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7A62铝合金在热磁时效后的析出行为与力学性能
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作者 丁学锋 刘文辉 +3 位作者 黄浩 胡强 张秦 宋宇峰 《中国有色金属学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第3期751-762,共12页
采用透射电镜(TEM)、X射线衍射(XRD)、硬度及室温拉伸性能测试等方法,研究了热磁时效作用对7A62铝合金微观组织与力学性能的影响。结果表明:在热磁时效作用下,7A62铝合金内部的位错移动性增强,溶质原子移动速率加快,进而促进了析出相的... 采用透射电镜(TEM)、X射线衍射(XRD)、硬度及室温拉伸性能测试等方法,研究了热磁时效作用对7A62铝合金微观组织与力学性能的影响。结果表明:在热磁时效作用下,7A62铝合金内部的位错移动性增强,溶质原子移动速率加快,进而促进了析出相的形核与长大,峰值时效时间显著缩短,仅为未加磁峰值时效时间的1/3(即峰值时效时间由24 h缩短至8 h)。此外,磁场作用还会诱发位错退钉扎效应以及晶界无沉淀析出带的宽化作用,促使热磁峰时效后7A62铝合金伸长率较未加磁峰时效时提高15.6%。因此,热磁耦合作用可加速铝合金的时效析出过程,改善其力学性能,显著提高铝合金的生产效率。 展开更多
关键词 7A62铝合金 热磁时效 析出行为 力学性能
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Ku70作为RNA解旋酶调节miR-124的加工成熟及神经细胞的分化
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作者 黄皑雪 李睿婷 +8 位作者 赵越超 李洁 李慧 丁学锋 王琳 肖参 刘雪梅 秦成峰 邵宁生 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1418-1433,共16页
目的Ku70蛋白主要通过其DNA结合特性参与双链DNA断裂(DSB)的非同源端连接(NHEJ)修复,有报道称其具有RNA结合功能,本文探索Ku70是否具有RNA解旋酶活性并影响miRNA加工成熟。方法利用RNA免疫共沉淀(RIP)测序结合生物信息学分析Ku蛋白结合... 目的Ku70蛋白主要通过其DNA结合特性参与双链DNA断裂(DSB)的非同源端连接(NHEJ)修复,有报道称其具有RNA结合功能,本文探索Ku70是否具有RNA解旋酶活性并影响miRNA加工成熟。方法利用RNA免疫共沉淀(RIP)测序结合生物信息学分析Ku蛋白结合的RNA;蛋白质印迹法(Western blot,WB)结合定量反转录PCR(qRTPCR)检测Ku蛋白与miRNAs的表达关系;生物膜干涉技术(BLI)实验分析Ku蛋白与RNA的结合能力;电泳迁移率变动分析(EMSA)实验确定Ku70及Ku80的RNA解旋酶活性;形态学检测结合WB分析Ku70调节miR-124引起的神经细胞功能变化;免疫荧光结合形态学分析寨卡病毒(ZIKV)感染后Ku70及miR-124的变化与神经元分化关联。结果研究发现,Ku70蛋白具有RNA解旋酶活性,并通过其RNA解旋酶活性影响miRNA加工成熟。Ku70缺失引起许多miRNAs上调,其中包括神经细胞特异的miR-124。在人神经前体细胞(h NPCs)和人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)中敲低Ku70可促进miR-124的成熟,从而导致上述细胞向神经元分化。本文进一步发现,ZIKV感染影响了Ku70及miR-124的表达,导致细胞形态的分化。结论本研究揭示了Ku70的一种新功能,即Ku70有可能参与miRNA的成熟调控和神经细胞的分化,并且可能是ZIKV病毒致小头症的原因之一。 展开更多
关键词 KU70 RNA解旋酶 miRNA加工成熟 miR-124 神经元分化
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EM菌与水生植物黄花水龙(Jussiaea stipulacea Ohwi)联合作用去除富营养化水体中氮磷的效应 被引量:20
