鸡γ-干扰素基因在大肠杆菌中的高效表达及多克隆抗体的制备

将克隆得到的鸡 IFN- γ基因亚克隆到大肠杆菌原核表达载体 p PROEXTMHT的 Pst 和 Kpn 位点上 ,构建了重组表达质粒 p PROEXTMHT- IFN -γ,经序列分析鉴定 ,确证目的基因克隆入载体的预期位点。将重组质粒转化大肠杆菌 DH5 α,于 37℃不同时间诱导培养 ,SDS- PAGE电泳表明 ,该基因在大肠杆菌中发生高水平表达 ,表达的鸡 IFN- γ融合蛋白相对分子质量约为 2 2 0 0 0。重组蛋白占菌体总蛋白的 33%。经 Western blot鉴定 ,该重组蛋白质具有生物学活性。包涵体被 6 mol/ L 盐酸胍裂解后 ,通过镍离子亲和树脂进行了纯化。用所获得的重组鸡 IFN- γ融合蛋白及其纯化产物经 3次肌肉注射于新西兰白兔 ,制备了兔抗鸡 IFN- γ多克隆抗体。琼脂扩散结果表明 ,多克隆抗体可与纯化的鸡IFN

IL-2和绵羊梅迪-维斯纳病病毒核心蛋白Gag核酸疫苗联合免疫小鼠的免疫应答

构建绵羊梅迪-维斯纳病病毒(MVV)核心蛋白Gag核酸疫苗并与IL-2联合免疫小鼠,为评价其诱导的体液和细胞免疫应答。将MVV gag基因与羊IL-2基因分别插入到核酸疫苗载体质粒pcDNA5.0中,构建真核表达质粒pcDNA5.0-Gag和pcDNA5.0-IL-2,并经酶切以及测序鉴定。分别用阳性质粒pcDNA5.0-Gag、空载体pcDNA5.0及pcDNA5.0-Gag和pcDNA5.0-IL-2共免疫BALB/C小鼠,采用ELISA检测免疫小鼠的特异性抗体以及IFN-γ和IL-4水平,用MTT比色法检测免疫小鼠脾淋巴细胞的增殖。结果表明pcDNA5.0-IL-2联合免疫组小鼠血清抗体效价和IFN-γ、IL-4水平高于pcDNA5.0-Gag免疫组,与空载体pcDNA5.0对照组相比有显著差异(P<0.01)。且pcDNA5.0-Gag单独免疫组及与IL-2联合免疫组小鼠脾淋巴细胞增殖的刺激指数均高于空载体pcDNA5.0对照组。因此,构建真核表达质粒pcDNA5.0-Gag和pcDNA5.0-IL-2,用其联合免疫BALB/C小鼠所诱导的免疫反应以特异性细胞免疫应答为主,同时可产生体液免疫,且IL-2发挥了免疫佐剂的作用,为进一步将其用于MVV的防治奠定了基础。

基于PBL结合多媒体教学模式在生物技术教学上的应用

为提升学生学习兴趣,培养学生自主学习的能力是当前教育关注的首要问题。本文针对在生物技术课堂上遇到的实际问题,提出建立多媒体资料库,引导学生自己提出问题并加以解决,拓展学生思路,提高了教学效果,学生反响良好。

细菌群体感应系统的研究

群体感应是细菌根据细胞密度变化进行基因表达调控的一种生理行为。细菌通过群体感应与周围环境进行信息交流,参与多种生理过程。就细菌群体感应系统的组成、作用机制、类型、特点及细菌中群体感应的最新进展作以综述。

乳酸菌双组分信号转导系统

乳酸菌广泛应用于食品发酵工业中,其中有些菌种是重要的益生菌。乳酸菌中存在着双组分信号转导系统,参与乳酸菌的多种生理生化过程,是其代谢活动的重要调控机制。本文就双组分信号转导系统的组成、作用机制、类型、特点以及乳酸菌中双组分信号转导系统作一综述。

鸡CD4蛋白基因的克隆及其mRNA在淋巴器官中的表达

从鸡胸腺、脾脏、哈德氏腺、外周血液和法氏囊等免疫器官中分离淋巴细胞 ,应用 RT-PCR对这些免疫器官中鸡 CD4分子 m RNA的表达进行了研究。同时 ,用 RT-PCR对鸡脾淋巴细胞 CD4分子 c DNA进行了克隆和序列测定。结果表明 ,在上述器官中 ,法氏囊淋巴细胞不表达鸡 CD4分子 m RNA,其他器官中均有表达。通过序列分析表明 ,本试验扩增得到的基因为编码鸡

