的应用研究

目的探讨“框架式”教学法在医学生物化学教学中的应用价值。方法以该院2000级、2001级、2002级专科及成教专科学生为研究对象,将2001级专科、成教学生各随机分为两组(实验组与对照组),两组间入学成绩差异无显著性;2002级专科、成教学生均为实验组,2000级为对照组,实验组采用教师讲授并结合“框架式”教学法,对照组采用以教师讲授为主的传统教学方法。结果2001级实验组与对照组学生基础知识考试成绩比较有差异(P<0.05),2002级与2000级测试成绩平均分和最高分比较,实验组均高于对照组。结论“框架式”教学方法在促进学生学习积极性,提高学生对知识的应用能力及发挥学生学习主体作用等方面明显优于传统教学方法。

细胞因子诱导的杀伤细胞对Lewis肺癌细胞的抑瘤作用及抑瘤机制的研究

目的观察细胞因子诱导的杀伤(cytokine induced killer,CIK)细胞对Lewis肺癌细胞增殖和Lewis肺癌移植瘤生长的抑制作用,探讨其抑瘤机制。方法常规方法培养CIK细胞,以CIK细胞为效应细胞,Lewis肺癌细胞为靶细胞,以不同效靶比共同培养,MTT法检测细胞增殖情况,同时电镜观察Lewis肺癌细胞形态特征改变;流式细胞仪检测Lewis肺癌细胞的凋亡;免疫细胞化学法检测并比较FasL在单个核细胞和CIK细胞表面的表达;用MTT法检测抗FasL单克隆抗体对CIK细胞杀伤Lewis肺癌细胞的影响;用ELISA方法检测Lewis肺癌荷瘤小鼠脾细胞上清液中IL-2、IL-4、IFN-γ和TNF-α浓度。结果电镜观察:CIK细胞能促进Lewis肺癌细胞凋亡超微结构的改变;流式细胞仪检测:CIK细胞组凋亡率明显高于对照组;FasL在CIK细胞表达增加;抗Fas单抗可抑制CIK杀伤Lewis肺癌细胞的活性;CIK细胞治疗的Lewis肺癌小鼠脾细胞培养上清液中细胞因子水平明显高于对照组。结论CIK细胞可在体内及体外抑制Lewis肺癌细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡,Fas/FasL途径在其中发挥一定作用,同时CIK细胞抗肿瘤作用可能与淋巴细胞活化和分泌细胞因子有关。

肌肽通过调节JNK和NF-kappaB通路抑制高糖诱导的心肌细胞凋亡(英文)

高血糖症是糖尿病并发心血管疾病的重要危险因素.高血糖诱导产生的活性氧(ROS)能够引起糖尿病心肌病.我们的前期工作已经证实,肌肽对高糖环境下细胞凋亡具有保护作用,但其机制尚未明确.为研究肌肽对高糖诱导的大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及相关信号机制,以高糖诱导心肌细胞H9c2为模型,采用Brdu-ELISA法检测细胞增殖过程中DNA合成情况,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫印迹实验检测JNK/c-Jun、NF-κB的磷酸化水平,RT-PCR检测TNF-α的mRNA表达.实验结果显示,肌肽能够提高高糖损伤的H9c2细胞增殖能力,降低心肌细胞凋亡,抑制高糖激活的JNK、c-Jun和NF-κB磷酸化水平及TNFα的mRNA表达.上述结果表明,肌肽拮抗高糖诱导的心肌细胞凋亡机制与抑制p-JNK/p-c-Jun、p-NF-κB水平和TNF-α表达有关.