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作者 丁学锋 蔡景波 +2 位作者 杨肖娥 常会庆 濮培民 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期1324-1327,共4页
采用人工自然模拟试验方法,研究了EM菌与水生植物黄花水龙(Jussiaea stipulacea Ohwi)联合作用对污水水质改善的影响。结果表明,EM菌对水体中氮、磷的去除有一定的效果,尤其是对氨氮的去除效果最好。对于污水中氨氮的去除率,固定EM和水... 采用人工自然模拟试验方法,研究了EM菌与水生植物黄花水龙(Jussiaea stipulacea Ohwi)联合作用对污水水质改善的影响。结果表明,EM菌对水体中氮、磷的去除有一定的效果,尤其是对氨氮的去除效果最好。对于污水中氨氮的去除率,固定EM和水生植物结合非固定EM的处理都达到了92%左右,但单独EM菌处理对水体磷的去除效果较差,只有20%左右。黄花水龙与不固定EM菌的联合处理去除氮和磷的效果最好,在处理12 d期间内,对NH+4-N、TN和TP的去除率分别达98.1%、53.6%和47.4%。有关植物与EM联合作用降低水体中氮和磷的机制有待进一步研究。 展开更多
关键词 EM菌 总氮 总磷 氨氮 水生植物黄花水龙 富营养化水
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人copineⅤ蛋白多克隆抗体的制备 被引量:1
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作者 丁学锋 靳雁斌 +5 位作者 王晓文 吴燕 刘淑红 宋小国 范文红 范明 《生物技术通讯》 CAS 2008年第1期69-72,共4页
目的:制备兔抗人copineⅤ多克隆抗体。方法:将copineⅤN端423 bp(626~1 048 bp)构建到原核表达载体pET28a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下进行蛋白表达;以镍柱纯化后的蛋白为抗原,与等体积佐剂混合后免疫家兔3次;用ELISA和West... 目的:制备兔抗人copineⅤ多克隆抗体。方法:将copineⅤN端423 bp(626~1 048 bp)构建到原核表达载体pET28a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下进行蛋白表达;以镍柱纯化后的蛋白为抗原,与等体积佐剂混合后免疫家兔3次;用ELISA和Western印迹检测抗血清,用(NH4)2SO4沉淀法初步纯化抗体。结果:表达并纯化了copineⅤN端蛋白,ELISA检测表明抗血清具有高亲和性,Western印迹检测表明抗体能特异性识别内源性和过表达的copineⅤ。结论:制备了具有高亲和性和特异性的抗人copineⅤ多克隆抗体。 展开更多
关键词 copineV 原核表达 多克隆抗体
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进出关铁路通道扩能措施研究 被引量:2
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作者 丁学锋 李晓音 付昌友 《铁道勘察》 2010年第5期64-68,共5页
摸清进出关通道现状的分工、标准、能力与速度的适应性、存在问题;明确相关的铁路网规划,并分析规划实施后存在的问题;针对沈山线的能力不足,提出了分流货运至锦承线与京承线、分流货运至高锦线及其延长线、分流客运至新建城际三个扩能... 摸清进出关通道现状的分工、标准、能力与速度的适应性、存在问题;明确相关的铁路网规划,并分析规划实施后存在的问题;针对沈山线的能力不足,提出了分流货运至锦承线与京承线、分流货运至高锦线及其延长线、分流客运至新建城际三个扩能方案。从工程投资与既有路网资产利用、运营成本、运输能力与速度、效益等方面进行综合比较,最后推荐分流货运至高锦线的方案。 展开更多
关键词 进出关通道 沈山线 扩能 速度
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管材内压闭端爆破测试系统的研制 被引量:5
