辅助生殖技术供卵法规合理性的伦理学思考

供卵技术主要用于解决不孕不育问题,促进辅助生殖技术的发展,但同时引发一系列伦理法律问题。根据我国供卵的现状及已颁布的法律法规和章程等对供卵技术实施的风险、卵子来源、供/受者条件、增加近亲婚配危险、子代法律地位以及知情权与隐私权的冲突等伦理法律问题进行论述和分析,并认为在供卵技术实施过程中,既要做到供/受卵双方的知情同意,又要严防该技术的商业化。因此,我国应加强供卵技术的伦理规约与法律应对,使这类妇女实现生育愿望的同时,又完全遵循合理的伦理法律原则,保证供卵技术合理开展。

3种内膜准备方案对多次胚胎移植失败患者冻融胚胎移植结局的影响

目的分析自然周期、激素替代周期与降调节后激素替代周期内膜准备方案对多次胚胎移植失败患者冻融胚胎移植结局的影响。方法选取海南省妇幼保健院生殖医学中心与南京医科大学附属苏州医院生殖与遗传中心在2015年12月至2016年12月期间收治的、符合纳入标准的多次胚胎移植失败患者130例,根据内膜准备方案的不同,分为自然组(n=51)、替代组(n=32)、降调节组(n=47)。对样本做回顾性分析并对比患者年龄、解冻胚胎数、不孕年限、移植胚胎数、转化日内膜厚度、雌二醇水平等一般临床资料。在自然周期以及冻融胚胎移植中,对比三组转化日子宫内膜形态,记录并比较三组胚胎着床、早期流产等妊娠结局情况。结果三组患者年龄、解冻胚胎数、不孕年限、移植胚胎数、转化日内膜厚度、雌二醇水平差异均无统计学意义(均P>0.05)。自然组在自然周期以及冻融胚胎移植中,子宫内膜形态均优于替代组和降调节组(χ~2值分别为11.99、14.88,均P<0.05)。降调节组的妊娠率、胚胎着床率达53.19%(25/47)、61.70%(29/47),均显著高于替代组和自然组(χ~2值分别为9.80、11.80,均P<0.05),但三组早期流产率无明显差异(χ~2=3.51,P>0.05)。结论降调节后激素替代周期能够有效提高多次胚胎移植失败患者的妊娠率和胚胎着床率。对于子宫内膜形态有缺陷或状态欠佳的患者,选择降调节后激素替代周期为佳。

尼莫地平联合硫酸镁对中重度妊娠期高血压孕妇的临床研究

目的观察尼莫地平联合硫酸镁对中重度妊娠期高血压疾病孕妇血清和肽素、皮质醇的影响。方法选取中重度妊娠期高血压孕妇78例,随机分为试验组和对照组,各39例。对照组给予25%硫酸镁注射液60 m L+葡萄糖500m L,静脉滴注,每天1次;试验组在对照组的基础上给予尼莫地平片35 mg,每天2次,持续治疗至分娩。治疗前后收集血液标本测定血清和肽素、皮质醇、内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)浓度,比较2组患者的临床疗效,记录2组孕产妇妊娠结局和药物不良发应发生情况。结果治疗后,对照组有效率为76. 92%(30例/39例),试验组为94. 87%(37例/39例),差异有统计学意义(P <0. 05)。试验组顺产率为61. 54%(24例/39例),对照组为38. 46%(15例/39例),差异有统计学意义(P <0. 05)。治疗后,对照组和试验组血清皮质醇分别为(310. 36±30. 18),(281. 20±27. 45) nmol·L^(-1),血清和肽素分别为(1. 97±0. 61),(1. 48±0. 59)μg·L^(-1),血清ET-1分别为(73. 51±12. 26),(54. 17±11. 09) ng·L^(-1),血清NO分别为(714. 53±86. 67),(924. 55±102. 34)nmol·L^(-1),差异均有统计学意义(均P <0. 05)。对照组并发症发生率为35. 90%(14例/39例),试验组为发生率12. 82%(5例/39例),差异有统计学意义(P <0. 05)。结论尼莫地平与硫酸镁联用有助于改善中重度妊娠期高血压孕妇的妊娠结局,降低血清和肽素、皮质醇浓度,改善血管内皮功能,安全性高。