京尼平保护高糖诱导损伤小鼠胰岛MIN6细胞的机制

京尼平(genipin,Gen)是一种重要的抗氧化物,在细胞内抵抗氧化应激损伤过程中发挥重要的作用。为了探讨京尼平对高糖诱导损伤的小鼠胰岛MIN6细胞的影响,采用CCK-8法检测细胞存活率。高糖损伤组细胞活力下降(P<0.05),京尼平作用高糖损伤的细胞后,细胞活力增加(P<0.05);小鼠胰岛素(insulin)检测试剂盒和ATP含量检测试剂盒检测发现,高糖损伤组胰岛素释放量减少(P<0.001),ATP含量减少(P<0.001),给予京尼平后,胰岛素释放量增加(P<0.01),ATP含量增加(P<0.01);荧光探针DCFH-DA检测细胞内活性氧簇(ROS)水平发现,高糖损伤组ROS含量明显增加(P<0.01),给予京尼平作用后,ROS含量减少(P<0.05);谷胱甘肽(GSH)/氧化型谷胱甘肽(GSSG)、细胞内丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)以及细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性的测定发现,高糖损伤组细胞GSH/GSSH比值、SOD和CAT水平下降(P<0.05),细胞内MDA和LDH水平显著升高(P<0.001),给予京尼平后,GSH/GSSH比值、SOD和CAT水平增加(P<0.01),MDA和LDH水平显著降低(P<0.01);线粒体膜电位(JC-1)检测发现,高糖损伤组细胞中MMP水平下降(P<0.01),京尼平作用高糖损伤的细胞后,MMP水平增加(P<0.05);Western印迹检测解偶联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)、抗氧化蛋白谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase,GR)和谷氧还蛋白1(glutaredoxin 1,Grx1)含量结果显示,高糖损伤组UCP2含量增加(P<0.01)和抗氧化蛋白含量减少(P<0.01),给予京尼平后,UCP2表达下降(P<0.05)、抗氧化蛋白质的表达增加(P<0.05)。结果提示,京尼平对高糖损伤的小鼠胰岛细胞具有抗氧化性的保护作用,以及维持胰岛细胞功能促进胰岛素分泌的作用。本文为京尼平对高糖损伤的小鼠胰岛MIN6细胞的抗氧化作用提供实验数据,也为后续探讨京尼平在糖尿病的治疗和预防中提供新的思路。

谷氧还蛋白的生物学活性及其与人类疾病的关系

谷氧还蛋白(glutaredoxin,Grx),又称巯基转移酶(thioltransferase,TTase),是巯基-二硫键氧化还原酶家族的重要组分。Grx最早由Holmgren发现,在生物界普遍存在,是一种依赖谷胱甘肽(GSH)催化氧化状态的蛋白质二硫键还原为巯基,修复蛋白质活性的小分子酶蛋白。它具有多种生物学活性,在调节机体的氧化还原反应和细胞生长、抑制凋亡方面起重要作用,与人类某些疾病,如心脑血管疾病、白内障、糖尿病、AIDS、自身免疫性疾病、肿瘤和感染等的发生、发展,以及干预治疗有关。

灵芝茶对老年小鼠抗疲劳、抗缺氧能力及肝脏核酸含量的影响(英文)

背景灵芝茶作为保健饮品目前仅见对大鼠化学性肝损伤有保护作用;对小鼠血糖有调节作用的研究报道,其抗疲劳、抗缺氧作用的研究尚少。目的探讨灵芝茶的保健作用及在延缓衰老中的作用。设计随机对照的实验研究。地点和材料老年(17～18月龄)昆明种小白鼠,体质量40～45g,由齐齐哈尔医学院实验动物中心提供。实验在齐齐哈尔医学院药理及生化实验室完成。干预①灵芝茶组(n=20)饮用灵芝茶8周后负重游泳,与对照组(n=20)比较游泳时间。②应用鼠用多功能乏氧瓶,对小鼠造成急性缺氧环境,对照组(n=20)饮凉开水,实验组(n=20)饮灵芝茶水,模型对照组(n=20)饮凉开水,在测定前30min,腹腔注射异丙肾上腺素0.2mg/kg,8周后比较耗氧率。③灵芝茶组(n=20)和凉开水对照组(n=20)各饮灵芝茶和冷水8周后,测定肝脏核酸含量。主要观察指标负重游泳时间;乏氧瓶内的耗氧率;肝脏RNA和DNA含量。结果灵芝茶组小鼠负重游泳时间[(42.83±12.6)min]长于对照组[(34.9±19.4)min],差异有显著性意义(t=3.187,P<0.01);灵芝茶组小鼠在乏氧瓶内的耗氧率[(0.055±0.009)mL/(min·g)]高于对照组[(0.043±0.007)mL/(min·g)],差异有显著性意义(t=2.307,P<0.05),与异丙肾上腺素组[(0.024±0.006)mL/(min·g)]比较,差异有显著性意义(t=4.015,P<0.001);

PI3K-Akt信号通路与肿瘤

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3Ks)信号参与增殖、分化、凋亡和葡萄糖转运等多种细胞功能的调节．近年来发现,IA型PI3K和其下游分子蛋白激酶B(PKB或Akt)所组成的信号通路与人类肿瘤的发生发展密切相关．该通路调节肿瘤细胞的增殖和存活,其活性异常不仅能导致细胞恶性转化,而且与肿瘤细胞的迁移、黏附、肿瘤血管生成以及细胞外基质的降解等相关,目前以PI3K-Akt信号通路关键分子为靶点的肿瘤治疗策略正在发展中．

细菌性肝脓肿76例

细菌性肝脓肿是一种潜在的可致死的临床疾病,即使在治疗的情况下,也会有4%~6%的死亡率〔1〕。肝脓肿的病因主要是细菌入侵,东方与西方肝脓肿入侵的细菌不同〔2〕,在东方引起肝脓肿的主要原因尚不明确,在西方主要与胆道感染及恶性肿瘤有关〔3〕。本研究对近6年来我院收治的脓肿患者的诊断及治疗进行总结分析。1材料与方法1.

