火焰兰属SRAP-PCR体系的建立优化及验证

为建立火焰兰SRAP-PCR体系,采用U20(55)均匀试验设计,以10份火焰兰种质基因组DNA为模板,用3对SRAP引物对DNA模板、Mg2+、引物、Taq DNA聚合酶和d NTPs等5个因素的浓度进行优化组合和验证。结果表明,提取的火焰兰基因组DNA纯度高、完整性好;利用引物对Me6/Em6进行PCR扩增,对20个处理初步筛选出扩增条带较清晰,多态性丰富的处理,再用2个DNA模板进行复筛,获得最佳反应体系(20μL):模板DNA 60 ng、Mg2+2.0 mmol/L、引物1.0μmol/L、Taq DNA聚合酶1.2 U、d NTPs 0.20 mmol/L。最后用2对引物、8份火焰兰种质来验证优化SRAP-PCR体系,其所获条带清晰,多态性丰富。

冬凤兰与‘黄金小神童’大花蕙兰杂交后代的观赏性评价

对海南原生兰种冬凤兰(Cymbidium dayanum)(父本)与耐热型大花蕙兰品种‘黄金小神童’(Cymbidium‘Golden Elf’)(母本)的杂交后代15个株系进行了观赏性评价,采用主成分分析法对其20个观赏性状进行分析,同时对各株系的观赏性进行评价。结果表明:20个性状指标可转换成6个主成分,其方差总贡献率达全部性状信息的88.95%,分别称为花朵因子、花数因子、花形因子、花香因子、花色因子、花展因子;通过计算各株系的主成分分值,筛选出了3个观赏性状优异、具有开发价值的株系。该方法也可为其它兰花杂交育种提供参考。

柱花草遗传家系建立及遗传变异分析

以1979柱花草(S.guianensis TPRC1979)为母本、品45柱花草(S.guianensis TPRCR273)为父本杂交,F1杂种自交获得202株F2代分离群体,对此柱花草家系的形态学性状、农艺学性状及营养成分含量变化进行分析,以此探究该家系内各个性状的遗传特性及其遗传规律。结果表明:柱花草花色遗传可能由一对等位基因控制,黄花对白花为显性性状;F2代出现了亲本及F1没有的斜倚型,其中直立型87株(43.07%),斜倚型115株(56.93%);农艺学性状平均变异系数为20%,变异最大的是鲜重(46.19%)和干重(44.84%),变异系数最小的为叶长(8.31%);营养成分含量变异系数排前3位的为粗脂肪>钙>磷。F_2代群体的形态学性状、农艺学性状和营养成分含量的各个性状都有不同的变异,符合数量性状遗传特点,能为后续柱花草遗传图谱构建和QTL定位提供一定的基础。

柱花草重要性状与SSR、SRAP分子标记的关联分析

为了寻找与柱花草重要性状相关联的分子标记,本研究以20份柱花草品种(系)为对象,进行了株高等5个农艺性状和粗蛋白等8个品质性状的观测分析。在分析遗传多样性和群体结构的基础上,将品种间差异显著的11个性状与SSR、SRAP标记进行关联分析。结果表明,共有14个SSR标记与5个性状相关联,有16个SRAP标记与4个性状相关联。其中,1个SSR标记、15个SRAP标记与鲜重相关联;12个SSR标记和1个SRAP标记与株高相关联;12个SSR标记、1个SRAP标记与茎粗相关联;11个SRAP标记与粗蛋白含量相关联,分别只有1个SSR标记与叶宽、粗灰分含量相关联。关联分析能够有效地找到与部分性状相关联的标记,为柱花草种质鉴定、杂交育种及分子育种实践提供依据。