肥胖型和瘦型PCOS与酶类抗氧化剂和内分泌代谢指标的相关性分析

目的研究肥胖型和瘦型多囊卵巢综合征(PCOS)与酶类抗氧化剂和内分泌代谢指标的相关性。方法采用随机法选取该院2014-2016年确诊为肥胖型PCOS患者50例作为肥胖型组、瘦型PCOS患者50例作为瘦型组,并分别检测和分析两组的酶类抗氧化剂(包括SOD、CAT、GPX、INS)以及各种内分泌代谢指标和其相关性。结果瘦型组的PRL、E1、FSH、INS、SOD以及血脂4项均低于肥胖型组(P<0.05);瘦型组和肥胖型组的T、FSH均与SOD呈正相关关系,瘦型组的SOD与INS呈正相关关系,CAT与TC呈正相关关系;肥胖型组的CAT与SHBG、E1、E2、PRL、INS以及血脂4项呈正相关关系,SOD与SHBG、E1、E2、PRL、TC、TG、HOMA呈正相关关系。结论 PCOS患者本身会存在酶类抗氧化应激反应,且这种反应与PCOS患者拥有的无排卵现象以及高雄激素血症有着密切的联系,而且肥胖型PCOS的这种反应同时还会出现在内分泌代谢方面,但是瘦型PCOS的这种反应仅仅与胰岛素抵抗有密切的联系。

微阵列比较基因组杂交技术诊断产前超声检查异常胎儿染色体变异的价值

目的探讨微阵列比较基因组杂交(a CGH)技术对产前超声检查异常胎儿染色体变异的诊断价值。方法选取2013年2月-2014年6月收治的16例产前超声异常孕妇,抽取的羊水样本经常规G显带染色体分析后应用aCGH技术进行染色体变异分析。结果 1~14号羊水样本a CGH分析未见143个疾病相关位点染色体拷贝数的增加/缺失(>100 Kb),全基因组筛查未见染色体拷贝数增加/缺失(>1 Mb);15号羊水样本的9号染色体9p13.3~9p21.11区域35.8 Mb拷贝数增加,该区域拷贝数增加与神经系统发育异常、自闭症等有关;16号羊水样本的2号染色体2p25.3~2p23.1区域30.7Mb拷贝数增加,该区域拷贝数增加与生长发育迟缓及其他结构畸形有关。结论利用a CGH技术可以快速地分析和鉴定染色体微缺失或微重复变异,与常规G显带染色体核型分析互为补充,有利于提高胎儿超声异常的产前诊断效率。

睾丸与附睾精子对梗阻性无精子症ICSI助孕结局的影响

目的比较睾丸精子与附睾精子对梗阻性无精子症(obstructive azoospermia,OA)患者行卵胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)治疗结局的影响。方法收集2014年1月至2016年12月在海南医学院第一附属医院生殖医学中心因梗阻性无精子症行ICSI助孕治疗患者的临床资料,共163个周期。根据精子来源分为两组,TESA组:采用睾丸精子抽吸术(testicular sperm aspiration,TESA)取精,共137个周期;PESA组:采用经皮附睾精子抽吸术(percutaneous epididymal sperm aspiration,PESA)取精,共26个周期。比较两组的正常受精率、2PN卵裂率、优质胚胎率、胚胎利用率、胚胎种植率、临床妊娠率、流产率及活产率之间有无差异。结果 TESA组的胚胎种植率、临床妊娠率及活产率高于PESA组,但差异均无统计学意义(P>0.05);TESA组的正常受精率、2PN卵裂率、优质胚胎率、胚胎利用率及流产率均低于PESA组,但差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论对梗阻性无精子症患者,睾丸精子和附睾精子ICSI后可达到相似的助孕结局。

男性年龄对非男性不育夫妇IVF妊娠结局的影响

目的探讨男性年龄对非男性不育夫妇行体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)治疗妊娠结局有无影响。方法收集2015年1月至2016年12月在海南医学院第一附属医院生殖医学中心因女方输卵管因素进行IVF助孕治疗且女方年龄小于35岁患者的临床资料,共658个周期。根据男方年龄分为4组:A组(<35岁)、B组(35~39岁)、C组(40~44岁)和D组(≥45岁),分别比较各组间的受精率、2PN卵裂率、优质胚胎率、胚胎利用率、种植率、临床妊娠率、流产率及活产率,分析各指标之间有无差异。结果 C组临床妊娠率均低于其它3组,差异有统计学意义(P<0.05),其它指标在各组间的差异均无统计学意义。结论在非男性不育夫妇中,男性年龄对辅助生殖技术临床妊娠率可能存在负面影响,但不影响最终的活产率。