人参皂苷Rg1对H_2O_2诱导的293T细胞NF-κB转录活性影响

目的:观察人参皂苷Rg1对H2O2诱导HEK293T细胞损伤过程中NF-κB转录活性的影响,探讨人参皂苷Rg1的抗氧化机制。方法:H2O2模拟氧化应激条件,MTT法和台盼蓝染色法检测人参皂苷Rg1对细胞生长的影响;以DCFH-DA为探针流式细胞仪检测细胞内ROS水平;利用双荧光素酶顺式报告系统,检测人参皂苷Rg1对荧光素酶报告基因NF-κB-Luc相对荧光素酶值的影响,以检测人参皂苷Rg1是否具有下调H2O2诱导的NF-κB转录激活的作用。结果:H2O2诱导损伤的293T细胞存活率随H2O2浓度的增高而下降,相同H2O2浓度下,人参皂苷Rg1预保护组细胞存活率较损伤组显著提高(P<0.05);H2O2处理后细胞内自由基明显增加,其荧光强度增加了40%～50%,而给予有效浓度的人参皂苷Rg1后,荧光强度降低35%～40%;与正常对照组比较,H2O2模拟氧化应激条件下,HEK293T细胞中NF-κB荧光素酶报告活性明显升高(P<0.05),而在人参皂苷Rg1预保护组则明显受到抑制(P<0.05)。结论:人参皂苷Rg1对H2O2所致的细胞氧化应激损伤具有明显的保护作用,其可能机制是有效地清除了细胞内过多的自由基,下调了转录因子NF-κB的转录活性,继而抑制了NF-κB通路的激活。

过表达PI3Kp55γN末端氨基酸抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的黏附性

目的研究PI3K p55γ调节亚基N末端氨基酸过表达对乳腺癌细胞MDA-MB-231黏附性的影响,探讨其作用的分子机制。方法通过脂质体介导用重组质粒p EGFPN24瞬时转染MDA-MB-231细胞系。荧光显微镜和免疫印迹方法鉴定转染细胞中绿色荧光蛋白(GFP)以及融合蛋白GFP-N24的表达,细胞黏附实验检测细胞在胶原和纤黏连蛋白上的黏附性。免疫印迹实验检测细胞内源性E-钙黏素(E-cadherin)和磷酸化Akt(p Akt)的表达。酶谱实验检测基质金属蛋白酶9(MMP9)和尿激酶型纤维酶原活化因子(u PA)的表达与分泌。结果荧光显微镜下可见转染细胞因外源基因的表达而发出绿色荧光,胞浆分泌颗粒明显增加。免疫印迹结果显示,融合蛋白GFP-N24的表达量略低于空载体中GFP的表达量。过表达N24p55γ的细胞在纤黏连蛋白和胶原上的黏附性明显下降。细胞内源性PI3K下游信号分子磷酸化Akt的表达量下降,但N24p55γ的过表达不影响转染细胞中细胞黏附分子E-cadherin的表达。此外,N24p55γ的过表达抑制肿瘤转移相关基因MMP9的活化与u PA的分泌。结论 PI3K p55γN末端氨基酸过表达可能通过影响PI3K/Akt信号通路以及肿瘤转移相关基因MMP9和u PA的表达抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的黏附性。

