肉鸡源肠炎沙门氏菌的分离与鉴定及生物学特性观察

自2007年9月以来,重庆某肉鸡养殖场的15~30日龄肉鸡流行一种以纤维素渗出性心包炎、气囊炎和肝周炎为主要特征的疾病。为探索该病病因及制定有效防治措施,笔者对其病原菌进行了分离鉴定及生物学特性观察。利用SS营养琼脂平板分离,经生化及PCR鉴定出26株肠炎沙门氏菌。分离菌株能将试验鸡、鸭及小鼠致死,并能复制出与临床表现一致的病例。药敏试验结果显示,26株分离菌对阿莫西林、氧氟沙星等常用抗菌药物广泛耐药。以CQ0709株制备灭活菌苗免疫5日龄鸡后15 d,及12日龄注射特异性蛋黄抗体后24 h对人工感染均有很好的保护力。以上结果表明,耐药性肠炎沙门氏菌是危害重庆某肉鸡养殖场肉鸡的病原。

四川广安某猪场香猪疾病的诊断

2014年7月和2014年11月,广安某香猪养殖场饲养的香猪两次发病。第1次为种母香猪发病,表现精神沉郁,呼吸急促,鼻孔流出大量泡沫样分泌物,皮肤发绀,体温40℃-42℃之间,母猪怀孕后期流产,近1个月内死亡23头种母猪,流产8胎。

雏鸭沙门菌病病原分离鉴定及耐药性检测

应用细菌分离、生化鉴定及药敏试验方法,从重庆大足某鸭场病死鸭脾脏分离出1株长约2.2μm、宽约0.3μm,革兰氏阴性杆菌,生化鉴定为沙门菌属(鉴定值AG701)。药敏试验显示分离菌对试验用药物抑菌圈直径分别为头孢吡肟(23mm)、米诺环素(20mm)、阿米卡星(18mm)、左氧氟沙星(18mm)、氨苄西林/舒巴坦(15mm)、头孢曲松(13mm)、庆大霉素(12mm)、强力霉素(12mm)、诺氟沙星(10mm)、氨苄西林(10mm)、四环素(0mm)、复方新诺明(0mm)。

黑山羊胰阔盘吸虫病的诊治

2013年9月1日,重庆市大足县某羊场黑山羊群发病,最初3只羊（共290只）表现腹泻,下颌肿大,四肢无力,行走困难,采食量下降,27只羊在病后10～20 d内死亡.经当地兽医按羊巴氏杆菌病使用头孢类、氨基糖苷类和磺胺类药物治疗无明显好转,发病率增加至29.0％ （84/290）,转来西南大学荣昌校区动物医院诊治.据畜主介绍：该场2012年8-11月出现过相同疫情,经当地兽医人员和药厂技术员诊治,未得出具体诊断结果,感染疫情羊97头均相继死亡,死亡率为41.1％（97/236）.

重庆荣昌及周边地区肉鸭大肠杆菌分离鉴定及耐药性检测

大肠杆菌是一种条件性致病菌,可引起各个日龄段的动物发病。在肉鸭上以10～30日龄发病最多,严重时引起大批死亡,很难根除。一些养鸭户为控制该病发生,在饲料或饮水中长期添加抗菌药物,造成多重耐药菌株出现,严重影响治疗效果。该病在临床中以易发生、难治疗、易复发著称。笔者对重庆市荣昌及周边地区疑似病鸭进行细菌分离、鉴定和耐药性检测,以期对临床用药进行指导。

牛病毒性腹泻的诊疗报告

牛病毒性腹泻又称牛黏膜病，由牛病毒性腹泻病毒引起，以发热、口腔及其他消化道黏膜糜烂或溃疡、白细胞减少为特征。笔者在门诊时遇到一养牛场牛口腔溃疡、流涎病例，采用紧急免疫接种、控制继发感染的治疗方案，收到了理想的疗效。报告如下。

重庆某猪场猪圆环病毒与附红细胞体混合感染的诊治

2011年4月中旬，重庆大足县某千头猪场猪群发病，开始表现2头猪胸、背及腰部皮肤炎症，疑似螨虫感染或蚊虫叮咬，口服伊维菌素无效，15日内病情蔓延至全群，大剂量使用磺胺药物后病情更加严重，相继死亡母猪5头，育肥猪14头，另有30多头病危。据养殖户介绍：该场免疫疫苗有猪瘟细胞苗、O型口蹄疫疫苗、伪狂犬基因缺失苗和蓝耳灭活苗，未免疫PCV2苗。笔者亲身经历，对该病诊断情况报告如下，以期对临床猪病防治有帮助。