双酚A对人早孕绒毛滋养细胞IGF-I及ADAM12表达的影响

目的探讨对人早孕绒毛滋养细胞采用不同浓度双酚A(BPA)干扰,对其胰岛素样生长因子I(IGF-I)及解整合素-金属蛋白酶12(ADAM12)表达的影响。方法取海南医学院妇产科门诊人流室一名自然妊娠早孕50 d孕妇的新鲜绒毛组织制备绒毛滋养细胞(孕妇知情同意,并经医院伦理委员会批准),配制4组含不同浓度BPA的培养液(A组:1×10^-4g/L,B组:1×10^-5g/L,C组:1×10^-6g/L,D组:1×10^-7g/L),并设培养基(E组:BPA 0 g/L)为对照组,进行滋养细胞培养,72 h后收取滋养细胞行实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)实验,检测不同浓度BPA条件下IGF-I、ADAM12 mRNA表达量的变化。结果各实验组中ADAM12、IGF-I mRNA的表达受BPA的影响,均有不同程度升高。当BPA浓度为1×10^-5g/L(B组)时,IGF-I mRNA的表达明显升高,是C组的3.18倍(P<0.01),是对照组E组的5.48倍(P<0.01);ADAM12 mRNA的表达量明显上升,是C组的4.19倍(P<0.01),是对照组E组的6.27倍(P<0.01)。结论 BPA对绒毛滋养细胞的IGF-I和ADAM12的mRNA表达有刺激升高的作用。

环孢素A对围着床胚胎的作用及在不明原因反复着床失败中的应用探索

体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)中胚胎可能着床失败,但反复着床失败(recurrent implantation failure,RIF)特别是原因不明会给医生和患者带来极大的困扰.RIF只是一种对治疗经历的描述,作为诊断,目前尚未达成统一的标准.胚胎着床失败的原因源于胚胎、子宫内膜容受性和胚胎-子宫内膜同步等因素.如何改善胚胎因素成为当今关注的焦点.

不孕症诊断指南

不孕症是1种低生育力状态,严重危害育龄期女性的生殖健康,指1对配偶未采取避孕措施,有规律性生活至少12个月未能获得临床妊娠。广义的不孕症包括不能妊娠和不能获得活产两个方面,本指南仅包括不能妊娠的相关内容。本指南是由中华医学会妇产科学分会妇科内分泌学组参考WHO、美国生殖医学学会(ASRM)、英国国家卫生和临床医疗优选研究所(NICE)的相关指南,并结合我国临床实践现状,经全国各级医疗机构专家函审最终制定,适用于全国各级各类医疗机构妇产科及男科执业医师对不孕症的诊断。

环孢素A改善滋养细胞轻度受损小鼠囊胚的着床

目的探讨环孢素A(cyclosporin A,CsA)是否可以改善滋养细胞轻度受损的小鼠胚胎的着床。方法①将30只ICR小鼠腹腔注射CsA 5 mg/kg,采用化学发光法检测注射后1 h、3 h、4 h、6 h、8 h、10 h、13 h、14 h、16 h、20 h鼠体内CsA血药浓度变化情况;②将36只小鼠随机分为对照组和实验组,实验组腹腔注射CsA 5 mg/kg,对照组相同体质量下注射同等剂量橄榄油,根据Gardner评分结合实验需要将移植胚胎分为A、B、C三类,分类后胚胎分别移植至两组小鼠子宫,于交配后(days postcoitum,dpc)5.5 d时采用实时荧光定量PCR技术检测小鼠胚胎着床率及着床部位白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)mRNA的表达情况。结果①小鼠体内CsA血药浓度在给药后6~10 h达到高峰;②B类胚胎在实验组小鼠中着床率[73.9%(34/46)]高于对照组[50.0%(23/46),P=0.018];③两组小鼠着床部位LIF mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论CsA给药剂量为5 mg/kg时,CsA可以改善滋养细胞形态上存在轻度受损的小鼠胚胎的着床;CsA可能成为提高IVF成功率的潜在药物。