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作者 丁学锋 杜彦亭 +4 位作者 刘建章 李中奎 张建军 金明哲 朱仁宗 《原子能科学技术》 EI CAS CSCD 2003年第z1期98-101,共4页
研制了管材内压闭端爆破测试系统。该系统实现了按ASTMB811-90标准要求的对锆合金核燃料包壳管室温闭端爆破性能及材料在施加内压过程应变的测试。
关键词 锆合金 管材 内压闭端爆破试验 液压伺服系统
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环境因子及沉水植物对底泥磷释放的影响研究 被引量:56
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作者 蔡景波 丁学锋 +3 位作者 彭红云 常会庆 杨肖娥 濮培民 《水土保持学报》 CSCD 北大核心 2007年第2期151-154,共4页
通过环境因子(温度、pH、扰动、溶解氧等)及沉水植物对底泥磷释放影响的研究,分析了环境因子影响底泥磷释放的因素,及不同环境条件下沉水植物影响底泥磷释放的因素,得出了如下结论:溶解氧、pH、温度及扰动等对底泥磷向上覆水体释放都有... 通过环境因子(温度、pH、扰动、溶解氧等)及沉水植物对底泥磷释放影响的研究,分析了环境因子影响底泥磷释放的因素,及不同环境条件下沉水植物影响底泥磷释放的因素,得出了如下结论:溶解氧、pH、温度及扰动等对底泥磷向上覆水体释放都有一定影响,其中溶解氧和pH值影响较大;湖泊特别浅水型湖泊中,磷对水体富营养化起重要作用;沉水植物在控制湖泊底泥营养向水体扩散、风等外界因素扰动底泥起关键作用;浅水型湖泊中,湖泊底泥受扰动较大适合种植象狐尾藻类多分枝的沉水植物,这样有利于抑制底泥磷向水体的释放。 展开更多
关键词 环境因子 沉水植物 底泥 磷释放
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宁波力洋水库富营养化现状及生态治理对策 被引量:9
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作者 方云英 杨肖娥 +2 位作者 濮培民 常会庆 丁学锋 《水土保持学报》 CSCD 北大核心 2004年第6期183-186,共4页
力洋水库位于浙江省宁波市力洋镇,是居民的饮用水水源,水库在2002年春秋季相继爆发了蓝藻水华,2002年11月和2003年2月调查分析了力洋水库的地形和富营养状况,分析了春季藻类爆发的原因。同时对控制水库水质进一步富营养化提出一系列措施... 力洋水库位于浙江省宁波市力洋镇,是居民的饮用水水源,水库在2002年春秋季相继爆发了蓝藻水华,2002年11月和2003年2月调查分析了力洋水库的地形和富营养状况,分析了春季藻类爆发的原因。同时对控制水库水质进一步富营养化提出一系列措施,主要是生活、畜禽污水治理工程,山地、林地截污治理工程,入库河道上的物理生态工程,库岸物理生物截污工程,库区采用固定化氮循环细菌技术(INCB)及建设以漂浮植物和浮床植物为主的生态浮岛群生态系统工程,库区排水口建设二层以生物膜和过滤为主要特征的物理生态工程(PEEN),减少藻类输出,保证自来水厂出水水质。 展开更多
关键词 宁波市 力洋水库 富营养化 生态治理对策
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自噬对不同低氧条件下PC12细胞存活的影响 被引量:7
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作者 何云凌 吴丽颖 +5 位作者 黄欣 赵彤 丁学锋 吴奎武 范明 朱玲玲 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2013年第3期193-196,I0001,共5页