莱菔硫烷对HCY致内皮细胞炎症损伤的治疗作用

目的:探讨莱菔硫烷(SFN)对同型半胱氨酸(HCY)诱导的人脐静脉细胞融合细胞EA.hy.926损伤的治疗作用。方法:将EA.hy.926细胞用10mmol/L的HCY诱导4h,再用0μmol/L～20μmol/L的SFN处理12h。采用噻唑蓝(MTT)法测吸光度,并计算粘附率;采用蛋白印记法(Western blotting)检测NF-κB的蛋白表达。结果:不同浓度的SFN均可抑制损伤后的EA.hy.926细胞的粘附和核转录因子κB(NF-κB)的蛋白表达量,并呈现剂量依赖关系。结论:SFN对HCY导致的EA.hy.926细胞炎症损伤有抑制作用,可能存在治疗作用。

乳酸菌抗菌肽的筛选及发展趋势

筛选新型、广谱、天然的抗菌肽,是当前食品安全领域研究的热点问题。建立高效筛选方法,将加速新型抗菌肽的发现和应用。本文就当前乳酸菌抗菌肽筛选方法及发展趋势进行阐述。

有机水稻种植中的病虫害管理

近年来,随着国民经济的发展,消费者对于有机食品的需求越来越多,作为主食之一的有机大米受到了消费者的青睐。有机稻米的生产依赖于有机水稻的种植,如何扩大有机水稻种植面积,增加有机水稻的单产,成了支持有机大米行业的必要途径。但是因为有机种植过程中禁止使用化学合成的化肥、农药,生长调节剂等物质及生物工程生物及其产物,因此有机水稻种植规模要想扩大,首先要解决的就是种植中的病虫害管理问题。

如何保持有机产品认证的有效性

有机产品认证检查涉及了与其相关的种植、养殖、加工、贸易全过程检查,是从土地到餐桌的全程质量控制,它注重生产过程的检查,必要时对产品进行检查;注重跟踪系统的检查和认证,通过连续（每年）监督有机生产,保证质量;帮助生产者改进和完善生产体系,促进生产者建立持续稳定的有机农业生产体系。

有机肉鹅养殖的饲料管理

近年来，有机大鹅养殖成为时尚的朝阳产业，如何在养殖过程中控制管理成本，减少饲养风险，成为有机大鹅养殖的成功关键，本文从有机饲料的供给管理，饲料的搭配管理，饲料添加物质管理等几个方面入手，阐述了有机大鹅养殖中饲料的管理要点，确保在养殖过程中成本控制，同时保证有机完整性。

高效纵向流折流板换热器

综合分析了弓形折流板换热器、折流杆换热器的优点和不足之处,在试验的基础上,提出了纵向流折流板换热器。该类型换热器既具有折流杆换热器壳程压降低、换热效率高、抗振性能好、抗结垢性能强等优点,又具有弓形折流板换热器适应性强、工作可靠、制造与组装简易等优点,是一种新型纵向流折流板结构的高效能量转换设备。

旋压封头直段裂纹产生原因分析及预防措施

本文对冷旋压封头直段作应力分析。由于存在接近临界抗拉强度σb的切向拉应力σp从而导致封头直边段材料会产生“严重滑移层”，这些“严重滑移层”在适宜的条件下会扩展形成裂纹，进而影响压力容器的安全性能．同时，提出一些预防措施，供参考。

高效水平聚结板含油污水除油器的设计

综合介绍了高效水平聚结板重力式含油污水除油器的原理、结构、设计计算及制造注意事项。聚结板末端折边的翼板及升油管组成的组合结构,是除油器的关键结构,它可有效地使油水在聚结板间进行分离,克服了斜向布置的聚结板结构使已分离的油相和水相的返混现象,提高油水分离效率,加快除油速度。采用密闭容器,减少了较高温度下油气挥发。该结构除油器是一种高效重力式含油污水除油器。

研究生“高级食品化学实验”教学模式探索

为提高食品专业研究生实验教学质量,对哈尔滨工业大学开设的研究生学位课"高级食品化学实验"进行教学模式探索,主要包括实验内容设计、实验模式和教学模式的探索。

发酵床在有机猪养殖中的应用探讨

由于现代化工业技术的引入,使得人们忽视了动物的福利和生命的基本权利,养殖者将有生命的猪当做无生命的机器,将猪饲养在一个狭小的水泥空间,饲喂高能量、高添加剂的饲料,限制猪的运动自由和生物特性,导致猪本身抵抗力下降,疾病频发。

有机肉鹅养殖的饲料管理

近年来,有机肉鹅养殖业兴起。养殖过程中成本的管理和风险控制是必须考虑的问题,做好有机肉鹅养殖中饲料成本的管理是有机肉鹅养殖成功的关键。笔者通过对有机肉鹅养殖中饲料供给的管理、饲料搭配的管理、饲料添加物质的管理等几个方面进行介绍,旨在阐明肉鹅饲管理的关键因素,确保有机肉鹅养殖的效益。