长链非编码RNA Linc00673过表达对胃癌MGC-803细胞增殖与凋亡的影响

目的:探讨长链非编码RNA Linc00673过表达对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法:将重组慢病毒表达质粒pLVX-Linc00673和对照空载体质粒pLVX-NC在293T细胞中进行慢病毒包装与扩增,将重组慢病毒转染胃癌细胞MGC-803建立稳定过表达Linc00673的细胞系,实时荧光定量PCR方法检测Linc00673基因的表达;MTT实验和克隆形成实验观察细胞的生长增殖;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;qPCR检测细胞周期相关调控基因表达;免疫印迹法检测PI3K/Akt信号通路关键分子及肿瘤增殖相关蛋白的表达。结果:Linc00673在胃癌细胞系MGC-803、BGC-823和AGS中的表达量显著高于正常胃粘膜细胞GES-1(P<0.05)。建立了稳定过表达Linc00673的MGC-803细胞系,Linc00673的表达量比对照空载体组高200倍。Linc00673过表达促进MGC-803细胞增殖和克隆形成(P<0.05),抑制细胞凋亡并影响细胞周期G1→S期进程(P<0.01);Linc00673过表达可影响MGC-803细胞周期调节基因CCNG2、p19和CDK1的表达;免疫印迹结果显示,Linc00673过表达不仅促进PI3K/Akt信号通路关键分子pAKT及其下游靶点NF-κB和Bcl-2蛋白的表达,而且上调肿瘤相关因子β-catenin和EZH2蛋白的表达。结论:Linc00673过表达可能通过PI3K/Akt信号通路促进MGC-803细胞增殖、抑制凋亡。

基于案例教学的临床生物化学检验教学改革研究与实践

案例教学法（case-based teaching,CBL）起源于20世纪初期,由美国哈佛商学院所倡导,即围绕一定培训目的把实际中真实的情景加以典型化处理,形成供学生思考分析和决断的案例（通常为书面形式）,通过独立研究和相互讨论的方式,提高学生分析问题和解决问题能力的一种方法。医学案例教学中所用案例主要为临床病例,也称为病例教学,在医学检验专业课中开展案例教学法可以起到巩固、扩充临床相关知识的目的。

番茄红素对慢性苯染毒小鼠抗氧化酶的影响(英文)

背景:苯中毒主要对造血系统和神经系统造成损伤,导致DNA损伤,DNA加合物形成等。番茄红素是一种重要的类胡罗卜素,具有多种生物学作用,如抗氧化、抗肿瘤、诱导细胞间隙连接通讯等。目的:探讨番茄红素对慢性苯染毒所造成的氧化损伤的拮抗作用。设计:随机对照的实验研究。地点和材料:哈尔滨医科大学公共卫生学院动物室。选用纯种雄性健康昆明鼠30只,由哈尔滨医科大学附属第二医院动物中心提供。干预措施:分为对照组、苯染毒组和番茄红素组,每组10只。对照组不染毒,苯染毒组和番茄红素组静式吸入苯蒸气,番茄红素组给予番茄红素,60d后处死,取肝、脾、脑组织。主要观察指标:测定肝、脾和脑中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力及丙二醛含量。结果:苯染毒能够明显,降低组织匀浆中SOD活性犤肝、脾、脑分别为(12.57±1.94),(5.57±0.81),(8.28±2.25)μkat/g〗,GSH-Px活力犤肝、脾、脑分别为(0.38±0.05),(0.52±0.05),(0.10±0.01)mkat/g犦,升高丙二醛含量犤肝、脾、脑分别为(2.85±0.38),(3.58±0.53),(3.10±0.89)μmol/g犦。给予番茄红素后可使小鼠组织匀浆的SOD活性(μkat/g)升高(肝、脾、脑分别为16.08±2.55,6.43±1.28,9.03±1.52),GSH-Px活力(mkat/g)上升(肝、脾、脑分别为0.53±0.

生物化学教学中应用PBL教学模式的探讨

目的:探讨PBL教学模式在生物化学教学中的应用效果。方法:选取齐齐哈尔医学院2009级本科专业2个教学班分别作为研究组和对照组。研究组在教学中实施PBL教学模式,对照组采用常规讲授法。待课程结束时,统计两组学生的考试成绩并进行分析。结果:研究组的学生考试成绩和对教学方法的评价均明显优于对照组(P<0.05)。结论:应用PBL教学模式进行生理学教学效果良好,值得推广。

细胞凋亡相关基因P53和bcl-2在乳腺癌中的表达

目的 :研究凋亡相关基因P53和bcl- 2乳腺癌中的表达情况 ,以探讨其与乳腺癌发生发展的关系。方法 :采用免疫组化S -P法检测 31例乳腺癌中凋亡相关基因P53和bcl- 2的表达。结果 :31例乳腺癌中P53和bcl- 2的阳性表达率分别为 87%和 77.4% ;bcl- 2的阳性表达在乳腺癌高中分化组与低分化组间比较差异有显著性 (P <0 .0 5) ;P53和bcl- 2的共同阳性率为 70 % ,二者的共同阴性率为 0 ,二者表达之间无明显相关 (P >0 .0 5)。结论 :P53基因的突变以及bcl- 2的表达增高均与乳腺癌的发生发展相关 ,通过改变肿瘤的抗凋亡状态进行肿瘤的基因治疗 。