目的:探讨不同低氧对细胞存活和自噬的调节作用。方法:采用不同氧含量处理大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12),MTT方法检测细胞存活情况;Western blot检测自噬特异性标记物微管相关蛋白轻链3(LC3)和接头蛋白p62的表达变化;流式细胞分析测定低... 目的:探讨不同低氧对细胞存活和自噬的调节作用。方法:采用不同氧含量处理大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12),MTT方法检测细胞存活情况;Western blot检测自噬特异性标记物微管相关蛋白轻链3(LC3)和接头蛋白p62的表达变化;流式细胞分析测定低氧及阻断自噬后活性氧水平(ROS)的变化情况。结果:不同低氧细胞存活能力不同:适度低氧促进细胞存活,严重低氧导致细胞存活能力下降;自噬标记蛋白在不同低氧下表达水平不同:适度低氧使LC3-II和p62表达增加,严重低氧则反之,LC3-II和p62表达降低;与常氧相比,适度低氧没有改变ROS水平,严重低氧使ROS水平增加;用自噬抑制剂3-MA抑制自噬后,各种氧含量下的ROS水平都被升高,其中,适度低氧与严重低氧ROS升高幅度明显高于常氧情况。结论:适度低氧促进细胞存活,严重低氧导致细胞死亡,自噬活性介导了不同低氧的作用效果。 展开更多
关键词 低氧 自噬 活性氧 LC3II P62
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TiC颗粒及其表面镀镍对H13钢烧结行为及组织与性能的影响 被引量:2
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作者 丁学锋 易丹青 +2 位作者 王斌 于鹏超 成伟欣 《粉末冶金材料科学与工程》 EI 北大核心 2014年第6期940-947,共8页
采用粉末冶金法制备H13钢(Steel 1)、TiC颗粒增强的钢基复合材料(Steel 2)以及Ni包覆TiC颗粒增强的钢基复合材料(Steel 3),研究TiC颗粒及其表面镀镍对H13钢的致密度、微观组织与形貌、以及力学性能的影响,并通过烧结动力学方程研究TiC... 采用粉末冶金法制备H13钢(Steel 1)、TiC颗粒增强的钢基复合材料(Steel 2)以及Ni包覆TiC颗粒增强的钢基复合材料(Steel 3),研究TiC颗粒及其表面镀镍对H13钢的致密度、微观组织与形貌、以及力学性能的影响,并通过烧结动力学方程研究TiC颗粒及颗粒表面镀镍对材料力学性能的影响机理。结果表明:在1400℃温度下,随烧结时间延长,3种材料的致密度均增加,而在相同的烧结时间下,钢的密度为ρ(Steel 1)>ρ(Steel 3)>ρ(Steel 2)。在1 400℃/2 h条件下烧结的Steel 1的致密度为97.27%,抗拉强度达到1 069 MPa;添加TiC颗粒增强相后,材料的致密度、抗拉强度、伸长率和冲击韧性都下降,但TiC表面镀镍后,材料的致密度及力学性能均得到改善。孔隙率、增强颗粒分布以及颗粒与基体的界面状况不同,是导致3组材料力学性能差异的主要原因。 展开更多
关键词 粉末冶金 表面处理 烧结工艺 致密性 组织与性能
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FGH4169合金的高温变形行为 被引量:5
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作者 王博 易丹青 +3 位作者 丁学锋 姚草根 王斌 傅上 《中南大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第11期4408-4414,共7页
利用MMS 200热模拟实验机对FGH4169合金进行高温压缩实验,建立该合金高温变形本构方程。研究结果表明:在变形温度为950~1 050℃,应变速率为0.004~10 s 1的条件下,动态再结晶是该合金的重要软化机制;FGH4169合金在950~1 050℃范围内... 利用MMS 200热模拟实验机对FGH4169合金进行高温压缩实验,建立该合金高温变形本构方程。研究结果表明:在变形温度为950~1 050℃,应变速率为0.004~10 s 1的条件下,动态再结晶是该合金的重要软化机制;FGH4169合金在950~1 050℃范围内的激活能为430 kJ/mol,该合金的功率耗散效率约比Inconel718合金的功率耗散效率高10%,峰值效率达到57%。并得到FGH4169合金在本实验条件下的加工图;其适合加工工艺如下:变形温度为1 010~1 050℃,应变速率为0.01~0.1 s 1,或者变形温度为980℃,应变速率为0.004~0.01 s 1。 展开更多
