产片球菌素的乳酸片球菌培养条件的优化

通过正交实验对从泡菜中分离出的一株乳酸片球菌进行发酵条件的研究,结果发现乳酸片球菌素的产量除了与菌株自身性质有关外,其他发酵条件对片球菌素的产量和活性也有影响,包括培养基组分、培养基pH、培养温度以及培养时间,实验确定了产片球菌素的最佳培养基成分、最佳培养pH、最佳培养温度和最佳培养时间。

乳酸片球菌抑菌物质细菌素的分离纯化

将乳酸片球菌接种于MRS培养基,37℃静置培养17h后产生抑菌物质细菌素。用三步法从培养液中分离纯化细菌素:首先根据细菌素在pH6.0时与菌体的吸附力最强,pH2.0时吸附力最弱,通过调节pH和离心来收集细菌素,然后经过SP Sepharose Fast Flow阳离子交换柱层析和Sephadex G-50凝胶层析进行纯化,最后细菌素的得率为0.19%,比活为5.17×104AU/mg,纯化了34.54倍。得到的细菌素样品通过Tricine-SDS-PAGE电泳出现清晰条带,大小约为4600D。

片球菌素对酸奶中单核细胞增多症李氏杆菌的抑菌作用

将从泡菜中分离出的一株产片球菌素的乳酸片球菌接种至MRS培养基,培养后采用基于pH的吸附和解吸附法提取片球菌素,以单核细胞增多症李氏杆菌CVCC1595(4.55×108cfu/mL)为指示菌,采用琼脂扩散法,测定片球菌素的抑菌活性。结果表明,其对单核细胞增多症李氏杆菌CVCC1595的最小抑菌浓度为1.6g/mL,随机活性单位为21.875AU/mg。将片球菌素(0.01mg/mL)添加到人工污染单核细胞增多症李氏杆菌CVCC1595的酸奶(6.305logcfu/mL)中,1d以后其菌落数下降为4.301logcfu/mL,并可以在30d的实验周期内保持抑菌作用。

巴氏法测定牛乳脂肪的改进

对测定牛乳脂肪的巴布科克氏法进行了改进,首次定量确定了硫酸的滴加速度,且通过改变离心条件,大大缩短了测定时间,使其更适合于乳品分析。