人巨细胞病毒感染与不明原因反复胚胎种植失败患者Th1/Th2、Th17/Treg型细胞因子表达水平的关系

目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)感染与不明原因反复胚胎种植失败(RIF)患者辅助性T细胞(Th)1/Th2、Th17/调节性T细胞(Treg)型细胞因子表达水平的关系。方法选择2018年1月-2020年1月海南现代妇女儿童医院生殖医学科收治接受IVF-ET助孕的不明原因RIF患者100例作为RIF组,均采用酶联免疫试验法测定HCMV-IgM、HCMV-IgG抗体情况,实时荧光定量聚合酶链反应法(RT-PCR)测定外周血单个核细胞Th17、Treg相关细胞因子ROR-γt、Foxp3 mRNA表达,采血应用酶联免疫法测定白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平,计算IFN-γ/IL-10、IL-17/TGF-β1比值,与同期收治移植后成功妊娠女性30例(成功组)进行对照,比较两组上述参数的差别;RIF组按是否发生HCMV感染分为感染组与非感染组,比较感染组与非感染组Th1/Th2、Th17/Treg型细胞因子表达水平的差异,探究HCMV感染与RIF患者Th1/Th2、Th17/Treg型细胞因子表达水平的关系。结果RIF组HCMV阳性率29.00%高于成功组3.33%(P<0.05);RIF组外周血单个核细胞ROR-γt高于成功组,血IL-17、IFN-γ、IFN-γ/IL-10比值、IL-17/TGF-β1比值高于成功组(P<0.05),Foxp3 mRNA及TGF-β1低于成功组(P<0.05);感染组ROR-γt mRNA、IL-17、IFN-γ、IFN-γ/IL-10比值、IL-17/TGF-β1比值高于非感染组(P<0.05),Foxp3 mRNA、IL-10和TGF-β1低于非感染组(P<0.05);HCMV阳性率与Th1/Th2、Th17/Treg均呈正相关(r=0.595、0.640,P<0.05)。结论不明原因RIF患者HCMV活动性感染率较高,伴HCMV感染患者Th1/Th2、Th17/Treg比值更高,向Th1、Th17免疫漂移更明显,整体免疫抑制程度更高,可能是造成胚胎移植排斥的重要原因。

莱克多巴胺对人卵巢颗粒细胞类固醇激素合成急性调节蛋白表达的影响

目的探讨β2肾上腺素受体(adrenergic receptor,AR)激动剂莱克多巴胺(ractopamine,RAC)对人卵巢颗粒细胞类固醇激素合成的效应。方法在人卵巢颗粒细胞体外培养系统中,添加高(50μmol/L)、中(5μmol/L)、低(0.5μmol/L)3种剂量的RAC,并设置空白对照(对照组)、50μmol/L克伦特罗(clenbuterol,CLB)和50μmol/L普萘洛尔组,在0 h、4 h、12 h、24 h和48 h回收细胞,采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测颗粒细胞类固醇激素合成急性调节蛋白(steroidogenic acute regulatory protein,St AR)m RNA和蛋白表达水平的变化。结果各实验组颗粒细胞St AR m RNA的表达与其蛋白表达的变化趋势基本一致。对照组颗粒细胞各时间点St AR的表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。CLB和RAC可升高St AR表达,普萘洛尔可抑制其表达。与0 h相比,St AR的表达水平在RAC作用后4 h达到高峰(P=0.000);12 h后,St AR的表达从峰值急剧下降(P=0.003);24 h后,基本恢复至基础水平(P>0.05)。不同剂量RAC与颗粒细胞共培养4 h后,St AR表达水平从高到低的顺序为:RAC低剂量组>RAC中剂组>RAC高剂量组,组间差异有统计学意义(P=0.000)。结论 RAC可升高颗粒细胞St AR的表达水平,影响卵巢类固醇激素合成功能,其后果可能引起女性生殖内分泌紊乱。

高危型HPV感染对IVF/ICSI-ET患者PBMCs中TLR4、NF-κB表达的影响

目的 探讨高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染对体外受精/卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)患者外周血单个核细胞(PBMCs)Toll样受体4(TLR4)、核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法 选择2018年8月-2020年5月海南现代妇女儿童医院收治的拟进行IVF/ICSI-ET的患者为研究对象,根据HPV检查结果将高危型HPV感染患者104例及非高危型HPV感染患者152例,分别纳入高危型组及非高危型组。采集外周静脉血检测PBMCs中TLR4、NF-κB表达水平,常规进行IVF/ICSI治疗,收集IVF/ICSI治疗参数,随访统计妊娠结局。结果 高危型组PBMCs中TLR4、NF-κB表达水平高于非高危型组(P<0.05),两组IVF/ICSI参数及临床妊娠率、活产率、早产率、出生缺陷率比较,均无统计学差异;高危型组流产率高于非高危型组(P<0.05),两组妊娠结局良好者TLR4、NF-κB表达水平均低于妊娠结局不良者(P<0.05)。结论 高危型HPV感染可导致IVF/ICSI-ET患者PBMCs中TLR4、NF-κB表达水平的升高,这一生理病理变化可能是高危型HPV感染患者不良妊娠结局发生的机制。