关键词 FGH4169合金 热压缩 动态再结晶 本构方程
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锆-4合金的疖状腐蚀 被引量:7
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作者 李佩志 丁学锋 邱军 《稀有金属材料与工程》 SCIE EI CAS CSCD 1992年第6期51-56,共6页
对不同状态的锆-4合金管材进行了高温蒸汽腐蚀研究。经400℃预膜和未预膜的样品在460℃/10.3 MPa的蒸汽中进行腐蚀试验,结果表明:未预膜的样品迅速腐蚀,而预膜处理延缓了疖状腐蚀的产生;不同加工工艺的样品的腐蚀结果截然不同。挤压前... 对不同状态的锆-4合金管材进行了高温蒸汽腐蚀研究。经400℃预膜和未预膜的样品在460℃/10.3 MPa的蒸汽中进行腐蚀试验,结果表明:未预膜的样品迅速腐蚀,而预膜处理延缓了疖状腐蚀的产生;不同加工工艺的样品的腐蚀结果截然不同。挤压前进行β淬火使Zr-4合金的抗疖状腐蚀性能得到改善,应变时效处理后的Zr-4合金管材具有良好的抗疖状腐蚀性能。疖状腐蚀的敏感性与合金的组织状态密切相关,取决于合金中的第二相粒子的数密度、平均粒子大小和基体中溶质元素的含量。 展开更多
关键词 疖状腐蚀 β淬火 氧化膜 锆-4合金
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西藏拉萨地区育龄男性精子浓度分析 被引量:3
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作者 旦增 林凯 +5 位作者 丁学锋 索朗曲宗 刘淑红 格桑罗布 范明 赵永岐 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1147-1148,共2页
男性不育症是关系人类生殖的重要问题之一,足够数量的精子是生育的必要条件,在引起男性不育的诸多原因中少精子症是一种严重的精液异常。
关键词 精液 精子浓度 少精子症 高原 西藏地区
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阿的平对微波辐射小鼠血液系统炎症反应的影响 被引量:3
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作者 吴燕 苏振涛 +5 位作者 周红梅 王飞 刘淑红 丁学锋 赵永岐 范明 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第2期499-502,共4页
本研究旨在探讨阿的平(Quinacrine)对微波辐射后小鼠外周血粒细胞、淋巴细胞、血清白介素1(IL-1)、白介素6(IL-6)含量的影响,观察阿的平对微波辐射引起的炎症反应的拮抗作用。130只BALB/c小鼠随机分为4组:正常对照组、辐射对照组(注射... 本研究旨在探讨阿的平(Quinacrine)对微波辐射后小鼠外周血粒细胞、淋巴细胞、血清白介素1(IL-1)、白介素6(IL-6)含量的影响,观察阿的平对微波辐射引起的炎症反应的拮抗作用。130只BALB/c小鼠随机分为4组:正常对照组、辐射对照组(注射用水组)、低剂量组(阿的平12.6 mg/kg)、高剂量组(阿的平50.4 mg/kg)。小鼠灌胃给予阿的平后1小时,将辐射对照组、低剂量组、高剂量组用强度为50 mW/cm2的微波照射30分钟。在照射后即刻、1天、2天、7天处死小鼠取血,用血细胞分析仪测定外周血粒细胞数,用放射免疫法检测血清IL-1β、IL-6含量的变化。结果表明,微波辐照后粒细胞和淋巴细胞数量随时间延长明显增加,在给药组这些细胞数量改变的趋势均明显延缓;50 mW/cm2微波辐射1天后小鼠血清IL-1β水平明显升高,直至7天后方逐渐恢复至正常水平,而2个浓度的阿的平灌胃均能抑制辐射引起的血清IL-1β水平升高;50m W/cm2微波辐射后血清IL-6水平从即刻至7天逐渐升高,阿的平灌胃能够明显延缓IL-6的升高,在辐射后2天内阿的平的作用尤为明显。结论:辐照前灌胃给予阿的平能够明显延缓微波辐射引起的小鼠粒细胞和淋巴细胞数量增加,能够部分抑制血清IL-1β和IL-6水平的增高并产生了一定的拮抗作用。本研究结果提示阿的平可能有一定的抗微波辐射效应。 展开更多
