黄连解毒汤对骨肉瘤143B细胞的抑制作用及机制

目的:探讨黄连解毒汤(HLJDD)对人骨肉瘤143B细胞的抑制作用及潜在机制。方法:SPF级大鼠随机平均分成4组,每组6只:HLJDD高、中、低剂量组分别给予HLJDD 6.30、3.15、1.58 g/kg灌胃,对照组给予等量水灌胃,均2次/d,连续灌胃1周,用于含药血清的制备。人骨肉瘤143B细胞分别应用低、中、高剂量HLJDD含药血清进行干预,通过CCK-8试剂盒检测不同剂量HLJDD对骨肉瘤143B细胞的增殖影响;通过划痕愈合实验观察不同剂量HLJDD对骨肉瘤143B细胞迁移的作用;通过流式细胞技术观察不同剂量HLJDD含药血清培养骨肉瘤143B细胞后的凋亡变化;通过Western Blot检测不同剂量HLJDD含药血清对骨肉瘤143B细胞的增殖相关蛋白(PCNA)、迁移相关蛋白(MMP-9、vimentin)及凋亡相关蛋白(cleaved caspase-3、caspase-3、Bax、Bcl-2)的影响,Western Blot进一步检测低、中、高剂量HLJDD含药血清对β-catenin及其相关信号分子c-Myc的影响。结果:与空白组和对照组比较,骨肉瘤143B细胞经不同剂量的HLJDD处理后,细胞的增殖率、迁移率均显著降低(P<0.05),中、高剂量组细胞凋亡率显著增加(P<0.05);HLJDD低、中、高剂量组均能够显著下调细胞增殖相关蛋白PCNA、迁移相关蛋白MMP-9(HLJDD低剂量组除外)、vimentin水平以及抗凋亡蛋白Bcl-2水平(P<0.05);此外,中、高剂量组HLJDD含药血清能够显著上调促凋亡蛋白Bax水平以及caspase凋亡通路中cleaved caspase-3水平(P<0.05),而caspase-3表达显著下调(P<0.05);β-catenin和c-Myc表达水平在HLJDD各剂量组均被显著下调(P<0.05)。结论:HLJDD促进了人骨肉瘤143B细胞的凋亡,抑制了人骨肉瘤143B细胞的增殖和迁移,从而起抗肿瘤作用,可能是通过抑制Wnt信号通路实现的。