蜜蜂残翅病研究进展

蜜蜂残翅病病毒(Deformed Wing Virus,DWV)是蜜蜂残翅病的病原体,能够侵染各个发育阶段的蜜蜂,严重时导致蜂蛹发育缓慢,成蜂翅膀畸形、体型萎缩、行动乏力,蜂群早衰;不严重的隐形感染也会缩短蜜蜂寿命。DWV借助于狄斯瓦螨Varroa destructor在全球广泛传播,并产生DWV-B和DWV-C等变异体,它们的共同作用促使蜂群群势急剧衰弱,是导致“越冬蜂群的消失(OCL)”和“蜂群崩溃失调症(CCD)”的主要病因之一,给养蜂业造成巨大损失,而目前尚没有特异性的有效治疗药物。DWV的自身特征、与狄斯瓦螨的关系、以及单独或者和狄斯瓦螨共同作用对蜜蜂的影响等研究都是开发防治技术方法的基础,本文从生物学、流行学、病理学和防治技术等方面对残翅病病毒的最新研究成果进行了综述。

狄斯瓦螨唾液毒性蛋白VTP互作蛋白FABP的鉴定与功能分析

【目的】阐明狄斯瓦螨Varroa destructor唾液毒性蛋白(Varroa toxic protein,VTP)致死中华蜜蜂(以下简称中蜂)Apis cerana工蜂预蛹的机制,从而了解狄斯瓦螨与中蜂的互作机制,为开发蜂螨害防治新技术拓宽思路。【方法】通过酵母双杂交筛选狄斯瓦螨唾液蛋白VTP的互作蛋白;利用RNAi技术和qRT-PCR验证互作蛋白基因功能并检测相关基因表达情况。【结果】利用酵母双杂交筛选到11个候选蛋白基因,进一步通过“回复”验证,脂肪酸结合蛋白(Fatty acid binding protein,FABP)是唯一阳性蛋白;为了进一步验证FABP在体内与VTP结合,通过注射dsRNA-fabp干扰中蜂幼虫fabp的表达,结果发现,注射dsRNA-fabp幼虫组化蛹率(58%)与仅注射VTP组(40%)相比显著提高。qRT-PCR检测发现,fabp沉默后,幼虫的蘑菇体大型凯恩细胞特异性蛋白1基因(Mushroombodylarge-typeKenyon cell-specificprotein1,mblk-1)基因和蜕皮激素受体基因(Ecdysonereceptor,ecr)基因的相对表达量发生变化。【结论】狄斯瓦螨唾液毒性蛋白VTP可能通过与中蜂体内FABP蛋白结合,导致5龄幼虫化蛹失败,从而致死中蜂。

中国蜜蜂西奈湖病毒基因组测序与系统发育分析

【目的】获得广东省西方蜜蜂Apis mellifera所携带西奈湖病毒(Lake Sinai virus,LSV)基因组全长序列,并进行系统发育分析,确定其分类地位。【方法】利用Sanger测序得到广东省西方蜜蜂所携带的LSV基因组全长,命名为LSV GIABR并上传至GenBank。从基因库中下载28个LSV基因组全长序列,以及34条RDRP序列,利用软件MEGA.X,分别使用最大似然法(Maximum Likelihood)和邻接法(Neighbor-Joining)构建的系统发育树,确立LSVGIABR的分类地位。另外,使用软件RDP4.0分析基因组是否发生重组及重组位置。【结果】LSV GIABR基因组全长5910 nt,包含ORF1(基因组位置78-2615),RDRP(1852-3720),核衣壳蛋白Capsid(3739-5301)和ORF4(5346-5798)。全基因组和RDRP基因系统发育分析确定LSVGIABR属于LSV2,基因组重组分析推测其可能是美国和澳大利亚的LSV2株系的母本。【结论】从广东省西方蜜蜂检测到的LSV基因组全长为5910 nt,属于LSV2,并可能是美国和澳大利亚的LSV2株系的母本。