屠宰场生鸡肉肠炎沙门氏菌的污染途径

目的:研究屠宰场生鸡肉肠炎沙门氏菌的主要污染途径。方法:以屠宰场生鸡肉样品为研究对象,在利用多聚酶链反应(PCR)检测肠炎沙门氏菌污染的基础上,通过流行病学的方法研究生鸡肉污染与肉鸡感染的关系。结果:屠宰场生鸡肉样品肠炎沙门氏菌污染阳性率为9.03%(26/288),样品污染与样品来源屠宰场间无统计学联系,但与养殖场的肉鸡感染肠炎沙门氏菌有联系;养殖场肉鸡感染肠炎沙门氏菌与生鸡肉污染有正的统计学联系(相对危险性=18.5);肉鸡实验性感染肠炎沙门氏菌后的带菌时间可达42d,排菌达56d以上。结论:屠宰场生鸡肉肠炎沙门氏菌的污染途径主要为内源性污染。

鸭疫里默氏杆菌培养滤液对鸭胚成纤维细胞形态的影响

为探索鸭疫里默氏杆菌的致病机制,研究了鸭疫里默氏杆菌培养滤液对鸭胚成纤维细胞形态的影响。结果显示,鸭疫里默氏杆菌AF株的培养滤液能使鸭胚成纤维细胞形态发生变化,表现为细胞膜和细胞质逐渐丢失、核浓缩等;90%(27/30)的鸭疫里默氏杆菌临床分离菌株能液化明胶,具有致病性,培养滤液具有改变鸭胚成纤维细胞形态的生物学活性;10%(3/30)的菌株不液化明胶,无致病性,培养滤液无改变鸭胚成纤维细胞形态的生物学活性;经硫酸铵盐析、阴离子交换、疏水和凝胶过滤层析,从AF株培养滤液中分离获得分子质量约为55 ku、能水解明胶及改变细胞形态的活性蛋白质。证实,降解明胶的蛋白水解酶是鸭疫里默氏杆菌培养滤液影响鸭胚成纤维细胞形态的活性物质,可能是细菌的毒力因子之一。

肠炎沙门氏菌对感染鸡部分血液生化指标的影响

[目的]探索肠炎沙门氏菌对感染鸡部分血液生化指标的影响。[方法]以肠炎沙门氏菌感染12日龄的健康三黄肉鸡为材料,在感染后不同时间采集其颈静脉血,分离血清用于生化指标检测。[结果]感染鸡血清AST、ALT、LDH和GLU活性呈先升高后降低的变化趋势,血清ALP活性、ALB和GLO含量总体呈先降低后升高的变化趋势。除TP无显著变化外,感染鸡血清其他7项生化指标都发生显著变化(P>0.05)。其中ALT、AKP、LDH和GLO活性在感染后显著升高(P<0.01),ALB活性显著降低(P<0.05)。[结论]该研究为揭示肠炎沙门氏菌感染病的发生、发展规律及制定综合防治措施提供了依据。

案例教学法在动物传染病学课程中的实践

从案例教学法的含义及实施必要性、动物传染病案例的来源、案例教学法的实践及效果分析以及进一步做好动物传染病学课程案例教学的要求4个方面,介绍了动物传染病课程案例教学法,以期为改进和提高动物传染病学及其他相关课程的教学方法及教学效果提供参考。

一株鸭疫里默氏杆菌自然弱毒株的分离鉴定

从四川德阳某鸭场病死鸭肝脏中分离的DY9株细菌,经理化特性、16SrRNA核苷酸序列与cam基因检测,证明为鸭疫里默氏杆菌,并对其毒力与毒力稳定性等进行了测定。DY9株细菌对14日龄非免疫健康鸭的LD50大于2.3×1010CFU/0.5mL,但死亡鸭不具有纤维素性炎症病变,并未能回收到细菌;经敏感鸭体内连续传10代和经巧克力营养琼脂平板传30代后毒力未见显著改变;培养滤液不影响鸭胚成纤维细胞的形态;油佐剂灭活菌苗与活菌苗免疫鸭后14d攻毒分别获得100%和79.52%的相对保护率,21d时均为100%。以上结果表明,DY9株细菌为毒力稳定的鸭疫里默氏杆菌自然弱毒株。

鸭疫里默氏杆菌明胶酶的纯化及特性分析

为阐明鸭疫里默氏杆菌明胶酶的特性,试验以液化明胶的AF株为研究对象,纯化了其明胶酶,并对该酶进行热稳定性、蛋白化学修饰剂抑制作用、金属离子及络合物的影响和致病性等特性分析。结果表明,鸭疫里默氏杆菌AF株的培养上清经超滤浓缩、70%硫酸铵沉淀、阴离子交换层析、疏水柱层析和凝胶柱层析,可获得纯化的明胶酶,SDS-PAGE显示单条带,相对分子质量约59000。该酶在65℃迅速失活,Cu2+、Cd2+、Mn2+、Hg2+对酶活性有强烈的抑制作用,络合物EDTA和EGTA的抑制作用可被Ca2+逆转,PMSF、NBS和AAD可抑制其活性。明胶酶对雏鸭具有毒力,能缩短鸭疫里默氏杆菌致病菌株感染的潜伏期和致死动物的时间,显著提高动物的死亡率。以上结果表明,鸭疫里默氏杆菌明胶酶是一种具有致病作用的金属蛋白酶。