关键词 阿的平 微波辐射 炎症反应 外周血粒细胞 外周血淋巴细胞
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高原低氧环境部队官兵精子质量研究 被引量:11
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作者 林凯 吴燕 +11 位作者 张硕 张开和 丁学锋 刘淑红 赵永岐 魏利召 马红雨 陈立敏 闵帆 赵亮 朱美财 范明 《军医进修学院学报》 CAS 2011年第7期698-700,共3页
目的研究高原低氧环境对部队成年男性精子质量的影响。方法对驻守西藏3 900米高原的78名官兵测定其精子浓度和活力,并检测精子凋亡和生精细胞凋亡情况。结果驻藏部队成年男性精子浓度和活力均低于周边省市常住人群;生精细胞凋亡率(4.96&... 目的研究高原低氧环境对部队成年男性精子质量的影响。方法对驻守西藏3 900米高原的78名官兵测定其精子浓度和活力,并检测精子凋亡和生精细胞凋亡情况。结果驻藏部队成年男性精子浓度和活力均低于周边省市常住人群;生精细胞凋亡率(4.96±5.86)%与正常生育组(4.61±1.23)%对比无显著差异,精子凋亡率(14.92±7.47)%与正常生育组(5.32±2.48)%比较显著升高,与不育组(19.7±11.4)%比较无显著差异。结论高原低氧环境可致成年男性精子浓度下降、活力减弱,其主要影响精子凋亡,对生精细胞凋亡无明显影响。 展开更多
关键词 高原 低氧 军事人员 精子
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修建枢纽联络线提高运输能力和运输质量 被引量:2
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作者 丁学锋 周明东 《铁道运输与经济》 北大核心 2003年第1期36-37,共2页
通过对杭州枢纽萧甬至浙赣联络线和即将建设的金华地区温州方向至杭州方向间客车联络线的分析计算,说明修建联络线,可以减少枢纽列车对数,提高枢纽和编组站能力,节省机车车辆运用,在金华枢纽还可促进南站地区的发展。
关键词 运输能力 运输管理 杭州铁路枢纽 客车联络线 金华地区 旅客运输
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小鼠Cpne5基因mRNA水平的表达分布及其在胚胎的表达定位 被引量:3
17
作者 靳雁斌 丁学锋 +4 位作者 司慧远 吴彦瑞 王晓文 吴燕 范文红 《标记免疫分析与临床》 CAS 2013年第2期93-96,共4页
目的明确小鼠Cpne5基因在mRNA水平的组织表达分布及其在胚胎的表达定位。方法提取新生、成年小鼠主要脏器的总RNA,利用RT-PCR法检测Cpne5 mRNA的表达量;合成针对Cpne5 mRNA的杂交探针,取不同胎龄胎鼠进行整体原位杂交。结果 Cpne5 mRNA... 目的明确小鼠Cpne5基因在mRNA水平的组织表达分布及其在胚胎的表达定位。方法提取新生、成年小鼠主要脏器的总RNA,利用RT-PCR法检测Cpne5 mRNA的表达量;合成针对Cpne5 mRNA的杂交探针,取不同胎龄胎鼠进行整体原位杂交。结果 Cpne5 mRNA在成年小鼠10种脏器组织均有不同程度的表达,以大脑,小脑,睾丸和肺脏表达量较高;而肝脏和肌肉未表达。新生小鼠9种脏器中,Cpne5表达量最高的是脑组织,眼和肾次之,肺和肝脏表达量很少。制备并评估Cpne5原杂探针的产量,SP6转录的反义探针浓度为100ng/μL,T7转录的正义探针浓度为10ng/μL,原位杂交结果显示Cpne5 mRNA主要表达于胎鼠的端脑、间脑、中脑及菱脑原节。结论在新生和成年小鼠的脑组织中Cpne5基因mRNA高水平表达,并在胎鼠发育过程中定位于胎脑。 展开更多
关键词 Cpne5基因 信使RNA 表达 整体原位杂交 小鼠
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人CPNE5多克隆抗体的制备 被引量:2
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作者 靳雁斌 丁学锋 +4 位作者 司慧远 吴彦瑞 王晓文 范文红 范明 《标记免疫分析与临床》 CAS 2011年第6期411-415,共5页
制备人CPNE5的多克隆抗体。将CPNE5基因中423bp(626-1048bp)的片段构建到原核表达载体pGEX-5X-1,将重组质粒转化大肠杆菌BL21,在IPTG诱导下表达蛋白,经SDS-PAGE分离纯化得到抗原肽段,质谱法鉴定后常规免疫家兔。用CL-4B柱纯化抗体。结... 制备人CPNE5的多克隆抗体。将CPNE5基因中423bp(626-1048bp)的片段构建到原核表达载体pGEX-5X-1,将重组质粒转化大肠杆菌BL21,在IPTG诱导下表达蛋白,经SDS-PAGE分离纯化得到抗原肽段,质谱法鉴定后常规免疫家兔。用CL-4B柱纯化抗体。结果显示,成功表达并纯化了人CPNE5抗原肽段;ELISA显示抗血清具有高亲合性,Western blot检测表明抗体能特异性识别CPNE5。本文制备的抗体经检验证实为高亲合性和特异性的兔抗人CPNE5多克隆抗体。 展开更多
关键词 人CPNE5 pGEX-5X-1 原核表达 多克隆抗体 酶联免疫吸附实验 免疫印迹
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不同浓度的添加剂N2和B27对神经干细胞增殖的影响 被引量:1
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作者 赵彤 黄欣 +4 位作者 丁学锋 吴奎武 吴丽颖 朱玲玲 范明 《生物技术通讯》 CAS 2012年第6期857-859,共3页
目的:通过比较添加不同浓度的无血清培养添加剂N2、B27对神经干细胞增殖的影响,探讨一种最优的体外培养大鼠胚胎神经干细胞的方法。方法:分离培养胚胎13.5d SD大鼠的神经干细胞,采用CCK-8细胞计数、BrdU掺入、测量神经球直径的方法,比... 目的:通过比较添加不同浓度的无血清培养添加剂N2、B27对神经干细胞增殖的影响,探讨一种最优的体外培养大鼠胚胎神经干细胞的方法。方法:分离培养胚胎13.5d SD大鼠的神经干细胞,采用CCK-8细胞计数、BrdU掺入、测量神经球直径的方法,比较不同浓度N2、B27对神经干细胞增殖的影响。结果:N2与B27合用对神经干细胞增殖和成球的作用最为明显,单独添加2%B27的作用优于1%B27和N2组。结论:1%N2和1%B27同时添加更有利于神经干细胞的增殖和自我更新,此方法为神经干细胞的应用提供了实验依据。 展开更多
关键词 神经干细胞 增殖 添加剂 N2 B27
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小鼠胎脑组织活体转基因技术的建立 被引量:1
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作者 吴燕 丁学锋 +5 位作者 刘淑红 赵永岐 吴彦瑞 王飞 范文红 范明 《生物技术通讯》 CAS 2010年第3期413-415,共3页
目的:建立实用的小鼠活体脑组织基因转染技术。方法:将EGFP质粒(CAGS启动子)注射到胎龄16 d(E16d)的胎鼠侧脑室,用镊形电极隔着子宫壁夹住胎鼠头部,在45 V电压下给予5次电脉冲刺激,每次刺激50ms,间隔1 s;转染后不同天数将胎鼠脑组织完... 目的:建立实用的小鼠活体脑组织基因转染技术。方法:将EGFP质粒(CAGS启动子)注射到胎龄16 d(E16d)的胎鼠侧脑室,用镊形电极隔着子宫壁夹住胎鼠头部,在45 V电压下给予5次电脉冲刺激,每次刺激50ms,间隔1 s;转染后不同天数将胎鼠脑组织完整取出,以4%PFA固定后冰冻切片,进行激光共聚焦照相。结果:EGFP质粒被转入小鼠活体脑组织细胞中并获得表达,动物存活率为90%,GFP阳性率高于80%。结论:通过对麻醉剂、电脉冲刺激、质粒浓度、术中术后处理等多种实验条件的摸索,建立了实用的小鼠胎脑组织活体转基因技术。 展开更多
关键词 子宫内电转 转基因 神经元迁移 胚胎
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