鸭疫里默氏菌明胶酶对小鸭部分血液指标影响

用鸭疫里默氏菌明胶酶以颈静脉方式注射10日龄健康鸭,于注射后3、6、9、12 h测定部分血液指标。结果显示,注射明胶酶后雏鸭红细胞、白细胞和淋巴细胞数量显著减少(P<0.05或P<0.01);血清谷草/谷丙转氨酶活性、碱性磷酸酶活性及总胆固醇和血清葡萄糖水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。结果表明,鸭疫里默氏菌明胶酶对10日龄鸭的谷草转氨酶等血液指标影响明显。

仔猪腹壁疝气手术合并去势的简易操作

疝气是腹部内脏从自然孔道或病理性破裂孔脱至皮下或其他腔孔的一种常见病,依据发痛部位的不同,可分为脐疝、腹股沟阴囊疝以及腹壁疝[1-3].仔猪疝气病会导致病仔猪生长发育较慢,饲料报酬降低,若不及时采取有效措施,还可能会导致仔猪死亡,造成养殖户经济损失[4-7].笔者最近遇到一例仔猪疝气病例,现报道如下。

鸭疫里默氏杆菌明胶酶对雏鸭免疫功能影响的研究

为研究鸭疫里默氏杆菌明胶酶对雏鸭免疫功能的影响,本研究将2000 u明胶酶经颈静脉注射10日龄健康鸭建立动物模型,测定了模型动物的部分免疫指标。结果显示,注射明胶酶的雏鸭外周血T淋巴细胞非特异性酯酶阳性率、白细胞杀菌指数、红细胞C3bR花环率、血清溶血和杀菌活性、脾淋巴细胞的增殖和分泌IgG能力等显著低于阴性和空白对照组(p<0.05或p<0.01);明胶酶可导致雏鸭脾脏严重损害,脾中央动脉内皮细胞肿胀、脱落,淋巴细胞变性、坏死及细胞核膜不规则与染色质周边浓集。结果表明,鸭疫里默氏杆菌明胶酶对雏鸭的免疫功能具有损害作用。

动物医学本科病原微生物及免疫学相关课程实验教学改革探析

对动物医学本科传统病原微生物及免疫学相关课程实验教学中存在的问题进行分析,阐述了课程设置、教学内容、教学方式及教学组织形式等方面的改革思路,并提出具体改革措施,以建立连续、自主、开放的实验教学模式,从而培养创新型动物医学人才。

鸭疫里默氏杆菌不同分离株生化特性及胞外蛋白酶的检测

研究测定了29株鸭疫里默氏杆菌不同分离株的生化指标,并采用底物平板法、底物-PAGE法检测了鸭疫里默氏杆菌胞外蛋白酶的产生情况。结果显示,所有分离株接触酶阳性,硝酸盐还原试验、M.R和V.P试验、尿素酶、精氨酸酶阴性,大部分菌株不发酵碳水化合物,能缓慢液化明胶,明胶液化阳性率为89.7%(26/29)。底物平板法和底物-PAGE法检测发现,89.7%(26/29)的鸭疫里默氏杆菌分离株能产生降解明胶和脱脂奶蛋白的胞外蛋白酶,且该酶类活性可被EDTA抑制。

应用多聚酶链反应检测生鸡肉中沙门氏菌的研究

目的:建立快速、特异、灵敏的PCR方法以检测生鸡肉中的肠炎沙门氏菌。方法:以肠炎沙门氏菌的sefA基因作为靶序列设计一对引物,将样品增菌后用煮沸法提取细菌基因组DNA进行检测。结果:每克生鸡肉污染3.0×10°CFU肠炎沙门氏菌,经16h增菌培养后可扩增出500bp特异性性DNA带,对28份屠宰场样品的检测结果与传统方法相符合。结论:PCR法适于生鸡肉中肠炎沙门氏菌的快速、准确检测。

种鸭环肠吸虫与棘口吸虫混合感染的诊治

重庆某养鸭场饲养2500羽产蛋种鸭,2017年8中旬至10月中旬陆续出现以呼吸困难、咳嗽、甩头、产蛋率低、畸形蛋、薄壳蛋、消瘦、零星死亡为特征的疾病。根据发病情况、临床症状、剖检及实验室检验,确诊为鸭环肠吸虫与棘口吸虫混合感染。